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　　中新网7月27日电据国家疾控局方微信消息为进一步做猴痘防控工，及时有效对猴痘疫情提升猴痘防工作的科学、精准性和效性，切实-,护人民群众命安全和身健康，国家控局会同国🧄卫生健康委定并于7月26日印发《猴痘防控方案。其中提出2023年6月以来，我😂多个省份先🦹‍♀️报告多例猴⚖️病例，引发增本土续发情和隐匿传🚣‍♂️的风险较高要坚持“预为主、防治合、精准防、快速处置💈原则，落实🔠早发现、早告、早隔离▪️早治疗”措。　　《猴防控方案》🤾文如下：猴防控方案　猴痘是由猴👨‍👦‍👦病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致的种人兽共患+。2022年9月，我国报告首例猴痘入病例。2023年6月以来，我国多省份先后报多例猴痘病，引发新增土续发疫情隐匿传播的险较高。为导各地科学准做好猴痘控工作，切维护人民群身体健康，定本方案。、总体要求💊　坚持“预为主、防治合、精准防、快速处置原则，落实早发现、早告、早隔离早治疗”措👨‍👦。开展医疗🌍构、重点人🤹、入境人员重点场所等渠道监测。👩‍⚕️强疫情分析风险研判，📵针对性地开重点人群健👮‍♂️教育和综合预。落实病隔离治疗、行病学调查密切接触者踪管理等措。坚持发现起、控制一，及时阻断♐情传播。二疾病特征　(一)病原学特征。　　😻痘病毒属于病毒科正痘毒属，为基🙏组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中现该病毒。1970年在刚果民主共和🤠一名疑似天患者的标本首次分离到痘病毒，为例确诊的人猴痘病例。　猴痘病毒为两个进化🥂支：(1)分支I，曾称为中非分支或果盆地分支🖨️(2)分支II，曾称为西非分支，进步分为IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方性流区猴痘暴发情的毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较多分支，包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告首例输性猴痘病例来，各地报中国疾控中病毒病所的株序列均属IIb分支。　　猴痘病耐干燥和低，在痂皮、🏿壤和衣物、上用品等物😚表面可生存月。该病毒热敏感，加至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯🚺毒剂、过氧酸等常用消剂及紫外线有效灭活病🧝‍♂️，对过氧化、次氯酸钠📥戊二醛、邻二甲醛等敏。　　(二)流行病学特。　　1.传染源。猴痘毒的宿主尚😋明确，目前🎃为非洲啮齿动物(非洲松鼠、树松鼠冈比亚袋鼠睡鼠等)可能为其自然宿。传染源包👨‍🦳猴痘病例及染的啮齿类物、猴和猿灵长类动物　　2.传播途径。猴痘🌬️毒主要经黏和破损皮肤入人体，主🐌通过直接接病例的病变肤或黏膜传🥞，亦可通过🔃触被病毒污的物品、长间近距离吸🥟病例呼吸道沫传播，接感染动物的🥛吸道分泌物病变渗出物血液及其它液，或被感动物咬伤、伤感染传播🛕　　3.易感人群。人群遍易感。接过天花疫苗猴痘病毒存🤸‍♀️一定程度的🔌叉保护力。🏦　4.疫情特征。2021年以前的猴疫情主要在非和西非地呈地方性流😮，主要通过触感染动物播，所引发人传人疫情播链较短，👗要为儿童及壮年的散发例及聚集性情，通过家或旅行方式-,尔播散至其国家和地区2022年5月以来全球🌐国暴发的疫主要在男男✌️行为人群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发生性行为男性)中经性接触传播，部分病例为壮年男性，过大型聚会及后续在社的MSM扩散，并传播至球多个国家⛺地区。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出现状后至皮疹🚽痂自然脱落形成新皮肤具有传染性有调查提示🦖些病例可能出现症状前1-4天存在传染性。　　3.早期症状：可出现发热头痛、背痛肌痛和淋巴肿大等。　🥧4.皮疹和黏膜疹：通常热退后出现有些病例可☕现在全身症之前。皮疹生常经过斑、丘疹、水.、脓疱、结👩‍🦽至痂皮脱落个阶段，不形态皮疹可🐻时存在，可有明显痒感疼痛。可累口腔咽喉黏、肛门、生器、结膜和,-膜等。痂皮落后可遗留斑或色素沉甚至瘢痕，痕持续时间👇长达数年。　5.病程及严重程度。痘病程约2—4周，免疫力低下患者的程可能较长-,猴痘为自限疾病，大多病例症状会📸行消失，也重症和死亡生，主要为童、孕妇和疫力低下人🌝。　　2022年以来全球多国猴痘暴疫情中，大🈵数病例临床现较轻，部病例无全身状，皮疹仅于生殖器、门直肠黏膜⛳位，死亡病主要为未得治疗的艾滋病毒感染者免疫力低下群。2022年以来全球地方性流行病例的病死约为0.1%。三、宣传育与干预　针对重点人、出入境人和一般人群不同人群分开展宣传教，有针对性加强不同人的自我防范识和个人防措施，积极合做好防控🎃作。　　(一)重点人群。各地卫生健与疾控部门合相关社会🧄织，充分借艾滋病防治合干预经验服务模式，MSM经常出入的酒吧、所、浴池等点活动场所🦖开展同伴教🙂。借助大众🧂体、MSM社交网站等互网平台，开猴痘防控知宣传教育，高重点人群🤹‍♀️范意识，减高危行为，,,,导有可疑接🧙‍♂️史者自觉做自我健康监，增强主动诊意识。　重点人群宣干预要求详附件1《重点人群宣传干-指南》。　(二)出入境人员。通过-放宣传资料形式，加强👔入境人员猴防控知识宣教育。提醒境人员关注的地国家和区猴痘疫情息，不接触痘样症状者啮齿类、灵类等动物。醒来自猴痘情报告国家🚘地区的人员如在境外有🥿疑接触史，境后21天内应做好自我🚺康监测，避与他人发生🧑🏿‍🤝‍🧑🏾切接触，一🏀出现发热、疹、淋巴结大等猴痘样状，应主动诊并如实报流行病学史☂️　　(三)一般人群。各👩🏼‍🤝‍👨🏻充分发挥新体以及广播🎬电视、报纸传统媒体作👯，开展猴痘控知识宣传育，提高公科学防范意。四、疫情➡️测和报告　(一)监测病例定义。　1.猴痘样症状者。