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　　中新网7月27日电据国家疾控局官方信消息，为进一步做猴痘防控工作，及时💙效应对猴痘疫情，提猴痘防控工作的科学、精准性和有效性，实维护人民群众生命全和身体健康，国家控局会同国家卫生健委制定并于7月26日印发《猴痘防控方案🌏。其中提出，2023年6月以来，我国多个省份先后报告多例猴病例，引发新增本土发疫情和隐匿传播的险较高。要坚持“预为主、防治结合、精防控、快速处置”原，落实“早发现、早🌙告、早隔离、早治疗🥙措施。　　《猴痘防方案》全文如下：猴防控方案　　猴痘是猴痘病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致的一种人兽患病。2022年9月，我国报告首例猴痘入病例。2023年6月以来，我国多个省先后报告多例猴痘病✍️，引发新增本土续发情和隐匿传播的风险高。为指导各地科学准做好猴痘防控工作🌠切实维护人民群众身健康，制定本方案。🩲、总体要求　　坚持预防为主、防治结合精准防控、快速处置原则，落实“早发现早报告、早隔离、早疗”措施。开展医疗构、重点人群、入境员和重点场所等多渠监测。加强疫情分析👗风险研判，有针对性开展重点人群健康教🥜和综合干预。落实病🚱隔离治疗、流行病学查和密切接触者追踪🏻理等措施。坚持发现起、控制一起，及时断疫情传播。二、疾特征　　(一)病原学特征。　　猴痘病毒🆙于痘病毒科正痘病毒👨‍🦰，为基因组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发现该病毒。1970年在刚果民主共和国一名疑似天花患的标本中首次分离到痘病毒，为首例确诊人类猴痘病例。　　痘病毒分为两个进化🉐支：(1)分支I，曾称为中非分支或刚果地分支；(2)分支II，曾称为西非分支，进一步分为IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方性流行区猴痘暴发疫情👯毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较多亚分支，包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告首例输入性痘病例以来，各地报中国疾控中心病毒病的毒株序列均属于IIb分支。　　猴痘病毒耐干燥和低温，在痂、土壤和衣物、床上品等物体表面可生存月。该病毒对热敏感🗣️加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂、过氧乙酸🗽常用消毒剂及紫外线🔔有效灭活病毒，对过化氢、次氯酸钠、戊醛、邻苯二甲醛等敏↘️。　　(二)流行病学特征。　　1.传染源。猴痘病毒的宿主尚明确，目前认为非洲齿类动物(非洲松鼠、树松鼠、冈比亚袋鼠-睡鼠等)可能为其自然宿主。传染源包括猴病例及感染的啮齿类物、猴和猿等灵长类物。　　2.传播途径。猴痘病毒主要经黏🥍和破损皮肤侵入人体主要通过直接接触病,-的病变皮肤或黏膜传，亦可通过接触被病污染的物品、长时间🖲️距离吸入病例呼吸道沫传播，接触感染动的呼吸道分泌物、病🌛渗出物、血液及其它-液，或被感染动物咬、抓伤感染传播。　3.易感人群。人群普遍易感。接种过天花🛅苗对猴痘病毒存在一程度的交叉保护力。　4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫情主要在中非和西非地😄呈地方性流行，主要过接触感染动物传播所引发的人传人疫情🎇播链较短，主要为儿及青壮年的散发病例聚集性疫情，通过家🈂️或旅行方式偶尔播散其他国家和地区。2022年5月以来全球多国暴发的疫情主要在男性行为人群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发生性行为的男性)中经性接触传播，大部分病为青壮年男性，通过型聚会以及后续在社的MSM扩散，并传播至全球多个国家和地🔓。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出现症状后至🐣疹结痂自然脱落并形🥅新皮肤前具有传染性有调查提示一些病例能在出现症状前1-4天存在传染性。　　3.早期症状：可出现发热、头痛、背痛、肌和淋巴结肿大等。　4.皮疹和黏膜疹：通常在热退后出现，有病例可出现在全身症之前。皮疹发生常经斑疹、丘疹、水疱、疱、结痂至痂皮脱落🧑🏽‍🤝‍🧑🏽个阶段，不同形态皮🐴可同时存在，可伴有显痒感和疼痛。可累口腔咽喉黏膜、肛门生殖器、结膜和角膜🥉。痂皮脱落后可遗留斑或色素沉着甚至瘢，瘢痕持续时间可长数年。　　5.病程及严重程度。猴痘病程2—4周，免疫力低下患者的病程可能较长👰猴痘为自限性疾病，多数病例症状会自行🚥失，也有重症和死亡生，主要为儿童、孕🎥和免疫力低下人群。　2022年以来全球多国猴痘暴发疫情中大多数病例临床表现轻，部分病例无全身状，皮疹仅限于生殖、肛门直肠黏膜部位死亡病例主要为未得治疗的艾滋病病毒感者等免疫力低下人群💂2022年以来全球非地方性流行区病例的死率约为0.1%。三、宣传教育与干预　针对重点人群、出入人员和一般人群等不人群分类开展宣传教，有针对性地加强不人群的自我防范意识个人防护措施，积极合做好防控工作。　(一)重点人群。各地卫生健康与疾控部门合相关社会组织，充借鉴艾滋病防治综合预经验和服务模式，🐧MSM经常出入的酒吧、会所、浴池等重点动场所，开展同伴教☄️。借助大众媒体、MSM社交网站等互联网平台，开展猴痘防控知宣传教育，提高重点群防范意识，减少高行为，引导有可疑接🦴史者自觉做好自我健🚡监测，增强主动就诊识。　　重点人群宣干预要求详见附件1《重点人群宣传干预指》。　　(二)出入境人员。通过发放宣传料等形式，加强出入人员猴痘防控知识宣教育。提醒出境人员注目的地国家和地区痘疫情信息，不接触🏛️痘样症状者及啮齿类灵长类等动物。提醒自猴痘疫情报告国家🚔地区的人员，如在境有可疑接触史，入境21天内应做好自我健康监测，避免与他人生密切接触，一旦出发热、皮疹、淋巴结大等猴痘样症状，应🌑动就诊并如实报告流病学史。　　(三)一般人群。各地充分发新媒体以及广播、电、报纸等传统媒体作，开展猴痘防控知识传教育，提高公众科⬆️防范意识。四、疫情测和报告　　(一)监测病例定义。　　1.猴痘样症状者。