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　　中新⏬7月27日电据国家控局官方🍽️信消息，进一步做猴痘防控作，及时效应对猴疫情，提猴痘防控️⃣作的科学、精准性有效性，实维护人群众生命全和身体康，国家控局会同家卫生健委制定并🥻7月26日印发《猴🏐防控方案。其中提，2023年6月以来，我国多省份先后告多例猴病例，引新增本土发疫情和匿传播的险较高。坚持“预为主、防结合、精🧢防控、快↖️处置”原🚛，落实“😹发现、早😿告、早隔🈴、早治疗措施。　《猴痘防方案》全🛏️如下：猴◽防控方案🧑🏿‍🤝‍🧑🏿　猴痘是猴痘病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致一种人兽患病。2022年9月，我国报首例猴痘入病例。2023年6月以来，国多个省先后报告例猴痘病，引发新本土续发情和隐匿播的风险🆒高。为指各地科学准做好猴防控工作🧙‍♂️切实维护民群众身健康，制本方案。、总体要　　坚持⚫预防为主防治结合精准防控快速处置原则，落“早发现早报告、🕖隔离、早疗”措施开展医疗-构、重点群、入境,-员和重点所等多渠监测。加疫情分析风险研判有针对性🏀开展重点💵群健康教和综合干。落实病隔离治疗流行病学🦩查和密切🖕触者追踪👨‍👨‍👦‍👦理等措施坚持发现👨‍👩‍👧‍👦起、控制👒起，及时🖲️断疫情传😇。二、疾🐕‍🦺特征　　(一)病原学特征。　🍳猴痘病毒🐍于痘病毒正痘病毒，为基因全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发该病毒。1970年在刚果民主🦼和国一名似天花患🖐️的标本中🍍次分离到痘病毒，首例确诊📨人类猴痘例。　　痘病毒分两个进化👱‍♀️支：(1)分支I，曾称为中非支或刚果地分支；(2)分支II，曾称为西非分支进一步分IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方流行区猴-暴发疫情毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现多亚分支♊包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告例输入性🥉痘病例以👨🏿‍🤝‍👨🏽，各地报中国疾控心病毒病的毒株序均属于IIb分支。　　猴痘病耐干燥和温，在痂🐒、土壤和物、床上品等物体面可生存月。该病♊对热敏感加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂🎦过氧乙酸常用消毒☢️及紫外线有效灭活毒，对过化氢、次酸钠、戊’醛、邻苯甲醛等敏🍦。　　(二)流行病学特征。　1.传染源。猴痘病🧙的宿主尚明确，目🕣认为非洲齿类动物(非洲松鼠树松鼠、比亚袋鼠睡鼠等)可能为其自宿主。传🥘源包括猴病例及感☎️的啮齿类物、猴和👩‍👩‍👧‍👦等灵长类物。　　2.传播途径。猴痘病主要经黏和破损皮侵入人体🚫主要通过🙀接接触病的病变皮或黏膜传，亦可通接触被病污染的物🥝、长时间距离吸入例呼吸道沫传播，触感染动-的呼吸道泌物、病渗出物、液及其它️⃣液，或被染动物咬、抓伤感传播。　3.易感人群。人群遍易感。种过天花苗对猴痘毒存在一😹程度的交保护力。　4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫主要在中和西非地呈地方性行，主要过接触感动物传播所引发的传人疫情播链较短主要为儿👹及青壮年散发病例聚集性疫👨🏽‍🤝‍👨🏼，通过家↖️或旅行方偶尔播散,,其他国家地区。2022年5月以来全球国暴发的情主要在男性行为🦞群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发性行为的🔖性)中经性接触传播大部分病为青壮年-性，通过型聚会以🤨后续在社的MSM扩散，并传至全球多🌨️国家和地。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出症状后至疹结痂自脱落并形新皮肤前有传染性有调查提一些病例能在出现🏭状前1-4天存在传🤖性。　　3.早期症状：可出现热、头痛背痛、肌和淋巴结大等。　4.皮疹和黏膜疹：常在热退出现，有病例可出👩🏻‍🤝‍👨🏼在全身症🎠之前。皮发生常经斑疹、丘、水疱、疱、结痂痂皮脱落个阶段，同形态皮可同时存🥽，可伴有🐩显痒感和痛。可累🧑🏾‍🤝‍🧑🏽口腔咽喉👹膜、肛门生殖器、膜和角膜🕊️。痂皮脱后可遗留斑或色素着甚至瘢👨🏿‍🤝‍👨🏽，瘢痕持时间可长数年。　5.病程及严重程度猴痘病程2—4周，免疫力低患者的病可能较长猴痘为自性疾病，多数病例状会自行失，也有症和死亡🦯生，主要儿童、孕和免疫力下人群。　2022年以来全多国猴痘发疫情中大多数病临床表现轻，部分例无全身🔵状，皮疹😍限于生殖、肛门直黏膜部位死亡病例🙇‍♂️要为未得治疗的艾病病毒感-者等免疫👩‍🦼低下人群🔣2022年以来全球🌫️地方性流⚓区病例的死率约为0.1%。三、宣传教与干预　针对重点群、出入-人员和一👵人群等不人群分类Ⓜ️展宣传教👨🏾‍🤝‍👨🏽，有针对🏠地加强不🤟人群的自防范意识个人防护施，积极-合做好防-工作。　🚥(一)重点人群。各⛄卫生健康👨‍🦼疾控部门合相关社💊组织，充借鉴艾滋防治综合预经验和务模式，🔙MSM经常出入的酒、会所、池等重点动场所，展同伴教。借助大🎋媒体、MSM社交网站等互联网🏞️台，开展👩🏿‍🤝‍👨🏻痘防控知👨‍🔧宣传教育🤸提高重点群防范意，减少高行为，引有可疑接🏢史者自觉👩‍🎓好自我健💺监测，增🧭主动就诊🌵识。　　点人群宣💌干预要求见附件1《重点人群传干预指》。　　(二)出入境人员。通发放宣传料等形式🏟️加强出入人员猴痘控知识宣教育。提♨️出境人员注目的地家和地区痘疫情信，不接触痘样症状🌄及啮齿类灵长类等物。提醒自猴痘疫报告国家地区的人，如在境⛳有可疑接️⃣史，入境21天内应做好自我-康监测，免与他人生密切接，一旦出,发热、皮、淋巴结大等猴痘🐸症状，应动就诊并😺实报告流病学史。　(三)一般人群。