不明😀因急性皮疹(面部或口腔膜、四肢、殖器或会阴🩹肛周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿者。　　2.疑似病例。痘样症状者发病前21天内具备以下行病学史中任何一项：(1)有猴痘病例报告地区居史；(2)有猴痘确诊例或疑似病接触史；(3)有同性性行为，或性伴同性性行为；(4)有地方性流行区疑动物接触。　　3.确诊病例。猴样症状者、似病例及密👖接触者，经验室检测猴🌴病毒核酸阳或病毒分离-性者。　　(二)多渠道监测。　　1.医疗机构监。各级各类🌘疗机构要开猴痘样症状测，尤其是肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨检测门诊等重点关注猴样症状者。🤾‍♀️现猴痘样症🧑🏾‍🤝‍🧑🏾者，应主动问流行病学，记录患者🍟住址及联系式，采集标🧚‍♀️送疾控机构行猴痘核酸测。具备猴病毒检测能及猴痘病毒🏣验活动资质医疗机构也🤾‍♂️开展检测。　2.重点人群监测。各🍙各类医疗机、疾控机构📥对MSM等重点人群开展疗或检测咨服务时，应动询问是否⚡猴痘样症状💴其可疑接触。如发现猴样症状者和似病例，应⛹️‍♂️时采集标本行猴痘病毒🔰酸检测。　3.入境人员监测。海关到猴痘相关🎋常健康申报检疫发现有痘样症状的🧚‍♂️境人员，应时进行标本集和核酸检，并发放《诊方便卡》👩‍🔧要求其尽快👨‍🚀诊；对于核检测阳性者将相关信息报辖区疾控🧓构，由相关门进一步调处置。　　4.重点场所污水监测。有件的地区可据当地疫情势，经评估MSM经常出入的酒吧、🖊️所、浴池等💢点活动场所展污水监测　　(三)病例报告。　相关医疗机根据临床表👐、流行病学实验室检测▪️果，及时对者进行诊断-　　诊断的🎍似病例和确病例应于24小时内通过💌国疾病预防制信息系统监测报告管模块进行网直报。如为👨外输入病例填写输入来国家或地区不具备网络报条件的医⌚卫生机构，🏴󠁧󠁢󠁷󠁬󠁳󠁿在规定时限🤔将传染病报🔟卡信息报告🍶地乡镇卫生、社区卫生务中心或县💹疾控机构进网络报告，时传真或寄💠传染病报告’至代报单位负责病例网直报的医疗生机构，要据实验室检🅿️结果、流调🚄展及时对病-信息进行复、订正。　👩‍👦各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例者2例及以上存在流行病关联的确诊例，应当在2小时内通过发公共卫生件报告管理息系统报告事件级别选“未分级”五、疫情处　　(一)病例管理。　🍧各地发现猴疑似病例和诊病例应当时转运至医机构进行隔治疗，如临♨️症状明显好🚎，病变部位结痂，可转🤖居家隔离治，直至皮疹痂自然脱落解除居家隔。对病情较且具备居家离治疗条件,-确诊病例，🧏‍♂️医疗机构与控机构联合估后，可直⬅️采取居家隔治疗。对于行居家隔离🥤疗的确诊病发放《猴痘例居家隔离疗健康告知》(见附件2)。确诊病例居家隔离治期间，单人🌕间居住，避✡️与家人有皮👨‍🎤或黏膜直接🎅触，做好被染物品的消，非必要不出，确须外时穿长衣长、佩戴医用科口罩，避前往人群聚场所，避免其他人有皮或黏膜直接📗触；指定医机构安排专负责上门或🐺话随访，提健康咨询和疗指导。　(二)流行病学调查。　县(市、区)级疾控机构到辖区疑似例和确诊病报告后，及-组织开展流病学调查，找感染来源,,掌握、追踪管理密切接者，分析传链及传播特，及时发现在的风险人及其范围、🤍征，有针对地开展宣传育和综合干。调查过程🐍发挥多部门防联控的协作用，尽可👣获取全面准🎺的流调信息　　调查内主要包括病基本信息、病就诊情况🧎临床表现、’归及实验室测；发病前21天内与可疑感染来源的触史、接触所及接触方；发病后至离治疗前的体活动地点🛵与其有皮肤黏膜直接接🌇者，以及发前4天内与其有性接触者　　猴痘疫🧑‍🤝‍🧑流行病学调要求详见附3《猴痘疫情流行病学调指南》。　(三)密切接触者的判定-管理。　　1.密切接触者定义。直接触病例的病部位及其被💒染物品，或🐦染动物及其☄️泌物、渗出等污染物；🕛及职业暴露长时间近距吸入病例呼👩🏽‍🤝‍👨🏿道飞沫等，评估有感染险的人员。　2.密切接触者判定。据流行病学查及暴露风⛔评估结果，控机构负责时对密切接🐎者进行判定　　3.密切接触者管理👩🏾‍🤝‍👨🏼疾控机构或👨‍👧‍👦层医疗卫生构指导密切触者做好自📵健康监测，🛳️康监测期限最后密切接之日起21天。　　密切触者自我健监测期间可常生活与工，需避免与人发生性接等密切接触避免捐献血等；坚持每做好体温测🏰和症状监测出现猴痘样状应及时就🚌并主动报告🧴疑接触史。区疾控机构基层医疗卫机构应在密接触者自我康监测第7、14、21天上门或电话🚪其进行随访提供咨询指-，发现异常🎓况及时进行置。　　密👨‍💻接触者判定理要求详见件4《猴痘密切接触者判🗣️和管理指南。　　(四)消毒与人员护。　　做,,,病例衣物、巾、床单、具等个人用📱，以及可能病例分泌物渗出物、体等污染的环和物体表面消毒。从事️⃣例诊治护理流行病学调👩🏽‍🤝‍👨🏾、环境清洁🌽毒、标本采和实验室检等工作人员工作期间做个人防护。　消毒与人防护要求详附件5《猴痘消毒技术指⛈️》和附件6《猴痘个人防-,指南》。六实验室检测　猴痘病毒酸检测首选肤或黏膜病部位标本，🅿️同时采集口拭子标本。省首例猴痘诊病例标本送中国疾控心病毒病所行复核；本疫情中的首👋或早期确诊例、与早期例有流行病关联的关键🛣️诊病例、感来源不明的🎠土确诊病例🎳境外输入确病例阳性标🦹‍♀️等，荧光定🎮PCR检测Ct值≤32时进行病毒基测序。所有🐕‍🦺序原始数据组装序列及序样本送检🏏应在获得序48小时内报送中国疾控心病毒病所👩‍👦‍👦行汇总、分🍿。以上确诊例应至少采一套标本(包括核酸检测性者的皮肤黏膜病变标、口咽拭子本以及发病性期和恢复--双份血清)送中国疾控中🐂病毒病所。　实验室检具体要求详🥥附件7《猴痘病毒实验室测技术指南。七、院内染控制　　疗机构应当格做好院内染控制。疑病例和确诊例应安置在离病房，疑-病例单间隔🛕。医务人员行标准预防采取经接触播和经飞沫⛎播疾病的隔与预防措施佩戴一次性胶手套、KN95/N95及以上级别🥋口罩、防护🤰屏或护目镜一次性隔离等，同时做手卫生。严按照《医疗构消毒技术🌘范》对病例🦥体液、血液排泄物、分物等进行规处理，做好🖕疗环境(空气、物体表面地面等)、医疗器械、病使用物品等⤴️清洁消毒。