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  中新网7月27日电据国家疾控局方微信消息为进一步做猴痘防控工📘,及时有效👨‍🔬对猴痘疫情🟨提升猴痘防👩‍🦲工作的科学、精准性和🌐效性,切实护人民群众🖋️命安全和身健康,国家控局会同国卫生健康委定并于7月26日印发《猴痘防控方案。其中提出2023年6月以来,我▪️多个省份先报告多例猴病例,引发👩🏿‍🤝‍👩🏻增本土续发情和隐匿传的风险较高📍要坚持“预🧑🏿‍🤝‍🧑🏻为主、防治合、精准防、快速处置原则,落实早发现、早告、早隔离👳早治疗”措。  《猴,-防控方案》文如下:猴🥒防控方案 猴痘是由猴病毒(Mpoxvirus,MPXV)感染所致的种人兽共患。2022年9月,我国报告首例猴痘入病例。2023年6月以来,我国多省份先后报多例猴痘病👩🏾‍🤝‍👩🏻,引发新增--土续发疫情隐匿传播的险较高。为导各地科学准做好猴痘控工作,切维护人民群身体健康,定本方案。、总体要求 坚持“预🧘为主、防治-合、精准防、快速处置原则,落实早发现、早😍告、早隔离☦️早治疗”措。开展医疗👩🏽‍🤝‍👨🏼构、重点人、入境人员重点场所等渠道监测。强疫情分析风险研判,针对性地开重点人群健教育和综合预。落实病🚷隔离治疗、⏲️行病学调查密切接触者👨‍👧踪管理等措。坚持发现☹️起、控制一,及时阻断👬🏿情传播。二🚯疾病特征 🏻(一)病原学特征。  痘病毒属于病毒科正痘毒属,为基组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中-现该病毒。1970年在刚果民主共和一名疑似天🍙患者的标本🧏‍♀️首次分离到痘病毒,为-例确诊的人猴痘病例。 猴痘病毒🆚为两个进化支:(1)分支I,曾称为中非分支或🧰果盆地分支♻️(2)分支II,曾称为西非分支,进🐍步分为IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方性流区猴痘暴发情的毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较多分支,包括A.1、A.2和B.1等亚分支,2022年9月我国报告首例输性猴痘病例来,各地报中国疾控中🙃病毒病所的🚺株序列均属🌵IIb分支。  猴痘病耐干燥和低,在痂皮、壤和衣物、上用品等物👈表面可生存月。该病毒🍳热敏感,加至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯毒剂、过氧酸等常用消剂及紫外线有效灭活病,对过氧化、次氯酸钠戊二醛、邻二甲醛等敏🙍。  (二)流行病学特。  1.传染源。猴痘⏲️毒的宿主尚明确,目前为非洲啮齿动物(非洲松鼠、树松鼠冈比亚袋鼠睡鼠等)可能为其自然宿。传染源包猴痘病例及染的啮齿类👨🏽‍🤝‍👨🏻物、猴和猿灵长类动物🌍  2.传播途径。猴痘毒主要经黏和破损皮肤入人体,主通过直接接病例的病变肤或黏膜传,亦可通过触被病毒污💩的物品、长间近距离吸🔻病例呼吸道❗沫传播,接🚔感染动物的吸道分泌物病变渗出物血液及其它液,或被感-动物咬伤、伤感染传播🧘‍♂️  3.易感人群。人群🐝遍易感。接💳过天花疫苗猴痘病毒存📸一定程度的叉保护力。 4.疫情特征。2021年以前的猴疫情主要在非和西非地呈地方性流,主要通过,触感染动物播,所引发🛬人传人疫情播链较短,🤒要为儿童及壮年的散发例及聚集性👩‍👩‍👦‍👦情,通过家🤤或旅行方式🤼‍♂️尔播散至其国家和地区2022年5月以来全球国暴发的疫-,主要在男男行为人群(Menwhohavesexwithmen,简称MSM,指与同性发生性行为男性)中经性接触传播,部分病例为💆‍♂️壮年男性,过大型聚会及后续在社,-的MSM扩散,并传播至球多个国家地区。  (三)临床特征。  1.潜伏期:5-21天,多为6-13天。  2.传染期:病例出现🛁状后至皮疹👩🏼‍🤝‍👨🏿痂自然脱落形成新皮肤具有传染性有调查提示👭🏻些病例可能↩️出现症状前1-4天存在传染性。  3.早期症状:可出现发热头痛、背痛肌痛和淋巴🤛肿大等。 ,4.皮疹和黏膜疹:通常-热退后出现有些病例可现在全身症之前。皮疹生常经过斑、丘疹、水、脓疱、结至痂皮脱落个阶段,不形态皮疹可时存在,可🚑有明显痒感🔮疼痛。可累🧣口腔咽喉黏🚻、肛门、生器、结膜和膜等。痂皮落后可遗留斑或色素沉甚至瘢痕,痕持续时间长达数年。⛔ 5.病程及严重程度。痘病程约2—4周,免疫力低下患者的程可能较长猴痘为自限疾病,大多病例症状会❇️行消失,也重症和死亡生,主要为童、孕妇和疫力低下人。  2022年以来全球多国猴痘暴疫情中,大数病例临床☂️现较轻,部🛥️病例无全身状,皮疹仅于生殖器、门直肠黏膜位,死亡病主要为未得🧑🏾‍🤝‍🧑🏾治疗的艾滋病毒感染者免疫力低下💚群。2022年以来全球🤬地方性流行病例的病死🏄‍♂️约为0.1%。三、宣传育与干预 针对重点人、出入境人🏌️‍♀️和一般人群不同人群分-开展宣传教,有针对性-加强不同人的自我防范🎍识和个人防措施,积极合做好防控作。  (一)重点人群。各地卫生健🔲与疾控部门合相关社会🐅织,充分借😿艾滋病防治合干预经验👩‍🦽服务模式,📕MSM经常出入的酒吧、所、浴池等点活动场所’开展同伴教。借助大众体、MSM社交网站等互网平台,开猴痘防控知宣传教育,🏉高重点人群范意识,减👨‍💼高危行为,导有可疑接,,,史者自觉做自我健康监,增强主动诊意识。 👷重点人群宣干预要求详👨‍🎨附件1《重点人群宣传干指南》。 👯‍♂️(二)出入境人员。通过👰放宣传资料💶形式,加强入境人员猴🌐防控知识宣👩‍👩‍👦‍👦教育。提醒🌓境人员关注的地国家和区猴痘疫情息,不接触🌻痘样症状者啮齿类、灵类等动物。醒来自猴痘情报告国家地区的人员如在境外有疑接触史,🍭境后21天内应做好自我康监测,避与他人发生😀切接触,一👨‍👨‍👧出现发热、疹、淋巴结🧱大等猴痘样状,应主动诊并如实报流行病学史  (三)一般人群。各充分发挥新体以及广播电视、报纸传统媒体作🕔,开展猴痘控知识宣传育,提高公科学防范意。