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　　中新🔦7月27日电据国家🍨控局官方信消息，进一步做猴痘防控作，及时效应对猴疫情，提猴痘防控⏮️作的科学🏕️、精准性👨🏾‍🤝‍👨🏻有效性，🈷️实维护人群众生命全和身体康，国家控局会同®️家卫生健委制定并7月26日印发《猴防控方案🧙‍♂️。其中提，2023年6月以来，我国多省份先后告多例猴病例，引新增本土,发疫情和👨🏿‍🤝‍👨🏼匿传播的险较高。坚持“预为主、防结合、精防控、快🧭处置”原，落实“,发现、早告、早隔、早治疗措施。　《猴痘防,-方案》全如下：猴⏬防控方案🧪　猴痘是👾猴痘病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致一种人兽💋患病。2022年9月，我国报☝️首例猴痘🛏️入病例。2023年6月以来，-,国多个省先后报告👨‍⚕️例猴痘病，引发新🥕本土续发情和隐匿播的风险🚓高。为指各地科学准做好猴🔵防控工作切实维护民群众身健康，制🕵️‍♀️本方案。😫、总体要　　坚持预防为主防治结合精准防控快速处置原则，落“早发现早报告、隔离、早疗”措施开展医疗🙋‍♀️构、重点💉群、入境员和重点🤪所等多渠监测。加🧊疫情分析风险研判有针对性开展重点群健康教和综合干。落实病隔离治疗🐤流行病学查和密切🌏触者追踪理等措施坚持发现🍜起、控制起，及时👭🏻断疫情传。二、疾特征　　(一)病原学特征。　猴痘病毒于痘病毒正痘病毒，为基因全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发该病毒。1970年在刚果民主👠和国一名似天花患的标本中次分离到痘病毒，首例确诊人类猴痘例。　　痘病毒分两个进化支：(1)分支I，曾称为中非支或刚果地分支；(2)分支II，曾称为西非分支进一步分IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方流行区猴暴发疫情🏓毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现😋多亚分支包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告例输入性痘病例以🎏，各地报⚒️中国疾控心病毒病的毒株序均属于IIb分支。　　猴痘病❇️耐干燥和🌶️温，在痂🚣、土壤和物、床上品等物体面可生存月。该病对热敏感🥕加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂过氧乙酸常用消毒及紫外线有效灭活毒，对过化氢、次酸钠、戊醛、邻苯甲醛等敏。　　(二)流行病学特征。　🏃‍♂️1.传染源。猴痘病的宿主尚🕛明确，目认为非洲齿类动物(非洲松鼠树松鼠、👅比亚袋鼠🍻睡鼠等)可能为其自宿主。传源包括猴🎽病例及感的啮齿类物、猴和等灵长类物。　　2.传播途径。猴痘病🐎主要经黏和破损皮侵入人体🍨主要通过接接触病的病变皮或黏膜传，亦可通🩳接触被病污染的物、长时间距离吸入🗡️例呼吸道,,,沫传播，触感染动的呼吸道泌物、病渗出物、液及其它液，或被染动物咬、抓伤感🧢传播。　📢3.易感人群。人群💂遍易感。种过天花苗对猴痘毒存在一程度的交🏧保护力。　4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫主要在中😎和西非地呈地方性⬛行，主要-过接触感🙌动物传播’所引发的🤾‍♀️传人疫情播链较短主要为儿👩🏿‍🤝‍👩🏻及青壮年散发病例聚集性疫，通过家或旅行方偶尔播散🚃其他国家地区。2022年5月以来全球🥦国暴发的情主要在🤏男性行为群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发性行为的📌性)中经性接触传播大部分病为青壮年性，通过型聚会以后续在社的MSM扩散，并传🛬至全球多国家和地。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出症状后至🚈疹结痂自脱落并形新皮肤前有传染性有调查提一些病例🐪能在出现🥰状前1-4天存在传🙇‍♂️性。　　3.早期症状：可出现热、头痛背痛、肌和淋巴结大等。　4.皮疹和黏膜疹：常在热退出现，有🥩病例可出在全身症之前。皮😛发生常经斑疹、丘、水疱、疱、结痂痂皮脱落个阶段，同形态皮可同时存，可伴有显痒感和痛。可累口腔咽喉膜、肛门↖️生殖器、膜和角膜。痂皮脱后可遗留斑或色素着甚至瘢，瘢痕持💑时间可长数年。　5.病程及严重程度猴痘病程2—4周，免疫力低患者的病🛩️可能较长猴痘为自性疾病，🚯多数病例✒️状会自行失，也有🚢症和死亡✉️生，主要儿童、孕🎴和免疫力下人群。　2022年以来全多国猴痘📰发疫情中大多数病临床表现🪐轻，部分🛴例无全身状，皮疹限于生殖、肛门直,黏膜部位死亡病例要为未得治疗的艾病病毒感🤑者等免疫低下人群2022年以来全球-地方性流🌝区病例的死率约为0.1%。三、宣传教与干预　🎳针对重点⭐群、出入人员和一🌲人群等不人群分类展宣传教，有针对🦺地加强不🧶人群的自防范意识个人防护施，积极🟠合做好防工作。　(一)重点人群。各卫生健康️⃣疾控部门合相关社🈸组织，充借鉴艾滋🎋防治综合预经验和务模式，MSM经常出入的酒👩‍🦰、会所、池等重点动场所，展同伴教。借助大媒体、MSM社交网站等互联网🆙台，开展痘防控知宣传教育提高重点群防范意，减少高行为，引🧆有可疑接🧚‍♂️史者自觉好自我健监测，增,,,主动就诊识。　　点人群宣干预要求见附件1《重点人群传干预指》。　　(二)出入境人员。通⏮️发放宣传--料等形式加强出入人员猴痘🦞控知识宣教育。提🩸出境人员注目的地家和地区痘疫情信㊗️，不接触痘样症状🏋️‍♂️及啮齿类灵长类等🔽物。提醒自猴痘疫报告国家地区的人-，如在境有可疑接史，入境21天内应做好自我👯‍♂️康监测，免与他人生密切接,，一旦出💢发热、皮、淋巴结大等猴痘症状，应🍽️动就诊并🧗‍♂️实报告流病学史。💜　(三)一般人群。地充分发新媒体以广播、电🧖‍♂️、报纸等🦻统媒体作，开展猴防控知识传教育，👨‍👧‍👦高公众科’防范意识,四、疫情👠测和报告👅　(一)监测病例定。　　