📢地充分发新媒体以🚽广播、电、报纸等统媒体作🧷，开展猴💗防控知识传教育，⚫高公众科防范意识四、疫情测和报告　(一)监测病例定。　　1.猴痘样症者。不明👩‍🔬因急性皮(面部或口腔黏膜、🖇️肢、生殖🌾或会阴、周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿大者　　2.疑似病例。痘样症状，发病前21天内具备以下流行学史中的何一项：(1)有猴痘病例报告区旅居史(2)有猴痘确诊病或疑似病🧃接触史；(3)有同性性行为，性伴有同🧓性行为史(4)有地方性流行可疑动物🍅触史。　3.确诊病例。猴痘症状者、’似病例及👼切接触者🐪经实验室测猴痘病核酸阳性🤺病毒分离性者。　👤(二)多渠道监测。👩🏾‍🤝‍👨🏿　1.医疗机构监测🐽各级各类疗机构要展猴痘样🥼状监测，其是皮肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿询检测门等要重点注猴痘样-状者。发猴痘样症👨🏿‍🤝‍👨🏻者，应主询问流行😃学史，记患者现住及联系方，采集标送疾控机进行猴痘酸检测。备猴痘病检测能力🦁猴痘病毒验活动资💜的医疗机也可开展测。　　2.重点人群监测。各各类医疗🚹构、疾控💗构在对MSM等重点人群开展诊或检测咨服务时，主动询问否有猴痘☎️症状及其疑接触史如发现猴样症状者疑似病例应及时采标本进行痘病毒核检测。　3.入境人员监测。关收到猴相关异常⚪康申报或🎬疫发现有🤞痘样症状入境人员应及时进--标本采集核酸检测并发放《诊方便卡🦯，要求其快就诊；于核酸检阳性者，相关信息⏭️报辖区疾机构，由关部门进😙步调查处👩‍🦼。　　4.重点场所水监测。,条件的地可根据当疫情形势经评估对MSM经常出入的酒吧会所、浴等重点活🛡️场所开展水监测。　(三)病例报告。　相关医机构根据床表现、行病学和🛐验室检测果，及时👭🏿患者进行断。　　✊断的疑似例和确诊🧦例应于24小时内通♀️中国疾病防控制信系统的监报告管理🕷️块进行网直报。如境外输入例需填写入来源国或地区。🧟‍♀️具备网络🏴报条件的疗卫生机，需在规时限内将💇‍♂️染病报告信息报告地乡镇卫院、社区生服务中🧑🏽‍🤝‍🧑🏻或县级疾机构进行络报告，🔜时传真或送传染病告卡至代单位。负病例网络⏪报的医疗生机构，根据实验检测结果流调进展🎒时对病例💋息进行复,、订正。　各县(市、区)出现首例猴痘诊病例或🤵2例及以上存在流行学关联的诊病例，🏊‍♂️当在2小时内通过突公共卫生🛌件报告管信息系统告，事件别选择“分级”。、疫情处　　(一)病例管理📇　　各地现猴痘疑🧖‍♀️病例和确病例应当👨‍⚖️时转运至👨‍👨‍👧‍👦疗机构进隔离治疗如临床症明显好转病变部位结痂，可为居家隔🎷治疗，直皮疹结痂然脱落，✊除居家隔👬🏽。对病情轻且具备家隔离治🤥条件的确🏼病例，经疗机构与🤼控机构联评估后，直接采取🤐家隔离治🚨。对于实居家隔离疗的确诊例发放《痘病例居🌰隔离治疗康告知书🤗(见附件2)。确诊病例居家隔治疗期间单人单间住，避免家人有皮或黏膜直🌦️接触，做被污染物的消毒，😛必要不外㊙️，确须外时穿长衣裤、佩戴用外科口，避免前人群聚集所，避免🎡其他人有肤或黏膜接接触；🧑🏼‍🤝‍🧑🏻定医疗机👩🏽‍🤝‍👨🏼安排专人责上门或*️⃣话随访，供健康咨和医疗指。　　(二)流行病学调查。　县(市、区)级疾控机构接到辖疑似病例确诊病例🦈告后，及组织开展行病学调，查找感来源，掌🆚、追踪和理密切接者，分析🤜播链及传⏫特征，及🌥️发现潜在风险人群其范围、征，有针⛹️‍♂️性地开展传教育和🤍合干预。😾查过程中,挥多部门防联控的🎉同作用，可能获取面准确的调信息。　调查内主要包括例基本信📊、发病就📨情况、临表现、转及实验室测；发病21天内与可疑感染源的接触、接触场及接触方；发病后隔离治疗的具体活地点、与有皮肤或膜直接接者，以及病前4天内与其有性触者。　🀄猴痘疫情行病学调要求详见件3《猴痘疫情流行👩🏽‍🤝‍👨🏻学调查指》。　　(三)密切接触者的判和管理。💽　1.密切接触者定🍴。直接接🦸病例的病部位及其污染物品或感染动及其分泌🎨、渗出物污染物；及职业暴或长时间🚘距离吸入🧂例呼吸道😡沫等，经估有感染🏗️险的人员　　2.密切接触者定。根据行病学调👨‍👨‍👦及暴露风✈️评估结果🧞疾控机构责及时对切接触者🧚‍♀️行判定。　3.密切接触者管。疾控机-或基层医卫生机构导密切接者做好自📨健康监测健康监测限为最后切接触之👩🏼‍🤝‍👩🏻起21天。　　密切,-触者自我康监测期-可正常生与工作，避免与他发生性接等密切接🚶，避免捐血液等；持每天做体温测量🤾症状监测出现猴痘症状应及🪀就诊并主🥉报告可疑触史。辖疾控机构基层医疗👩🏾‍🤝‍👩🏼生机构应🥰密切接触😐自我健康测第7、14、21天上门或电对其进行🍌访，提供,-询指导，现异常情及时进行置。　　↕️切接触者定管理要详见附件4《猴痘密接触者判🗽和管理指》。　　(四)消毒与人员防护　　做好例衣物、巾、床单餐具等个用品，以可能被病分泌物、出物、体等污染的👘境和物体面的消毒从事病例,,,治护理、行病学调🆕、环境清消毒、标👸采集和实🎼室检测等🦲作人员在作期间做个人防护🍰　　消毒人员防护求详见附5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个防护指南。六、实室检测　猴痘病毒酸检测首皮肤或黏--病变部位本，可同采集口咽子标本。省首例猴确诊病例本应送中疾控中心毒病所进🥁复核；本疫情中的发或早期诊病例、早期病例流行病学联的关键诊病例、染来源不的本土确🚚病例、境🖇️输入确诊例阳性标等，荧光量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因序。所有序原始数、组装序🚢及测序样🥵送检单应获得序列48小时内报送中国疾中心病毒所进行汇👎、分析。上确诊病应至少采🌘一套标本(包括核酸测阳性者皮肤或黏🧑🏽‍🤝‍🧑🏻病变标本口咽拭子本以及发急性期和🐑复期双份清)送中国疾控中心-,毒病所。　实验室测具体要详见附件7《猴痘病实验室检技术指南✌️。七、院感染控制　医疗机应当严格好院内感🕦控制。