四、疫情测和报告 (一)监测病例定义。 1.猴痘样症状者。不明因急性皮疹(面部或口腔膜、四肢、殖器或会阴肛周等部位),伴发热(>37.3℃)或淋巴结肿者。  2.疑似病例。🤬痘样症状者发病前21天内具备以下行病学史中任何一项:(1)有猴痘病例报告地区居史;(2)有猴痘确诊-,-例或疑似病👨‍👧接触史;(3)有同性性行为,或性伴🐀同性性行为;(4)有地方性流行区疑动物接触--。  3.确诊病例。猴样症状者、似病例及密接触者,经验室检测猴📽️病毒核酸阳🧙‍♂️或病毒分离性者。  (二)多渠道监测。  1.医疗机构监。各级各类😵疗机构要开猴痘样症状测,尤其是肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨🐆检测门诊等重点关注猴样症状者。⚙️现猴痘样症🧉者,应主动🙆‍♀️问流行病学,记录患者住址及联系式,采集标,-送疾控机构🧓行猴痘核酸😶测。具备猴病毒检测能及猴痘病毒验活动资质🧞‍♀️医疗机构也👨‍⚖️开展检测。 2.重点人群监测。各各类医疗机😢、疾控机构🦰对MSM等重点人群开展疗或检测咨🧝服务时,应动询问是否🌰猴痘样症状-其可疑接触。如发现猴🔗样症状者和似病例,应🦠时采集标本🕞行猴痘病毒酸检测。 3.入境人员监测。海关🧃到猴痘相关常健康申报🙋检疫发现有痘样症状的🌤️境人员,应❣️时进行标本集和核酸检,并发放《🌧️诊方便卡》要求其尽快诊;对于核🕟检测阳性者将相关信息🥗报辖区疾控🏴构,由相关门进一步调,-处置。  4.重点场所污水监测。有件的地区可据当地疫情势,经评估MSM经常出入的酒吧、🌹所、浴池等点活动场所展污水监测  (三)病例报告。 -,相关医疗机根据临床表、流行病学实验室检测🐾果,及时对者进行诊断-,  诊断的似病例和确⚙️病例应于24小时内通过国疾病预防制信息系统监测报告管模块进行网直报。如为外输入病例填写输入来,国家或地区不具备网络报条件的医卫生机构,在规定时限🕑将传染病报卡信息报告🔀地乡镇卫生🕷️、社区卫生务中心或县疾控机构进网络报告,时传真或寄-传染病报告至代报单位负责病例网🧑🏿‍🤝‍🧑🏻直报的医疗🤽‍♀️生机构,要据实验室检结果、流调展及时对病信息进行复、订正。 🙌各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例者2例及以上存在流行病关联的确诊🛸例,应当在2小时内通过发公共卫生件报告管理息系统报告事件级别选“未分级”🧃五、疫情处  (一)病例管理。 各地发现猴🔅疑似病例和⚛️诊病例应当时转运至医机构进行隔治疗,如临症状明显好🩰,病变部位结痂,可转⛷️居家隔离治,直至皮疹⏮️痂自然脱落解除居家隔。对病情较且具备居家⛄离治疗条件确诊病例,🧐医疗机构与控机构联合估后,可直🚵采取居家隔治疗。对于行居家隔离👭🏾疗的确诊病发放《猴痘例居家隔离疗健康告知》(见附件2)。确诊病例居家隔离治期间,单人-间居住,避与家人有皮或黏膜直接⚡触,做好被染物品的消✝️,非必要不🦢出,确须外时穿长衣长、佩戴医用🥃科口罩,避👨‍❤️‍💋‍👨前往人群聚场所,避免其他人有皮或黏膜直接触;指定医机构安排专负责上门或话随访,提Ⓜ️健康咨询和疗指导。 (二)流行病学调查。 县(市、区)级疾控机构到辖区疑似例和确诊病报告后,及组织开展流病学调查,🔌找感染来源掌握、追踪管理密切接者,分析传链及传播特,及时发现🐐在的风险人🛂及其范围、🔈征,有针对地开展宣传育和综合干🧞‍♂️。调查过程发挥多部门防联控的协作用,尽可获取全面准的流调信息  调查内📯主要包括病🚵‍♂️基本信息、病就诊情况🎄临床表现、归及实验室测;发病前21天内与可疑感染来源的触史、接触所及接触方;发病后至离治疗前的体活动地点与其有皮肤👁️黏膜直接接🥳者,以及发前4天内与其有性接触者🐱  猴痘疫-流行病学调要求详见附3《猴痘疫情流行病学调指南》。 ☄️(三)密切接触者的判定🦁管理。  1.密切接触者定义。直接触病例的病部位及其被-,染物品,或染动物及其🌉泌物、渗出等污染物;及职业暴露长时间近距-吸入病例呼🚑道飞沫等,评估有感染险的人员。 2.密切接触者判定。🥗据流行病学查及暴露风评估结果,控机构负责🔀时对密切接者进行判定🗣️  3.密切接触者管理🦾疾控机构或层医疗卫生构指导密切触者做好自健康监测,康监测期限🚑最后密切接之日起21天。  密切👰触者自我健🎐监测期间可常生活与工👩🏼‍🤝‍👨🏾,需避免与人发生性接🥠等密切接触避免捐献血等;坚持每做好体温测和症状监测出现猴痘样⛸️状应及时就并主动报告疑接触史。区疾控机构🈵基层医疗卫机构应在密💁接触者自我康监测第7、14、21天上门或电话其进行随访提供咨询指,发现异常况及时进行🎟️置。  密接触者判定🥘理要求详见件4《猴痘密切接触者判和管理指南🧬。  (四)消毒与人员护。  做病例衣物、🎚️巾、床单、具等个人用🕎,以及可能病例分泌物渗出物、体等污染的环和物体表面消毒。从事例诊治护理流行病学调👩🏿‍🤝‍👨🏾、环境清洁毒、标本采和实验室检等工作人员工作期间做个人防护。 消毒与人🤧防护要求详附件5《猴痘消毒技术指-》和附件6《猴痘个人防🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿指南》。六实验室检测 猴痘病毒酸检测首选肤或黏膜病🤐部位标本,同时采集口🚒拭子标本。省首例猴痘诊病例标本送中国疾控心病毒病所行复核;本疫情中的首🎪或早期确诊🎑例、与早期例有流行病关联的关键🧵诊病例、感来源不明的土确诊病例🔀境外输入确🛶病例阳性标等,荧光定PCR检测Ct值≤32时进行病毒基🐇测序。所有序原始数据组装序列及🏄‍♀️序样本送检应在获得序48小时内报送中国疾控心病毒病所行汇总、分。以上确诊例应至少采😒一套标本(包括核酸检测性者的皮肤黏膜病变标👵、口咽拭子🧙‍♂️本以及发病性期和恢复双份血清)送中国疾控中病毒病所。 实验室检具体要求详附件7《猴痘病毒实验室测技术指南。七、院内🚾染控制  疗机构应当格做好院内🧛‍♀️染控制。疑病例和确诊例应安置在离病房,疑👨‍👧‍👦病例单间隔。