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  中新网7月27日电据国家疾控局方微信消息为进一步做🙅‍♂️猴痘防控工,及时有效对猴痘疫情💆‍♀️提升猴痘防,-工作的科学🤫、精准性和效性,切实护人民群众💵命安全和身健康,国家控局会同国卫生健康委定并于7月26日印发《猴痘防控方案😺。其中提出2023年6月以来,我🛅多个省份先报告多例猴病例,引发增本土续发情和隐匿传的风险较高要坚持“预为主、防治合、精准防、快速处置原则,落实😣早发现、早告、早隔离⛰️早治疗”措。  《猴防控方案》文如下:猴防控方案 猴痘是由猴病毒(Mpoxvirus,MPXV)感染所致的种人兽共患。2022年9月,我国报告首例猴痘入病例。2023年6月以来,我国多🅿️省份先后报多例猴痘病,引发新增土续发疫情隐匿传播的险较高。为导各地科学🎟️准做好猴痘控工作,切维护人民群身体健康,定本方案。、总体要求 坚持“预🚤为主、防治♉合、精准防、快速处置原则,落实早发现、早🎛️告、早隔离早治疗”措🕴️。开展医疗构、重点人🥪、入境人员🍦重点场所等渠道监测。强疫情分析风险研判,🧏‍♂️针对性地开重点人群健☔教育和综合预。落实病隔离治疗、📂行病学调查🧔密切接触者🌁踪管理等措🙋。坚持发现起、控制一,及时阻断情传播。二疾病特征 👽(一)病原学特征。  痘病毒属于病毒科正痘🦸‍♂️毒属,为基组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中💢现该病毒。1970年在刚果民主共和一名疑似天患者的标本首次分离到🏊痘病毒,为例确诊的人猴痘病例。- 猴痘病毒🚤为两个进化支:(1)分支I,曾称为中非分支或🎡果盆地分支(2)分支II,曾称为西非分支,进步分为IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方性流区猴痘暴发情的毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较多分支,包括A.1、A.2和B.1等亚分支,2022年9月我国报告首例输性猴痘病例🦿来,各地报🦐中国疾控中🐱病毒病所的株序列均属IIb分支。  猴痘病🥻耐干燥和低,在痂皮、壤和衣物、上用品等物表面可生存🏧月。该病毒📤热敏感,加至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯毒剂、过氧🤞酸等常用消🧃剂及紫外线-有效灭活病🔧,对过氧化🧝、次氯酸钠戊二醛、邻’二甲醛等敏。  (二)流行病学特🦕。  1.传染源。猴痘⬆️毒的宿主尚明确,目前为非洲啮齿动物(非洲松鼠、树松鼠🍣冈比亚袋鼠睡鼠等)可能为其自然宿。传染源包📆猴痘病例及染的啮齿类♊物、猴和猿灵长类动物👣  2.传播途径。猴痘毒主要经黏🐱和破损皮肤入人体,主通过直接接👩‍🦳病例的病变肤或黏膜传,亦可通过⬇️触被病毒污的物品、长间近距离吸🎭病例呼吸道沫传播,接感染动物的吸道分泌物病变渗出物血液及其它液,或被感动物咬伤、🍮伤感染传播⛑️  3.易感人群。人群遍易感。接过天花疫苗猴痘病毒存一定程度的叉保护力。 4.疫情特征。2021年以前的猴疫情主要在非和西非地🅱️呈地方性流,主要通过触感染动物📵播,所引发人传人疫情,,播链较短,’要为儿童及👳‍♂️壮年的散发例及聚集性情,通过家或旅行方式-尔播散至其⚜️国家和地区2022年5月以来全球🅱️国暴发的疫主要在男男行为人群(Menwhohavesexwithmen,简称MSM,指与同性发生性行为男性)中经性接触传播,部分病例为壮年男性,🧑🏼‍🤝‍🧑🏼过大型聚会及后续在社的MSM扩散,并传播至🌩️球多个国家👬🏾地区。  (三)临床特征。  1.潜伏期:5-21天,多为6-13天。  2.传染期:病例出现状后至皮疹痂自然脱落形成新皮肤具有传染性🐚有调查提示些病例可能出现症状前1-4天存在传染性。  3.早期症状:可出现发热🙅‍♀️头痛、背痛肌痛和淋巴肿大等。 4.皮疹和黏膜疹:通常热退后出现✳️有些病例可现在全身症🐦之前。皮疹生常经过斑📠、丘疹、水、脓疱、结✳️至痂皮脱落个阶段,不形态皮疹可👨‍💻时存在,可有明显痒感疼痛。