不明📵因急性皮疹(面部或口腔黏膜、四肢、生殖或会阴、肛周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿大者。　　2.疑似病例。猴痘样症状者，发病前21天内具备以下流行病学史中的任何一项：(1)有猴痘病例报告地区旅居史；(2)有猴痘确诊病例或疑似病🍑接触史；(3)有同性性行为，或性伴有同📧性行为史；(4)有地方性流行区可疑动物触史。　　3.确诊病例。猴痘样症状者、🎟️似病例及密切接触者经实验室检测猴痘病核酸阳性或病毒分离性者。　　(二)多渠道监测。　　1.医疗机构监测。各级各类🔧疗机构要开展猴痘样👷状监测，尤其是皮肤(性病)科、肛肠科、艾滋病自愿咨询检测门等要重点关注猴痘样-状者。发现猴痘样症💻者，应主动询问流行🧝‍♂️学史，记录患者现住及联系方式，采集标送疾控机构进行猴痘酸检测。具备猴痘病🚒检测能力及猴痘病毒🦸‍♀️验活动资质的医疗机也可开展检测。　　2.重点人群监测。各级各类医疗机构、疾控构在对MSM等重点人群开展诊疗或检测咨🚤服务时，应主动询问否有猴痘样症状及其🧖‍♂️疑接触史。如发现猴样症状者和疑似病例🏭应及时采集标本进行痘病毒核酸检测。　3.入境人员监测。海关收到猴痘相关异常🛋️康申报或检疫发现有👭🏻痘样症状的入境人员😸应及时进行标本采集核酸检测，并发放《诊方便卡》，要求其快就诊；对于核酸检阳性者，将相关信息报辖区疾控机构，由⛴️关部门进一步调查处。　　4.重点场所污水监测。有条件的地可根据当地疫情形势经评估对MSM经常出入的酒吧、会所、浴等重点活动场所开展😐水监测。　　(三)病例报告。　　相关医机构根据临床表现、行病学和实验室检测果，及时对患者进行断。　　诊断的疑似👾例和确诊病例应于24小时内通过中国疾病防控制信息系统的监报告管理模块进行网直报。如为境外输入👩‍🍳例需填写输入来源国🌭或地区。不具备网络报条件的医疗卫生机🕔，需在规定时限内将🧑🏿‍🤝‍🧑🏽染病报告卡信息报告地乡镇卫生院、社区生服务中心或县级疾机构进行网络报告，时传真或寄送传染病告卡至代报单位。负🎭病例网络直报的医疗生机构，要根据实验检测结果、流调进展🍭时对病例信息进行复、订正。　　各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例或者2例及以上存在流行病学关联的🌦️诊病例，应当在2小时内通过突发公共卫生,,,件报告管理信息系统告，事件级别选择“分级”。五、疫情处　　(一)病例管理。　　各地发现猴痘疑病例和确诊病例应当↖️时转运至医疗机构进隔离治疗，如临床症明显好转，病变部位结痂，可转为居家隔治疗，直至皮疹结痂-然脱落，解除居家隔。对病情较轻且具备家隔离治疗条件的确病例，经医疗机构与控机构联合评估后，直接采取居家隔离治。对于实行居家隔离疗的确诊病例发放《痘病例居家隔离治疗康告知书》(见附件2)。确诊病例居家隔离治疗期间，单人单间住，避免与家人有皮🐐或黏膜直接接触，做被污染物品的消毒，,,,必要不外出，确须外时穿长衣长裤、佩戴用外科口罩，避免前🧰人群聚集场所，避免其他人有皮肤或黏膜🦿接接触；指定医疗机安排专人负责上门或话随访，提供健康咨和医疗指导。　　(二)流行病学调查。　　县(市、区)级疾控机构接到辖区疑似病例确诊病例报告后，及组织开展流行病学调🍔，查找感染来源，掌、追踪和管理密切接者，分析传播链及传👨🏾‍🤝‍👨🏽特征，及时发现潜在👩‍🍳风险人群及其范围、征，有针对性地开展传教育和综合干预。查过程中发挥多部门防联控的协同作用，可能获取全面准确的调信息。　　调查内💆‍♂️主要包括病例基本信🍥、发病就诊情况、临表现、转归及实验室测；发病前21天内与可疑感染来源的接触、接触场所及接触方；发病后至隔离治疗📍的具体活动地点、与有皮肤或黏膜直接接者，以及发病前4天内与其有性接触者。　‼️猴痘疫情流行病学调要求详见附件3《猴痘疫情流行病学调查指》。　　(三)密切接触者的判定和管理。　1.密切接触者定义。直接接触病例的病部位及其被污染物品或感染动物及其分泌、渗出物等污染物；📠及职业暴露或长时间距离吸入病例呼吸道🏧沫等，经评估有感染险的人员。　　2.密切接触者判定。根据行病学调查及暴露风评估结果，疾控机构🐢责及时对密切接触者行判定。　　3.密切接触者管理。疾控机或基层医疗卫生机构导密切接触者做好自健康监测，健康监测限为最后密切接触之😐起21天。　　密切接触者自我健康监测期🦑可正常生活与工作，避免与他人发生性接等密切接触，避免捐👁️‍🗨️血液等；坚持每天做体温测量和症状监测出现猴痘样症状应及☮️就诊并主动报告可疑触史。辖区疾控机构基层医疗卫生机构应密切接触者自我健康测第7、14、21天上门或电话对其进行💂‍♂️访，提供咨询指导，🏄现异常情况及时进行👔置。　　密切接触者定管理要求详见附件4《猴痘密切接触者判和管理指南》。　　(四)消毒与人员防护。　　做好病例衣物、巾、床单、餐具等个☹️用品，以及可能被病分泌物、渗出物、体等污染的环境和物体面的消毒。从事病例治护理、流行病学调、环境清洁消毒、标采集和实验室检测等作人员在工作期间做个人防护。　　消毒人员防护要求详见附5《猴痘消毒技术指南》和附件6《猴痘个人防护指南》。六、实📧室检测　　猴痘病毒酸检测首选皮肤或黏病变部位标本，可同采集口咽拭子标本。省首例猴痘确诊病例本应送中国疾控中心🍰毒病所进行复核；本疫情中的首发或早期诊病例、与早期病例流行病学关联的关键诊病例、感染来源不的本土确诊病例、境输入确诊病例阳性标等，荧光定量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因测序。所有🔪序原始数据、组装序⭐及测序样本送检单应获得序列48小时内报送中国疾控中心病毒所进行汇总、分析。上确诊病例应至少采👑一套标本(包括核酸检测阳性者的皮肤或黏病变标本、口咽拭子本以及发病急性期和复期双份血清)送中国疾控中心病毒病所。　实验室检测具体要详见附件7《猴痘病毒实验室检测技术指南。七、院内感染控制　医疗机构应当严格👩🏿‍🤝‍👩🏽好院内感染控制。疑病例和确诊病例应安🏑在隔离病房，疑似病🥫单间隔离。医务人员行标准预防，采取经☯️触传播和经飞沫传播病的隔离与预防措施佩戴一次性乳胶手套KN95/N95及以上级别的口罩、防护屏或护目镜、一次性离衣等，同时做好手⛔生。严格按照《医疗构消毒技术规范》对🍱例的体液、血液、排物、分泌物等进行规🤹处理，做好诊疗环境(空气、物体表面、地等)、医疗器械、病例使用物品等的清洁消。