医务人员🚴‍♂️行标准预防👮采取经接触🗺️播和经飞沫播疾病的隔与预防措施🐂佩戴一次性胶手套、KN95/N95及以上级别口罩、防护屏或护目镜,,,一次性隔离等,同时做手卫生。严按照《医疗构消毒技术🙅‍♂️范》对病例体液、血液排泄物、分-物等进行规🔺处理,做好疗环境(空气、物体表面地面等)、医疗器械、病使用物品等-清洁消毒。据《医疗废管理条例》医疗卫生机♥️医疗废物管办法》做好疗废物的处和管理。八📀工作要求 (一)加强组织协调。各卫生健康、控部门加强海关等有关🚭门的密切协和信息共享及时发现与置猴痘疫情🦪落实猴痘病发现、疫情🧝‍♂️告、诊疗隔、密切接触追踪管理等作,防止疫扩散和蔓延各地在猴痘情防控过程👿应注意保护例、密切接者和重点人等个人隐私  (二)加强宣传引导-各地要及时布辖区猴痘情相关信息🌽做好政策解和公众健康🏛️示。通过多方式和渠道展猴痘防控识宣传,加🤤重点人群宣教育的针对和实效性。🦉时回应社会切,引导公科学认识猴。  (三)加强人员培-。各地要加对各级疾控🤪构和医疗机🚺专业人员的🕜训。对医务-,员重点开展痘病例的识与诊断、病🌒发现与报告🙄病例管理等关知识培训强化诊治意🧿。对疾控人重点开展流病学调查、切接触者的’定和管理、验室检测、点人群宣传预等相关知培训,提高♣️痘疫情防控👩‍💻应急处置能。  附件  1.重点人群宣传干👩🏿‍🤝‍👩🏽指南  2.猴痘病例居隔离治疗健告知书  3.猴痘疫情流行病学调查✔️南  4.猴痘密切接触判定和管理南  5.猴痘消毒技术南  6.猴痘个人防护南  7.猴痘病毒实验检测技术指😆  附件1  重点人群传干预指南 2022年5月以来,全球非地方性行区发生的痘疫情以男性行为人群(MSM)为主。为充分利,我国艾滋病治综合干预♉务体系,开🛶MSM等重点人群宣传干,防范猴痘情传播扩散形成常态化滋病与猴痘👫合防控一体🧏应对机制,定本指南。、实施策略 在现有艾病防治综合预服务体系础上,综合用行为学干方法和手段通过宣传教、促进安全行为、动员☹️测、外展服、同伴教育互联网干预✈️,从个体、体和社会等👱个层面为目💚人群提供猴⚙️综合干预服🧑‍🤝‍🧑。二、组织施  各级疗机构和疾机构要加强点科室和艾😰病自愿咨询测门诊工作🔯员猴痘知识训,对重点群提供猴痘👫控知识宣传检测咨询与,-员、治疗和怀等服务。级疾控机构🧍‍♂️当积极推动地有能力、有良好艾滋😬防治经验的MSM志愿者或社会组织共🤭参与猴痘防🧿宣传工作,😱工作过程中意保护重点群个人隐私三、形势分🐭  各地要强对重点人猴痘疫情、控现状、影因素及出入-情况的调查-,及时分析研猴痘疫情形,为制定本📭高危行为干🦈工作计划提依据。具体容包括:1.重点人群基、活动形式,-特点、活动所、出入境时间及地区;2.猴痘知识、态度和✋危行为;3.猴痘疫情水及其影响因;4.猴痘防治政策及专🍶机构已开展🤦‍♀️工作;5.包括志愿者在的有关组织个人已开展干预活动;6.影响猴痘防治工作的困和问题。四宣传干预 (一)宣传教育。各级疾机构或健康育专业机构⚱️供技术支持🔦社会组织参’,共同研究定适合当地😸点的猴痘预宣传材料,强警示宣传育。通过大媒体、MSM网站和以移👩🏿‍🤝‍👨🏻终端为载体交友软件等👨🏿‍🤝‍👨🏻台,宣传国、国内及本-猴痘疫情信和防控知识提高重点人猴痘防范意。  (二)同伴教育。🌤️级疾控机构加强同伴教🕘员挑选、招和培训,组和支持同伴🖍️传活动,增🧟‍♀️人群猴痘风防范意识,动主动检测定期组织同教育员工作会,了解猴干预工作存的困难和问,有针对性😎给予帮助和📀持。  (三)外展服务。各级疾控机干预工作人👩‍👧‍👧定期到重点群活动场所展猴痘宣传▫️咨询、发放传材料等外服务活动,高重点人群痘防范意识知识水平,动重点人群强自我健康⏬理,主动寻检测咨询服🚔。  (四)检测咨询。级疾控机构过互联网、伴教育、外活动等多种-,式动员有猴样症状或可🚖接触史的重人群进行猴检测。各级类医疗机构肤(性病)科、肛肠科、🏮滋病自愿咨检测门诊发猴痘样症状,应主动询其流行病学及性接触史记录患者现📩址及联系方,采集标本疾控机构进猴痘核酸检,具备猴痘🌍测能力及猴👨‍🦲病毒实验活资质的医疗构也可开展❎测。对于已🕧立互联网+HIV检测平台的地区,可♑加猴痘检测容,实现互网在线检测约和结果查。五、重点所干预  点活动场所括实体和虚两类场所,体场所包括吧、会所、池等经营性🔶所,虚拟场包括移动互网和社交媒。  (一)实体场所干🍃。  各级控机构负责织干预工作员在当地MSM经常出入的酒吧、会所🐃浴池等活动所,开展猴📪预防干预宣,主要包括  1.在MSM经常出入的酒吧、会、浴池等实场所,张贴目的健康教宣传图片,🧖置健康教育料公告栏;🟦 2.强化个人健康责任识,开展猴健康咨询,动开展自我🐔险评估; 3.提供转介服务信息,知明确的诊流程以及相检测、医疗🔼构名称、联人等信息。 各地要加😄对猴痘确诊例发病前21天内活动过场所以及污监测阳性场的干预宣传重视目标人🎽的个人隐私护,加强对会组织同伴育员猴痘防知识培训,立规范的行干预流程,高自我防护能。  (二)虚拟场所干预。  各疾控机构负组织指导当🚴‍♀️有序开展猴线上宣传,相关网站、交媒体平台时发布和更🥶猴痘宣传教内容,形成向重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣传干预务体系。 各级疾控机支持社会组🔺或同伴教育利用网站、箱或社交媒🛥️平台,组织展在线咨询交流。及时答网友提出🧑🏿‍🤝‍🧑🏼各种猴痘相问题。针对同时期猴痘🔣播特点,定或不定期组📺专家、专业员、同伴教🚐员利用互联和社交媒体👨🏿‍🤝‍👨🏾台进行在线教。各级疾机构要定期导更新相关业信息,确宣传内容科、有效。 🤽‍♂️附件2  附件3  猴痘疫情流行病调查指南 为指导各地控机构规范🈳展猴痘疑似例、确诊病👨‍🌾和聚集性疫的流行病学查,及时掌病例暴露史接触史等流🕢病学相关信,落实密切触者的追踪定,防止疫🕸️传播扩散,定本指南。、调查目的 (一)查找感染来源,握、追踪和理密切接触。  (二)分析传播链传播特征。 (三)及时发现潜在的险人群及其征、范围,针对性地开宣传教育和-合干预。二调查对象 疑似病例、诊病例和聚性疫情。三调查方法和👩‍🚒容  通过阅资料,询⛵病例、诊治🥯生、家属和情人等进行🤛行病学调查如病例的病允许,调查🐻应先调查病本人,再对🛺诊治医生、属和知情者-行调查。 🈁开展个案调时,要认真🦀详细了解和录病例基本息、发病就🐋情况、临床现、转归及验室检测信-;发病前21天内与可疑染来源的接🚏史、接触场及接触方式发病后至隔治疗前的具💇‍♂️活动地点、♥️其有皮肤或膜直接接触🧡,以及发病🛍️4天内与其有性接触者。👕 (一)基本情况。如姓、性别、年、住址、国、联系方式。  (二)发病就诊情🛌。临床表现🥀实验室检测☝️发病就诊经和病情变化转归。  (三)感染来源调查。对病发病前21天内的暴露史展调查,包-境内外猴痘-例报告地区行史或居住,对可疑的染来源要详👨‍🦯询问接触时、方式、频、地点及接时采取的防措施等,特是性接触史调查时,若现调查表中🐝列入,但具重要流行病意义的内容应进行详细问和记录。 (四)密切接触者调查判定。对病传染期的活情况和人群触情况进行’踪和排查后判定其密切触者。密切触者判定和理按照《猴🌮密切接触者🛕定和管理指》(附件4)执行。  见附件3-1《猴痘病例案调查表》四、组织与施  按照属地化管理原则,由病现住址所在县(市、区)级疾控部门😞织辖区疾控🙎‍♀️构开展猴痘👨‍💻例的流行病调查,就诊疗机构提供⏹️疗信息。调单位应根据查计划和调目的,确定🥈查人员组成职责分工,时开展病例🚵‍♀️行病学个案查。调查过中发挥多部联防联控的同作用,尽-能获取全面🐃确的流调信。调查期间调查人员要➕好个人防护五、信息的报与分析 疾控机构完调查后,应好病例分析结,及时将行病学个案查表、调查🦱告等资料逐🙉报送上级疾机构,并做🏴‍☠️调查资料的🔲管和存档。👊例流调信息按有关规定😒严格做好信安全和个人🌯私信息保护  附件:3-1.猴痘病例个案调查  附件4  猴痘密切触者判定和理指南  👩‍🦲指导各地做猴痘密切接者判定和管,-,有效控制🤼‍♂️痘疫情的传🪐,制定本指🪒。一、密切触者判定标  密切接者是指直接触病例的病🈂️部位及其被染物品,或染动物及其泌物、渗出等污染物的员;以及职暴露或长时📅近距离吸入例呼吸道飞等,经评估🗾感染风险的📰员。具体情🍦包括:  1.与疑似病例或确诊病例病后有皮肤-黏膜直接接的人员,接方式包括性触、抚摸、抱和亲吻等🌚  2.与有皮疹症状的似病例或确病例共用衣、被褥、餐等物品的人;  3.医疗诊疗、采🛵或实验室检等操作过程🔟可能暴露于毒,经评估感染风险的疗卫生工作♠️员;  4.与疑似病例确诊病例发前4天内有性接触,并经🧙行病学调查--业人员评估🦛感染风险的员,亦可判为密切接触;  5.在狭小密闭空与疑似病例确诊病例长👚间近距离接(如长时间共处同一封闭🍼间),经流行病学调查专😬人员评估有👩‍👧‍👧染风险的人,亦可判定🏢密切接触者  6.接触感染猴痘病的动物及其💞泌物、渗出等污染物,未采取有效人防护的人💶;  7.其他可能存在毒暴露风险人员。二、切接触者管  1.管理期限与方式🧚‍♀️病例发现地🏃‍♂️控机构或密--接触者所在疾控机构应⚪追踪到密切😲触者当天及🥴开展猴痘病👨‍👧核酸检测,知并指导密⌨️接触者做好🔪我健康监测健康监测期为自最后密接触之日算21天。自我健康监测期可正常生活工作,需避🔯与他人发生🦕接触等密切触,避免捐,血液等。 👫2.知情告知。实施健康👗测时,疾控🌅构或基层医卫生机构应👨‍👧‍👧头告知健康测的缘由、限、注意事和疾病相关识,以及负随访疾控机或基层医疗生机构联系和联系方式并发放《猴密切接触者康告知书》🥴  3.定期随访。疾控构或基层医卫生机构应第7、14、21天电话或上门主动询🧑🏿‍🤝‍🧑🏽密切接触者🥞我健康监测📫况,提供咨指导建议。现异常情况及时调查处。  4.自我健康监测坚持每天做🌴体温测量和状监测,主📴症状包括发(>37.3℃)、皮疹、浅表淋巴结大等。密切️⃣触者一旦出相关症状应时前往医疗构就诊或与访联系人取联系,接受痘病毒核酸测。  附🍨:4-1.猴痘密切接触🔅健康告知书🙍‍♀️ 附件5  猴痘消毒技指南  为一步规范猴疫情相关的📌毒工作,落科学消毒、准消毒,减💔猴痘病毒对🛎️众健康造成危害,制定指南。一、源地消毒 🍵(一)适用范围。  适于出现猴痘例后,对其🔬能污染的场和物品进行随时消毒和末消毒。 (二)消毒原则。  1.范围和对象定。  根🌽流行病学调🍮结果,确定场消毒的范⛴️和对象。对例在住院、运期间可能染的环境和品,进行随消毒。对病💙居住或活动的场所,如住场所、工🔮场所、学习所、诊疗场、转运工具🚭及其他可能到污染的场,在其离开(如住院、转院、出院、🚗亡)进行终末消毒。  2.方法选择。  (1)诊疗用品消毒👨🏾‍🤝‍👨🏻尽量选择一#️⃣性诊疗用品🙆‍♂️非一次性诊用品应首选力蒸汽灭菌🎬不耐热物品🏪选择化学消😒剂或低温灭设备进行消👨‍⚕️或灭菌。 🥎(2)手消毒。建议使用消毒剂揉搓手进行消毒🍙也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒😧。  (3)环境和物体面消毒。可💩择含氯消毒、二氧化氯过氧乙酸、氧化氢等消🙈剂擦拭、喷或浸泡消毒🔝  (4)衣物、床单等织品消毒。选择热力消💿、含氯消毒或季铵盐类👩‍🎨毒剂浸泡等毒方式。 (三)常见污染对象的消🥀方法。  1.手消毒。  可选用速⏹️手消毒剂,⛪直接选用75%乙醇进行擦拭消毒;醇✏️过敏者,可择季铵盐类有效的非醇手消毒剂。肉眼可见污物时,应先用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六洗手法清洗🦪手,然后按述方法消毒  2.皮肤、黏膜。 🍲皮肤被污染污染时,应🪐即清除污染,再用一次吸水材料沾0.5%碘伏或过氧化氢毒剂擦拭消3分钟以上,使用清水清干净;粘膜🖥️用大量生理♣️水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。 3.床单、毛巾、衣服等织品。  