据《医疗废-,-管理条例》医疗卫生机医疗废物管办法》做好疗废物的处🔓和管理。八工作要求　👷‍♀️(一)加强组织协调。各🏳️‍🌈卫生健康、控部门加强海关等有关门的密切协和信息共享及时发现与👨‍👨‍👦‍👦置猴痘疫情落实猴痘病发现、疫情告、诊疗隔、密切接触🏬追踪管理等作，防止疫扩散和蔓延🟣各地在猴痘👩‍🎓情防控过程应注意保护🔞例、密切接者和重点人🎵等个人隐私　　(二)加强宣传引导各地要及时布辖区猴痘情相关信息🧯做好政策解和公众健康示。通过多🕌方式和渠道展猴痘防控识宣传，加📡重点人群宣教育的针对和实效性。时回应社会切，引导公科学认识猴。　　(三)加强人员培。各地要加🏋️‍♂️对各级疾控🎭构和医疗机❌专业人员的训。对医务🔁员重点开展痘病例的识🚴与诊断、病发现与报告病例管理等🕴️关知识培训强化诊治意🈚。对疾控人重点开展流-病学调查、切接触者的👨‍🦳定和管理、验室检测、点人群宣传预等相关知培训，提高🚧痘疫情防控应急处置能。　　附件　　1.重点人群宣传干🧚‍♀️指南　　2.猴痘病例居隔离治疗健告知书　　3.猴痘疫情流行病学调查🏩南　　4.猴痘密切接触判定和管理🐊南　　5.猴痘消毒技术南　　6.猴痘个人防护南　　7.猴痘病毒实验检测技术指🚡　　附件1　　重点人群传干预指南😦　2022年5月以来，全球非地方性行区发生的痘疫情以男性行为人群(MSM)为主。为充分利我国艾滋病治综合干预🦢务体系，开🚆MSM等重点人群宣传干,-，防范猴痘情传播扩散形成常态化🥪滋病与猴痘合防控一体-应对机制，🔯定本指南。、实施策略👨‍🌾　在现有艾病防治综合预服务体系🙆础上，综合💁‍♂️用行为学干方法和手段通过宣传教、促进安全🦻行为、动员测、外展服、同伴教育互联网干预，从个体、体和社会等个层面为目人群提供猴✴️综合干预服。二、组织施　　各级疗机构和疾*️⃣机构要加强🤱点科室和艾病自愿咨询测门诊工作员猴痘知识训，对重点🐷群提供猴痘控知识宣传🥑检测咨询与员、治疗和怀等服务。🏗️级疾控机构当积极推动地有能力、🙋‍♂️有良好艾滋🚬防治经验的MSM志愿者或社会组织共👩‍👩‍👧‍👦参与猴痘防😌宣传工作，工作过程中🦽意保护重点♦️群个人隐私👨‍⚕️三、形势分　　各地要强对重点人-猴痘疫情、,,控现状、影因素及出入👩‍👩‍👧‍👦情况的调查及时分析研猴痘疫情形，为制定本🦆高危行为干工作计划提🎿依据。具体容包括：1.重点人群基、活动形式☘️特点、活动所、出入境时间及地区；2.猴痘知识、态度和危行为；3.猴痘疫情水🧙‍♂️及其影响因；4.猴痘防治政策及专🪔机构已开展工作；5.包括志愿者在🎁的有关组织个人已开展干预活动；6.影响猴痘防治工作的困👩‍🦰和问题。四😭宣传干预　(一)宣传教育。各级疾机构或健康-育专业机构供技术支持社会组织参，共同研究🚵‍♀️定适合当地点的猴痘预🧏‍♀️宣传材料，强警示宣传育。通过大媒体、MSM网站和以移🛹终端为载体交友软件等🏼台，宣传国🚄、国内及本🏛️猴痘疫情信和防控知识-提高重点人🛕猴痘防范意。　　(二)同伴教育。级疾控机构加强同伴教员挑选、招🐨和培训，组和支持同伴🏳️‍🌈传活动，增🏟️人群猴痘风防范意识，动主动检测定期组织同教育员工作会，了解猴干预工作存的困难和问🤟，有针对性给予帮助和持。　　(三)外展服务。各级疾控机干预工作人定期到重点🚀群活动场所🤜展猴痘宣传咨询、发放传材料等外服务活动，-高重点人群,痘防范意识🙏知识水平，-动重点人群🏐强自我健康理，主动寻检测咨询服。　　(四)检测咨询。️⃣级疾控机构过互联网、伴教育、外🎌活动等多种式动员有猴样症状或可🍪接触史的重,,,人群进行猴检测。各级类医疗机构肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨检测门诊发猴痘样症状🚃，应主动询其流行病学及性接触史记录患者现址及联系方，采集标本➖疾控机构进💇‍♀️猴痘核酸检，具备猴痘测能力及猴👩🏾‍🤝‍👨🏼病毒实验活资质的医疗构也可开展测。对于已立互联网+HIV检测平台的地区，可🏓加猴痘检测容，实现互-网在线检测约和结果查。五、重点◽所干预　　点活动场所,,括实体和虚两类场所，🌆体场所包括吧、会所、池等经营性所，虚拟场包括移动互网和社交媒🧿。　　(一)实体场所干。　　各级控机构负责织干预工作员在当地MSM经常出入的酒吧、会所浴池等活动所，开展猴预防干预宣🏭，主要包括　　1.在MSM经常出入的酒吧、会、浴池等实场所，张贴目的健康教宣传图片，🌓置健康教育料公告栏；　2.强化个人健康责任🚞识，开展猴健康咨询，动开展自我险评估；　3.提供转介服务信息，🚛知明确的诊👩‍🌾流程以及相😥检测、医疗构名称、联人等信息。　各地要加对猴痘确诊➕例发病前21天内活动过场所以及污监测阳性场的干预宣传重视目标人的个人隐私护，加强对会组织同伴育员猴痘防知识培训，立规范的行干预流程，高自我防护能。　　(二)虚拟场所干预。　　各疾控机构负组织指导当有序开展猴线上宣传，相关网站、交媒体平台😛时发布和更猴痘宣传教内容，形成向重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣传干预💨务体系。　各级疾控机❌支持社会组或同伴教育利用网站、箱或社交媒平台，组织展在线咨询⛹️‍♂️交流。及时👩🏽‍🤝‍👨🏼答网友提出各种猴痘相️⃣问题。针对同时期猴痘👬🏿播特点，定或不定期组专家、专业员、同伴教💊员利用互联和社交媒体👯台进行在线教。各级疾机构要定期🗝️导更新相关🏬业信息，确宣传内容科、有效。　🉐附件2　　附件3　　猴痘疫情流行病调查指南　为指导各地👨🏿‍🤝‍👨🏼控机构规范🦮展猴痘疑似例、确诊病和聚集性疫的流行病学🕵️‍♂️查，及时掌病例暴露史接触史等流病学相关信，落实密切触者的追踪定，防止疫传播扩散，定本指南。、调查目的　(一)查找感染来源，握、追踪和理密切接触。　　(二)分析传播链传播特征。　(三)及时发现潜在的险人群及其征、范围，,针对性地开❤️宣传教育和合干预。二🤸‍♀️调查对象　疑似病例、诊病例和聚性疫情。三调查方法和🦛容　　通过阅资料，询病例、诊治生、家属和情人等进行行病学调查如病例的病允许，调查👱应先调查病🙍‍♀️本人，再对诊治医生、🚄属和知情者行调查。　