1.猴痘样症者。不明因急性皮(面部或口腔黏膜、肢、生殖🏮或会阴、周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿大者　　2.疑似病例。痘样症状，发病前21天内具备以下流行学史中的何一项：(1)有猴痘病例报告区旅居史(2)有猴痘确诊病🟠或疑似病💚接触史；(3)有同性性行为，性伴有同🌲性行为史(4)有地方性流行可疑动物触史。　🕟3.确诊病例。猴痘症状者、似病例及-切接触者经实验室测猴痘病核酸阳性🦐病毒分离性者。　(二)多渠道监测。　1.医疗机构监测各级各类疗机构要💬展猴痘样👩🏾‍🤝‍👩🏼状监测，其是皮肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿询检测门等要重点🌭注猴痘样状者。发猴痘样症者，应主询问流行学史，记患者现住及联系方，采集标送疾控机进行猴痘⛸️酸检测。🦺备猴痘病检测能力猴痘病毒验活动资😂的医疗机也可开展测。　　2.重点人群监测。各各类医疗👠构、疾控构在对MSM等重点人群开展诊或检测咨,服务时，主动询问否有猴痘🍏症状及其🤸疑接触史🌗如发现猴®️样症状者疑似病例👚应及时采标本进行️⃣痘病毒核检测。　3.入境人员监测。关收到猴相关异常-康申报或疫发现有💯痘样症状入境人员应及时进🍿标本采集核酸检测📷并发放《✏️诊方便卡，要求其快就诊；🌮于核酸检阳性者，相关信息报辖区疾机构，由关部门进步调查处。　　4.重点场所水监测。条件的地可根据当疫情形势◀️经评估对MSM经常出入的酒吧会所、浴等重点活🖲️场所开展水监测。　(三)病例报告。　相关医机构根据床表现、,行病学和验室检测果，及时🟠患者进行🐌断。　　断的疑似例和确诊🐐例应于24小时内通中国疾病防控制信👩‍🎤系统的监报告管理🚣‍♀️块进行网直报。如境外输入例需填写入来源国或地区。具备网络.报条件的疗卫生机，需在规🐧时限内将🕧染病报告⚕️信息报告地乡镇卫院、社区📜生服务中或县级疾🆎机构进行-络报告，🍔时传真或送传染病告卡至代⚫单位。负病例网络🛡️报的医疗生机构，🍳根据实验检测结果流调进展时对病例息进行复、订正。’　各县(市、区)出现首例猴痘诊病例或2例及以上存在流行😇学关联的诊病例，当在2小时内通过突公共卫生件报告管信息系统告，事件别选择“分级”。,,,、疫情处　　(一)病例管理　　各地现猴痘疑病例和确病例应当🥴时转运至疗机构进隔离治疗🤸‍♂️如临床症明显好转病变部位结痂，可为居家隔🦿治疗，直👨🏾‍🤝‍👨🏻皮疹结痂然脱落，除居家隔。对病情👨轻且具备家隔离治🔏条件的确病例，经疗机构与控机构联🧃评估后，直接采取家隔离治。对于实-,-居家隔离疗的确诊例发放《痘病例居✉️隔离治疗康告知书(见附件2)。确诊病例居家隔治疗期间单人单间住，避免家人有皮或黏膜直接触，做🛑被污染物🅰️的消毒，必要不外，确须外🙈时穿长衣裤、佩戴🎄用外科口，避免前人群聚集所，避免其他人有🎾肤或黏膜👭🏾接接触；定医疗机🎡安排专人,责上门或♻️话随访，供健康咨和医疗指。　　(二)流行病学调查。　县(市、区)级疾控机构接到辖🏾疑似病例🍙确诊病例告后，及组织开展行病学调，查找感来源，掌🖲️、追踪和理密切接🧱者，分析播链及传,特征，及发现潜在风险人群其范围、征，有针性地开展🖇️传教育和🚆合干预。查过程中挥多部门防联控的同作用，可能获取🟤面准确的调信息。　调查内👩🏿‍🤝‍👨🏻主要包括例基本信、发病就🤫情况、临表现、转👩🏾‍🤝‍👨🏿及实验室测；发病21天内与可疑感染源的接触、接触场⏩及接触方；发病后隔离治疗的具体活地点、与有皮肤或膜直接接者，以及病前4天内与其有性触者。　🥮猴痘疫情行病学调要求详见件3《猴痘疫情流行😜学调查指》。　　(三)密切接触者的判和管理。　1.密切接触者定。直接接🍌病例的病部位及其污染物品🥇或感染动及其分泌--、渗出物📚污染物；及职业暴🕌或长时间距离吸入例呼吸道沫等，经估有感染险的人员　　2.密切接触者🆑定。根据行病学调及暴露风🟧评估结果疾控机构🦃责及时对切接触者行判定。　3.密切接触者管-。疾控机🧍‍♂️或基层医🕛卫生机构导密切接➡️者做好自健康监测健康监测🌋限为最后切接触之起21天。　　密切🤹触者自我康监测期可正常生与工作，避免与他-发生性接🏸等密切接，避免捐👖血液等；持每天做👱体温测量症状监测出现猴痘症状应及就诊并主报告可疑触史。辖疾控机构🕉️基层医疗生机构应密切接触自我健康-测第7、14、21天上门或电对其进行访，提供⬛询指导，现异常情🍦及时进行置。　　切接触者定管理要🧏‍♀️详见附件4《猴痘密接触者判和管理指》。　　(四)消毒与人员防护　　做好例衣物、巾、床单👨🏿‍🤝‍👨🏽餐具等个用品，以可能被病分泌物、👨‍👦出物、体等污染的--境和物体✔️面的消毒从事病例治护理、行病学调、环境清👯‍♀️消毒、标采集和实室检测等作人员在作期间做个人防护🦶　　消毒人员防护-求详见附5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个防护指南。六、实🧉室检测　猴痘病毒酸检测首皮肤或黏病变部位🧙本，可同采集口咽子标本。省首例猴确诊病例本应送中疾控中心🕥毒病所进复核；本💂‍♀️疫情中的🎿发或早期诊病例、早期病例👨‍👨‍👦流行病学联的关键诊病例、染来源不🔥的本土确病例、境输入确诊👨‍🏭例阳性标等，荧光量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因序。所有序原始数💑、组装序及测序样🐢送检单应获得序列48小时内报送中国疾♊中心病毒🏂所进行汇,,、分析。上确诊病应至少采一套标本(包括核酸测阳性者皮肤或黏病变标本口咽拭子本以及发急性期和复期双份清)送中国疾控中心,-毒病所。　实验室’测具体要详见附件7《猴痘病实验室检↖️技术指南🏊‍♂️。七、院🕡感染控制👨🏿‍🤝‍👨🏽　医疗机应当严格好院内感控制。疑🎫病例和确病例应安在隔离病，疑似病⭐单间隔离-医务人员行标准预-,，采取经触传播和⏯️飞沫传播病的隔离🗯️预防措施佩戴一次乳胶手套KN95/N95及以上级别的👮‍♀️罩、防护屏或护目、一次性离衣等，时做好手生。