根据《医疗废物管条例》《医疗卫生机医疗废物管理办法》🍕好医疗废物的处置和理。八、工作要求　🐤(一)加强组织协调。各地卫生健康、疾控门加强与海关等有关门的密切协作和信息享，及时发现与处置👩🏼‍🤝‍👨🏽痘疫情，落实猴痘病发现、疫情报告、诊隔离、密切接触者追管理等工作，防止疫扩散和蔓延。各地在痘疫情防控过程中应⛸️意保护病例、密切接者和重点人群等个人私。　　(二)加强宣传引导。各地要及时布辖区猴痘疫情相关息，做好政策解读和众健康提示。通过多方式和渠道开展猴痘控知识宣传，加强重人群宣传教育的针对和实效性。及时回应🍉会关切，引导公众科🚴‍♂️认识猴痘。　　(三)加强人员培训。各地加强对各级疾控机构医疗机构专业人员的🔬训。对医务人员重点展猴痘病例的识别与断、病例发现与报告💇‍♂️病例管理等相关知识训，强化诊治意识。疾控人员重点开展流🖨️病学调查、密切接触的判定和管理、实验🌁检测、重点人群宣传预等相关知识培训，高猴痘疫情防控和应处置能力。　　附件🐭　　1.重点人群宣传干预指南　　2.猴痘病例居家隔离治疗健告知书　　3.猴痘疫情流行病学调查指南☯️　4.猴痘密切接触者判定和管理指南　　5.猴痘消毒技术指南　　6.猴痘个人防护指南　　7.猴痘病毒实验室检测技术指南　附件1　　重点人群宣传干预指南　　2022年5月以来，全球非地方性流行区发生的痘疫情以男男性行为👩🏻‍🤝‍👨🏾群(MSM)为主。为充分利用我国艾滋病治综合干预服务体系开展MSM等重点人群宣传干预，防范猴痘情传播扩散，形成常化艾滋病与猴痘综合🦴控一体化应对机制，🍸定本指南。一、实施👲略　　在现有艾滋病👝治综合干预服务体系础上，综合运用行为干预方法和手段，通宣传教育、促进安全行为、动员检测、外服务、同伴教育和互网干预等，从个体、体和社会等多个层面目标人群提供猴痘综干预服务。二、组织🔒施　　各级医疗机构🕺疾控机构要加强重点👨‍👩‍👦‍👦室和艾滋病自愿咨询测门诊工作人员猴痘🎈识培训，对重点人群供猴痘防控知识宣传检测咨询与动员、治和关怀等服务。各级控机构应当积极推动🚔地有能力、具有良好滋病防治经验的MSM志愿者或社会组织共👨‍👦参与猴痘防治宣传工，在工作过程中注意护重点人群个人隐私🎙️三、形势分析　　各要加强对重点人群猴😐疫情、防控现状、影因素及出入境情况的查，及时分析研判猴-疫情形势，为制定本高危行为干预工作计提供依据。具体内容,,,括：1.重点人群基数、活动形式和特点、动场所、出入境的时及地区等；2.猴痘知识、态度和高危行为3.猴痘疫情水平及其影响因素；4.猴痘防治政策及专业机构已展的工作；5.包括志愿者在内的有关组织个人已开展的干预活；6.影响猴痘防治工作的困难和问题。四宣传干预　　(一)宣传教育。各级疾控机或健康教育专业机构供技术支持，社会组🛢️参与，共同研究制定合当地特点的猴痘预🚞宣传材料，加强警示传教育。通过大众媒🪁、MSM网站和以移动终端为载体的交友软等平台，宣传国际、内及本地猴痘疫情信和防控知识，提高重-人群猴痘防范意识。　(二)同伴教育。各级疾控机构要加强同教育员挑选、招募和训，组织和支持同伴传活动，增强人群猴风险防范意识，推动动检测。定期组织同🔄教育员工作例会，了猴痘干预工作存在的🔷难和问题，有针对性给予帮助和支持。　(三)外展服务。各级疾控机构干预工作人定期到重点人群活动所开展猴痘宣传、咨、发放宣传材料等外🦛服务活动，提高重点群猴痘防范意识和知水平，推动重点人群强自我健康管理，主寻求检测咨询服务。　(四)检测咨询。各级疾控机构通过互联、同伴教育、外展活🦦等多种形式动员有猴样症状或可疑接触史重点人群进行猴痘检🛅。各级各类医疗机构肤(性病)科、肛肠科、艾滋病自愿咨询检门诊发现猴痘样症状，应主动询问其流行学史及性接触史，记患者现住址及联系方，采集标本送疾控机进行猴痘核酸检测，备猴痘检测能力及猴💉病毒实验活动资质的⛓️疗机构也可开展检测对于已建立互联网+HIV检测平台的地区，可增加猴痘检测内容实现互联网在线检测约和结果查询。五、🍿点场所干预　　重点🕴️动场所包括实体和虚🧤两类场所，实体场所🧈括酒吧、会所、浴池经营性场所，虚拟场💅包括移动互联网和社媒体。　　(一)实体场所干预。　　各级✅控机构负责组织干预作人员在当地MSM经常出入的酒吧、会所🏄‍♂️浴池等活动场所，开猴痘预防干预宣传，🦴要包括：　　1.在MSM经常出入的酒吧、会所、浴池等实体场，张贴醒目的健康教宣传图片，设置健康育资料公告栏；　　2.强化个人健康责任意识，开展猴痘健康咨，推动开展自我风险️⃣估；　　3.提供转介服务信息，告知明确🤵诊疗流程以及相关检、医疗机构名称、联人等信息。　　各地,-加强对猴痘确诊病例病前21天内活动过的场所以及污水监测阳🦹‍♂️场所的干预宣传，重目标人群的个人隐私护，加强对社会组织伴教育员猴痘防治知培训，建立规范的行💧干预流程，提高自我护技能。　　(二)虚拟场所干预。　　各疾控机构负责组织指当地有序开展猴痘线宣传，在相关网站、交媒体平台及时发布🈚更新猴痘宣传教育内,-，形成面向重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣传干预服务系。　　各级疾控机支持社会组织或同伴-育员利用网站、信箱📔社交媒体平台，组织展在线咨询和交流。时解答网友提出的各猴痘相关问题。针对同时期猴痘传播特点定期或不定期组织专、专业人员、同伴教员利用互联网和社交🈹体平台进行在线宣教各级疾控机构要定期↙️导更新相关专业信息确保宣传内容科学、效。　　附件2　　附件3　　猴痘疫情流行病学调查指南　　为🔧导各地疾控机构规范展猴痘疑似病例、确👨‍💼病例和聚集性疫情的行病学调查，及时掌病例暴露史、接触史流行病学相关信息，实密切接触者的追踪💉定，防止疫情传播扩-，制定本指南。一、-,查目的　　(一)查找感染来源，掌握、追和管理密切接触者。　(二)分析传播链及传播特征。　　(三)及时发现潜在的风险群及其特征、范围，针对性地开展宣传教💯和综合干预。二、调🈂️对象　　疑似病例、诊病例和聚集性疫情😯三、调查方法和内容　通过查阅资料，询病例、诊治医生、家和知情人等进行流行学调查。如病例的病允许，调查时应先调病例本人，再对其诊🌕医生、家属和知情者行调查。　　开展个🥩调查时，要认真、详💼了解和记录病例基本⭐息、发病就诊情况、🙅‍♂️床表现、转归及实验⚛️检测信息；发病前21天内与可疑感染来源📖接触史、接触场所及♂️触方式；发病后至隔治疗前的具体活动地、与其有皮肤或黏膜🙅接接触者，以及发病4天内与其有性接触者。　　