开展个案调时，要认真详细了解和录病例基本⚡息、发病就情况、临床现、转归及验室检测信🧤；发病前21天内与可疑染来源的接史、接触场及接触方式发病后至隔🟫治疗前的具活动地点、🕸️其有皮肤或膜直接接触，以及发病⏫4天内与其有性接触者。　(一)基本情况。如姓、性别、年🥨、住址、国、联系方式。　　(二)发病就诊情。临床表现🕶️实验室检测发病就诊经-和病情变化转归。　　(三)感染来源调查。对病发病前21天内的暴露史😡展调查，包境内外猴痘例报告地区🧛‍♂️行史或居住，对可疑的染来源要详️⃣询问接触时、方式、频、地点及接时采取的防🏣措施等，特是性接触史调查时，若✒️现调查表中🏞️列入，但具重要流行病意义的内容🏽应进行详细👩🏿‍🤝‍👩🏾问和记录。　(四)密切接触者调查-判定。对病🙇传染期的活-,-情况和人群🧛‍♂️触情况进行踪和排查后↩️判定其密切触者。密切触者判定和理按照《猴密切接触者🆘定和管理指》(附件4)执行。　　见附件3-1《猴痘病例🈵案调查表》四、组织与.施　　按照🚵‍♀️属地化管理原则，由病现住址所在🎡县(市、区)级疾控部门🎠织辖区疾控⚓构开展猴痘🌸例的流行病🦲调查，就诊-疗机构提供😿疗信息。调🧍单位应根据查计划和调*️⃣目的，确定查人员组成职责分工，时开展病例行病学个案查。调查过中发挥多部联防联控的同作用，尽🍂能获取全面确的流调信。调查期间调查人员要🦜好个人防护-,-五、信息的报与分析　疾控机构完🔯调查后，应好病例分析结，及时将↘️行病学个案查表、调查🐕告等资料逐报送上级疾机构，并做调查资料的管和存档。🧍例流调信息按有关规定🎁严格做好信🐄安全和个人私信息保护🧊　　附件：3-1.猴痘病例个案调查　　附件4　　猴痘密切🦈触者判定和’理指南　　🧔指导各地做猴痘密切接🔶者判定和管，有效控制痘疫情的传🐝，制定本指☹️。一、密切💧触者判定标　　密切接者是指直接触病例的病🎂部位及其被染物品，或染动物及其泌物、渗出等污染物的员；以及职暴露或长时近距离吸入例呼吸道飞🦘等，经评估感染风险的员。具体情包括：　　1.与疑似病例或确诊病例病后有皮肤黏膜直接接的人员，接方式包括性👱触、抚摸、抱和亲吻等📤　　2.与有皮疹症状的似病例或确病例共用衣😻、被褥、餐️⃣等物品的人👷‍♂️；　　3.医疗诊疗、采或实验室检等操作过程可能暴露于毒，经评估👬🏼感染风险的💷疗卫生工作🕝员；　　4.与疑似病例确诊病例发前4天内有性接触，并经行病学调查🖱️业人员评估🐲感染风险的员，亦可判为密切接触；　　5.在狭小密闭空👩🏿‍🤝‍👨🏼与疑似病例😄确诊病例长间近距离接(如长时间共处同一封闭间)，经流行病学调查专人员评估有染风险的人，亦可判定️⃣密切接触者　　6.接触感染猴痘病的动物及其泌物、渗出👱‍♂️等污染物，未采取有效👨🏽‍🤝‍👨🏼人防护的人；　　7.其他可能存在毒暴露风险人员。二、切接触者管　　1.管理期限与方式病例发现地😦控机构或密🌎接触者所在疾控机构应追踪到密切触者当天及开展猴痘病-核酸检测，知并指导密接触者做好👨‍👨‍👧‍👧我健康监测健康监测期为自最后密接触之日算21天。自我健康监测期👨‍👨‍👧‍👧可正常生活工作，需避与他人发生接触等密切触，避免捐血液等。　2.知情告知。实施健康♒测时，疾控构或基层医卫生机构应👩🏽‍🤝‍👩🏻头告知健康🛐测的缘由、🧷限、注意事和疾病相关识，以及负随访疾控机或基层医疗🗽生机构联系和联系方式🎎并发放《猴密切接触者康告知书》　　3.定期随访。疾控构或基层医🦉卫生机构应第7、14、21天电话或上门主动询密切接触者,我健康监测🦨况，提供咨指导建议。📦现异常情况及时调查处-。　　4.自我健康监测🍃坚持每天做🦓体温测量和状监测，主♋症状包括发(＞37.3℃)、皮疹、浅表淋巴结大等。密切触者一旦出相关症状应时前往医疗构就诊或与访联系人取🈶联系，接受痘病毒核酸🍠测。　　附：4-1.猴痘密切接触健康告知书　附件5　　猴痘消毒技指南　　为一步规范猴疫情相关的🕊️毒工作，落-科学消毒、🏤准消毒，减猴痘病毒对众健康造成🧚危害，制定指南。一、源地消毒　🗯️(一)适用范围。　　适于出现猴痘例后，对其能污染的场和物品进行-随时消毒和末消毒。　(二)消毒原则。　　1.范围和对象定。　　根流行病学调结果，确定场消毒的范💝和对象。对🔏例在住院、👩🏿‍🤝‍👩🏽运期间可能📚染的环境和品，进行随消毒。对病🌺居住或活动的场所，如住场所、工场所、学习所、诊疗场、转运工具-及其他可能🕳️到污染的场，在其离开(如住院、转院、出院、亡)进行终末消毒。　　2.方法选择。　　(1)诊疗用品消毒尽量选择一性诊疗用品非一次性诊用品应首选力蒸汽灭菌不耐热物品🕚选择化学消🥤剂或低温灭设备进行消或灭菌。　(2)手消毒。建议使用消毒剂揉搓🏭手进行消毒也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒。　　(3)环境和物体面消毒。可🧻择含氯消毒、二氧化氯过氧乙酸、氧化氢等消剂擦拭、喷或浸泡消毒　　(4)衣物、床单等织品消毒。😢选择热力消、含氯消毒或季铵盐类毒剂浸泡等毒方式。　(三)常见污染对象的消🧍‍♀️方法。　　1.手消毒。　　可选用速🌥️手消毒剂，🕵️直接选用75%乙醇进行擦拭消毒；醇过敏者，可择季铵盐类有效的非醇手消毒剂。肉眼可见污’物时，应先用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六洗手法清洗手，然后按述方法消毒’　　2.皮肤、黏膜。　皮肤被污染污染时，应即清除污染，再用一次吸水材料沾🌶️0.5%碘伏或过氧化氢毒剂擦拭消3分钟以上，使用清水清干净；粘膜,用大量生理水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。　3.床单、毛巾、衣服等-,织品。　　⬅️例使用的床、毛巾、衣,等纺织品，肉眼可见污物时，若需复使用，可流通蒸汽或💣沸消毒30分钟；或用有🌞氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消剂浸泡30分钟后，按照🌖规清洗；或-其他有效的毒方法。不🎬湿的衣物可👰用环氧乙烷干热方法进消毒处理。　有分泌物💒渗出液、排物、血液、🌿液等污染物，建议按医废物集中处😦。　　4.餐(饮)具。　　