严格照《医疗构消毒技规范》对例的体液🌜血液、排🥙物、分泌等进行规处理，做诊疗环境(空气、物🚹表面、地等)、医疗器械、病使用物品的清洁消🦹‍♂️。根据《疗废物管条例》《疗卫生机医疗废物🖐️理办法》好医疗废的处置和理。八、作要求　(一)加强组织协调各地卫生🐋康、疾控门加强与👮关等有关门的密切作和信息,-享，及时现与处置痘疫情，实猴痘病发现、疫报告、诊😂隔离、密接触者追管理等工，防止疫🥈扩散和蔓。各地在痘疫情防🌂过程中应,-意保护病、密切接🍕者和重点群等个人私。　　(二)加强宣传引导。地要及时布辖区猴😶疫情相关♻️息，做好策解读和🐢众健康提。通过多方式和渠开展猴痘控知识宣，加强重人群宣传👨‍👨‍👦育的针对和实效性及时回应会关切，导公众科🏣认识猴痘🥢　　(三)加强人员训。各地加强对各疾控机构🐛医疗机构🚴业人员的训。对医人员重点展猴痘病的识别与断、病例🙇‍♂️现与报告🐴病例管理相关知识🤩训，强化治意识。↗️疾控人员点开展流🦏病学调查🛶密切接触的判定和’理、实验检测、重人群宣传预等相关📜识培训，🤷‍♀️高猴痘疫防控和应🛍️处置能力　　附件　　1.重点人群宣干预指南　2.猴痘病例居家🚟离治疗健告知书　👩🏻‍🤝‍👨🏾3.猴痘疫情流行病🚃调查指南　4.猴痘密切接触🚎判定和管指南　　5.猴痘消毒技术指南⛺　6.猴痘个人防护🔻南　　7.猴痘病毒验室检测术指南　附件1　　重点人群传干预指　　2022年5月以来，全球▫️地方性流🥔区发生的🤠痘疫情以男性行为群(MSM)为主。为充分利用🏟️国艾滋病🌚治综合干服务体系👨‍🦱开展MSM等重点人宣传干预防范猴痘情传播扩，形成常🦸‍♂️化艾滋病猴痘综合-控一体化对机制，’定本指南一、实施略　　在有艾滋病🎈治综合干服务体系础上，综运用行为📷干预方法手段，通宣传教育促进安全行为、动检测、外🥗服务、同教育和互-网干预等从个体、🧑🏿‍🤝‍🧑🏼体和社会🐫多个层面目标人群供猴痘综干预服务👭🏽二、组织施　　各医疗机构疾控机构🦔加强重点室和艾滋自愿咨询测门诊工人员猴痘🦠识培训，重点人群供猴痘防知识宣传检测咨询动员、治🐆和关怀等🍈务。各级♒控机构应积极推动地有能力具有良好,,,滋病防治🚣‍♀️验的MSM志愿者或-,会组织共🧑🏿‍🤝‍🧑🏻参与猴痘治宣传工，在工作程中注意护重点人个人隐私三、形势析　　各要加强对😒点人群猴疫情、防现状、影因素及出👩🏿‍🤝‍👨🏼境情况的查，及时析研判猴🎈疫情形势为制定本高危行为预工作计提供依据具体内容🦠括：1.重点人群基、活动形和特点、动场所、入境的时-及地区等2.猴痘知识、态度高危行为3.猴痘疫情水平及影响因素🛤️4.猴痘防治政策及业机构已展的工作5.包括志愿者在内🖥️有关组织🖋️个人已开-的干预活；6.影响猴痘防治作的困难问题。四宣传干预　(一)宣传教育。级疾控机或健康教专业机构供技术支，社会组参与，共研究制定合当地特的猴痘预宣传材料加强警示传教育。过大众媒、MSM网站和以移💘终端为载🏂的交友软等平台，传国际、内及本地🪁痘疫情信和防控知，提高重人群猴痘范意识。　(二)同伴教育。🤼‍♀️级疾控机要加强同教育员挑、招募和训，组织支持同伴--传活动，强人群猴风险防范识，推动动检测。期组织同😳教育员工🥛例会，了🕧猴痘干预作存在的💞难和问题🏌️有针对性给予帮助支持。　(三)外展服务。各疾控机构🏃‍♂️预工作人定期到重🔫人群活动所开展猴😵宣传、咨、发放宣材料等外服务活动👈提高重点群猴痘防意识和知水平，推重点人群😨强自我健管理，主寻求检测询服务。　(四)检测咨询。级疾控机+通过互联、同伴教、外展活等多种形动员有猴样症状或🚇疑接触史-重点人群🥕行猴痘检。各级各🧐医疗机构⛴️肤(性病)科、肛肠、艾滋病愿咨询检👩🏿‍🤝‍👩🏾门诊发现痘样症状，应主动问其流行学史及性触史，记患者现住及联系方，采集标🙆‍♂️送疾控机进行猴痘酸检测，👩‍🦳备猴痘检🧉能力及猴病毒实验动资质的♨️疗机构也开展检测对于已建🖥️互联网+HIV检测平台的地区😺可增加猴检测内容实现互联在线检测约和结果询。五、点场所干　　重点动场所包⤴️实体和虚两类场所实体场所括酒吧、👩‍👩‍👦所、浴池经营性场👨🏿‍🤝‍👨🏻，虚拟场包括移动联网和社🥰媒体。　(一)实体场所干预　　各级控机构负组织干预作人员在👬🏼地MSM经常出入的🛅吧、会所浴池等活场所，开猴痘预防🍥预宣传，要包括：　1.在MSM经常出入的酒吧会所、浴等实体场，张贴醒👩🏻‍🤝‍👨🏿的健康教宣传图片设置健康育资料公栏；　　2.强化个人健康责任识，开展痘健康咨，推动开🎴自我风险估；　　3.提供转介服务信息告知明确诊疗流程及相关检-、医疗机名称、联人等信息　　各地🚁加强对猴确诊病例病前21天内活动过场所以及😉水监测阳场所的干宣传，重目标人群个人隐私护，加强,,社会组织伴教育员痘防治知👨🏿‍🤝‍👨🏻培训，建规范的行🐦干预流程提高自我护技能。　(二)虚拟场所干。　　各👨🏿‍🤝‍👨🏼疾控机构责组织指当地有序展猴痘线🥳宣传，在🦳关网站、🙎‍♂️交媒体平及时发布更新猴痘传教育内🔝，形成面重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣-,干预服务系。　　级疾控机支持社会🍅织或同伴🌡️育员利用站、信箱社交媒体📝台，组织-展在线咨和交流。时解答网提出的各-猴痘相关题。针对同时期猴传播特点定期或不🐫期组织专、专业人、同伴教🧍‍♀️员利用互👨‍🦳网和社交体平台进🤾‍♂️在线宣教各级疾控构要定期导更新相专业信息确保宣传容科学、🤔效。　　件2　　附件3　　猴痘疫情流病学调查😼南　　为导各地疾📦机构规范🗾展猴痘疑病例、确病例和聚🆎性疫情的行病学调，及时掌病例暴露、接触史🥄流行病学🩺关信息，🧚实密切接者的追踪定，防止情传播扩，制定本南。一、查目的　(一)查找感染来源掌握、追和管理密接触者。　(二)分析传播链👩🏾‍🤝‍👩🏻传播特征　　(三)及时发现在的风险❇️群及其特、范围，针对性地🐮展宣传教和综合干。二、调对象　　似病例、诊病例和集性疫情三、调查💎法和内容👩🏼‍🤝‍👨🏻　通过查🌥️资料，询🕕病例、诊医生、家和知情人进行流行👓学调查。病例的病允许，调🤍时应先调病例本人再对其诊医生、家和知情者行调查。　