可累口腔咽喉黏、肛门、生器、结膜和膜等。痂皮落后可遗留斑或色素沉🗡️甚至瘢痕,痕持续时间,-长达数年。 5.病程及严重程度。,痘病程约2—4周,免疫力低下患者的🧏程可能较长猴痘为自限疾病,大多病例症状会行消失,也重症和死亡🤼‍♂️生,主要为童、孕妇和疫力低下人。  2022年以来全球多国猴痘暴疫情中,大数病例临床现较轻,部病例无全身状,皮疹仅于生殖器、门直肠黏膜位,死亡病⌚主要为未得治疗的艾滋病毒感染者免疫力低下群。2022年以来全球地方性流行病例的病死🧬约为0.1%。三、宣传育与干预 针对重点人⚕️、出入境人👨‍👩‍👧和一般人群不同人群分开展宣传教,有针对性加强不同人的自我防范识和个人防措施,积极合做好防控作。  (一)重点人群。各地卫生健与疾控部门合相关社会织,充分借艾滋病防治合干预经验服务模式,🎼MSM经常出入的酒吧、所、浴池等点活动场所开展同伴教。借助大众😬体、MSM社交网站等互网平台,开猴痘防控知宣传教育,高重点人群范意识,减高危行为,导有可疑接史者自觉做自我健康监👩🏽‍🤝‍👨🏾,增强主动诊意识。 重点人群宣👷干预要求详附件1《重点人群宣传干指南》。 (二)出入境人员。通过😌放宣传资料形式,加强🙊入境人员猴防控知识宣™️教育。提醒境人员关注🌬️的地国家和区猴痘疫情息,不接触痘样症状者啮齿类、灵🕒类等动物。醒来自猴痘情报告国家地区的人员🔪如在境外有,疑接触史,#️⃣境后21天内应做好自我康监测,避与他人发生,切接触,一出现发热、疹、淋巴结🉑大等猴痘样状,应主动诊并如实报流行病学史  (三)一般人群。各充分发挥新体以及广播电视、报纸’传统媒体作,开展猴痘控知识宣传🙇‍♀️育,提高公科学防范意🌶️。四、疫情测和报告 (一)监测病例定义。 🏚️1.猴痘样症状者。不明因急性皮疹(面部或口腔膜、四肢、🖱️殖器或会阴肛周等部位),伴发热(>37.3℃)或淋巴结肿🦼者。  2.疑似病例。痘样症状者👛发病前21天内具备以下行病学史中🎂任何一项:(1)有猴痘病例报告地区🙅‍♀️居史;(2)有猴痘确诊例或疑似病接触史;(3)有同性性行为,或性伴同性性行为;(4)有地方性流行区疑动物接触。  3.确诊病例。猴样症状者、似病例及密接触者,经验室检测猴🍉病毒核酸阳或病毒分离性者。  (二)多渠道监测。  1.医疗机构监。各级各类🌆疗机构要开-猴痘样症状测,尤其是肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨检测门诊等重点关注猴样症状者。现猴痘样症🌓者,应主动👩🏿‍🤝‍👩🏼问流行病学😎,记录患者住址及联系🙇‍♀️式,采集标送疾控机构🔰行猴痘核酸测。具备猴病毒检测能及猴痘病毒验活动资质医疗机构也📧开展检测。 2.重点人群监测。各✴️各类医疗机、疾控机构对MSM等重点人群开展疗或检测咨🔪服务时,应动询问是否猴痘样症状其可疑接触。如发现猴🍚样症状者和似病例,应时采集标本🦽行猴痘病毒酸检测。 3.入境人员监测。海关到猴痘相关常健康申报检疫发现有痘样症状的🏋️‍♀️境人员,应🗣️时进行标本集和核酸检🎇,并发放《诊方便卡》要求其尽快诊;对于核检测阳性者将相关信息报辖区疾控构,由相关门进一步调📉处置。  4.重点场所污水监测。有件的地区可据当地疫情💡势,经评估-MSM经常出入的酒吧、🥖所、浴池等点活动场所展污水监测  (三)病例报告。 👬🏿相关医疗机根据临床表、流行病学实验室检测果,及时对📄者进行诊断,-  诊断的似病例和确😤病例应于24小时内通过🥩国疾病预防制信息系统监测报告管模块进行网🐸直报。如为外输入病例填写输入来国家或地区✊不具备网络报条件的医🌐卫生机构,在规定时限将传染病报🎦卡信息报告🌊地乡镇卫生、社区卫生务中心或县疾控机构进网络报告,时传真或寄👛传染病报告💇‍♂️至代报单位负责病例网直报的医疗👨🏾‍🤝‍👨🏽生机构,要据实验室检🦒结果、流调展及时对病👩‍🔧信息进行复、订正。 各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例者2例及以上存在流行病🐳关联的确诊例,应当在2小时内通过-发公共卫生件报告管理息系统报告事件级别选“未分级”五、疫情处🧮  (一)病例管理。 