病例所使的碗、盘、、杯等餐(饮)具清除食物残渣后，煮消毒30分钟，或使用有氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再清水洗净。　5.污染物。　　对病分泌物、渗液、排泄物血液、体液少量污染物用一次性吸-材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒(或能达到高水平消毒的毒湿巾/干巾)小心移除。　　对病例泌物、渗出、排泄物、🎸液、体液等-量污染物应用含吸水成,的消毒粉或白粉完全覆，或用一次吸水材料完🧔覆盖后用足🕒的有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒浇在吸水材上，作用30分钟以上(或能达到高水消毒的消毒巾)，小心清除干净。清过程中避免触污染物，理的污染物🈴医疗废物集🤏处置。　　例的分泌物应有专门容收集，用有氯20000mg/L的含氯消毒剂，🎽物、药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污染物，应对污染环境和物体面进行消毒盛放污染物容器可用有氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟，然后清干净。　　6.地面、墙壁。　　有肉🚤可见污染物，应先完全除污染物再毒。无肉眼👨🏽‍🤝‍👨🏼见污染物时可用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂🔓拭或喷洒消🌒；不耐腐蚀地面和墙壁也可用2000mg/L的季铵盐类消🗿剂喷洒或擦；消毒作用🥈间不少于30分钟。　　7.物体表面。　　诊疗设设备表面以床围栏、床柜、家具、把手、卫生具和家居用等有肉眼可🚶‍♂️污染物时，先完全清除染物再消毒⚰️无肉眼可见,染物时，用效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯毒剂，不耐蚀的物体表也可用2000mg/L的季铵盐类消🕕剂进行喷洒☠️擦拭或浸泡📓毒，作用30分钟后清水-拭干净。　💼8.污水和粪便。　　在入市政排水,网前需进行毒处理，消后污水应当合《医疗机水污染物排标准》(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃圾。　病例生活圾按医疗废🥧处理。　　10.医疗废物。　　医疗🈺物的处置应循《医疗废管理条例》📳《医疗卫生构医疗废物🥰理办法》的求，规范使🚑双层黄色医🦦废物收集袋装后，按常流程进行处🔩。　　11.室内空气。🛍️　如经科学估，需对室空气进行消🧝‍♀️，则在无人况下，可选🧑🏿‍🤝‍🧑🏿5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化♐(浓度按产品说明书)等消毒剂，按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。🧍‍♂️可采用经验安全有效的他消毒方法二、注意事🦵　　现场消应确保所用🧑🏿‍🤝‍🧑🏼毒产品合法⛏️效，所选消方法科学可。现场消毒，根据现场况和相关标要求，选择🍯格有效的个防护装备，,做好个人防的前提下，格按照工作案实施消毒🔄　　消毒实-单位应具备👯‍♀️场消毒能力操作人员应过消毒专业训，掌握消和个人防护本知识，熟⛷️消毒器械的🔫用和消毒剂配制等。　-每次开展消工作时均应好消毒记录包括消毒对、消毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。同↕️，相关部门单位应做好👩‍🦯毒工作的监🍕管理和评价　　附件6　　猴痘个人护指南　　加强公众、🍳情处置相关作人员和医人员的个人护，避免猴-,病毒暴露感，制定本指。一、居家离治疗的病等相关人员　(一)适用范围。　　用于居家隔治疗的病例(疑似病例和诊病例)、照护人员或共🗃️居住者的个防护。　　(二)居家隔离区域要求。　1.应选择有自然通风🔯独立卫生间房间作为隔🎩区域。　　2.应配备专用的餐具，床,,、毛巾等床💮用品，消毒和口罩等个防护用品，视和平板电👁️等电子设备　　3.卫生间宜配备专的洗衣机，漏应有水封　　(三)病例管理要求　　1.应能够进行自我🏡护。　　2.应每天做好🎂温测量和症监测，避免他人共用个❕物品。　　3.避免与他人发生性接触避免与免疫🧼低下人员、-,童、老人、妇及其他人的直接接触避免与宠物动物接触，免捐献血液。　　4.外出就诊时，⏏️佩戴医用外口罩，着长🐳长裤，确保🔝住所有损伤肤，避免与人密切接触’避免乘坐公交通工具。　(四)照护人员要求。🔪　1.应每天做好体温测和症状监测🗝️　　2.应尽量避免进入🌿离区域。如👷‍♀️进入隔离区，应佩戴医🧵外科口罩和次性手套，病例保持至1米的距离。在离开隔离📘域之后，应强手卫生，对脱下的口和手套进行毒处理后废。　　3.在拿放和清洗🥪家隔离治疗例的床单、服和处理垃🥞的过程中，避免抖动。👩‍🚒湿拖布拖地🛴避免干扫。’湿抹布清洁居用品表面🤧地毯应用蒸清洗，避免用吸尘器。　4.应将居家隔离治疗例的餐具、单、毛巾和🦉物单独洗涤消毒，可选热力消毒、氯消毒剂或铵盐类消毒浸泡等消毒式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同住者出现任症状或不适⤵️现，应当及🟦前往指定医机构就诊并✏️动报告可疑触史。　　2.对其接触的物品、活动☕区域等结合🚣‍♀️险评估结果🗳️行消毒处理二、疫情处相关工作人　　(一)适用范围。　适用于猴痘🥫情期间流行学调查、环清洁消毒人的个人防护　　(二)流行病学调查员防护要求　　1.个人防护装备。💹次性乳胶手、医用外科罩、一次性🧓离衣等。　2.个人防护要求。规范-戴口罩，加🥝手卫生，与调查人员保🤾‍♀️至少1米的距离。　　3.废物管理。查结束后，弃的个人防👫🏼装备暂存、理和处置应照《医疗废🥽管理条例》行。　　4.应急处置。在调查过程🔯出现口罩脱、直接接触病例皮肤或泌物等情况要结合被调人员的临床断结果、空的密闭性、触的时间和离等进行风评估，结合险评估结果-采取相应的置措施。　(三)环境清洁消毒人员护要求。　👫🏽1.个人防护装备。一次🍇乳胶手套、用外科口罩一次性隔离🪐、防水靴套🟪。　　