例使用的床、毛巾、衣等纺织品,肉眼可见污🍟物时,若需复使用,可流通蒸汽或沸消毒30分钟;或用有氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消👨‍🦰剂浸泡30分钟后,按照规清洗;或💯其他有效的⛽毒方法。不湿的衣物可用环氧乙烷👨‍👩‍👧‍👦干热方法进消毒处理。 有分泌物渗出液、排👩‍👩‍👦‍👦物、血液、液等污染物🦵,建议按医🔖废物集中处。  4.餐(饮)具。  病例所使的碗、盘、🍦、杯等餐(饮)具清除食物残渣后,煮消毒30分钟,或使用有氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后,再清水洗净。 5.污染物。  对病分泌物、渗液、排泄物血液、体液😙少量污染物用一次性吸🚙材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒(或能达到高水平消毒的毒湿巾/干巾)小心移除。  对病例☔泌物、渗出、排泄物、液、体液等量污染物应🎇用含吸水成的消毒粉或白粉完全覆,或用一次😀吸水材料完覆盖后用足的有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒💕浇在吸水材上,作用30分钟以上(或能达到高水消毒的消毒-巾),小心清除干净。清过程中避免触污染物,🐫理的污染物📳医疗废物集🥒处置。  🎳例的分泌物应有专门容收集,用有氯20000mg/L的含氯消毒剂,物、药比例1:2浸泡消毒2小时。  清除污染物👩🏽‍🤝‍👩🏼,应对污染🌡️环境和物体🎙️面进行消毒盛放污染物容器可用有👨‍👨‍👦‍👦氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟,然后清干净。  6.地面、墙壁。  有肉可见污染物,应先完全除污染物再毒。无肉眼🍓见污染物时🚊可用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂拭或喷洒消;不耐腐蚀地面和墙壁❎也可用2000mg/L的季铵盐类消剂喷洒或擦;消毒作用间不少于30分钟。  7.物体表面。  诊疗设🆘设备表面以🧑🏾‍🤝‍🧑🏾床围栏、床柜、家具、把手、卫生具和家居用👩‍💻等有肉眼可-污染物时,🛠️先完全清除🐡染物再消毒🐣无肉眼可见🚲染物时,用效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯毒剂,不耐‼️蚀的物体表-也可用2000mg/L的季铵盐类消👌剂进行喷洒🙋‍♀️擦拭或浸泡毒,作用30分钟后清水拭干净。 8.污水和粪便。  在入市政排水网前需进行毒处理,消后污水应当合《医疗机水污染物排🤼‍♀️标准》(GB18466-2005)。  9.病例生活垃圾。 病例生活圾按医疗废处理。  10.医疗废物。  医疗物的处置应循《医疗废管理条例》《医疗卫生构医疗废物🦓理办法》的求,规范使⛴️双层黄色医废物收集袋,,装后,按常流程进行处👞。  11.室内空气。👮 如经科学🖤估,需对室空气进行消,则在无人况下,可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化(浓度按产品说明书)等消毒剂,按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。可采用经验安全有效的😞他消毒方法二、注意事  现场消🈺应确保所用😎毒产品合法效,所选消👩‍🔬方法科学可。现场消毒,根据现场况和相关标要求,选择格有效的个🤡防护装备,🧴做好个人防的前提下,格按照工作案实施消毒  消毒实单位应具备场消毒能力👨‍👨‍👧操作人员应过消毒专业训,掌握消和个人防护🚘本知识,熟♻️消毒器械的用和消毒剂配制等。 每次开展消工作时均应好消毒记录包括消毒对、消毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。同👞,相关部门单位应做好毒工作的监管理和评价  附件6  猴痘个人护指南  加强公众、👀情处置相关作人员和医人员的个人护,避免猴病毒暴露感,制定本指。一、居家离治疗的病等相关人员🌪️ (一)适用范围。  用于居家隔治疗的病例(疑似病例和诊病例)、照护人员或共.居住者的个防护。  (二)居家隔离区域要求。 1.应选择有自然通风🀄独立卫生间🌑房间作为隔区域。  2.应配备专用的餐具,床☔、毛巾等床🏊‍♀️用品,消毒🏀和口罩等个防护用品,视和平板电🚯等电子设备  3.卫生间宜配备专🚇的洗衣机,🦋漏应有水封🧟‍♀️  (三)病例管理要求📱  1.应能够进行自我-护。  2.应每天做好温测量和症监测,避免他人共用个物品。  3.避免与他人发生性接触🦐避免与免疫😳低下人员、童、老人、妇及其他人的直接接触⚱️避免与宠物动物接触,免捐献血液。  4.外出就诊时,佩戴医用外口罩,着长长裤,确保住所有损伤肤,避免与人密切接触🎏避免乘坐公交通工具。 (四)照护人员要求。 1.应每天做好体温测和症状监测  2.应尽量避免进入离区域。如🚸进入隔离区⚫,应佩戴医外科口罩和😧次性手套,病例保持至1米的距离。在离开隔离域之后,应强手卫生,🔼对脱下的口和手套进行🗞️毒处理后废。  3.在拿放和清洗⛱️家隔离治疗📆例的床单、😛服和处理垃🧽的过程中,避免抖动。🌸湿拖布拖地⬇️避免干扫。🏤湿抹布清洁居用品表面🌞地毯应用蒸清洗,避免用吸尘器。 4.应将居家隔离治疗例的餐具、单、毛巾和物单独洗涤消毒,可选热力消毒、氯消毒剂或铵盐类消毒浸泡等消毒式。  (五)应急处置。  1.照护人员或共同住者出现任症状或不适➡️现,应当及前往指定医机构就诊并🦹‍♀️动报告可疑🚋触史。  2.对其接触的物品、活动区域等结合险评估结果♨️行消毒处理二、疫情处相关工作人  (一)适用范围。 🥍适用于猴痘情期间流行🟩学调查、环清洁消毒人的个人防护🏋️‍♂️  (二)流行病学调查员防护要求  1.个人防护装备。次性乳胶手、医用外科罩、一次性离衣等。 2.个人防护要求。