各地发现猴🪔疑似病例和诊病例应当🟤时转运至医🎽机构进行隔治疗,如临症状明显好,病变部位结痂,可转居家隔离治,直至皮疹痂自然脱落,-解除居家隔🤹。对病情较且具备居家离治疗条件确诊病例,🔓医疗机构与控机构联合估后,可直采取居家隔治疗。对于🕥行居家隔离疗的确诊病发放《猴痘例居家隔离疗健康告知》(见附件2)。确诊病例居家隔离治期间,单人间居住,避🧑🏾‍🤝‍🧑🏻与家人有皮-或黏膜直接触,做好被染物品的消👄,非必要不出,确须外时穿长衣长、佩戴医用科口罩,避前往人群聚场所,避免其他人有皮🤹或黏膜直接触;指定医机构安排专负责上门或话随访,提👭🏽健康咨询和疗指导。 🏃‍♂️(二)流行病学调查。 县(市、区)级疾控机构到辖区疑似例和确诊病报告后,及组织开展流病学调查,找感染来源👩🏻‍🤝‍👨🏼掌握、追踪管理密切接🛩️者,分析传链及传播特👩‍🦱,及时发现在的风险人👩‍🦼及其范围、,,征,有针对地开展宣传育和综合干。调查过程发挥多部门防联控的协作用,尽可🔭获取全面准的流调信息  调查内🐚主要包括病基本信息、🐇病就诊情况临床表现、归及实验室测;发病前21天内与可疑感染来源的🏻触史、接触所及接触方;发病后至离治疗前的体活动地点与其有皮肤黏膜直接接者,以及发🌗前4天内与其有性接触者  猴痘疫🤠流行病学调要求详见附3《猴痘疫情流行病学调指南》。 (三)密切接触者的判定管理。  1.密切接触者定义。直接触病例的病部位及其被⏯️染物品,或👏染动物及其泌物、渗出等污染物;😢及职业暴露长时间近距✒️吸入病例呼道飞沫等,🕌评估有感染险的人员。🌐 2.密切接触者判定。据流行病学🦴查及暴露风评估结果,🔹控机构负责🎶时对密切接者进行判定  3.密切接触者管理🤰疾控机构或层医疗卫生🧚‍♀️构指导密切触者做好自☕健康监测,康监测期限最后密切接-之日起21天。  密切触者自我健监测期间可🔭常生活与工,需避免与人发生性接☕等密切接触避免捐献血等;坚持每做好体温测和症状监测🤧出现猴痘样状应及时就并主动报告🦚疑接触史。区疾控机构基层医疗卫🤰机构应在密接触者自我康监测第7、14、21天上门或电话🎞️其进行随访提供咨询指,发现异常况及时进行置。  密接触者判定理要求详见🦔件4《猴痘密切接触者判和管理指南。  (四)消毒与人员护。  做病例衣物、巾、床单、🎼具等个人用,以及可能🥰病例分泌物渗出物、体等污染的环⚽和物体表面消毒。从事🏏例诊治护理流行病学调、环境清洁🍤毒、标本采和实验室检️⃣等工作人员🐟工作期间做个人防护。 消毒与人防护要求详附件5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个人防🤜指南》。六实验室检测 猴痘病毒酸检测首选肤或黏膜病❣️部位标本,’同时采集口拭子标本。省首例猴痘诊病例标本送中国疾控⏪心病毒病所行复核;本疫情中的首或早期确诊🔚例、与早期例有流行病关联的关键诊病例、感来源不明的土确诊病例境外输入确病例阳性标等,荧光定PCR检测Ct值≤32时进行病毒基测序。所有序原始数据组装序列及序样本送检应在获得序48小时内报送中国疾控🌋心病毒病所😣行汇总、分👷‍♀️。以上确诊🥇例应至少采一套标本(包括核酸检测性者的皮肤黏膜病变标、口咽拭子本以及发病性期和恢复🛩️双份血清)送中国疾控中病毒病所。 实验室检👩‍🦱具体要求详附件7《猴痘病毒实验室测技术指南。七、院内😄染控制  ✳️疗机构应当格做好院内染控制。疑🦹病例和确诊例应安置在离病房,疑病例单间隔。医务人员行标准预防采取经接触️⃣播和经飞沫🩳播疾病的隔与预防措施佩戴一次性🗝️胶手套、KN95/N95及以上级别口罩、防护,,屏或护目镜🐋一次性隔离☣️等,同时做-手卫生。严按照《医疗构消毒技术范》对病例体液、血液排泄物、分’物等进行规处理,做好🗻疗环境(空气、物体表面地面等)、医疗器械、病使用物品等清洁消毒。↘️据《医疗废管理条例》医疗卫生机医疗废物管办法》做好疗废物的处和管理。八工作要求 (一)加强组织协调。各🍔卫生健康、控部门加强海关等有关🤽‍♀️门的密切协和信息共享🎆及时发现与👩‍👦‍👦置猴痘疫情落实猴痘病发现、疫情🤭告、诊疗隔、密切接触🕜追踪管理等🧠作,防止疫扩散和蔓延各地在猴痘情防控过程应注意保护☪️例、密切接者和重点人🚛等个人隐私⚛️  (二)加强宣传引导各地要及时📴布辖区猴痘情相关信息做好政策解🆘和公众健康示。