(一)基本情况。如姓名、性别、年、住址、国籍、联系🆙式等。　　(二)发病就诊情况。临床表现实验室检测、发病就经过和病情变化与转。　　(三)感染来源调查。对病例发病前21天内的暴露史开展调查，包括境内外猴痘-例报告地区旅行史或🏚️住史，对可疑的感染🚣‍♂️源要详细询问接触时、方式、频次、地点接触时采取的防护措🍣等，特别是性接触史调查时，若发现调查中未列入，但具备重流行病学意义的内容应进行详细询问和记🦉。　　(四)密切接触者调查及判定。对病传染期的活动情况和群接触情况进行追踪排查后，判定其密切触者。密切接触者判和管理按照《猴痘密🌷接触者判定和管理指》(附件4)执行。　　详见附件3-1《猴痘病例个案调查表》四、组织与实施　　照“属地化管理”原🩳，由病例现住址所在县(市、区)级疾控部门组织辖区疾控机构展猴痘病例的流行病调查，就诊医疗机构,,供诊疗信息。调查单应根据调查计划和调🧣目的，确定调查人员成和职责分工，及时展病例流行病学个案查。调查过程中发挥部门联防联控的协同用，尽可能获取全面🦯确的流调信息。调查间，调查人员要做好人防护。五、信息的报与分析　　疾控机🐓完成调查后，应做好例分析总结，及时将🍋行病学个案调查表、查报告等资料逐级报😱上级疾控机构，并做🕍调查资料的保管和存。病例流调信息要按🔓关规定，严格做好信-安全和个人隐私信息🤎护。　　附件：3-1.猴痘病例个案调查表　　附件4　　猴痘密切接触者判定和管理🎆南　　为指导各地做👩🏽‍🤝‍👩🏻猴痘密切接触者判定,管理，有效控制猴痘情的传播，制定本指。一、密切接触者判标准　　密切接触者🙋‍♀️指直接接触病例的病部位及其被污染物品👩‍👩‍👧或感染动物及其分泌、渗出物等污染物的🍍员；以及职业暴露或时间近距离吸入病例吸道飞沫等，经评估感染风险的人员。具情形包括：　　1.与疑似病例或确诊病例病后有皮肤或黏膜直📠接触的人员，接触方包括性接触、抚摸、抱和亲吻等；　　2.与有皮疹症状的疑似例或确诊病例共用衣、被褥、餐具等物品🤺人员；　　3.医疗诊疗、采样或实验室检🥋等操作过程中可能暴于病毒，经评估有感风险的医疗卫生工作员；　　4.与疑似病例或确诊病例发病前4天内有性接触，并经行病学调查专业人员👬估有感染风险的人员亦可判定为密切接触；　　5.在狭小密闭空间与疑似病例或确🎶病例长时间近距离接(如长时间共处同一封闭空间)，经流行病学调查专业人员评估有🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿染风险的人员，亦可🚒定为密切接触者；　👵6.接触感染猴痘病毒的动物及其分泌物、出物等污染物，而未取有效个人防护的人,；　　7.其他可能存在病毒暴露风险的人。二、密切接触者管🕺　　1.管理期限与方式。病例发现地疾控构或密切接触者所在🎶疾控机构应于追踪到切接触者当天及时开,,,猴痘病毒核酸检测，知并指导密切接触者好自我健康监测，健👎监测期限为自最后密接触之日算起21天。自我健康监测期间可常生活与工作，需避与他人发生性接触等切接触，避免捐献血等。　　2.知情告知。实施健康监测时，控机构或基层医疗卫机构应口头告知健康🚼测的缘由、期限、注🎿事项和疾病相关知识✒️以及负责随访疾控机或基层医疗卫生机构系人和联系方式，并放《猴痘密切接触者⏬康告知书》。　　3.定期随访。疾控机构⛴️基层医疗卫生机构应第7、14、21天电话或上门主动询问密接触者自我健康监测🖱️况，提供咨询指导建。发现异常情况，及调查处置。　　4.自我健康监测。坚持每做好体温测量和症状测，主要症状包括发💷(＞37.3℃)、皮疹、浅表淋巴结肿大。密切接触者一旦出🧎‍♀️相关症状应及时前往🐸疗机构就诊或与随访系人取得联系，接受痘病毒核酸检测。　附件：4-1.猴痘密切接触者健康告知书　附件5　　猴痘消毒技术指南　　为进一规范猴痘疫情相关的毒工作，落实科学消、精准消毒，减少猴病毒对公众健康造成危害，制定本指南。、疫源地消毒　　(一)适用范围。　　适用于出现猴痘病例后，🎉其可能污染的场所和品进行的随时消毒和末消毒。　　(二)消毒原则。　　1.范围和对象确定。　　根流行病学调查结果，➗定现场消毒的范围和*️⃣象。对病例在住院、运期间可能污染的环和物品，进行随时消。对病例居住或活动🧚‍♀️的场所，如居住场所工作场所、学习场所😭诊疗场所、转运工具⛈️及其他可能受到污染场所，在其离开后(如住院、转院、出院、🐥亡)进行终末消毒。　　2.方法选择。　　(1)诊疗用品消毒。尽量选择一次性诊疗品，非一次性诊疗用🚮应首选压力蒸汽灭菌不耐热物品可选择化消毒剂或低温灭菌设进行消毒或灭菌。　🚱(2)手消毒。建议使用手消毒剂揉搓双手行消毒，也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒剂。　　(3)环境和物体表面消毒。可-择含氯消毒剂、二氧氯、过氧乙酸、过氧氢等消毒剂擦拭、喷或浸泡消毒。　　(4)衣物、床单等纺织品消毒。可选择热力消,,、含氯消毒剂或季铵类消毒剂浸泡等消毒式。　　(三)常见污染对象的消毒方法。　1.手消毒。　　可选用速干手消毒剂，直接选用75%乙醇进行擦拭消毒；醇类过者，可选择季铵盐类有效的非醇类手消毒。有肉眼可见污染物，应先使用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六步洗手法清洗双手🧑🏻‍🤝‍🧑🏻然后按上述方法消毒　　2.皮肤、黏膜。　　皮肤被污染物污☢️时，应立即清除污染，再用一次性吸水材沾取0.5%碘伏或过氧化氢消毒剂擦拭消3分钟以上，使用清水清洗干净；粘膜应用量生理盐水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。　　3.床单、毛巾、衣服等纺织品。　　例使用的床单、毛巾🏴‍☠️衣服等纺织品，无肉可见污染物时，若需复使用，可用流通蒸或煮沸消毒30分钟；或用有效氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒剂浸泡30分钟后，按照常规清洗或用其他有效的消毒法。不耐湿的衣物可🙀用环氧乙烷或干热方进行消毒处理。　　🧟‍♀️分泌物、渗出液、排物、血液、体液等污物时，建议按医疗废集中处理。　　4.餐(饮)具。　　