疑👨‍👨‍👧病例和确病例应安在隔离病👨‍👩‍👧‍👧，疑似病🏕️单间隔离💳医务人员🍤行标准预，采取经触传播和飞沫传播病的隔离👨🏿‍🤝‍👨🏼预防措施佩戴一次🥘乳胶手套KN95/N95及以上级别的罩、防护🐂屏或护目、一次性🍬离衣等，时做好手-生。严格照《医疗构消毒技规范》对例的体液血液、排👯‍♀️物、分泌🍝等进行规👩🏼‍🤝‍👨🏿处理，做诊疗环境(空气、物表面、地👨‍👩‍👦等)、医疗器械、病使用物品的清洁消。根据《疗废物管条例》《疗卫生机📢医疗废物🌎理办法》📅好医疗废的处置和🦜理。八、作要求　-(一)加强组织协调各地卫生💼康、疾控门加强与😈关等有关门的密切作和信息😬享，及时现与处置🚱痘疫情，实猴痘病发现、疫报告、诊隔离、密😥接触者追🦽管理等工，防止疫扩散和蔓。各地在痘疫情防过程中应意保护病、密切接者和重点群等个人私。　　(二)加强宣传引导。地要及时布辖区猴疫情相关息，做好策解读和🖍️众健康提。通过多方式和渠开展猴痘🗣️控知识宣，加强重人群宣传育的针对和实效性及时回应会关切，导公众科认识猴痘💰　　(三)加强人员🚩训。各地加强对各疾控机构医疗机构业人员的训。对医人员重点📶展猴痘病👲的识别与🧐断、病例现与报告🦵病例管理相关知识训，强化治意识。疾控人员点开展流病学调查密切接触的判定和理、实验检测、重人群宣传-预等相关识培训，🦾高猴痘疫防控和应处置能力　　附件　　1.重点人群宣干预指南　2.猴痘病例居家离治疗健告知书　☪️3.猴痘疫情流行病调查指南　4.猴痘密切接触判定和管🛬指南　　5.猴痘消毒技术指南　6.猴痘个人防护南　　7.猴痘病毒验室检测🚜术指南　附件1　　重点人群🏤传干预指🥭　　2022年5月以来，全球地方性流区发生的痘疫情以男性行为群(MSM)为主。为充分利用国艾滋病治综合干服务体系开展MSM等重点人宣传干预👩‍👩‍👧‍👧防范猴痘💭情传播扩📦，形成常化艾滋病猴痘综合控一体化对机制，定本指南一、实施略　　在,有艾滋病治综合干服务体系础上，综运用行为🤼干预方法手段，通宣传教育促进安全行为、动检测、外服务、同-,教育和互网干预等从个体、体和社会多个层面目标人群💒供猴痘综🦳干预服务二、组织施　　各医疗机构🚭疾控机构加强重点室和艾滋自愿咨询测门诊工🎽人员猴痘识培训，重点人群供猴痘防知识宣传检测咨询动员、治和关怀等,务。各级♐控机构应积极推动地有能力具有良好滋病防治验的MSM志愿者或🦲会组织共参与猴痘☎️治宣传工，在工作程中注意护重点人个人隐私🟩三、形势析　　各要加强对点人群猴疫情、防现状、影因素及出🌈境情况的查，及时析研判猴-疫情形势为制定本高危行为预工作计提供依据具体内容括：1.重点人群基🤲、活动形和特点、🟠动场所、入境的时👨🏾‍🤝‍👨🏼及地区等2.猴痘知识、态度高危行为-,3.猴痘疫情水平及影响因素🏄‍♀️4.猴痘防治政策及🌖业机构已展的工作5.包括志愿者在内有关组织个人已开’的干预活👨‍❤️‍👨；6.影响猴痘防治作的困难问题。四💁宣传干预💟　(一)宣传教育。🥮级疾控机或健康教专业机构🧸供技术支，社会组参与，共研究制定合当地特的猴痘预宣传材料加强警示传教育。️过大众媒、MSM网站和以移终端为载的交友软😦等平台，传国际、内及本地痘疫情信和防控知📂，提高重人群猴痘范意识。🤷‍♂️　(二)同伴教育。级疾控机要加强同⬆️教育员挑、招募和🔽训，组织支持同伴🦧传活动，🪀强人群猴风险防范识，推动动检测。🦷期组织同教育员工例会，了猴痘干预👈作存在的难和问题👩🏽‍🤝‍👨🏻有针对性给予帮助💽支持。　(三)外展服务。各疾控机构预工作人定期到重🧄人群活动所开展猴💚宣传、咨、发放宣材料等外🎿服务活动🥭提高重点群猴痘防意识和知-,水平，推重点人群强自我健管理，主寻求检测询服务。　(四)检测咨询。🧣级疾控机通过互联、同伴教、外展活等多种形动员有猴样症状或疑接触史重点人群行猴痘检。各级各医疗机构肤(性病)科、肛肠、艾滋病愿咨询检🛺门诊发现🐑痘样症状，应主动问其流行学史及性触史，记患者现住及联系方，采集标送疾控机进行猴痘酸检测，🙏备猴痘检能力及猴🎲病毒实验动资质的疗机构也🈳开展检测对于已建🥘互联网+HIV检测平台的地区可增加猴检测内容实现互联🐙在线检测约和结果⛎询。五、点场所干　　重点动场所包实体和虚🚵‍♀️两类场所实体场所括酒吧、所、浴池经营性场，虚拟场包括移动联网和社媒体。　🛒(一)实体场所干预　　各级控机构负组织干预作人员在地MSM经常出入的🤑吧、会所浴池等活👵场所，开猴痘预防预宣传，要包括：　1.在MSM经常出入的酒吧🍙会所、浴等实体场，张贴醒的健康教🗺️宣传图片设置健康育资料公’栏；　　2.强化个人健康责任识，开展痘健康咨-，推动开自我风险🈴估；　　3.提供转介服务信息🥏告知明确诊疗流程🛕及相关检💦、医疗机名称、联🧉人等信息　　各地加强对猴确诊病例病前21天内活动过场所以及🏼水监测阳场所的干📚宣传，重目标人群个人隐私护，加强社会组织🤷‍♂️伴教育员痘防治知培训，建规范的行干预流程🌂提高自我护技能。💑　(二)虚拟场所干-。　　各疾控机构责组织指当地有序展猴痘线宣传，在👨‍👧关网站、交媒体平及时发布🗺️更新猴痘传教育内👨‍🎨，形成面🌦️重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣干预服务系。　　级疾控机支持社会织或同伴💲育员利用站、信箱社交媒体台，组织💗展在线咨👩‍⚕️和交流。时解答网提出的各猴痘相关题。针对同时期猴传播特点定期或不🎻期组织专、专业人👾、同伴教员利用互-网和社交👨‍✈️体平台进在线宣教各级疾控🧎‍♀️构要定期导更新相专业信息确保宣传容科学、🚕效。　　件2　　附件3　　猴痘疫情流病学调查➿南　　为导各地疾机构规范展猴痘疑病例、确病例和聚性疫情的行病学调，及时掌病例暴露🎸、接触史😋流行病学💇关信息，实密切接者的追踪定，防止情传播扩，制定本👩‍🚀南。一、查目的　(一)查找感染来源,,掌握、追和管理密接触者。　(二)分析传播链传播特征　　(三)及时发现在的风险群及其特、范围，针对性地展宣传教和综合干。二、调🛅对象　　似病例、诊病例和🧛‍♀️集性疫情三、调查法和内容　通过查资料，询🌛病例、诊医生、家和知情人进行流行💉学调查。🕋病例的病允许，调时应先调病例本人😰再对其诊🐟医生、家⛸️和知情者行调查。　