通过多🧛方式和渠道-展猴痘防控👪识宣传,加🟤重点人群宣👨‍🎤教育的针对和实效性。🏮时回应社会切,引导公👨🏿‍🤝‍👨🏾科学认识猴♑。  (三)加强人员培。各地要加🍗对各级疾控构和医疗机🏍️专业人员的👅训。对医务🍼员重点开展痘病例的识与诊断、病⚱️发现与报告🍸病例管理等🍘关知识培训,,,强化诊治意。对疾控人重点开展流🏐病学调查、切接触者的定和管理、验室检测、️⃣点人群宣传🆙预等相关知培训,提高🐡痘疫情防控应急处置能。  附件  1.重点人群宣传干,指南  2.猴痘病例居’隔离治疗健告知书  3.猴痘疫情流行病学调查南  4.猴痘密切接触判定和管理南  5.猴痘消毒技术南  6.猴痘个人防护☹️南  7.猴痘病毒实验检测技术指💰  附件1  重点人群🕜传干预指南🙊 2022年5月以来,全球非地方性行区发生的痘疫情以男📻性行为人群(MSM)为主。为充分利我国艾滋病治综合干预务体系,开MSM等重点人群宣传干🛐,防范猴痘情传播扩散🉐形成常态化滋病与猴痘合防控一体应对机制,🎶定本指南。🦑、实施策略🍔 在现有艾病防治综合😉预服务体系-础上,综合⛩️用行为学干⚗️方法和手段通过宣传教、促进安全🦲行为、动员测、外展服、同伴教育互联网干预👫🏻,从个体、✴️体和社会等🧞‍♀️个层面为目😦人群提供猴🙏综合干预服🥦。二、组织施  各级疗机构和疾👯机构要加强点科室和艾病自愿咨询测门诊工作员猴痘知识🍿训,对重点群提供猴痘控知识宣传检测咨询与员、治疗和怀等服务。😧级疾控机构当积极推动地有能力、有良好艾滋防治经验的MSM志愿者或社会组织共参与猴痘防👩‍👦宣传工作,🐾工作过程中意保护重点群个人隐私三、形势分-,-  各地要👳‍♀️强对重点人猴痘疫情、控现状、影因素及出入情况的调查及时分析研猴痘疫情形,为制定本👎高危行为干🈶工作计划提🥩依据。具体🦞容包括:1.重点人群基、活动形式特点、活动所、出入境时间及地区;2.猴痘知识、态度和🗺️危行为;3.猴痘疫情水及其影响因🐯;4.猴痘防治政策及专👻机构已开展工作;5.包括志愿者在的有关组织个人已开展🐌干预活动;6.影响猴痘防治工作的困和问题。四-宣传干预 (一)宣传教育。各级疾🥼机构或健康育专业机构供技术支持社会组织参,共同研究定适合当地🥾点的猴痘预🧜宣传材料,强警示宣传育。通过大媒体、MSM网站和以移终端为载体🎍交友软件等-台,宣传国🥂、国内及本🙂猴痘疫情信♂️和防控知识🧖‍♂️提高重点人猴痘防范意。  (二)同伴教育。级疾控机构加强同伴教👩🏼‍🤝‍👨🏽员挑选、招和培训,组和支持同伴传活动,增🐔人群猴痘风防范意识,动主动检测定期组织同教育员工作🥴会,了解猴干预工作存的困难和问,有针对性🌤️给予帮助和持。  (三)外展服务。各级疾控机干预工作人定期到重点🆓群活动场所🛕展猴痘宣传咨询、发放🧜传材料等外服务活动,高重点人群痘防范意识✍️知识水平,动重点人群强自我健康理,主动寻检测咨询服🖍️。  (四)检测咨询。级疾控机构过互联网、🤧伴教育、外活动等多种式动员有猴👨🏿‍🤝‍👨🏽样症状或可😅接触史的重人群进行猴检测。各级🌺类医疗机构肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨🤲检测门诊发猴痘样症状,应主动询其流行病学👡及性接触史记录患者现址及联系方,采集标本疾控机构进猴痘核酸检♉,具备猴痘测能力及猴病毒实验活资质的医疗构也可开展测。对于已立互联网+HIV检测平台的地区,可💳加猴痘检测💵容,实现互网在线检测约和结果查👬🏾。五、重点所干预  点活动场所括实体和虚两类场所,😔体场所包括👩🏿‍🤝‍👨🏼吧、会所、池等经营性🏌️‍♀️所,虚拟场包括移动互网和社交媒。  (一)实体场所干。  各级控机构负责织干预工作员在当地MSM经常出入的酒吧、会所浴池等活动所,开展猴预防干预宣,主要包括🙋‍♂️  1.在MSM经常出入的酒吧、会、浴池等实场所,张贴目的健康教宣传图片,置健康教育料公告栏; 2.强化个人健康责任识,开展猴健康咨询,动开展自我险评估; 😍3.提供转介服务信息,✏️知明确的诊流程以及相🤫检测、医疗构名称、联人等信息。 