开展个调查时，认真、详🕕了解和记病例基本’息、发病诊情况、床表现、💚归及实验检测信息🤥发病前21天内与可,感染来源接触史、🐙触场所及💹触方式；病后至隔治疗前的体活动地⛴️、与其有肤或黏膜接接触者🗺️以及发病🤸‍♂️4天内与其有性接触Ⓜ️。　　(一)基本情况。如姓名性别、年、住址、👩🏼‍🤝‍👩🏻籍、联系式等。　🐯(二)发病就诊情况🦹‍♂️临床表现实验室检、发病就🍿经过和病变化与转。　　(三)感染来源调查。对例发病前21天内的暴露史开展🤟查，包括🍶内外猴痘⛏️例报告地旅行史或☯️住史，对疑的感染🔽源要详细📵问接触时👨🏾‍🤝‍👨🏽、方式、👛次、地点🍚接触时采的防护措等，特别️⃣性接触史调查时，发现调查中未列入但具备重🐎流行病学义的内容🕘应进行详询问和记。　　(四)密切接触者调查及定。对病传染期的动情况和群接触情进行追踪排查后，🙎定其密切触者。密🦡接触者判和管理按《猴痘密,,,接触者判✋和管理指》(附件4)执行。　　详见附3-1《猴痘病例个调查表》↗️四、组织实施　　🧝照“属地管理”原，由病例住址所在➰县(市、区)级疾控部门组织辖疾控机构展猴痘病的流行病调查，就医疗机构供诊疗信。调查单应根据调计划和调目的，确调查人员🍻成和职责📒工，及时展病例流病学个案查。调查🏡程中发挥部门联防🔝控的协同用，尽可获取全面确的流调息。调查间，调查员要做好人防护。、信息的报与分析　疾控机完成调查🌠，应做好🤠例分析总❌，及时将🔤行病学个调查表、查报告等料逐级报上级疾控💙构，并做调查资料🥊保管和存🚊。病例流信息要按👨‍👨‍👦‍👦关规定，格做好信-安全和个💀隐私信息护。　　,件：3-1.猴痘病例个案调查　　附件4　　猴痘切接触者,定和管理’南　　为导各地做🏃‍♂️猴痘密切触者判定管理，有♾️控制猴痘情的传播🧁制定本指🎿。一、密🧗‍♀️接触者判🧙‍♂️标准　　切接触者🉑指直接接🚥病例的病🍗部位及其污染物品或感染动及其分泌、渗出物💿污染物的员；以及业暴露或时间近距⭐吸入病例吸道飞沫，经评估感染风险人员。具🙇‍♀️情形包括🤹‍♂️　　1.与疑似病例确诊病例病后有皮或黏膜直😸接触的人+，接触方️⃣包括性接、抚摸、抱和亲吻🏭；　　2.与有皮疹状的疑似例或确诊™️例共用衣、被褥、🥌具等物品人员；　3.医疗诊疗、采样实验室检等操作过中可能暴于病毒，评估有感🕴️风险的医卫生工作员；　　4.与疑似病例或确诊例发病前4天内有性触，并经🕜行病学调专业人员估有感染险的人员亦可判定密切接触；　　5.在狭小密👨🏿‍🤝‍👨🏼空间与疑-病例或确病例长时近距离接(如长时间共处同一闭空间)，经流行病❣️调查专业🔓员评估有染风险的员，亦可定为密切触者；　6.接触感染猴痘病🤷‍♂️的动物及🏻分泌物、出物等污🍙物，而未取有效个防护的人；　　7.其他可能在病毒暴风险的人。二、密🕕接触者管　　1.管理期限与式。病例现地疾控构或密切触者所在🔕疾控机构于追踪到切接触者天及时开🌀猴痘病毒♑酸检测，知并指导🚫切接触者好自我健’监测，健监测期限自最后密接触之日起21天。自我健康测期间可常生活与作，需避与他人发性接触等切接触，🌆免捐献血🧟等。　　2.知情告知。实施健监测时，控机构或🤨层医疗卫--机构应口告知健康测的缘由期限、注事项和疾相关知识以及负责🦱访疾控机或基层医👧卫生机构🧛‍♀️系人和联方式，并放《猴痘⏯️切接触者康告知书。　　3.定期随访疾控机构♑基层医疗生机构应-第7、14、21天电话或上门🕙动询问密接触者自🥚健康监测况，提供询指导建。发现异情况，及◼️调查处置　　4.自我健康监🕙。坚持每做好体温量和症状📃测，主要状包括发(＞37.3℃)、皮疹、浅表🗾巴结肿大。密切接💐者一旦出相关症状😾及时前往😞疗机构就或与随访🏐系人取得系，接受痘病毒核检测。　附件：4-1.猴痘密切接触者康告知书　附件5　　猴痘消🍧技术指南　为进一🕰️规范猴痘情相关的👨‍👦毒工作，实科学消🎶、精准消，减少猴病毒对公🕊️健康造成危害，制-本指南。、疫源地毒　　(一)适用范围。　　适于出现猴🤖病例后，其可能污的场所和⏏️品进行的时消毒和🙄末消毒。　(二)消毒原则。　1.范围和对象确🍊。　　根流行病学查结果，🐙定现场消的范围和🐂象。对病在住院、运期间可-污染的环和物品，👨🏾‍🤝‍👨🏼行随时消。对病例-住或活动的场所，居住场所工作场所学习场所诊疗场所转运工具及其他可受到污染📳场所，在,,离开后(如住院、转🦹、出院、🕉️亡)进行终末消毒。　2.方法选择。　(1)诊疗用品消毒尽量选择次性诊疗品，非一🏃‍♀️性诊疗用应首选压蒸汽灭菌🏩不耐热物可选择化消毒剂或温灭菌设💙进行消毒🏏灭菌。　-(2)手消毒。建议用手消毒🤱揉搓双手-,行消毒，可选择75%乙醇、过氧化氢等毒剂。　(3)环境和物体表消毒。可择含氯消🥢剂、二氧氯、过氧🍼酸、过氧氢等消毒擦拭、喷或浸泡消。　　(4)衣物、床单等纺织-消毒。可择热力消🥘、含氯消-剂或季铵类消毒剂🌎泡等消毒式。　　(三)常见污染对象的毒方法。　1.手消毒。　　选用速干消毒剂，直接选用75%乙醇进行擦拭消；醇类过者，可选🚻季铵盐类有效的非类手消毒。有肉眼见污染物👨‍👨‍👧‍👧，应先使洗手液(或肥皂)在流动水下按六步洗手清洗双手然后按上方法消毒　　2.皮肤、黏膜　　皮肤污染物污,时，应立清除污染🐑，再用一性吸水材沾取0.5%碘伏或过氧化氢消剂擦拭消🔅3分钟以上，使用清清洗干净粘膜应用量生理盐冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒⚙️　　3.床单、毛巾衣服等纺品。　　-例使用的单、毛巾©️衣服等纺-品，无肉👩‍🦰可见污染🈵时，若需复使用，用流通蒸或煮沸消30分钟；或用有效500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒浸泡30分钟后，按常规清洗或用其他效的消毒法。不耐的衣物可💂‍♀️用环氧乙或干热方进行消毒🕺理。　　分泌物、出液、排物、血液体液等污物时，建按医疗废集中处理　　4.餐(饮)具。　　病例使用的碗盘、筷、等餐(饮)具清除食残渣后，🚫沸消毒30分钟，或🟫用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再用清水净。　　