病例所使用的碗、盘、筷、等餐(饮)具清除食物残渣后，煮沸消毒30分钟，或使用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再用清水洗净。　　5.污染物。　　对病例分泌物、渗出液、排物、血液、体液等少污染物可用一次性吸🧏材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒剂(或能达到高水平消毒的消毒巾/干巾)小心移除。　　对病例分泌物、出液、排泄物、血液体液等大量污染物应🦮用含吸水成分的消毒或漂白粉完全覆盖，🐖用一次性吸水材料完📈覆盖后用足量的有效5000-10000mg/L的含氯消毒剂浇在吸水材料上，作30分钟以上(或能达到高水平消毒的消毒巾)，小心清除干净。清除过程中避免接触-染物，清理的污染物医疗废物集中处置。　病例的分泌物等应🗽专门容器收集，用有氯20000mg/L的含氯消毒剂，按物☘️药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污染物后，应对污染的环🥙和物体表面进行消毒📽️盛放污染物的容器可有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液浸泡消毒30分钟，然后清洗干净。　　6.地面、墙壁。　　有肉可见污染物时，应先全清除污染物再消毒📂无肉眼可见污染物时可用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂擦拭或喷消毒；不耐腐蚀的地和墙壁，也可用2000mg/L的季铵盐类消毒剂喷洒或擦拭；毒作用时间不少于30分钟。　　7.物体表面。　　诊疗设施设🈷️表面以及床围栏、床🐴柜、家具、门把手、➿生洁具和家居用品等肉眼可见污染物时，先完全清除污染物再毒。无肉眼可见污染时，用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂，不耐蚀的物体表面也可用2000mg/L的季铵盐类消毒剂进行喷洒擦拭或浸泡消毒，作30分钟后清水擦拭干净。　　8.污水和粪便。　　在进入市政水管网前需进行消毒理，消毒后污水应当合《医疗机构水污染排放标准》(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃圾。　　病例生活垃圾🏽医疗废物处理。　　10.医疗废物。　　医疗废物的处置应遵循医疗废物管理条例》《医疗卫生机构医疗⏭️物管理办法》的要求规范使用双层黄色医废物收集袋封装后，常规流程进行处置。　11.室内空气。　　如经科学评估，需👩‍🚀室内空气进行消毒，’在无人情况下，可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化氯(浓度按产品说明书)等消毒剂，按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。也可采用验证安全有效的其他’毒方法。二、注意事️⃣　　现场消毒应确保用消毒产品合法有效所选消毒方法科学可。现场消毒时，根据场情况和相关标准要，选择合格有效的个防护装备，在做好个◻️防护的前提下，严格💞照工作方案实施消毒　　消毒实施单位应🏄‍♂️备现场消毒能力，操人员应经过消毒专业训，掌握消毒和个人护基本知识，熟悉消器械的使用和消毒剂配制等。　　每次开💗消毒工作时均应做好毒记录，包括消毒对💡、消毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作用时间等。同时，相关门和单位应做好消毒作的监督管理和评价　　附件6　　猴痘个人防护指南　　为加公众、疫情处置相关作人员和医务人员的人防护，避免猴痘病🖥️暴露感染，制定本指。一、居家隔离治疗病例等相关人员　　(一)适用范围。　　适用于居家隔离治疗的😒例(疑似病例和确诊病例)、照护人员或共同居住者的个人防护。　(二)居家隔离区域要求。　　1.应选择有自然通风、独立卫🛏️间的房间作为隔离区☪️。　　2.应配备专用的餐具，床单、毛巾床上用品，消毒剂和🧑🏿‍🤝‍🧑🏾罩等个人防护用品，视和平板电脑等电子🌹备。　　3.卫生间宜配备专用的洗衣机，漏应有水封。　　(三)病例管理要求。　　1.应能够进行自我照护。　　2.应每天做好体温测量和症状监，避免与他人共用个🧑🏿‍🤝‍🧑🏽物品。　　3.避免与他人发生性接触，避📩与免疫力低下人员、童、老人、孕妇及其👯‍♂️人员的直接接触，避♍与宠物等动物接触，免捐献血液等。　　4.外出就诊时，应佩戴医用外科口罩，着长长裤，确保遮住所有伤皮肤，避免与他人切接触，避免乘坐公交通工具。　　(四)照护人员要求。　　1.应每天做好体温测量和症状监测。　　2.应尽量避免进入隔离域。如需进入隔离区，应佩戴医用外科口和一次性手套，与病😹保持至少1米的距离。在离开隔离区域之后应加强手卫生，并对下的口罩和手套进行毒处理后废弃。　　3.在拿放和清洗居家隔离治疗病例的床单、服和处理垃圾的过程，应避免抖动。用湿🧍‍♀️布拖地，避免干扫。湿抹布清洁家居用品▪️面，地毯应用蒸汽清，避免使用吸尘器。　4.应将居家隔离治疗病例的餐具、床单毛巾和衣物单独洗涤消毒，可选择热力消、含氯消毒剂或季铵类消毒剂浸泡等消毒👰式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同居住者出现任🍑症状或不适表现，应🚸及时前往指定医疗机就诊并主动报告可疑触史。　　2.对其接触的物品、活动的区等结合风险评估结果行消毒处理。二、疫处置相关工作人员　🗞️(一)适用范围。　　适用于猴痘疫情期间👚行病学调查、环境清🕜消毒人员的个人防护🤟　　(二)流行病学调查人员防护要求。　1.个人防护装备。一次性乳胶手套、医用◀️科口罩、一次性隔离等。　　2.个人防护要求。规范佩戴口罩加强手卫生，与被调人员保持至少1米的距离。　　3.废物管理。调查结束后，废弃个人防护装备暂存、理和处置应按照《医废物管理条例》执行🥩　　4.应急处置。如在调查过程中出现口👨🏽‍🤝‍👨🏼脱落、直接接触了病皮肤或分泌物等情况要结合被调查人员的🤑床诊断结果、空间的闭性、接触的时间和离等进行风险评估，合风险评估结果，采🔟相应的处置措施。　(三)环境清洁消毒人员防护要求。　　1.个人防护装备。一次乳胶手套、医用外科罩、一次性隔离衣、👁️‍🗨️水靴套等。　　2.