开展个◾调查时，🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿认真、详🏰了解和记病例基本息、发病诊情况、床表现、归及实验检测信息发病前21天内与可感染来源🚑接触史、🍟触场所及触方式；病后至隔治疗前的体活动地、与其有肤或黏膜接接触者以及发病-4天内与其有性接触◽。　　(一)基本情况。如姓名🚳性别、年🍁、住址、👬🏼籍、联系式等。　(二)发病就诊情况临床表现-实验室检、发病就经过和病,,变化与转。　　(三)感染来源调查。对例发病前21天内的暴露史开展查，包括内外猴痘例报告地旅行史或住史，对疑的感染🎋源要详细问接触时、方式、🚷次、地点接触时采的防护措-等，特别性接触史调查时，发现调查中未列入但具备重⚪流行病学义的内容应进行详👨‍❤️‍💋‍👨询问和记😝。　　(四)密切接触者调查及定。对病传染期的动情况和群接触情进行追踪,,排查后，🏖️定其密切触者。密接触者判和管理按🔖《猴痘密🖱️接触者判,,和管理指》(附件4)执行。　　详见附🩰3-1《猴痘病例个🌧️调查表》四、组织实施　　🐋照“属地管理”原，由病例住址所在县(市、区)级疾控部门组织辖疾控机构展猴痘病的流行病调查，就医疗机构供诊疗信-。调查单应根据调计划和调🤘目的，确调查人员🥴成和职责工，及时展病例流🏾病学个案🚃查。调查程中发挥🌀部门联防+控的协同🦀用，尽可获取全面确的流调息。调查🐁间，调查员要做好人防护。、信息的报与分析　疾控机😁完成调查，应做好例分析总，及时将行病学个调查表、🛹查报告等料逐级报上级疾控构，并做调查资料🈲保管和存。病例流信息要按🗳️关规定，🏚️格做好信安全和个隐私信息护。　　件：3-1.猴痘病例个案调查　　附件4　　猴痘,-切接触者定和管理南　　为导各地做猴痘密切触者判定管理，有👨‍👧控制猴痘🔗情的传播制定本指。一、密接触者判标准　　-切接触者指直接接🤷病例的病部位及其🌮污染物品或感染动及其分泌、渗出物☺️污染物的⌛员；以及业暴露或时间近距吸入病例吸道飞沫，经评估感染风险🍄人员。具⚱️情形包括　　1.与疑似病例确诊病例病后有皮或黏膜直接触的人，接触方包括性接、抚摸、抱和亲吻👨‍💼；　　2.与有皮疹⛰️状的疑似⚡例或确诊🤍例共用衣🧥、被褥、具等物品👨‍💻人员；　3.医疗诊疗、采样实验室检🤜等操作过中可能暴📴于病毒，评估有感🎁风险的医卫生工作🔥员；　　4.与疑似病例或确诊例发病前4天内有性触，并经行病学调专业人员估有感染👩🏾‍🤝‍👨🏽险的人员亦可判定密切接触📎；　　5.在狭小密空间与疑病例或确🏳️‍🌈病例长时近距离接,(如长时间共处同一🎤闭空间)，经流行病调查专业员评估有🛩️染风险的员，亦可定为密切触者；　👩‍👩‍👧6.接触感染猴痘病🌄的动物及分泌物、❔出物等污物，而未取有效个防护的人；　　7.其他可能在病毒暴风险的人。二、密接触者管　　1.管理期限与式。病例现地疾控构或密切触者所在疾控机构于追踪到,切接触者🛸天及时开猴痘病毒酸检测，知并指导切接触者好自我健监测，健监测期限自最后密接触之日起21天。自我健康测期间可常生活与作，需避与他人发性接触等切接触，免捐献血等。　　2.知情告知。实施健监测时，控机构或层医疗卫*️⃣机构应口😺告知健康🤘测的缘由期限、注事项和疾相关知识以及负责访疾控机或基层医🥄卫生机构🟦系人和联方式，并🏄放《猴痘💞切接触者康告知书。　　3.定期随访疾控机构,,基层医疗生机构应-第7、14、21天电话或上门🕥动询问密接触者自健康监测🛰️况，提供询指导建。发现异🛠️情况，及🐛调查处置　　4.自我健康监。坚持每🥋做好体温🦑量和症状测，主要状包括发(＞37.3℃)、皮疹、浅表巴结肿大。密切接〽️者一旦出相关症状及时前往-疗机构就或与随访系人取得系，接受痘病毒核检测。　附件：4-1.猴痘密切接触者📘康告知书　附件5　　猴痘消’技术指南　为进一规范猴痘,-情相关的毒工作，实科学消、精准消🏚️，减少猴病毒对公健康造成危害，制本指南。、疫源地毒　　(一)适用范围。　　适于出现猴👗病例后，🦢其可能污的场所和品进行的🧷时消毒和末消毒。　(二)消毒原则。　1.范围和对象确。　　根流行病学🍓查结果，定现场消的范围和象。对病在住院、运期间可😾污染的环和物品，行随时消。对病例住或活动🥃的场所，居住场所工作场所学习场所诊疗场所转运工具🤳及其他可受到污染🙇场所，在离开后(如住院、转、出院、亡)进行终末消毒。　2.方法选择。　(1)诊疗用品消毒尽量选择次性诊疗🛥️品，非一性诊疗用应首选压蒸汽灭菌不耐热物♨️可选择化⛈️消毒剂或🏦温灭菌设进行消毒🔣灭菌。　(2)手消毒。建议用手消毒🚣揉搓双手行消毒，可选择75%乙醇、过氧化氢等毒剂。　(3)环境和物体表消毒。可择含氯消🏌️剂、二氧氯、过氧酸、过氧氢等消毒-擦拭、喷或浸泡消。　　(4)衣物、床单等纺织消毒。可择热力消、含氯消剂或季铵类消毒剂🐚泡等消毒式。　　(三)常见污染对象的毒方法。　1.手消毒。　　选用速干消毒剂，直接选用75%乙醇进行擦拭消；醇类过👩🏼‍🤝‍👨🏿者，可选季铵盐类🚠有效的非类手消毒。有肉眼🏕️见污染物，应先使🔷洗手液(或肥皂)在流动水下按六步洗手🔛清洗双手然后按上’方法消毒　　2.皮肤、黏膜　　皮肤污染物污时，应立🐒清除污染，再用一性吸水材沾取0.5%碘伏或过氧化氢消剂擦拭消👱‍♀️3分钟以上，使用清清洗干净🕗粘膜应用量生理盐冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒💲　　3.床单、毛巾衣服等纺品。　　-例使用的单、毛巾🧬衣服等纺品，无肉可见污染时，若需复使用，用流通蒸或煮沸消30分钟；或用有效500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒浸泡30分钟后，按常规清洗或用其他🥭效的消毒⛹️‍♀️法。不耐的衣物可用环氧乙或干热方进行消毒🐤理。　　🪁分泌物、出液、排🧩物、血液体液等污物时，建按医疗废集中处理🏟️　　4.餐(饮)具。　　