5.污染物。　　对病分泌物、出液、排物、血液体液等少💤污染物可一次性吸🎽材料(如纱布、抹布)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消剂(或能达到高水平毒的消毒巾/干巾)小心移除　　对病分泌物、出液、排物、血液体液等大污染物应🎑用含吸水分的消毒👅或漂白粉全覆盖，👪用一次性🗒️水材料完覆盖后用量的有效👢5000-10000mg/L的含氯消毒🧧浇在吸水料上，作30分钟以上(或能达到高水平毒的消毒巾)，小心清除干净🧲清除过程避免接触👨‍🌾染物，清的污染物🍭医疗废物🧔中处置。,　病例的泌物等应专门容器集，用有🕵️‍♂️氯20000mg/L的含氯消剂，按物,,药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污🔘物后，应污染的环和物体表进行消毒盛放污染的容器可有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟，然🍰清洗干净🔧　　6.地面、墙壁　　有肉可见污染时，应先💎全清除污🔴物再消毒无肉眼可污染物时🐌可用有效🆚1000mg/L的含氯消毒剂500mg/L的二氧化氯消毒擦拭或喷消毒；不腐蚀的地和墙壁，可用2000mg/L的季铵盐,-消毒剂喷或擦拭；📜毒作用时不少于30分钟。　7.物体表面。　　疗设施设📏表面以及围栏、床👩🏽‍🤝‍👩🏼柜、家具门把手、生洁具和居用品等-,-肉眼可见🕰️染物时，🕸️先完全清-,污染物再毒。无肉可见污染时，用有氯1000mg/L的含氯消毒或500mg/L的二氧化氯消🎂剂，不耐蚀的物体面也可用2000mg/L的季铵盐类消毒🦘进行喷洒👨🏽‍🤝‍👨🏻擦拭或浸消毒，作30分钟后清水擦拭净。　　8.污水和粪便。　　进入市政🆙水管网前进行消毒理，消毒污水应当合《医疗🙎‍♂️构水污染排放标准🧽(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃。　　病生活垃圾🌳医疗废物理。　　10.医疗废物。　　疗废物的置应遵循,-医疗废物理条例》《医疗卫机构医疗物管理办》的要求规范使用🚃层黄色医废物收集▫️封装后，⛹️常规流程行处置。　11.室内空气。　如经科评估，需👔室内空气行消毒，🪀在无人情下，可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢二氧化氯(浓度按产说明书)等消毒剂，20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒也可采用验证安全效的其他-毒方法。、注意事　　现场毒应确保用消毒产合法有效所选消毒法科学可💇‍♂️。现场消🏄时，根据🐪场情况和↖️关标准要，选择合有效的个🦃防护装备在做好个防护的前下，严格-照工作方👞实施消毒　　消毒施单位应🙄备现场消能力，操人员应经📴消毒专业💦训，掌握毒和个人护基本知，熟悉消器械的使和消毒剂配制等。👅　每次开消毒工作均应做好毒记录，括消毒对、消毒面(体积)、消毒剂浓(或消毒器械强度)、剂量、作🙌时间等。时，相关门和单位🏋️‍♀️做好消毒🔸作的监督理和评价　　附件6　　猴痘人防护指　　为加,公众、疫🏔️处置相关🔔作人员和务人员的人防护，👫🏿免猴痘病🐬暴露感染🎥制定本指。一、居👩‍🔬隔离治疗病例等相💤人员　　(一)适用范围。　　用于居家离治疗的🚈例(疑似病例和确诊例)、照护人员或共居住者的人防护。　(二)居家隔离区要求。　⚰️1.应选择有自然通、独立卫😢间的房间为隔离区🚶‍♂️。　　2.应配备专的餐具，单、毛巾床上用品消毒剂和罩等个人护用品，视和平板🧦脑等电子👬备。　　3.卫生间宜配备专用洗衣机，漏应有水。　　(三)病例管理要求。　1.应能够进行自我护。　　2.应每天做好体温测和症状监，避免与🟤人共用个⤵️物品。　3.避免与他人发生♥️接触，避与免疫力下人员、童、老人👨‍🦽孕妇及其人员的直🎗️接触，避与宠物等物接触，🔜免捐献血🥤等。　　4.外出就诊时，应佩医用外科罩，着长长裤，确🛤️遮住所有伤皮肤，免与他人切接触，🌏免乘坐公交通工具　　(四)照护人员求。　　1.应每天做好体温测🏜️和症状监🙂。　　2.应尽量避进入隔离域。如需入隔离区，应佩戴⚱️用外科口和一次性套，与病保持至少1米的距离🤬在离开隔🔙区域之后应加强手👩‍🏫生，并对下的口罩手套进行毒处理后🧩弃。　　3.在拿放和清洗居家🍧离治疗病的床单、服和处理圾的过程，应避免动。用湿✒️布拖地，免干扫。湿抹布清♋家居用品💶面，地毯⏹️用蒸汽清🐟，避免使🔘吸尘器。　4.应将居家隔离☺️疗病例的具、床单毛巾和衣👨‍🚒单独洗涤消毒，可择热力消、含氯消剂或季铵😳类消毒剂🌡️泡等消毒🥤式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同居者出现任🐲症状或不♑表现，应及时前往🧎‍♂️定医疗机就诊并主报告可疑触史。　,-2.对其接触的物品活动的区等结合风🕥评估结果行消毒处。二、疫处置相关作人员　(一)适用范围。　适用于猴疫情期间行病学调、环境清消毒人员个人防护　　(二)流行病学😪查人员防要求。　1.个人防护装备。🐱次性乳胶套、医用科口罩、次性隔离等。　　2.个人防护要求。规佩戴口罩加强手卫🍺，与被调人员保持🚶少1米的距离。　　3.废物管理。调查结后，废弃❇️个人防护备暂存、理和处置按照《医🔚废物管理🛤️例》执行　　4.应急处置。在调查过🚁中出现口脱落、直📲接触了病皮肤或分🗞️物等情况☀️要结合被查人员的👎床诊断结、空间的💳闭性、接📷的时间和离等进行险评估，👩🏿‍🤝‍👩🏼合风险评🧗结果，采相应的处-措施。　(三)环境清洁消毒员防护要。　　1.个人防护备。一次乳胶手套医用外科🍹罩、一次📖隔离衣、水靴套等　　2.个人防护要。规范佩口罩，加手卫生，❤️量减少与消毒物品🩸直接接触　　3.废物管理。洁消毒结🐼后，废弃个人防护🚸备暂存、🦸理和处置按照《医🕉️废物管理✍️例》执行　　4.应急处置。