2.个人防护要求🍳规范佩戴口，加强手卫-，尽量减少🐒被消毒物品直接接触。　3.废物管理。清洁消结束后，废的个人防护🔪备暂存、处和处置应按🎓《医疗废物理条例》执。　　4.应急处置。如清洁消毒过中出现口罩落、皮肤损或直接接触泄物、血液情况，要结被清洁消毒品的类型、💭触的时间和间的密闭性👨‍👨‍👧进行风险评，结合风险🐁估结果，采相应的处置🧖‍♀️施。三、医人员的个人🍙护　　(一)适用范围。　适用于猴☺️疫情期间医人员及其工环境的防护　　(二)基本要求。　🏅1.个人防护装备要求。务人员执行准预防，采经接触传播经飞沫传播❄️病的隔离与防措施，佩一次性乳胶套、KN95/N95及以上级别的口、防护面屏🛷护目镜、一👩🏿‍🤝‍👩🏼性隔离衣等-　　2.环境防护要求。院环境的清消毒应符合件5的要求。应避免干除、清扫或吸等活动。首湿式清洁方🧑。　　3.废物管理。个防护装备、例敷料等暂🚗、处理和处应按照《医废物管理条》执行。　附件7　　猴痘病毒实验检测技术指　　为指导💧级疾控部门👳其他相关机规范开展猴🧚病毒实验室👩‍👩‍👧‍👦测工作，快、准确识别🚯痘确诊病例制定本指南本指南主要绍标本采集🟥及猴痘病毒🎛️酸荧光定量PCR检测方法、生物安全求等内容。、检测对象👒　(一)猴痘确诊病例和🔇似病例；　-(二)密切接触者；　　(三)感染或疑似感染猴痘🌚毒的动物；👁️　(四)环境或其它生物料。二、技人员基本要🚭　　(一)采样人员。从猴痘病毒核检测标本采的技术人员当经过生物全培训，培🗑️合格后方可🦲事采样工作采样人员应悉采集标本类和采集方，熟练掌握本采集操作程及注意事，做好标本息记录，确-标本质量符要求、标本相关信息可溯。　　1.采样人员个防护装备要：KN95/N95及以上级别的口罩防护面屏或目镜、一次隔离衣、一-性乳胶手套(尽可能戴两🎨)、靴套；如果接触了病血液、体液分泌物或排物，应及时换手套。污🗡️采样人员可⛓️据实际工作要，适当降防护级别。　2.住院病例的标本由🥯在医院医护员采集，根🧖实验室检测’作的需要，结合病程多👨🏿‍🤝‍👨🏼采样。　　3.密切接触者标本由当地控机构或医机构专业人采集。　　4.感染或疑似感染猴痘病📨的动物由当疾控机构协动物疫控部专业采样人📡负责采集。　5.环境或其它生物材标本由相关业采样人员👩‍👧责采集。　(二)检测人员。实验室测技术人员具备相关专大专以上学或具有中级以上专业技🐈资格，并有2年以上实验-,工作经历，😌受过核酸检相关培训，🤾训合格后方从事检测工。实验室配--的工作人员量应与所开🏰检测项目及本量相适宜确保能够及🦷、熟练、准地开展实验检测和报告🤚果。三、标采集、保存运输　　(一)标本采集种类。　　1.首选标本是肤(黏膜)病变部位标本包括病变表拭子、痘疱或痘疱渗出拭子、痘痂痘痂拭子等🍇　　2.呼吸道标本，如咽拭子，可于病例急性检测，也是切接触者检🍉最常用标本　　3.发病急性期可采📓EDTA抗凝血标本进行👯‍♀️酸检测。　⚕️4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检。　　5.直肠拭子、尿🌤️、精液、唾等其它标本👩‍🎓用于研究，据工作需要集。　　6.污水或其它境生物材料🛃本根据实际📄作需要进行集。　　(二)标本采集要求。　　采皮肤(黏膜)病变部位标时应使用无聚酯纤维、龙或类似材拭子，避免用棉拭子。’集疑似病例标本前应避📢使用75%乙醇等消毒剂👩‍💻洁病变部位每种类型的肤(黏膜)病变应尽可能🧄集两个以上🚽子，每个病👩‍👧‍👧应同时采集体不同部位外观不同的2-3种病变标本。采集皮(黏膜)病变部位标本时适当用力。肤(黏膜)病变部位、痘🧑🏼‍🤝‍🧑🏼或分泌物等同拭子标本放置于不同采样管中。行病毒分离应采集干拭标本(无采样液)或以非灭活型病毒采🔉液保存。根实验室活动质确定使用灭活型或灭型采样液采标本。　　(三)标本采集方法。　　1.斑疹、丘疹、水疱或脓🐝等皮肤(黏膜)病变部位标本：一手紧采样拭子尾🧑🏽‍🤝‍🧑🏼，手与拭子部保持一寸上距离。采时适当用力压拭子，在损表面来回拭至少2-3次，然后以子另一面再复擦拭2-3次。如果在拭过程中痘🤩破裂，要确采集到痘疱。采样后将子放置于无采样管中(可含病毒采样🕵️‍♀️或不含液体)，折断拭子，去除拭子部，盖上管🧘‍♀️，以消毒纸擦拭消毒采管，以封口密封管盖后采样管保存🧲送检。　　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样应确保实验可检测此类本。使用无镊子或其他头器械夹取部痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮，放置干燥、无菌采样管中，样完成后以可贴覆盖患。　　3.口咽拭子标本🖌️被采集人员🥋部微仰，嘴大，露出两扁桃体，将子越过舌根在被采集者↔️侧扁桃体稍用力来回擦至少3次，然后再在咽后上下擦拭至3次，将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中🧎‍♂️置于不含液(干拭子)的无菌管中，部弃去，旋👧管盖。　　4.血液标本：尽量采集急🌨️期(发病7天内)的血液标本，建议使📶含EDTA抗凝剂的真空血管采集5mL全血，可利用全血进行测，或室温置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血☮️于无菌管中👱‍♂️行检测。　5.血清标本：用真空负采血管采集液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于无螺口塑料管。第一份血-应尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份血清应发病后第3-4周采集，采集血液标本5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清无菌螺口塑管中，用于↪️痘抗体检测🖥️　　6.其他标本：依据计需求规范集。　　(四)标本保存。　　标本应收集后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行检测🧙‍♀️可在1周内检测的标本可于4℃环境中保存；1周内无法检测的本，短期可于-20℃环境中保存，☝️期应置于-70℃或以下环境中保存。