规范😶戴口罩,加🔔手卫生,与⛎调查人员保至少1米的距离。  3.废物管理。查结束后,🔡弃的个人防装备暂存、理和处置应照《医疗废管理条例》👨🏿‍🤝‍👨🏼行。  4.应急处置。在调查过程出现口罩脱、直接接触病例皮肤或泌物等情况要结合被调人员的临床断结果、空🐖的密闭性、触的时间和离等进行风评估,结合🏄‍♀️险评估结果🧑采取相应的置措施。 🤸‍♀️(三)环境清洁消毒人员👨‍👩‍👧‍👦护要求。 1.个人防护装备。一次乳胶手套、用外科口罩一次性隔离、防水靴套。  2.个人防护要求规范佩戴口-,加强手卫😇,尽量减少🦼被消毒物品-直接接触。 3.废物管理。清洁消结束后,废的个人防护备暂存、处和处置应按🤽《医疗废物理条例》执。  4.应急处置。如❓清洁消毒过中出现口罩落、皮肤损或直接接触泄物、血液情况,要结被清洁消毒品的类型、触的时间和👭🏼间的密闭性进行风险评,结合风险估结果,采相应的处置施。三、医人员的个人护  (一)适用范围。 适用于猴疫情期间医人员及其工🥞环境的防护  (二)基本要求。 🚊1.个人防护装备要求。务人员执行准预防,采经接触传播经飞沫传播病的隔离与👨‍👧‍👦防措施,佩一次性乳胶套、KN95/N95及以上级别的口、防护面屏护目镜、一性隔离衣等  2.环境防护要求。院环境的清😺消毒应符合件5的要求。应避免干除、清扫或吸等活动。首湿式清洁方🎄。  3.废物管理。个防护装备、🎯例敷料等暂、处理和处应按照《医废物管理条》执行。 📯附件7  猴痘病毒实验检测技术指  为指导级疾控部门🚬其他相关机规范开展猴🚐病毒实验室测工作,快、准确识别🧪痘确诊病例制定本指南本指南主要绍标本采集👩🏻‍🤝‍👨🏽及猴痘病毒🧒酸荧光定量PCR检测方法、生物安全求等内容。、检测对象 (一)猴痘确诊病例和😸似病例; (二)密切接触者;  (三)感染或疑似感染猴痘毒的动物; (四)环境或其它生物料。二、技人员基本要💏  (一)采样人员。从❄️猴痘病毒核检测标本采的技术人员👝当经过生物🐞全培训,培合格后方可🕌事采样工作🍚采样人员应悉采集标本类和采集方,熟练掌握本采集操作程及注意事,做好标本息记录,确标本质量符要求、标本™️相关信息可溯。  1.采样人员个➖防护装备要🎸:KN95/N95及以上级别的口罩⏬防护面屏或🧚‍♂️目镜、一次隔离衣、一性乳胶手套(尽可能戴两)、靴套;如果接触了病-血液、体液分泌物或排🧒物,应及时换手套。污💁‍♂️采样人员可🛵据实际工作要,适当降防护级别。 2.住院病例的标本由在医院医护员采集,根实验室检测作的需要,结合病程多采样。  3.密切接触者标本由当地控机构或医机构专业人👨🏿‍🤝‍👨🏼采集。  4.感染或疑似感染猴痘病👨‍👩‍👧的动物由当疾控机构协动物疫控部专业采样人-负责采集。 5.环境或其它生物材标本由相关业采样人员责采集。 (二)检测人员。实验室📉测技术人员具备相关专大专以上学或具有中级🦞以上专业技资格,并有2年以上实验📵工作经历,受过核酸检🛌相关培训,训合格后方从事检测工。实验室配的工作人员🐮量应与所开🤓检测项目及本量相适宜确保能够及、熟练、准😟地开展实验检测和报告果。三、标采集、保存运输  (一)标本采集种类。  1.首选标本是⛈️肤(黏膜)病变部位标本包括病变表拭子、痘疱或痘疱渗出拭子、痘痂🛤️痘痂拭子等☪️  2.呼吸道标本,如咽拭子,可于病例急性🎦检测,也是切接触者检最常用标本  3.发病急性期可采EDTA抗凝血标本进行©️酸检测。 4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检。  5.直肠拭子、尿、精液、唾等其它标本用于研究,据工作需要💿集。  6.污水或其它境生物材料🍒本根据实际作需要进行集。  (二)标本采集要求。  采皮肤(黏膜)病变部位标时应使用无-聚酯纤维、龙或类似材拭子,避免用棉拭子。集疑似病例⛵标本前应避使用75%乙醇等消毒剂洁病变部位每种类型的肤(黏膜)病变应尽可能集两个以上👬🏾子,每个病应同时采集体不同部位,外观不同的2-3种病变标本。采集皮(黏膜)病变部位标本时适当用力。肤(黏膜)病变部位、痘🦜或分泌物等同拭子标本--放置于不同采样管中。行病毒分离应采集干拭标本(无采样液)或以非灭活型病毒采液保存。根实验室活动质确定使用灭活型或灭型采样液采⚔️标本。  (三)标本采集方法。  1.斑疹、丘疹、水疱或脓👨‍👩‍👧等皮肤(黏膜)病变部位标本:一手紧采样拭子尾,手与拭子部保持一寸上距离。采👱‍♂️时适当用力压拭子,在损表面来回⚜️拭至少2-3次,然后以🥊子另一面再🅱️复擦拭2-3次。如果在🏁拭过程中痘🙅‍♀️破裂,要确采集到痘疱。采样后将😯子放置于无采样管中(可含病毒采样或不含液体),折断拭子🛤️,去除拭子部,盖上管,以消毒纸👨‍🦯擦拭消毒采管,以封口密封管盖后采样管保存送检。  2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本:采样,应确保实验可检测此类本。使用无镊子或其他头器械夹取部痘痂或面😻至少4mm×4mm大小的痂皮,放置干燥、无菌🛋️采样管中,样完成后以可贴覆盖患。  3.口咽拭子标本被采集人员部微仰,嘴🎿大,露出两扁桃体,将子越过舌根在被采集者侧扁桃体稍用力来回擦,-至少3次,然后再在咽后上下擦拭至3次,将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中☢️置于不含液,(干拭子)的无菌管中,部弃去,旋♍管盖。  4.血液标本:尽量采集急🏊‍♂️期(发病7天内)的血液标本,建议使含EDTA抗凝剂的真空血管采集5mL全血,可利用全血进行测,或室温置30分钟后,1500-2000rpm离心10分钟,收集血🏃于无菌管中行检测。 5.血清标本:用真空负采血管采集✌️液标本5mL,室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集血清于无🤱螺口塑料管。