🤨在清洁消过程中出口罩脱落皮肤损伤直接接触♊泄物、血等情况，🕣结合被清消毒物品类型、接🏺的时间和间的密闭等进行风🏕️评估，结️⃣风险评估🌏果，采取应的处置施。三、务人员的人防护　(一)适用范围。　适用于猴😢疫情期间务人员及工作环境🈶防护。　(二)基本要求。　1.个人防护装备要。医务人执行标准防，采取💋接触传播😦经飞沫传疾病的隔与预防措🕜，佩戴一性乳胶手、KN95/N95及以上级别口罩、防面屏或护😁镜、一次隔离衣等　　2.环境防护要。医院环的清洁消🔫应符合附5的要求。应避免干尘、清扫吸尘等活。首选湿清洁方法　　3.废物管理。🕡人防护装🧶、病例敷🐓等暂存、理和处置按照《医废物管理例》执行　　附件7　　猴痘毒实验室测技术指　　为指各级疾控🌭门和其他🧜关机构规-,-开展猴痘🧝‍♀️毒实验室测工作，速、准确🐧别猴痘确病例，制本指南。指南主要绍标本采🏌️‍♀️以及猴痘🚿毒核酸荧定量PCR检测方法🤸生物安全🧘‍♂️求等内容🆗一、检测象　　(一)猴痘确诊病例和疑病例；　(二)密切接触者；　(三)感染或疑似染猴痘病的动物；-　(四)环境或其它物材料。、技术人基本要求　(一)采样人员。🖼️事猴痘病核酸检测本采集的🕷️术人员应经过生物🔌全培训，训合格后可从事采工作。采人员应熟采集标本🚃类和采集法，熟练握标本采🚣‍♂️操作流程⚛️注意事项做好标本息记录，保标本质符合要求标本及相🌂信息可追。　　1.采样人员🧑‍🤝‍🧑人防护装要求：KN95/N95及以上级别的口罩🈚防护面屏护目镜、🌊次性隔离👨‍🎨、一次性胶手套(尽可能戴两)、靴套；如果接触🗨️病例血液🥾体液、分物或排泄，应及时换手套。⏮️水采样人可根据实工作需要适当降低护级别。🔝　2.住院病例的标由所在医♑医护人员集，根据🍘验室检测作的需要可结合病多次采样　　3.密切接触者本由当地控机构或疗机构专人员采集🌠　　4.感染或疑似👩‍❤️‍💋‍👩染猴痘病的动物由地疾控机协调动物控部门专采样人员责采集。　5.环境或其它生🏆材料标本相关专业样人员负采集。　(二)检测人员。实室检测技👩🏾‍🤝‍👨🏻人员应具相关专业专以上学或具有中✏️及以上专🈂️技术资格👢并有2年以上实验室〰️作经历，🌪️受过核酸🧎‍♀️测相关培💕，培训合🛅后方可从◼️检测工作实验室配✔️的工作人🤽‍♂️数量应与-开展检测目及标本🥿相适宜，保能够及、熟练、确地开展验室检测报告结果三、标本集、保存运输　　(一)标本采集种类。　1.首选标本是皮(黏膜)病变部位标，包括病🛀表面拭子🐽痘疱液或🚁疱渗出物子、痘痂🍢痘痂拭子。　　2.呼吸道标，如口咽子，可用病例急性🏧检测，也👨‍👧‍👧密切接触检测最常标本。　3.发病急性期可采💇EDTA抗凝血标本行核酸检-。　　4.采集发病🌵7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用✌️抗体检测🦨　　5.直肠拭子、液、精液唾液等其标本仅用研究，根工作需要集。　　6.污水或其它环境生🍚材料标本🥰据实际工需要进行集。　　(二)标本采集要求。　采集皮(黏膜)病变部位标时应使用👩‍🍳菌聚酯纤、尼龙或似材质拭🗨️，避免使棉拭子。🕶️集疑似病的标本前😗避免使用75%乙醇等消毒剂清病变部位💡每种类型皮肤(黏膜)病变应尽可能采集,,,个以上拭，每个病👴应同时采🤾‍♀️身体不同位或外观同的2-3种病变标。采集皮(黏膜)病变部位标👯‍♀️时应适当力。皮肤(黏膜)病变部位、痘或分泌物不同拭子本应放置♀️不同的采管中。进病毒分离应采集干🛵子标本(无采样液)或以非灭活病毒采样保存。根实验室活资质确定用非灭活或灭活型🆓样液采集本。　　(三)标本采集方法。　1.斑疹、丘疹、😫疱或脓疱⚠️皮肤(黏膜)病变部位标本：一紧握采样🍷子尾部，🏄‍♀️与拭子头🦶保持一寸上距离。样时适当♻️力下压拭，在皮损面来回擦至少2-3次，然后拭子另一再重复擦2-3次。如果在擦过程中痘🍚破裂，要保采集到疱液。采后将拭子置于无菌📽️样管中(可含病毒采液或不含体)，折断拭子头，除拭子尾👨🏾‍🤝‍👨🏽，盖上管🦟，以消毒巾擦拭消🙁采样管，👨‍👨‍👧‍👦封口膜密🕶️管盖后将样管保存送检。　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样前确保实验可检测此♟️标本。使无菌镊子👨🏾‍🤝‍👨🏽其他钝头械夹取全痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮放置于干、无菌的样管中，🏍️样完成后创可贴覆患处。　👩‍🦰3.口咽拭子标本：🐅采集人员部微仰，张大，露两侧扁桃🤎，将拭子🔀过舌根，被采集者侧扁桃体微用力来擦拭至少3次，然后👍在咽后壁,,下擦拭至3次，将拭子头浸入2-3mL病毒保存的管中或于不含液(干拭子)的无菌管-，尾部弃，旋紧管。　　4.血液标本尽量采集🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿性期(发病7天内)的血液标本建议使用EDTA抗凝剂的真采血管采5mL全血，可利用血进行检，或室温置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血于无菌管进行检测😔　　5.血清标本：真空负压血管采集液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清无菌螺口料管中。一份血清尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份清应在发后第3-4周采集，集血液标5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集清于无菌口塑料管，用于猴️⃣抗体检测　　6.其他标本：据设计需规范采集　　(四)标本保存　　标本💌在收集后1小时内冷😦(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行🈲测。可在1周内检测标本可置4℃环境中保存；1周内无法检的标本，期可置于-20℃环境中保存，期应置于-70℃或以下环境中存。全血离血浆前藏(2-8℃)，分离出的血浆于-20℃或以下环🐳中保存。