个人防护要求。规范佩口罩，加强手卫生，量减少与被消毒物品直接接触。　　3.废物管理。清洁消毒结后，废弃的个人防护’备暂存、处理和处置按照《医疗废物管理🌸例》执行。　　4.应急处置。如在清洁消过程中出现口罩脱落皮肤损伤或直接接触🧐泄物、血液等情况，结合被清洁消毒物品🧴类型、接触的时间和间的密闭性等进行风,,评估，结合风险评估果，采取相应的处置🚌施。三、医务人员的人防护　　(一)适用范围。　　适用于猴疫情期间医务人员及工作环境的防护。　(二)基本要求。　　1.个人防护装备要求。医务人员执行标准防，采取经接触传播🏖️经飞沫传播疾病的隔与预防措施，佩戴一性乳胶手套、KN95/N95及以上级别的口罩、防护面屏或护镜、一次性隔离衣等　　2.环境防护要求。医院环境的清洁消应符合附件5的要求。应避免干除尘、清扫吸尘等活动。首选湿🕋清洁方法。　　3.废物管理。个人防护装、病例敷料等暂存、理和处置应按照《医废物管理条例》执行--　　附件7　　猴痘病毒实验室检测技术指　　为指导各级疾控👮‍♂️门和其他相关机构规开展猴痘病毒实验室🐃测工作，快速、准确🧸别猴痘确诊病例，制本指南。本指南主要,绍标本采集以及猴痘毒核酸荧光定量PCR检测方法、生物安全求等内容。一、检测🛌象　　(一)猴痘确诊病例和疑似病例；　(二)密切接触者；　　(三)感染或疑似感染猴痘病毒的动物；　(四)环境或其它生物材料。二、技术人基本要求　　(一)采样人员。从事猴痘病,-核酸检测标本采集的🐽术人员应当经过生物🛰️全培训，培训合格后可从事采样工作。采,人员应熟悉采集标本类和采集方法，熟练握标本采集操作流程注意事项，做好标本🥪息记录，确保标本质🎥符合要求、标本及相🧈信息可追溯。　　1.采样人员个人防护装要求：KN95/N95及以上级别的口罩、防护面屏或护目镜、次性隔离衣、一次性⚰️胶手套(尽可能戴两层)、靴套；如果接触了病例血液、体液、分👨‍💻物或排泄物，应及时换手套。污水采样人可根据实际工作需要🥺适当降低防护级别。　2.住院病例的标本由所在医院医护人员🎌集，根据实验室检测作的需要，可结合病多次采样。　　3.密切接触者标本由当地控机构或医疗机构专人员采集。　　4.感染或疑似感染猴痘病🙀的动物由当地疾控机🈁协调动物疫控部门专采样人员负责采集。　5.环境或其它生物材料标本由相关专业样人员负责采集。　(二)检测人员。实验室检测技术人员应具🐞相关专业大专以上学或具有中级及以上专技术资格，并有2年以上实验室工作经历，🧀受过核酸检测相关培，培训合格后方可从🛑检测工作。实验室配的工作人员数量应与开展检测项目及标本相适宜，确保能够及⤴️、熟练、准确地开展验室检测和报告结果三、标本采集、保存运输　　(一)标本采集种类。　　1.首选标本是皮肤(黏膜)病变部位标本，包括病🔥表面拭子、痘疱液或疱渗出物拭子、痘痂痘痂拭子等。　　2.呼吸道标本，如口咽子，可用于病例急性检测，也是密切接触🕵️检测最常用标本。　3.发病急性期可采集EDTA抗凝血标本进行核酸检测。　　4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检测。　　5.直肠拭子、尿液、精液唾液等其它标本仅用研究，根据工作需要集。　　6.污水或其它环境生物材料标本据实际工作需要进行集。　　(二)标本采集要求。　　采集皮(黏膜)病变部位标本时应使用无菌聚酯纤、尼龙或类似材质拭，避免使用棉拭子。集疑似病例的标本前🧟‍♀️避免使用75%乙醇等消毒剂清洁病变部位🔧每种类型的皮肤(黏膜)病变应尽可能采集两个以上拭子，每个病💖应同时采集身体不同位或外观不同的2-3种病变标本。采集皮🏊‍♀️(黏膜)病变部位标本时应适当用力。皮肤(黏膜)病变部位、痘痂或分泌物等不同拭子,-本应放置于不同的采管中。进行病毒分离应采集干拭子标本(无采样液)或以非灭活型病毒采样液保存。根实验室活动资质确定🤹‍♂️用非灭活型或灭活型样液采集标本。　　(三)标本采集方法。　　1.斑疹、丘疹、水疱或脓疱等皮肤(黏膜)病变部位标本：一手紧握采样拭子尾部，与拭子头部保持一寸💌上距离。采样时适当力下压拭子，在皮损👬🏿面来回擦拭至少2-3次，然后以拭子另一☔再重复擦拭2-3次。如果在擦拭过程中痘破裂，要确保采集到🥼疱液。采样后将拭子置于无菌采样管中(可含病毒采样液或不含体)，折断拭子头，去除拭子尾部，盖上管🧑🏿‍🤝‍🧑🏼，以消毒纸巾擦拭消☄️采样管，以封口膜密管盖后将采样管保存送检。　　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样前应确保实验可检测此类标本。使🥼无菌镊子或其他钝头械夹取全部痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮，放置于干、无菌的采样管中，样完成后以创可贴覆患处。　　3.口咽拭子标本：被采集人员部微仰，嘴张大，露😡两侧扁桃体，将拭子🍅过舌根，在被采集者侧扁桃体稍微用力来擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至3次，将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中或置于不含液(干拭子)的无菌管中，尾部弃去，旋紧管。　　4.血液标本：尽量采集急性期(发病7天内)的血液标本，建议使用含EDTA抗凝剂的真空采血管采🏗️5mL全血，可利用全血进行检测，或室温置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血浆于无菌管中进行检测🌖　　5.血清标本：用真空负压采血管采集📷液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于无菌螺口塑料管中。一份血清应尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份血清应在发后第3-4周采集，采集血液标本5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于无菌螺口塑料管🔲，用于猴痘抗体检测+　　6.其他标本：依据设计需求规范采集　　(四)标本保存。　　标本应在收集后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行检测。