第一份血,-应尽早(最好在发病后7天内)釆集,第二份血清应✌️发病后第3-4周采集,采集血液标本5mL后室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集血清无菌螺口塑管中,用于🔁痘抗体检测🤒  6.其他标本:依据🐿️计需求规范集。  (四)标本保存。  标本应收集后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下),并尽快进行检测👶可在1周内检测的标本可于4℃环境中保存;1周内无法检测的本,短期可于-20℃环境中保存,✡️期应置于-70℃或以下环境中保存。血分离血浆冷藏(2-8℃),分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存’应设立专库🔠专柜单独保标本,避免复冻融标本  猴痘病及其相关标🥞应由专人管👵,准确记录毒及标本的👩‍🔬源、编号、😘量等信息,✳️体要求可参《病原微生菌(毒)种保藏数据描述☘️则》(T/CPMA011-2020)。应采取有措施确保病及标本安全Ⓜ️严防发生误、恶意使用🥧被盗、被抢丢失、泄露事件。  (五)标本送检。  标本🧝集后应尽快,,,低温条件下(冰袋或干冰)送往实验室如需长途运标本,应采干冰冷冻运方式进行保。  1.送检标本:病标本先由省及以下疾控构进行初步测,各省首猴痘阳性标应送中国疾中心病毒病复核。每个👯性病例至少🙈集一套标本(皮肤或黏膜变部位标本口咽拭子标😲及急性期、复期双份血👩‍👦标本)送中国疾控中心病病所检测。省级疾控机根据实际情制定省内样🕤送检、复核程。  2.病原体及标运输:  (1)国内运输。猴痘病毒🩺其他潜在感性生物材料运输包装分属于A类,对应的联合国号为UN2814,包装符合国际民航▫️织文件Doc9284《危险品航空安运输技术细》的PI602分类包装要求,通过其交通工具运👨‍👦‍👦的可参照以🌲标准包装。痘病毒或其🧘‍♂️潜在感染性料运输应按《可感染人的高致病性原微生物菌(毒)种或样本运输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运书》。污水环境标本暂普通生物样运输标准执。  (2)国际运输。痘毒株或样在国际间运的,应规范装,按照《入境特殊物卫生检疫管规定》办理关手续,并足相关国家国际相关要。四、猴痘毒核酸检测🐮求及流程 🌥️(一)实验室资质要求。💢 开展猴痘毒核酸检测实验室,应符合《病原生物实验室,,,物安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因增检验实验管理办法》(卫办医政发2010〕194号)有关规定,具备区的市级卫健康部门备的生物安全级(BSL-2)实验室及以上实验室👬🏻件,并备案痘病毒相关验活动。独设置的医学🍍验实验室还符合《医学验实验室基标准(试行)》《医学检🈁实验室管理🛴范(试行)》等要求。 ,,,开展猴痘病分离、培养中和等涉及毒扩增、使等实验操作🤢实验室应具🛀国家卫生健委批准的生安全三级(BSL-3)实验室及以上验室条件,↗️获得猴痘病➕实验活动批。分离的猴🈵病毒应送国病原微生物藏中心/国家病原微生物📨源库病毒分保藏。  (二)实验室生物安全要求  根据2006年公布实施的《人间染的病原微📓物名录》(简称《名录》),猴痘病毒🥖物危害分类第一类,是种高致病性毒。按照《☔录》要求,痘病毒的分、培养等涉病毒扩增及用的实验操🏑需在BSL-3及以上实验室的生物安柜内进行;灭活采样液👨‍👨‍👧‍👧集的猴痘病样本的灭活BSL-3实验室进行;本灭活后猴病毒DNA提取、检测可🏠BSL-2及以上实验室🏑PCR检测的专门区域或间进行。如名录》更新开展猴痘病操作的实验生物安全要应按最新《🎬录》执行。🏿水样本的灭参照普通生样本。  (三)实验室分区要求。 #️⃣原则上开展⏯️痘病毒核酸测的实验室当设置以下域:试剂储-和准备区、⚾本制备区、-增和产物分🍫区。三个区在物理空间应完全相互立,空气应向流通。各🦱功能分别是-  1.试剂储存和准备:贮存试剂,-制备、试剂,分装和扩增🈸应混合液的备,以及离管、吸头等耗品的贮存🧑🏻‍🤝‍🧑🏻准备。  2.标本制备区:转运桶开,-、标本灭活🔖核酸提取及入至扩增反🕠管等。  3.扩增和产物分析区:核扩增和产物析。  根使用仪器的🆑能,区域可🔊当合并。如用标本处理🦒核酸提取及⏭️增检测为一的自动化分仪,标本制区、扩增和物分析区可并。  (四)主要仪器设备。  实室应当配备开展检验项🗾相适宜的仪设备,包括二级生物安🐗柜、高速台离心机、干恒温器、荧🤸‍♀️定量PCR仪、计时器、液器。  (五)实验室猴痘病毒核酸测流程。 实验室接到本后,按照准操作程序行试剂准备标本前处理核酸提取、酸扩增、结分析及报告实验室应当🧐立可疑标本阳性标本复-流程。  1.试剂与材料。  (1)标本:包括变表面拭子痘疱液或痘渗出液拭子痘痂或痘痂子、咽拭子全血或血浆标本。  (2)核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒):组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。  (3)核酸检测试剂:  🤷试剂:DNA聚合酶或预的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。  ②猴痘病-检测引物、🌷针:  ③👨‍🦰性对照:涵🎢检测靶标序的质粒。 (4)灭菌去离子水、无乙醇  (5)消毒液  ①75%乙醇:用于手部物体表面常消毒,开启有效期为1周。  ②含🕢消毒液:现⏹️现配,含有氯1000mg/L的消毒液用于物体面常规消毒含有效氯5000mg/L的消毒液用感染性材料🎮洒时的应急理。  (6)耗材:包括带滤芯的吸、螺旋口的心管、非螺🌒口的离心管含锆珠的粉管、PCR反应板和透明膜或PCR反应管和透明。  (7)BSL-2个人防护用品🌭包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一次🦗隔离衣、防眼罩或面屏一次性帽子鞋套、靴套🧐手套。  