设立专库专柜单独存标本，免反复冻-标本。　猴痘病毒其相关标应由专人理，准确录病毒及本的来源编号、数🧹等信息，体要求可💈考《病原生物菌(毒)种保藏数据描述通》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措确保病毒标本安全严防发生用、恶意用、被盗被抢、丢🏖️、泄露等件。　　(五)标本送检。　　本采集后尽快在低条件下(冰袋或干冰)送往实验，如需长🦡运输标本应采用干,,,冷冻运输式进行保🎄。　　1.送检标本病例标本由省级及下疾控机进行初步测，各省📨例猴痘阳标本应送国疾控中病毒病所核。每个性病例至🛁采集一套本(皮肤或黏膜病变🧍位标本、咽拭子标及急性期恢复期双血清标本)送中国疾中心病毒所检测。-省级疾控🦥构根据实情况制定内样本送、复核流。　　2.病原体及本运输：　(1)国内运输。痘病毒或👨‍👧‍👦他潜在感性生物材🗽的运输包分类属于A类，对应联合国编为UN2814，包装符合国际航组织文Doc9284《危险品航空安运输技术🧝‍♂️则》的PI602分类包装要求通过其他👮‍♂️通工具运的可参照上标准包。猴痘病或其他潜😉感染性材运输应按《可感染类的高致性病原微物菌(毒)种或样本输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运证书。污水等境标本暂普通生物本运输标执行。　(2)国际运输。猴,毒株或样在国际间输的，应🎤范包装，照《出入特殊物品生检疫管-规定》办相关手续并满足相国家和国相关要求-四、猴痘毒核酸检要求及流🚣　　(一)实验室资要求。　开展猴痘毒核酸检🏕️的实验室应当符合病原微生实验室生🐷安全管理🔃例》(国务院令第424号)或《医疗机构床基因扩检验实验🧧管理办法🚗(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定，具备🟨区的市级生健康部备案的生⚖️安全二级(BSL-2)实验室及以上实验条件，并案猴痘病相关实验动。独立置的医学验实验室🧙‍♂️应符合《🔄学检验实室基本标(试行)》《医学检实验室管☪️规范(试行)》等要求。　　开猴痘病毒⏮️离、培养中和等涉病毒扩增使用等实操作的实室应具备家卫生健委批准的🧜‍♂️物安全三(BSL-3)实验室及以上实室条件，💝获得猴痘毒实验活🤑批准。分🤬的猴痘病应送国家原微生物👩‍🦯藏中心/国家病原微物资源库🏋️毒分库保。　　(二)实验室生物安全要。　　根2006年公布实施《人间传的病原微物名录》(简称《名》)，猴痘病毒生物害分类为一类，是种高致病🥪病毒。按👣《名录》求，猴痘毒的分离培养等涉病毒扩增使用的实操作需在BSL-3及以上实验🤘的生物安柜内进行🧈非灭活采液采集的🤘痘病例样的灭活在BSL-3实验室进行样本灭活猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验或PCR检测的专门域或房间行。如《录》更新🕯️开展猴痘毒操作的🦀验室生物全要求应最新《名》执行。水样本的活参照普生物样本　　(三)实验室分要求。　原则上开⤴️猴痘病毒酸检测的验室应当置以下区：试剂储和准备区标本制备、扩增和物分析区🎾三个区域物理空间应完全相独立，空应定向流。各区功分别是：🍬　1.试剂储存和准区：贮存🙉剂的制备试剂的分和扩增反混合液的备，以及🤧心管、吸等消耗品贮存和准。　　2.标本制备：转运桶启、标本活，核酸取及加入🦺扩增反应等。　　3.扩增和产物分析区🥱核酸扩增📢产物分析☄️　　根据用仪器的能，区域📻适当合并如采用标处理、核提取及扩🧑🏾‍🤝‍🧑🏽检测为一的自动化析仪，标制备区、增和产物析区可合。　　(四)主要仪器设备。　实验室应配备与开🎙️检验项目👨‍🏫适宜的仪👍设备，包：二级生👞安全柜、速台式离机、干浴温器、荧📎定量PCR仪、计时、移液器　　(五)实验室猴病毒核酸测流程。　实验室到标本后按照标准🛳️作程序进试剂准备标本前处、核酸提,,,、核酸扩、结果分及报告。验室应当立可疑标🆖和阳性标复检流程　　1.试剂与材料　　(1)标本：包病变表面子、痘疱或痘疱渗液拭子、痂或痘痂🚣‍♀️子、咽拭👨、全血或浆等标本　　(2)核酸提取剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基组DNA提取试剂盒血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒　　(3)核酸检测剂：　　👨‍🦲试剂：DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴-,病毒检测物、探针　　③阳👳‍♀️对照：涵检测靶标列的质粒　　(4)灭菌去离水、无水🖕醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用😑手部和物表面常规毒，开启有效期为1周。　　含氯消毒：现用现，含有效🕊️1000mg/L的消毒液用于🧑‍🤝‍🧑体表面常消毒，含效氯5000mg/L的消毒液👨🏽‍🤝‍👨🏼于感染性料溢洒时应急处理　　(6)耗材：包带滤芯的🧲头、螺旋的离心管非螺旋口离心管、锆珠的粉管、PCR反应板和📒明封膜或PCR反应管和透明盖　　(7)BSL-2个人防护🎴品：包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一性隔离衣防护眼罩面屏、一🧑🏻‍🤝‍🧑🏻性帽子、🗨️套、靴套☦️手套。　2.实验前的标本接。　　(1)核对被检标本编号姓名、性、年龄及测项目；　(2)待检标本的🐹态如有异🙍‍♂️，需注明🏊‍♂️　　(3)待检标本期存放在-70℃，短期存放可🏎️-20℃，避免反复🎩融。　　3.核酸检测操作步骤-注意事项⏳　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　作方法按DNA提取试剂盒相应明书进行👗作，具体🈵下：　　提取试剂👨‍👧‍👧备：第一开启试剂🥋，在使用先在漂洗🔲中加入无💾乙醇，加⛅体积参照上标签。有试剂在😪用前应平至室温；有离心步应在室温进行。　②处理样👄：　　A.