可在1周内检测的标本可置于4℃环境中保存；1周内无法检测的标本，短期可置于-20℃环境中保存，长期应置于-70℃或以下环境中保存。全血🤾‍♂️离血浆前冷藏(2-8℃)，分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存。应设立专库,专柜单独保存标本，🐖免反复冻融标本。　猴痘病毒及其相关标应由专人管理，准确录病毒及标本的来源编号、数量等信息，体要求可参考《病原🛢️生物菌(毒)种保藏数据描述通则》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措施确保病毒及标本安全严防发生误用、恶意用、被盗、被抢、丢🤮、泄露等事件。　　(五)标本送检。　　标本采集后应尽快在低🛥️条件下(冰袋或干冰)送往实验室，如需长运输标本，应采用干冷冻运输方式进行保。　　1.送检标本：病例标本先由省级及下疾控机构进行初步测，各省首例猴痘阳标本应送中国疾控中📨病毒病所复核。每个性病例至少采集一套本(皮肤或黏膜病变部位标本、口咽拭子标及急性期、恢复期双🍚血清标本)送中国疾控中心病毒病所检测。💜省级疾控机构根据实情况制定省内样本送、复核流程。　　2.病原体及标本运输：　(1)国内运输。猴痘病毒或其他潜在感性生物材料的运输包分类属于A类，对应的联合国编号为UN2814，包装符合国际民航组织文件Doc9284《危险品航空安全运输技术细则》的PI602分类包装要求，通过其他交通工具运的可参照以上标准包。猴痘病毒或其他潜🚿感染性材料运输应按🧛《可感染人类的高致🕎性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规🧖‍♂️》(原卫生部令第45号)办理《准运证书》。污水等环境标本暂普通生物样本运输标执行。　　(2)国际运输。猴痘毒株或样在国际间运输的，应范包装，按照《出入特殊物品卫生检疫管🦆规定》办理相关手续并满足相关国家和国🌞相关要求。四、猴痘毒核酸检测要求及流　　(一)实验室资质要求。　　开展猴痘😇毒核酸检测的实验室应当符合《病原微生实验室生物安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因扩增检验实验👨‍👨‍👦‍👦管理办法》(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定，具备设区的市级卫生健康部🥳备案的生物安全二级(BSL-2)实验室及以上实验室条件，并案猴痘病毒相关实验🚱动。独立设置的医学验实验室还应符合《👨‍👩‍👦‍👦学检验实验室基本标(试行)》《医学检验实验室管理规范(试行)》等要求。　　开展猴痘病毒分离、培养中和等涉及病毒扩增使用等实验操作的实室应具备国家卫生健🍰委批准的生物安全三(BSL-3)实验室及以上实验室条件，获得猴痘病毒实验活批准。分离的猴痘病🤤应送国家病原微生物藏中心/国家病原微生物资源库病毒分库保。　　(二)实验室生物安全要求。　　根2006年公布实施的《人间传染的病原微物名录》(简称《名录》)，猴痘病毒生物危害分类为第一类，是种高致病性病毒。按,-《名录》要求，猴痘毒的分离、培养等涉病毒扩增及使用的实💁‍♂️操作需在BSL-3及以上实验室的生物安柜内进行；非灭活采液采集的猴痘病例样的灭活在BSL-3实验室进行；样本灭活-猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验室或PCR检测的专门区域或房间💦行。如《名录》更新开展猴痘病毒操作的验室生物安全要求应最新《名录》执行。⚛️水样本的灭活参照普🔭生物样本。　　(三)实验室分区要求。　原则上开展猴痘病毒酸检测的实验室应当置以下区域：试剂储和准备区、标本制备🏓、扩增和产物分析区🚻三个区域在物理空间👩🏻‍🤝‍👨🏾应完全相互独立，空应定向流通。各区功🦐分别是：　　1.试剂储存和准备区：贮存剂的制备、试剂的分和扩增反应混合液的🎺备，以及离心管、吸等消耗品的贮存和准®️。　　2.标本制备区：转运桶开启、标本活，核酸提取及加入扩增反应管等。　　3.扩增和产物分析区：核酸扩增和产物分析　　根据使用仪器的🌱能，区域可适当合并如采用标本处理、核提取及扩增检测为一的自动化分析仪，标制备区、扩增和产物析区可合并。　　(四)主要仪器设备。　　实验室应当配备与开检验项目相适宜的仪🧙‍♀️设备，包括：二级生安全柜、高速台式离机、干浴恒温器、荧定量PCR仪、计时器、移液器。　　(五)实验室猴痘病毒核酸测流程。　　实验室到标本后，按照标准作程序进行试剂准备标本前处理、核酸提🍝、核酸扩增、结果分及报告。实验室应当🎟️立可疑标本和阳性标复检流程。　　1.试剂与材料。　　(1)标本：包括病变表面👨🏿‍🤝‍👨🏾子、痘疱液或痘疱渗液拭子、痘痂或痘痂子、咽拭子、全血或浆等标本。　　(2)核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。　　(3)核酸检测试剂：　　🦸‍♂️试剂：DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴痘病毒检测引物、探针　　③阳性对照：涵检测靶标序列的质粒　　(4)灭菌去离子水、无水乙醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用于手部和物表面常规消毒，开启有效期为1周。　　②含氯消毒液：现用现，含有效氯1000mg/L的消毒液用于物体表面常规消毒，含效氯5000mg/L的消毒液用于感染性料溢洒时的应急处理🏵️　　(6)耗材：包括带滤芯的吸头、螺旋的离心管、非螺旋口离心管、含锆珠的粉🍆管、PCR反应板和透明封膜或PCR反应管和透明盖。　　(7)BSL-2个人防护用品：包括KN95/N95口罩及以上级别的口罩、一次性隔离衣防护眼罩或面屏、一性帽子、鞋套、靴套手套。　　2.实验前的标本接收。　　(1)核对被检标本编号、姓名、性别、年龄及测项目；　　(2)待检标本的状态如有异，需注明；　　(3)待检标本长期存放在-70℃，短期存放可在-20℃，避免反复冻融。　　3.核酸检测操作步骤及注意事项⛴️　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　操作方法按DNA提取试剂盒相应说明书进行作，具体如下：　　👨‍👧‍👦提取试剂准备：第一开启试剂盒，在使用先在漂洗液中加入无🐗乙醇，加入体积参照上标签。