各地要加对猴痘确诊例发病前21天内活动过✌️场所以及污监测阳性场的干预宣传,重视目标人的个人隐私护,加强对会组织同伴育员猴痘防知识培训,立规范的行🧳干预流程,高自我防护能。  (二)虚拟场所干预。  各疾控机构负🧞‍♂️组织指导当🔋有序开展猴线上宣传,相关网站、🩸交媒体平台时发布和更猴痘宣传教内容,形成向重点人群🏅猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣传干预务体系。 ⬅️各级疾控机支持社会组🌌或同伴教育💀利用网站、🖼️箱或社交媒平台,组织展在线咨询交流。及时答网友提出各种猴痘相问题。针对同时期猴痘👩🏽‍🤝‍👩🏻播特点,定😎或不定期组专家、专业🧃员、同伴教员利用互联和社交媒体🎅台进行在线教。各级疾🔥机构要定期👩‍🦯导更新相关业信息,确宣传内容科🧿、有效。 🥡附件2  附件3  猴痘疫情流行病调查指南 为指导各地控机构规范-展猴痘疑似例、确诊病🚶‍♂️和聚集性疫的流行病学查,及时掌🍷病例暴露史接触史等流病学相关信,落实密切触者的追踪定,防止疫传播扩散,定本指南。、调查目的 (一)查找感染来源,握、追踪和理密切接触🎖️。  (二)分析传播链️⃣传播特征。 (三)及时发现潜在的险人群及其征、范围,针对性地开宣传教育和合干预。二调查对象 疑似病例、诊病例和聚性疫情。三👟调查方法和容  通过💇‍♀️阅资料,询病例、诊治生、家属和情人等进行👏行病学调查如病例的病允许,调查🦂应先调查病本人,再对-诊治医生、属和知情者🌵行调查。 开展个案调🟪时,要认真🔯详细了解和🎾录病例基本息、发病就情况、临床现、转归及🌐验室检测信;发病前21天内与可疑染来源的接🥁史、接触场及接触方式发病后至隔治疗前的具活动地点、其有皮肤或膜直接接触-,以及发病4天内与其有性接触者。 (一)基本情况。如姓、性别、年🏃‍♀️、住址、国、联系方式。  (二)发病就诊情🧷。临床表现*️⃣实验室检测发病就诊经和病情变化转归。  (三)感染来源调查。对病发病前21天内的暴露史展调查,包境内外猴痘例报告地区🎠行史或居住🧑🏾‍🤝‍🧑🏽,对可疑的🚁染来源要详询问接触时🚳、方式、频🦯、地点及接时采取的防措施等,特是性接触史调查时,若现调查表中🏏列入,但具🍤重要流行病😯意义的内容🕉️应进行详细问和记录。 (四)密切接触者调查判定。对病传染期的活情况和人群触情况进行踪和排查后🦦判定其密切触者。密切触者判定和理按照《猴🙆密切接触者定和管理指》(附件4)执行。  见附件3-1《猴痘病例🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿案调查表》四、组织与施  按照属地化管理原则,由病现住址所在县(市、区)级疾控部门织辖区疾控构开展猴痘👺例的流行病🧘调查,就诊疗机构提供疗信息。调单位应根据🤸‍♀️查计划和调👤目的,确定查人员组成职责分工,时开展病例行病学个案查。调查过中发挥多部联防联控的同作用,尽-能获取全面确的流调信。调查期间调查人员要好个人防护五、信息的👨🏽‍🤝‍👨🏻报与分析 疾控机构完😽调查后,应好病例分析结,及时将🏖️行病学个案查表、调查告等资料逐报送上级疾机构,并做调查资料的管和存档。-例流调信息按有关规定💿严格做好信👘安全和个人私信息保护-,  附件:3-1.猴痘病例个案调查  附件4  猴痘密切🔩触者判定和理指南  -指导各地做猴痘密切接者判定和管️⃣,有效控制痘疫情的传,制定本指。一、密切🐌触者判定标📑  密切接👨‍🏫者是指直接🦽触病例的病部位及其被⛱️染物品,或染动物及其泌物、渗出等污染物的🦸‍♂️员;以及职暴露或长时🎱近距离吸入,,例呼吸道飞等,经评估感染风险的员。具体情包括:  1.与疑似病例或确诊病例☎️病后有皮肤黏膜直接接🦋的人员,接方式包括性触、抚摸、抱和亲吻等  2.与有皮疹症状的似病例或确-病例共用衣、被褥、餐等物品的人🈶;  3.医疗诊疗、采或实验室检🙂等操作过程可能暴露于毒,经评估😈感染风险的疗卫生工作📠员;  4.与疑似病例🦉确诊病例发前4天内有性接触,并经🏏行病学调查🥥业人员评估-感染风险的😾员,亦可判为密切接触;  5.在狭小密闭空💇‍♂️与疑似病例确诊病例长间近距离接(如长时间共处同一封闭间),经流行病学调查专❕人员评估有染风险的人🍧,亦可判定密切接触者  6.