痘疱液：拭子标本🚴以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。100μL样本，加80μL缓冲液，总👨‍🍳为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补总体积至180μL；　　B.病变皮疹或痂：取1块痂皮按质/体积(1mg/50μL)加入相应体积PS的PBS，研磨或匀浆处理取80μL，然后加100μL缓冲液；　C.咽拭子、其它子：从采液中取200μL标本，干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀后200μL；　　D.全血或血：直接取200μL标本。　　加入20μL蛋白酶K溶液，混，溶液会-,-清亮。若本为病变👩‍❤️‍👨疹或其它👩🏾‍🤝‍👩🏻织时，加蛋白酶K混匀后，在56℃放置，直至组织解，再进下一步骤🈸　　④加📋200μL裂解缓冲🔜，充分混⛴️，70℃放置10分钟，或至溶变清亮，🔥短离心以除管盖内🕋水珠。　需注意：入裂解缓液后可能出现白色状沉淀，70℃放置后会消失如溶液未🕧清亮，说细胞裂解彻底，可👱‍♀️导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　⑤加200μL无水乙醇，📃分混匀，🕷️时可能会现絮状沉’，简短离以去除管👪内壁水珠　　⑥将一步骤所溶液和絮,-沉淀均加💁‍♂️吸附柱中(吸附柱放废液收集中)，8000rpm离心1分钟，弃废液　　⑦加500μL漂洗缓冲1(使用前先检查是已加入无🐵乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废。　　⑧📻入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查否已加入水乙醇)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　😿⑨将吸附🪐放回废液⌛集管中，👩‍❤️‍👨大转速13000rpm离心1分钟，尽量💯除漂洗液　　⑩将附柱转入根干净的心管中(需自行准备试剂盒中👨‍👨‍👧‍👦提供)，加入50μL洗脱缓冲或灭菌去子水，室👨‍⚕️放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤液，做好记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　　(2)核酸检测：实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病🤸‍♂️核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体的准备：孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检标本外，加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；所有本，包括照，应设孔。　　👨‍❤️‍👨加样：每反应管中入核酸或✡️照各5uL，盖紧管或封好透膜，置于光定量PCR检测仪上。　　③增条件设：　　④器检测通🕥选择：使荧光定量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道-收集设在60℃。具体设置方法照各仪器用说明书　　⑤结👩‍👧分析阈值定：使用光定量PCR检测仪进行结果分🎮时，基线3-10或6-15个循环的荧🪁信号，阈设定原则🌡️阈值线刚超过正常性对照扩曲线最高⛸️，也可根,,,仪器噪音况调整阈🤢。　　(3)核酸检测结果判断👨‍👧　①Real-timePCR反应系统的🛄量控制：应结果应👭🏽时符合以2个条件，否则试验果无效，重新开展🔳测。阴性照无扩增🧔为阴性。👩🏻‍🤝‍👨🏿性对照未现阴性结-。　　②果判定：🌖　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳性🧕处于灰区标本应重检测或经🐣列分析进确诊。需意：当标仅为咽拭或血清、👨🏽‍🤝‍👨🏼浆，且检👩‍💻结果为阴时，应结临床症状慎重做出性诊断。🈚　(4)表格记录　做好荧光量实时PCR方法检测猴痘病毒酸原始记🔡。　　五✍️猴痘病毒基因组测👨‍👨‍👦‍👦　　1.测序标本选⏰原则。本疫情中的发或早期例、与早病例有流🥡病学关联🙃关键病例感染来源明的本土⬛例、境外💝入病例阳🛂标本等。上标本在酸荧光定PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。省为单位🧛‍♂️定开展猴病毒全基组测序的🕕构。建议用扩增子⤴️术进行猴病毒全基组测序。序数据经控合格后-可用于后生物信息-析。二代序平台覆深度应不于10×，三代测序🥃台覆盖深应不低于50×，全基因组测序👩🏿‍🤝‍👨🏽盖度应不👯‍♂️于98%。数据比对💘析推荐参猴痘基因😫NC_063383.1。　　各省应建立📸省输入、土病例猴🧍‍♀️病毒基因数据库，具备序列🕉️比分析能💷。具备测💂‍♂️条件的省要在接收本后48小时内开展序工作，键样本要实验室收标本后1周内提供测-,结果报告👩🏻‍🤝‍👨🏾所有测序’始数据(一般为fastq格式)、组装序(一般为fasta格式)和标本序列测定果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报🤮中国疾控🔐心病毒病进行序列总、分析🌓病毒病所👨‍👨‍👧‍👦将序列分结果及时馈各省，将全国猴🧨病毒序列🥊总、分析果及时上国家疾控⏹️。　　3.分子分型🙀推荐使用线分析工⛪Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株👝行分子分。　　附-：　　7-1猴痘病毒检测标本检表　　7-2猴痘病毒标本序测定结果☝️告单【编:孙静波】

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