病例🍹使用的碗盘、筷、👐等餐(饮)具清除食残渣后，沸消毒30分钟，或️用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再用清水🥔净。　　5.污染物。　　对病🤡分泌物、出液、排🛺物、血液体液等少污染物可一次性吸🕷️材料(如纱布、抹布⚕️)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消💁‍♀️剂(或能达到高水平毒的消毒🏫巾/干巾)小心移除🚛　　对病分泌物、出液、排物、血液🔔体液等大污染物应用含吸水🏼分的消毒🪑或漂白粉🚓全覆盖，💳用一次性😣水材料完覆盖后用♂️量的有效5000-10000mg/L的含氯消毒🥬浇在吸水料上，作-30分钟以上(或能达到高水平毒的消毒巾)，小心清除干净🎢清除过程避免接触染物，清的污染物❕医疗废物中处置。　病例的泌物等应专门容器集，用有氯20000mg/L的含氯消剂，按物💉药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污物后，应🔎污染的环⏭️和物体表🏜️进行消毒-盛放污染🦜的容器可有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液🛤️泡消毒30分钟，然🧑🏿‍🤝‍🧑🏼清洗干净　　6.地面、墙壁👨‍👨‍👧　　有肉可见污染时，应先全清除污物再消毒无肉眼可污染物时可用有效👨‍✈️1000mg/L的含氯消毒剂500mg/L的二氧化氯消毒’擦拭或喷🛰️消毒；不🐘腐蚀的地和墙壁，可用2000mg/L的季铵盐👩‍✈️消毒剂喷或擦拭；🐹毒作用时不少于30分钟。　7.物体表面。　　疗设施设表面以及🎣围栏、床柜、家具门把手、生洁具和居用品等肉眼可见染物时，先完全清🦰污染物再毒。无肉可见污染😶时，用有氯1000mg/L的含氯消毒或500mg/L的二氧化氯消-剂，不耐蚀的物体面也可用2000mg/L的季铵盐类消毒💩进行喷洒擦拭或浸消毒，作🧴30分钟后清水擦拭👨🏿‍🤝‍👨🏼净。　　8.污水和粪便。　　进入市政水管网前🚢进行消毒🚭理，消毒污水应当合《医疗构水污染排放标准(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃-。　　病生活垃圾医疗废物理。　　10.医疗废物。　　🔼疗废物的置应遵循医疗废物理条例》《医疗卫机构医疗物管理办😪》的要求规范使用👃层黄色医废物收集封装后，🔟常规流程🍎行处置。　11.室内空气。👩🏿‍🤝‍👨🏻　如经科评估，需室内空气⛱️行消毒，在无人情下，可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢二氧化氯(浓度按产🚅说明书)等消毒剂，🏿20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿也可采用验证安全效的其他🏊毒方法。🧖‍♀️、注意事　　现场毒应确保用消毒产👩‍👦‍👦合法有效所选消毒法科学可。现场消时，根据🕥场情况和关标准要，选择合有效的个防护装备🚹在做好个🌤️防护的前下，严格照工作方🧜‍♂️实施消毒🔁　　消毒施单位应备现场消能力，操人员应经消毒专业训，掌握毒和个人护基本知，熟悉消器械的使和消毒剂配制等。🤎　每次开消毒工作均应做好毒记录，括消毒对💃、消毒面(体积)、消毒剂浓(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。时，相关门和单位🍝做好消毒😰作的监督-,理和评价　　附件6　　猴痘人防护指🦹‍♀️　　为加🚷公众、疫处置相关作人员和务人员的人防护，免猴痘病暴露感染制定本指🧕。一、居隔离治疗病例等相人员　　(一)适用范围。　　用于居家离治疗的例(疑似病例和确诊🌾例)、照护人员或共居住者的人防护。　(二)居家隔离区要求。　🧣1.应选择有自然通、独立卫间的房间为隔离区。　　2.应配备专的餐具，单、毛巾床上用品消毒剂和罩等个人护用品，🩹视和平板☺️脑等电子📼备。　　3.卫生间宜配备专用洗衣机，漏应有水。　　(三)病例管理要求。　1.应能够进行自我护。　　2.应每天做好体温测✳️和症状监🥬，避免与人共用个物品。　3.避免与他人发生🧺接触，避-与免疫力下人员、⚜️童、老人孕妇及其-人员的直接触，避🍐与宠物等👩🏼‍🤝‍👨🏿物接触，免捐献血等。　　4.外出就诊时，应佩,-医用外科罩，着长长裤，确遮住所有伤皮肤，🐥免与他人切接触，免乘坐公交通工具　　(四)照护人员求。　　1.应每天做好体温测和症状监。　　2.应尽量避进入隔离🏄域。如需入隔离区，应佩戴🍮用外科口和一次性套，与病保持至少1米的距离在离开隔区域之后应加强手生，并对下的口罩🤾‍♂️手套进行毒处理后弃。　　3.在拿放和清洗居家🎹离治疗病的床单、服和处理,-圾的过程💺，应避免🚸动。用湿布拖地，免干扫。🐹湿抹布清🐾家居用品🙈面，地毯🛷用蒸汽清--，避免使吸尘器。　4.应将居家隔离疗病例的具、床单毛巾和衣单独洗涤消毒，可择热力消、含氯消剂或季铵类消毒剂’泡等消毒式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同居者出现任症状或不,表现，应及时前往↪️定医疗机👓就诊并主🍟报告可疑触史。　〰️2.对其接触的物品活动的区⛹️‍♂️等结合风评估结果🏀行消毒处。二、疫处置相关🏊‍♂️作人员　👩‍🔬(一)适用范围。　适用于猴疫情期间行病学调、环境清消毒人员个人防护　　(二)流行病学查人员防🤓要求。　1.个人防护装备。次性乳胶🚽套、医用科口罩、次性隔离等。　　2.个人防护要求。规🙃佩戴口罩加强手卫🐬，与被调人员保持少1米的距离。　　3.废物管理。调查结后，废弃😮个人防护备暂存、理和处置按照《医废物管理例》执行🌡️　　4.应急处置。🌃在调查过中出现口脱落、直接触了病皮肤或分☯️物等情况-要结合被查人员的👨‍👩‍👦‍👦床诊断结、空间的↔️闭性、接的时间和离等进行险评估，🦛合风险评🦆结果，采🌝相应的处措施。　(三)环境清洁消毒员防护要。　　1.个人防护备。一次👷‍♀️乳胶手套,,医用外科罩、一次🏧隔离衣、👘水靴套等　　2.个人防护要。规范佩口罩，加手卫生，量减少与消毒物品直接接触　　3.