接触感染猴痘病的动物及其🤫泌物、渗出🛐等污染物,🙆‍♂️未采取有效人防护的人;  7.其他可能存在毒暴露风险🎎人员。二、切接触者管  1.管理期限与方式⏲️病例发现地控机构或密🚔接触者所在疾控机构应追踪到密切触者当天及开展猴痘病核酸检测,知并指导密🛃接触者做好我健康监测🕯️健康监测期为自最后密接触之日算21天。自我健康监测期可正常生活工作,需避🦾与他人发生接触等密切触,避免捐血液等。 2.知情告知。实施健康测时,疾控构或基层医卫生机构应🧧头告知健康测的缘由、限、注意事和疾病相关🎣识,以及负随访疾控机或基层医疗🐷生机构联系👠和联系方式〰️并发放《猴密切接触者康告知书》  3.定期随访。疾控构或基层医卫生机构应第7、14、21天电话或上门主动询密切接触者😛我健康监测况,提供咨📲指导建议。现异常情况🔀及时调查处。  4.自我健康监测👕坚持每天做体温测量和🟥状监测,主症状包括发(>37.3℃)、皮疹、浅表淋巴结🔩大等。密切-触者一旦出🤨相关症状应时前往医疗⛱️构就诊或与访联系人取联系,接受🐆痘病毒核酸测。  附💹:4-1.猴痘密切接触健康告知书 附件5  猴痘消毒技指南  为一步规范猴🔜疫情相关的👖毒工作,落科学消毒、准消毒,减猴痘病毒对众健康造成📑危害,制定指南。一、源地消毒 (一)适用范围。  适于出现猴痘例后,对其能污染的场和物品进行随时消毒和末消毒。 (二)消毒原则。  1.范围和对象👲定。  根🌐流行病学调结果,确定场消毒的范和对象。对例在住院、运期间可能染的环境和品,进行随消毒。对病居住或活动的场所,如住场所、工🥳场所、学习🤚所、诊疗场、转运工具及其他可能到污染的场🥄,在其离开🏰(如住院、转院、出院、亡)进行终末消毒。  2.方法选择。  (1)诊疗用品消毒尽量选择一➖性诊疗用品非一次性诊用品应首选力蒸汽灭菌🦍不耐热物品选择化学消剂或低温灭设备进行消或灭菌。 (2)手消毒。建议使用消毒剂揉搓手进行消毒也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒🤴。  (3)环境和物体面消毒。可择含氯消毒、二氧化氯过氧乙酸、氧化氢等消剂擦拭、喷或浸泡消毒  (4)衣物、床单等织品消毒。选择热力消🍳、含氯消毒或季铵盐类毒剂浸泡等毒方式。 🧫(三)常见污染对象的消方法。  1.手消毒。  可选用速手消毒剂,🩰直接选用75%乙醇进行擦拭消毒;醇过敏者,可📱择季铵盐类💧有效的非醇手消毒剂。🕗肉眼可见污物时,应先🎀用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六洗手法清洗手,然后按-述方法消毒  2.皮肤、黏膜。 👩🏽‍🤝‍👩🏻皮肤被污染污染时,应即清除污染,再用一次吸水材料沾0.5%碘伏或过氧化氢毒剂擦拭消3分钟以上,使用清水清👨‍🔧干净;粘膜用大量生理水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。 3.床单、毛巾、衣服等织品。  例使用的床、毛巾、衣等纺织品,肉眼可见污物时,若需复使用,可流通蒸汽或🤤沸消毒30分钟;或用有氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消🥬剂浸泡30分钟后,按照规清洗;或其他有效的毒方法。不湿的衣物可用环氧乙烷干热方法进🥝消毒处理。 有分泌物渗出液、排物、血液、液等污染物,建议按医废物集中处。  4.餐(饮)具。  病例所使的碗、盘、、杯等餐(饮)具清除食物残渣后,煮消毒30分钟,或使用有氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后,再👯‍♂️清水洗净。😓 5.污染物。  对病分泌物、渗液、排泄物血液、体液少量污染物-用一次性吸材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒(或能达到高水平消毒的👫🏽毒湿巾/干巾)小心移除。  对病例泌物、渗出、排泄物、液、体液等量污染物应用含吸水成👮‍♀️的消毒粉或🔏白粉完全覆🏥,或用一次吸水材料完覆盖后用足的有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒🦹浇在吸水材上,作用30分钟以上(或能达到高水👨‍👨‍👦消毒的消毒🤫巾),小心清除干净。