所有试剂在用前应平衡至室温；有离心步骤应在室温🚶‍♀️进行。　　②处理样：　　A.痘疱液：干拭子标本需以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本，加入80μL缓冲液，总量为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补足总体积至180μL；　　B.病变皮疹或痘痂：取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体积含PS的PBS，研磨或匀浆处理，取80μL，然后加入100μL缓冲液；　　C.咽拭子、其它拭子：从采样液中取200μL标本，干拭子标本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀后取200μL；　　D.全血或血清：直接取200μL标本。　　③加入20μL蛋白酶K溶液，混匀，溶液会变清亮。若👌本为病变皮疹或其它🦀织时，加入蛋白酶K混匀后，在56℃放置，直至组织溶解，再进🤣下一步骤。　　④加200μL裂解缓冲液，充分混匀，70℃放置10分钟，或至溶液变清亮，简短离心以😆除管盖内壁水珠。　需注意：加入裂解缓🏦液后可能会出现白色🎎状沉淀，在70℃放置后会消失。如溶液未清亮，说明细胞裂解-彻底，可能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　⑤加200μL无水乙醇，充分混匀，此时可能会现絮状沉淀，简短离以去除管盖内壁水珠,-　　⑥将上一步骤所溶液和絮状沉淀均加📗吸附柱中(吸附柱放入废液收集管中)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　　⑦加500μL漂洗缓冲液1(使用前先检查是否已加入无水乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　　⑧🙍入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是否已加入无水乙醇)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　　⑨将吸附🧣放回废液收集管中，大转速13000rpm离心1分钟，尽量去除漂洗液。　　⑩将🐧附柱转入一根干净的心管中(需自行准备，试剂盒中未提供)，加入50μL洗脱缓冲液或灭菌去离子水，室放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤出液，做好记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　　(2)核酸检测：实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病毒核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体系的准备：每孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检测标本外，应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；所有样本，包括对照，应设🦧孔。　　②加样：每反应管中加入核酸或💥照各5uL，盖紧管盖或封好透明膜，置于光定量PCR检测仪上。　　③扩增条件设：　　④仪器检测通选择：使用荧光定量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道，收集设在60℃。具体设置方法参照各仪器用说明书。　　⑤结分析阈值设定：使用🏝️光定量PCR检测仪进行结果分析时，基线3-10或6-15个循环的荧光信号，阈设定原则为阈值线刚👩‍🦳超过正常阴性对照扩曲线最高点，也可根仪器噪音情况调整阈。　　(3)核酸检测结果判断　　①Real-timePCR反应系统的质量控制：应结果应同时符合以2个条件，否则试验结果无效，应重新开展测。阴性对照无扩增为阴性。阳性对照未现阴性结果。　　②果判定：　　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一孔Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳性和处于灰区🕛标本应重复检测或经列分析进行确诊。需意：当标本仅为咽拭或血清、血浆，且检结果为阴性时，应结🙆临床症状，慎重做出性诊断。　　(4)表格记录　　做好荧光量实时PCR方法检测猴痘病毒核酸原始记。　　五、猴痘病毒基因组测序　　1.测序标本选取原则。本疫情中的首发或早期例、与早期病例有流病学关联的关键病例感染来源不明的本土例、境外输入病例阳标本等。以上标本在酸荧光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。以省为单位确定开展猴病毒全基因组测序的构。建议使用扩增子术进行猴痘病毒全基组测序。测序数据经控合格后方可用于后生物信息分析。二代序平台覆盖深度应不⚾于10×，三代测序平台覆盖深度应不低于50×，全基因组测序覆盖度应不低于98%。数据比对分析推荐参👩‍🦼猴痘基因组NC_063383.1。　　各省应建立本省输入、土病例猴痘病毒基因数据库，应具备序列比分析能力。具备测🦡条件的省份要在接收本后48小时内开展测序工作，关键样本要☀️实验室收到标本后1周内提供测序结果报告所有测序原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中心病毒病进行序列汇总、分析病毒病所应将序列分结果及时反馈各省，将全国猴痘病毒序列总、分析结果及时上国家疾控局。　　3.分子分型。推荐使用线分析工具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行分子分型。　　附：　　7-1猴痘病毒检测标本送检表　　7-2猴痘病毒标本序列测定结果报告单【编:孙静波】

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