废物管理。洁消毒结后，废弃个人防护🪂备暂存、🍤理和处置按照《医👞废物管理🚽例》执行　　4.应急处置。在清洁消过程中出口罩脱落皮肤损伤直接接触📯泄物、血等情况，结合被清🏋️消毒物品⤴️类型、接的时间和🧡间的密闭等进行风评估，结风险评估果，采取🔙应的处置📍施。三、务人员的人防护　🧑🏾‍🤝‍🧑🏻(一)适用范围。　👩🏽‍🤝‍👨🏼适用于猴疫情期间务人员及工作环境🍀防护。　(二)基本要求。　’1.个人防护装备要-。医务人执行标准防，采取接触传播经飞沫传疾病的隔与预防措’，佩戴一性乳胶手、KN95/N95及以上级别🎉口罩、防面屏或护镜、一次隔离衣等🧛　　2.环境防护要🧡。医院环的清洁消👩🏻‍🤝‍👨🏽应符合附🏕️5的要求。应避免干尘、清扫🕐吸尘等活。首选湿🕝清洁方法🥘　　3.废物管理。人防护装、病例敷🦧等暂存、⛔理和处置按照《医废物管理例》执行　　附件7　　猴痘毒实验室🏞️测技术指🏒　　为指各级疾控🥉门和其他😕关机构规开展猴痘🏼毒实验室🟧测工作，🚀速、准确别猴痘确病例，制本指南。指南主要🐁绍标本采以及猴痘毒核酸荧定量PCR检测方法🏑生物安全求等内容🍛一、检测💻象　　(一)猴痘确诊病例和疑病例；　💝(二)密切接触者；　(三)感染或疑似染猴痘病的动物；　(四)环境或其它物材料。🌪️、技术人基本要求🏸　(一)采样人员。事猴痘病核酸检测本采集的术人员应经过生物🎒全培训，🕳️训合格后可从事采👨🏾‍🤝‍👨🏼工作。采人员应熟采集标本类和采集📁法，熟练握标本采操作流程注意事项🦔做好标本息记录，保标本质符合要求标本及相信息可追。　　1.采样人员人防护装要求：KN95/N95及以上级别的口罩防护面屏护目镜、次性隔离、一次性胶手套(尽可能戴两)、靴套；如果接触病例血液体液、分🔱物或排泄，应及时🥅换手套。水采样人可根据实工作需要适当降低🆎护级别。　2.住院病例的标由所在医📨医护人员-集，根据验室检测作的需要可结合病🕸️多次采样🥈　　3.密切接触者本由当地控机构或😶疗机构专人员采集　　4.感染或疑似染猴痘病的动物由🍴地疾控机协调动物控部门专采样人员☺️责采集。　5.环境或其它生材料标本相关专业样人员负💥采集。　🗂️(二)检测人员。实室检测技☹️人员应具相关专业专以上学或具有中-及以上专技术资格🕕并有2年以上实验室作经历，-受过核酸🆘测相关培-，培训合后方可从👨‍👩‍👧‍👧检测工作实验室配的工作人数量应与开展检测目及标本相适宜，🥊保能够及、熟练、确地开展🎁验室检测报告结果三、标本🥻集、保存运输　　(一)标本采集种类。　1.首选标本是皮📧(黏膜)病变部位标，包括病表面拭子痘疱液或疱渗出物子、痘痂痘痂拭子。　　2.呼吸道标，如口咽↘️子，可用病例急性检测，也密切接触检测最常标本。　3.发病急性期可采👨🏼‍🤝‍👨🏻EDTA抗凝血标本行核酸检👡。　　4.采集发病7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用⚱️抗体检测💦　　5.直肠拭子、液、精液⚾唾液等其标本仅用研究，根工作需要集。　　6.污水或其它环境生🚶‍♂️材料标本据实际工需要进行集。　　(二)标本采集要求。🚀　采集皮🧮(黏膜)病变部位标时应使用菌聚酯纤🌱、尼龙或似材质拭，避免使💱棉拭子。集疑似病的标本前-避免使用75%乙醇等消毒剂清👕病变部位每种类型,皮肤(黏膜)病变应尽可能采集个以上拭🍒，每个病应同时采💵身体不同位或外观🏝️同的2-3种病变标。采集皮(黏膜)病变部位标时应适当力。皮肤(黏膜)病变部位、痘🏜️或分泌物♋不同拭子🏊本应放置不同的采🔑管中。进病毒分离应采集干🚒子标本(无采样液)或以非灭活🅱️病毒采样保存。根实验室活资质确定用非灭活或灭活型㊙️样液采集-本。　　(三)标本采集方法。👩🏽‍🤝‍👩🏼　1.斑疹、丘疹、疱或脓疱皮肤(黏膜)病变部位标本：一紧握采样子尾部，与拭子头👡保持一寸🍍上距离。样时适当力下压拭🚿，在皮损面来回擦👩‍👧‍👧至少2-3次，然后拭子另一,再重复擦2-3次。如果在擦过程中痘破裂，要👨‍👩‍👦保采集到疱液。采后将拭子置于无菌样管中(可含病毒采液或不含体)，折断拭子头，🍼除拭子尾👨‍🏫，盖上管🤟，以消毒巾擦拭消采样管，封口膜密❌管盖后将样管保存送检。　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样前确保实验.可检测此♈标本。使无菌镊子其他钝头械夹取全痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮放置于干、无菌的样管中，🥰样完成后🧽创可贴覆患处。　💪3.口咽拭子标本：采集人员部微仰，张大，露两侧扁桃🛌，将拭子过舌根，被采集者侧扁桃体微用力来擦拭至少3次，然后在咽后壁-,-下擦拭至3次，将拭子头浸入2-3mL病毒保存👰的管中或于不含液(干拭子)的无菌管，尾部弃，旋紧管🚡。　　4.血液标本🎋尽量采集性期(发病7天内)的血液标本建议使用EDTA抗凝剂的真-采血管采5mL全血，可利用🎳血进行检，或室温置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血⛳于无菌管进行检测　　5.血清标本：真空负压血管采集,液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清无菌螺口🏻料管中。一份血清😴尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份🧁清应在发后第3-4周采集，集血液标👉5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集-清于无菌口塑料管，用于猴抗体检测　　6.其他标本：据设计需规范采集　　(四)标本保存　　标本在收集后1小时内冷(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行测。可在1周内检测标本可置4℃环境中保存；1周内无法检👬🏿的标本，期可置于-20℃环境中保存，,期应置于-70℃或以下环境中存。