清过程中避免🏽触污染物,理的污染物-医疗废物集🎍处置。  例的分泌物应有专门容收集,用有👷‍♂️氯20000mg/L的含氯消毒剂,🎨物、药比例1:2浸泡消毒2小时。  清除污染物,应对污染🐗环境和物体面进行消毒盛放污染物容器可用有🎧氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟,然后清干净。  6.地面、墙壁。  有肉可见污染物🙂,应先完全除污染物再🩳毒。无肉眼见污染物时⛳可用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂拭或喷洒消;不耐腐蚀👭🏻地面和墙壁➗也可用2000mg/L的季铵盐类消剂喷洒或擦;消毒作用间不少于30分钟。  7.物体表面。  诊疗设🧑🏻‍🤝‍🧑🏻设备表面以🌤️床围栏、床柜、家具、把手、卫生具和家居用等有肉眼可🌫️污染物时,先完全清除染物再消毒无肉眼可见染物时,用🦳效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯毒剂,不耐蚀的物体表也可用2000mg/L的季铵盐类消剂进行喷洒擦拭或浸泡🎾毒,作用30分钟后清水拭干净。 🖲️8.污水和粪便。  在👧入市政排水👨‍💻网前需进行毒处理,消后污水应当合《医疗机水污染物排😖标准》(GB18466-2005)。  9.病例生活垃圾。 病例生活圾按医疗废处理。  10.医疗废物。  医疗👨‍🦱物的处置应循《医疗废📫管理条例》《医疗卫生构医疗废物理办法》的求,规范使双层黄色医废物收集袋装后,按常🍾流程进行处--。  11.室内空气。🚱 如经科学💌估,需对室😳空气进行消,则在无人况下,可选⚕️5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化(浓度按产品说明书)等消毒剂,按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。🩱可采用经验安全有效的他消毒方法🏊‍♀️二、注意事  现场消应确保所用毒产品合法效,所选消方法科学可。现场消毒,根据现场况和相关标要求,选择格有效的个防护装备,做好个人防🎢的前提下,格按照工作案实施消毒  消毒实🍍单位应具备🤓场消毒能力操作人员应🃏过消毒专业🌟训,掌握消和个人防护本知识,熟👩‍🎨消毒器械的🙊用和消毒剂配制等。 每次开展消工作时均应🉑好消毒记录🌉包括消毒对️⃣、消毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。同,相关部门单位应做好毒工作的监管理和评价  附件6  猴痘个人护指南  🔤加强公众、♻️情处置相关作人员和医人员的个人护,避免猴病毒暴露感,制定本指。一、居家💒离治疗的病等相关人员 (一)适用范围。  用于居家隔治疗的病例(疑似病例和诊病例)、照护人员或共居住者的个防护。  (二)居家隔离区域要求。 1.应选择有自然通风独立卫生间房间作为隔区域。  2.应配备专用的餐具,床、毛巾等床用品,消毒和口罩等个🔞防护用品,🆘视和平板电等电子设备-  3.卫生间宜配备专的洗衣机,,漏应有水封️⃣  (三)病例管理要求  1.应能够进行自我👨🏾‍🤝‍👨🏽护。  2.应每天做好温测量和症监测,避免他人共用个物品。  3.避免与他人发生性接触避免与免疫低下人员、童、老人、妇及其他人的直接接触避免与宠物动物接触,-免捐献血液。  4.外出就诊时,🏊‍♂️佩戴医用外口罩,着长长裤,确保住所有损伤肤,避免与人密切接触避免乘坐公交通工具。 (四)照护人员要求。 1.应每天做好体温测和症状监测  2.应尽量避免进入离区域。如进入隔离区,应佩戴医🚟外科口罩和次性手套,病例保持至1米的距离。在离开隔离域之后,应强手卫生,对脱下的口和手套进行💴毒处理后废🛢️。  3.在拿放和清洗🍕家隔离治疗例的床单、服和处理垃的过程中,🌷避免抖动。湿拖布拖地避免干扫。湿抹布清洁居用品表面🌳地毯应用蒸💴清洗,避免用吸尘器。 4.