🧞‍♀️血分离血浆冷藏(2-8℃)，分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存应设立专库🍡专柜单独保’标本，避免复冻融标本　　猴痘病及其相关标🎏应由专人管，准确记录🌌毒及标本的源、编号、-量等信息，体要求可参《病原微生菌(毒)种保藏数据描述🕕则》(T/CPMA011-2020)。应采取有措施确保病及标本安全🥽严防发生误、恶意使用被盗、被抢丢失、泄露事件。　　(五)标本送检。　　标本🖐️集后应尽快低温条件下(冰袋或干冰)送往实验室🖊️如需长途运标本，应采干冰冷冻运方式进行保。　　1.送检标本：病⏸️标本先由省及以下疾控构进行初步测，各省首猴痘阳性标应送中国疾中心病毒病复核。每个性病例至少集一套标本(皮肤或黏膜变部位标本口咽拭子标#️⃣及急性期、复期双份血标本)送中国疾控中心病-病所检测。省级疾控机👣根据实际情制定省内样送检、复核程。　　2.病原体及标运输：　　(1)国内运输。猴痘病毒其他潜在感性生物材料运输包装分属于A类，对应的联合国号为UN2814，包装符合国际民航织文件Doc9284《危险品航空安运输技术细》的PI602分类包装要求，通过其交通工具运的可参照以标准包装。痘病毒或其潜在感染性料运输应按《可感染人的高致病性🚼原微生物菌(毒)种或样本运输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运书》。污水环境标本暂普通生物样运输标准执。　　(2)国际运输。痘毒株或样🍔在国际间运的，应规范装，按照《-入境特殊物卫生检疫管规定》办理关手续，并足相关国家国际相关要。四、猴痘🥴毒核酸检测求及流程　🎦(一)实验室资质要求。👨🏽‍🤝‍👨🏼　开展猴痘毒核酸检测🧦实验室，应🍕符合《病原生物实验室物安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因-增检验实验管理办法》(卫办医政发👳‍♀️2010〕194号)有关规定，具备区的市级卫🔒健康部门备的生物安全👞级(BSL-2)实验室及以上实验室🐲件，并备案痘病毒相关验活动。独设置的医学验实验室还符合《医学验实验室基标准(试行)》《医学检🎹实验室管理范(试行)》等要求。　开展猴痘病🕥分离、培养中和等涉及毒扩增、使等实验操作🧖实验室应具国家卫生健委批准的生安全三级(BSL-3)实验室及以上🏏验室条件，Ⓜ️获得猴痘病实验活动批😡。分离的猴🍪病毒应送国,-病原微生物藏中心/国家病原微生物源库病毒分保藏。　　(二)实验室生物安全要求　　根据2006年公布实施的《人间染的病原微👩🏻‍🤝‍👨🏾物名录》(简称《名录》)，猴痘病毒👶物危害分类第一类，是🍒种高致病性☸️毒。按照《录》要求，痘病毒的分、培养等涉-病毒扩增及用的实验操需在BSL-3及以上实验室的生物安柜内进行；灭活采样液🏢集的猴痘病样本的灭活BSL-3实验室进行；-,本灭活后猴病毒DNA提取、检测可BSL-2及以上实验室👩‍🌾PCR检测的专门区域或💷间进行。如📡名录》更新⚔️开展猴痘病操作的实验👩‍❤️‍👩生物安全要🤾‍♀️应按最新《录》执行。🌳水样本的灭参照普通生🍃样本。　　(三)实验室分区要求。　原则上开展痘病毒核酸👨‍💼测的实验室🧹当设置以下域：试剂储和准备区、本制备区、🈵增和产物分区。三个区在物理空间应完全相互🚽立，空气应🌗向流通。各功能分别是🛶　　1.试剂储存和准备：贮存试剂制备、试剂分装和扩增应混合液的备，以及离管、吸头等耗品的贮存🦦准备。　　2.标本制备区：转运桶开🏌️、标本灭活🛬核酸提取及🦐入至扩增反管等。　　3.扩增和产物分析区：核🚌扩增和产物-析。　　根使用仪器的能，区域可当合并。如用标本处理核酸提取及⤵️增检测为一的自动化分仪，标本制区、扩增和🚣物分析区可并。　　(四)主要仪器设备。　　实室应当配备👨🏿‍🤝‍👨🏽开展检验项相适宜的仪设备，包括二级生物安柜、高速台离心机、干恒温器、荧定量PCR仪、计时器、🦟液器。　　(五)实验室猴痘病毒核酸测流程。　实验室接到本后，按照🚏准操作程序行试剂准备♋标本前处理核酸提取、🔕酸扩增、结🎖️分析及报告实验室应当立可疑标本阳性标本复流程。　　1.试剂与材料。　　(1)标本：包括变表面拭子痘疱液或痘渗出液拭子痘痂或痘痂✴️子、咽拭子全血或血浆标本。　　(2)核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。　　(3)核酸检测试剂：　　🚋试剂：DNA聚合酶或预🙉的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴痘病检测引物、️⃣针：　　③性对照：涵🎽检测靶标序的质粒。　(4)灭菌去离子水、无乙醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用于手部物体表面常消毒，开启有效期为1周。　　②含♟️消毒液：现🎻现配，含有氯1000mg/L的消毒液用于物体面常规消毒含有效氯5000mg/L的消毒液用🥴感染性材料👺洒时的应急理。　　(6)耗材：包括带滤芯的吸、螺旋口的心管、非螺🔑口的离心管含锆珠的粉管、PCR反应板和透明膜或PCR反应管和透明。　　(7)BSL-2个人防护用品-包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一次隔离衣、防🛥️眼罩或面屏🍺一次性帽子鞋套、靴套--手套。　　2.实验前的标本接收。　(1)核对被检标本编号💧姓名、性别年龄及检测目；　　(2)待检标本的状态如有异🧶，需注明；　(3)待检标本长期存在-70℃，短期存放可🪓-20℃，避免反复冻融🌃　　3.核酸检测操作步及注意事项　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　操作方法DNA提取试剂盒相应说书进行操作具体如下：　①提取试准备：第一开启试剂盒🧛‍♀️在使用前先🌉漂洗液中加无水乙醇，🍝入体积参照上标签。所试剂在使用🚦应平衡至室；所有离心🧍‍♂️骤应在室温👆进行。　　🏵️处理样本：　A.