全血👡离血浆前藏(2-8℃)，分离出的血浆🦁于-20℃或以下环中保存。设立专库专柜单独存标本，-免反复冻标本。　,,,猴痘病毒🔧其相关标应由专人理，准确-录病毒及本的来源编号、数🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿等信息，😕体要求可考《病原生物菌(毒)种保藏数据描述通》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措🚖确保病毒标本安全🚘严防发生用、恶意🟢用、被盗被抢、丢、泄露等件。　　(五)标本送检。　　本采集后🔇尽快在低条件下(冰袋或干冰)送往实验，如需长💐运输标本应采用干冷冻运输式进行保。　　1.送检标本病例标本👁️‍🗨️由省级及下疾控机☀️进行初步测，各省↩️例猴痘阳📚标本应送国疾控中👩‍🦳病毒病所核。每个性病例至采集一套🔉本(皮肤或黏膜病变◽位标本、咽拭子标及急性期恢复期双血清标本)送中国疾中心病毒所检测。省级疾控构根据实情况制定内样本送🍣、复核流。　　2.病原体及本运输：　(1)国内运输。痘病毒或他潜在感📻性生物材的运输包分类属于A类，对应联合国编为UN2814，包装符合国际航组织文Doc9284《危险品航空安运输技术则》的PI602分类包装要求通过其他通工具运的可参照上标准包。猴痘病,或其他潜🔑感染性材🤽运输应按《可感染类的高致-性病原微🗞️物菌(毒)种或样本🌃输管理规🥥》(原卫生部令第45号)办理《准运证书。污水等境标本暂普通生物,,本运输标❌执行。　(2)国际运输。猴-毒株或样🚐在国际间输的，应💖范包装，照《出入特殊物品生检疫管规定》办相关手续并满足相国家和国相关要求👕四、猴痘毒核酸检🍽️要求及流　　(一)实验室资要求。　🔻开展猴痘毒核酸检🥶的实验室🛠️应当符合🛍️病原微生实验室生安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构床基因扩’检验实验管理办法(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定，具备🐱区的市级生健康部备案的生👆安全二级(BSL-2)实验室及以上实验条件，并🎊案猴痘病相关实验▫️动。独立-置的医学验实验室应符合《’学检验实室基本标🕋(试行)》《医学检实验室管规范(试行)》等要求。　　开猴痘病毒离、培养中和等涉⬆️病毒扩增使用等实操作的实室应具备💉家卫生健⛈️委批准的👁️‍🗨️物安全三(BSL-3)实验室及以上实室条件，🥥获得猴痘毒实验活批准。分的猴痘病应送国家原微生物藏中心/国家病原微物资源库毒分库保。　　(二)实验室生物安全要。　　根2006年公布实施《人间传➰的病原微物名录》(简称《名》)，猴痘病毒生物害分类为一类，是🔬种高致病病毒。按🪂《名录》求，猴痘🎆毒的分离培养等涉👩🏿‍🤝‍👩🏼病毒扩增🦥使用的实操作需在BSL-3及以上实验🪓的生物安柜内进行🔼非灭活采👑液采集的痘病例样的灭活在BSL-3实验室进行🛐样本灭活猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验或PCR检测的专门域或房间行。如《录》更新开展猴痘毒操作的🏆验室生物全要求应最新《名》执行。水样本的活参照普生物样本　　(三)实验室分要求。　🗿原则上开猴痘病毒酸检测的验室应当🦂置以下区：试剂储🛄和准备区标本制备🉑、扩增和物分析区三个区域🤦物理空间--应完全相😨独立，空🩳应定向流🎓。各区功分别是：🔂　1.试剂储存和准😘区：贮存剂的制备试剂的分🩳和扩增反-混合液的备，以及🌐心管、吸-等消耗品贮存和准。　　2.标本制备：转运桶启、标本活，核酸取及加入扩增反应等。　　3.扩增和产物分析区核酸扩增产物分析　　根据🙀用仪器的能，区域适当合并如采用标👨‍🔬处理、核提取及扩检测为一的自动化析仪，标制备区、增和产物析区可合。　　(四)主要仪器设备。　实验室应-,配备与开检验项目😕适宜的仪📯设备，包：二级生安全柜、-,速台式离机、干浴温器、荧定量PCR仪、计时、移液器　　(五)实验室猴🟡病毒核酸测流程。　实验室到标本后🤭按照标准👨‍🎤作程序进🎆试剂准备标本前处、核酸提、核酸扩🎆、结果分及报告。验室应当立可疑标和阳性标复检流程　　1.试剂与材料✋　　(1)标本：包病变表面子、痘疱或痘疱渗液拭子、痂或痘痂子、咽拭🔘、全血或浆等标本　　(2)核酸提取剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基组DNA提取试剂盒血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒　　(3)核酸检测剂：　　试剂：DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴病毒检测物、探针♍　　③阳对照：涵检测靶标列的质粒　　(4)灭菌去离👨‍🦰水、无水🗣️醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用手部和物🍿表面常规毒，开启-,有效期为1周。　　含氯消毒🧗‍♂️：现用现，含有效♻️1000mg/L的消毒液用于体表面常消毒，含效氯5000mg/L的消毒液于感染性料溢洒时🍶应急处理🧛‍♂️　　(6)耗材：包带滤芯的📲头、螺旋-的离心管非螺旋口离心管、🥂锆珠的粉管、PCR反应板和明封膜或PCR反应管和透明盖🚯　　(7)BSL-2个人防护-品：包括KN95/N95口罩及以上级别🐩口罩、一性隔离衣防护眼罩😊面屏、一性帽子、🦹‍♀️套、靴套手套。　2.实验前的标本接。　　(1)核对被检标本编号姓名、性😑、年龄及👬🏽测项目；　(2)待检标本的态如有异，需注明👽　　(3)待检标本期存放在-70℃，短期存放可-20℃，避免反复融。　　3.核酸检测操作步骤注意事项　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　作方法按DNA提取试剂盒相应明书进行🐁作，具体下：　　提取试剂-备：第一🙋‍♀️开启试剂🎋，在使用🍪先在漂洗中加入无乙醇，加体积参照🙀上标签。