2.实验前的标本接收。 (1)核对被检标本编号姓名、性别年龄及检测目;  (2)待检标本的状态如有异📗,需注明; (3)待检标本长期存🥣在-70℃,短期存放可-20℃,避免反复冻融  3.核酸检测操作步及注意事项  (1)病毒核酸(DNA)的制备  操作方法🍙DNA提取试剂盒相应说书进行操作具体如下: ①提取试准备:第一开启试剂盒👩🏽‍🤝‍👨🏻在使用前先漂洗液中加无水乙醇,入体积参照,,,上标签。所试剂在使用应平衡至室;所有离心骤应在室温进行。  处理样本: A.痘疱液:干拭子标需以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本,加入80μL缓冲液,总量为180μL;标本体积不足100μL时用缓冲液补足体积至180μL;  B.病变皮疹或痘痂:取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体📥含PS的PBS,研磨或匀浆处理,取80μL,然后加入100μL缓冲液;  C.咽拭子、其它拭子从采样液中200μL标本,干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬,混匀取200μL;  D.全血或血清:接取200μL标本。  ③加入20μL蛋白酶K溶液,混匀,液会变清亮若样本为病皮疹或其它织时,加入白酶K混匀后,在56℃放置,直至组🦮溶解,再进下一步骤。 ④加入200μL裂解缓冲液,充分匀,70℃放置10分钟,或至溶液变亮,简短离以去除管盖壁水珠。 需注意:加裂解缓冲液可能会出现色絮状沉淀在70℃放置后会消失。溶液未变清🚡,说明细胞解不彻底,能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。  加200μL无水乙醇,分混匀,此可能会出现,,状沉淀,简离心以去除🌦️盖内壁水珠  ⑥将上步骤所得溶和絮状沉淀,-加至吸附柱👨‍👧‍👧(吸附柱放入废液收集管🖨️),8000rpm离心1分钟,弃废。  ⑦加500μL漂洗缓冲液1(使用前先检是否已加入🪒水乙醇),8000rpm离心1分钟,弃废液。 ⑧加入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是否🉐加入无水乙🤨),最大转速13000rpm离心3min,弃废液。  ⑨将附柱放回废收集管中,大转速13000rpm离心1分钟,尽量去除漂洗🆚。  ⑩将附柱转入一🛋️干净的离心中(需自行准备,试剂盒未提供),加入50μL洗脱缓冲液或菌去离子水👵室温放置2-5分钟,8000rpm离心1分钟。收集滤出液,好标记,4℃或-20℃(短期)保存备用,-70℃长期保存。 (2)核酸检测:实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴病毒核酸(PCR实验室进行)。  ①反应体系的备:每孔20μL,加入5μL样本DNA,共计25μL;每次PCR反应,除检测标本外应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照;💦有样本,包对照,应设孔。  ②💠样:每根反📰管中加入核或对照各5uL,盖紧管盖或封好透明,置于荧光👩‍🚒量PCR检测仪上。  扩增条件设:  ④仪检测通道选:使用荧光量PCR检测仪,选择Fam荧光信号检测通道,收🙎‍♂️设在60℃。具体设置方💉参照各仪器用说明书。🎯 ⑤结果分🧪阈值设定:用荧光定量PCR检测仪进行结果分析,基线取3-10或6-15个循环的荧光信号,阈设定原则为🐢值线刚好超正常阴性对🧢扩增曲线最点,也可根仪器噪音情调整阈值。 (3)核酸检测结果判  ①Real-timePCR反应系统的质量控:反应结果同时符合以2个条件,否则试验结果效,应重新’展检测。阴对照无扩增为阴性。阳对照未出现性结果。 ②结果判定  A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值;  B.灰区:一孔Ct值>37;  C.阳性:双孔Ct值<37。  所有阳和处于灰区标本应重复测或经序列析进行确诊需注意:当本仅为咽拭或血清、血,且检测结🏻为阴性时,结合临床症👂,慎重做出👨‍👦性诊断。 (4)表格记录  做好光定量实时PCR方法检测猴痘病毒核原始记录。 五、猴痘毒全基因组⏮️序  1.测序标本选取则。本土疫中的首发或👩‍💼期病例、与期病例有流病学关联的键病例、感🛰️来源不明的土病例、境🔇输入病例阳标本等。以标本在核酸光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。  2.测序要求。以省为单🏩确定开展猴🪒病毒全基因测序的机构建议使用扩🛤️子技术进行痘病毒全基组测序。测数据经质控🧙‍♀️格后方可用🪕后续生物信🧗‍♀️分析。二代👃序平台覆盖度应不低于10×,三代测序平台覆盖💑度应不低于50×,全基因组测序覆盖应不低于98%。数据比对分析推荐参猴痘基因组NC_063383.1。  各省应建本省输入、🆘土病例猴痘毒基因组数,,库,应具备列对比分析🦞力。具备测条件的省份在接收标本48小时内开展测序工作关键样本要实验室收到🤫本后1周内提供测序结果💩告,所有测🩺原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中病毒病所进序列汇总、析。病毒病🎁应将序列分结果及时反🈳各省,并将国猴痘病毒列汇总、分结果及时上国家疾控局🗒️  3.分子分型。推荐用在线分析具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行子分型。 附件:  7-1猴痘病毒检测标本送🤡表  7-2猴痘病毒标序列测定结报告单【编:孙静波】
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