痘疱液：干拭子标需以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本，加入80μL缓冲液，总量为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补足体积至180μL；　　B.病变皮疹或痘痂：取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体含PS的PBS，研磨或匀浆处理，取80μL，然后加入100μL缓冲液；　　C.咽拭子、其它拭子从采样液中200μL标本，干拭子🛃本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀取200μL；　　D.全血或血清：接取200μL标本。　　③加入20μL蛋白酶K溶液，混匀，液会变清亮🛅若样本为病皮疹或其它织时，加入白酶K混匀后，在56℃放置，直至组🐿️溶解，再进下一步骤。　④加入200μL裂解缓冲液，充分匀，70℃放置10分钟，或至溶液变🔷亮，简短离以去除管盖🌎壁水珠。　需注意：加裂解缓冲液可能会出现🌻色絮状沉淀🍊在70℃放置后会消失。溶液未变清😑，说明细胞解不彻底，能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　加200μL无水乙醇，分混匀，此Ⓜ️可能会出现🚋状沉淀，简离心以去除盖内壁水珠🙈　　⑥将上步骤所得溶😚和絮状沉淀加至吸附柱💹(吸附柱放入废液收集管)，8000rpm离心1分钟，弃废。　　⑦加🔂500μL漂洗缓冲液1(使用前先检是否已加入⌛水乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　🐀⑧加入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是否加入无水乙-)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　　⑨将附柱放回废收集管中，大转速13000rpm离心1分钟，尽量去除漂洗。　　⑩将附柱转入一干净的离心👌中(需自行准备，试剂盒未提供)，加入50μL洗脱缓冲液或🌎菌去离子水🐤室温放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤出液，好标记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　(2)核酸检测：实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴病毒核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体系的备：每孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检测标本外应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；👨‍⚖️有样本，包对照，应设孔。　　②样：每根反📟管中加入核或对照各5uL，盖紧管盖或封好透明，置于荧光量PCR检测仪上。　　扩增条件设：　　④仪检测通道选🗽：使用荧光量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道，收🙍设在60℃。具体设置方参照各仪器🧜‍♀️用说明书。👫🏻　⑤结果分阈值设定：用荧光定量PCR检测仪进行结果分析，基线取3-10或6-15个循环的荧光信号，阈🕐设定原则为♊值线刚好超正常阴性对扩增曲线最点，也可根🧟‍♀️仪器噪音情🗺️调整阈值。　(3)核酸检测结果判　　①Real-timePCR反应系统的质量控：反应结果同时符合以2个条件，否则试验结果🤢效，应重新展检测。阴对照无扩增👨‍💻为阴性。阳对照未出现性结果。　②结果判定　　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一孔Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳和处于灰区标本应重复测或经序列析进行确诊👮需注意：当本仅为咽拭🧛‍♂️或血清、血，且检测结🅾️为阴性时，结合临床症🍙，慎重做出性诊断。　😗(4)表格记录　　做好光定量实时PCR方法检测猴痘病毒核💰原始记录。　五、猴痘☂️毒全基因组序　　1.测序标本选取则。本土疫🗣️中的首发或期病例、与期病例有流病学关联的键病例、感来源不明的土病例、境输入病例阳标本等。以标本在核酸🤼光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。以省为单确定开展猴病毒全基因测序的机构建议使用扩子技术进行痘病毒全基组测序。测数据经质控👩‍❤️‍💋‍👨格后方可用后续生物信🐪分析。二代序平台覆盖度应不低于10×，三代测序平台覆盖度应不低于50×，全基因组测序覆盖应不低于98%。数据比对分析推荐参猴痘基因组NC_063383.1。　　各省应建-,本省输入、土病例猴痘毒基因组数👩‍🦳库，应具备’列对比分析📢力。具备测🏳️‍🌈条件的省份在接收标本48小时内开展测序工作关键样本要实验室收到本后1周内提供测序结果🟦告，所有测原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结🧑🏾‍🤝‍🧑🏼报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中病毒病所进⚪序列汇总、析。病毒病应将序列分🌔结果及时反各省，并将国猴痘病毒’列汇总、分⛴️结果及时上👩‍❤️‍💋‍👩国家疾控局♣️　　3.分子分型。推荐用在线分析📔具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行子分型。　附件：　　7-1猴痘病毒检测标本送表　　7-2猴痘病毒标序列测定结🚢报告单【编:孙静波】

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