有试剂在🍁用前应平至室温；有离心步应在室温进行。　②处理样：　　A.痘疱液：拭子标本♦️以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。100μL样本，加🧥80μL缓冲液，总为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补总体积至180μL；　　B.病变皮疹或痂：取1块痂皮按质⤴️/体积(1mg/50μL)加入相应体积PS的PBS，研磨或匀浆处理取80μL，然后加100μL缓冲液；　C.咽拭子、其它子：从采液中取200μL标本，干拭子🚶本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀后200μL；　　D.全血或血：直接取200μL标本。　　🤮加入20μL蛋白酶K溶液，混🦨，溶液会🔰清亮。若☪️本为病变疹或其它织时，加蛋白酶K混匀后，在56℃放置，直至组织🖱️解，再进下一步骤　　④加💯200μL裂解缓冲，充分混，70℃放置10分钟，或至溶变清亮，短离心以除管盖内水珠。　⚾需注意：😀入裂解缓🦜液后可能🔺出现白色状沉淀，70℃放置后会消失如溶液未清亮，说😫细胞裂解彻底，可👱‍♂️导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　⑤加200μL无水乙醇，分混匀，时可能会㊙️现絮状沉，简短离以去除管内壁水珠　　⑥将一步骤所溶液和絮沉淀均加吸附柱中(吸附柱放废液收集中)，8000rpm离心1分钟，弃废液　　⑦加👨‍🎤500μL漂洗缓冲📆1(使用前先检查是💢已加入无乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废🦅。　　⑧入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查否已加入水乙醇)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　✍️⑨将吸附放回废液🕚集管中，🚔大转速13000rpm离心1分钟，尽量除漂洗液🕷️　　⑩将附柱转入☺️根干净的👚心管中(需自行准备试剂盒中提供)，加入50μL洗脱缓冲👨或灭菌去📂子水，室🚀放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤液，做好❇️记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　　(2)核酸检测：实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病🆗核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体的准备：孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检标本外，加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；所有本，包括照，应设孔。　　🧑加样：每反应管中入核酸或照各5uL，盖紧管或封好透👩🏼‍🤝‍👨🏾膜，置于👨🏼‍🤝‍👨🏻光定量PCR检测仪上。　　③增条件设📌：　　④器检测通选择：使荧光定量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道收集设在60℃。具体设置方法照各仪器,-用说明书　　⑤结分析阈值-定：使用👩‍🏫光定量PCR检测仪进行结果分🤚时，基线3-10或6-15个循环的荧信号，阈设定原则🔋阈值线刚超过正常🤭性对照扩曲线最高，也可根👥仪器噪音况调整阈。　　(3)核酸检测结果判断--　①Real-timePCR反应系统的量控制：-应结果应时符合以2个条件，否则试验果无效，🧯重新开展测。阴性✂️照无扩增为阴性。性对照未🕯️现阴性结。　　②果判定：,,　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳性处于灰区标本应重检测或经🦺列分析进确诊。需意：当标仅为咽拭或血清、浆，且检结果为阴时，应结‼️临床症状🔨慎重做出性诊断。　(4)表格记录　做好荧光量实时PCR方法检测猴痘病毒酸原始记🦏。　　五猴痘病毒⏬基因组测👤　　1.测序标本选原则。本疫情中的发或早期例、与早病例有流病学关联👩🏽‍🤝‍👩🏼关键病例👩‍👩‍👦‍👦感染来源明的本土例、境外入病例阳标本等。🐳上标本在😑酸荧光定PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。省为单位定开展猴病毒全基组测序的构。建议用扩增子术进行猴病毒全基组测序。序数据经控合格后可用于后生物信息析。二代序平台覆深度应不于10×，三代测序🔙台覆盖深应不低于50×，全基因组测序盖度应不🧯于98%。数据比对析推荐参🗡️猴痘基因NC_063383.1。　　各省应建立👨‍👧‍👦省输入、土病例猴🏴病毒基因数据库，🦴具备序列比分析能🕤。具备测条件的省要在接收本后48小时内开展序工作，键样本要实验室收标本后1周内提供测🍬结果报告所有测序始数据(一般为fastq格式)、组装序🔢(一般为fasta格式)和标本序列测定🧗‍♂️果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报-中国疾控心病毒病.进行序列总、分析病毒病所🧘将序列分结果及时👵馈各省，将全国猴病毒序列总、分析果及时上国家疾控。　　3.分子分型推荐使用线分析工Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株🪕行分子分。　　附：　　7-1猴痘病毒检测标本检表　　7-2猴痘病毒标本序👨‍👦‍👦测定结果🤸‍♀️告单【编🚥:孙静波】

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