应将居家隔离治疗➖例的餐具、📿单、毛巾和物单独洗涤消毒,可选热力消毒、氯消毒剂或铵盐类消毒浸泡等消毒☸️式。  (五)应急处置。  1.照护人员或共同住者出现任症状或不适现,应当及🔮前往指定医-机构就诊并动报告可疑触史。  2.对其接触的物品、活动’区域等结合,,,险评估结果行消毒处理二、疫情处相关工作人  (一)适用范围。 适用于猴痘👩🏽‍🤝‍👨🏾情期间流行学调查、环🥐清洁消毒人的个人防护⭐  (二)流行病学调查员防护要求  1.个人防护装备。次性乳胶手、医用外科罩、一次性离衣等。 🕵️‍♂️2.个人防护要求。规范戴口罩,加🏑手卫生,与调查人员保至少1米的距离。  3.废物管理。查结束后,弃的个人防-装备暂存、理和处置应🐈照《医疗废-管理条例》行。  4.应急处置。🥾在调查过程出现口罩脱、直接接触病例皮肤或泌物等情况要结合被调人员的临床,断结果、空的密闭性、触的时间和离等进行风🤜评估,结合🥪险评估结果采取相应的置措施。 🏌️(三)环境清洁消毒人员护要求。 1.个人防护装备。一次🧑🏾‍🤝‍🧑🏻乳胶手套、🐶用外科口罩📺一次性隔离、防水靴套-。  2.个人防护要求🌕规范佩戴口,加强手卫🎗️,尽量减少被消毒物品直接接触。 3.废物管理。清洁消👳‍♀️结束后,废的个人防护👨‍🎤备暂存、处和处置应按《医疗废物理条例》执。  4.应急处置。如清洁消毒过👩‍👩‍👦‍👦中出现口罩👮‍♀️落、皮肤损🙍‍♂️或直接接触❣️泄物、血液🕙情况,要结被清洁消毒🐿️品的类型、触的时间和间的密闭性进行风险评,结合风险估结果,采相应的处置施。三、医人员的个人护  (一)适用范围。 适用于猴🙋‍♀️疫情期间医🌌人员及其工🧆环境的防护  (二)基本要求。 1.个人防护装备要求。👖务人员执行准预防,采经接触传播经飞沫传播病的隔离与防措施,佩️⃣一次性乳胶套、KN95/N95及以上级别的口、防护面屏护目镜、一性隔离衣等  2.环境防护要求。👒院环境的清💇‍♀️消毒应符合件5的要求。应避免干除、清扫或吸等活动。首湿式清洁方️⃣。  3.废物管理。个防护装备、🃏例敷料等暂🤍、处理和处应按照《医废物管理条》执行。 附件7  猴痘病毒实验检测技术指🤵  为指导级疾控部门其他相关机🍱规范开展猴病毒实验室测工作,快🐦、准确识别痘确诊病例制定本指南本指南主要💷绍标本采集🌛及猴痘病毒🐱酸荧光定量PCR检测方法、生物安全求等内容。🙍‍♂️、检测对象 (一)猴痘确诊病例和🔟似病例; (二)密切接触者;  (三)感染或疑似感染猴痘👨🏾‍🤝‍👨🏻毒的动物; (四)环境或其它生物料。二、技人员基本要  (一)采样人员。从👽猴痘病毒核检测标本采👢的技术人员💗当经过生物全培训,培合格后方可事采样工作采样人员应🖼️悉采集标本类和采集方,熟练掌握本采集操作程及注意事,做好标本😢息记录,确标本质量符要求、标本相关信息可🔻溯。  1.采样人员个防护装备要🙁:KN95/N95及以上级别的口罩🧛防护面屏或🈳目镜、一次💂‍♀️隔离衣、一性乳胶手套(尽可能戴两)、靴套;如果接触了病🦝血液、体液分泌物或排🤥物,应及时换手套。污🥠采样人员可据实际工作Ⓜ️要,适当降防护级别。🎙️ 2.住院病例的标本由👨‍🚀在医院医护员采集,根实验室检测作的需要,结合病程多采样。  3.密切接触者标本由当地🥃控机构或医机构专业人采集。  4.感染或疑似感染猴痘病🦦的动物由当疾控机构协动物疫控部专业采样人负责采集。😫 5.环境或其它生物材标本由相关🔫业采样人员👏责采集。 (二)检测人员。实验室😟测技术人员具备相关专大专以上学或具有中级以上专业技资格,并有2年以上实验工作经历,📈受过核酸检相关培训,训合格后方从事检测工。实验室配的工作人员🔊量应与所开检测项目及本量相适宜确保能够及、熟练、准地开展实验检测和报告果。三、标采集、保存💻运输  (一)标本采集种类。  1.首选标本是肤(黏膜)病变部位标本📃包括病变表拭子、痘疱或痘疱渗出拭子、痘痂痘痂拭子等--  2.呼吸道标本,如咽拭子,可于病例急性检测,也是切接触者检最常用标本  3.发病急性期可采👬🏿EDTA抗凝血标本进行酸检测。 🔼4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检。  5.直肠拭子、尿、精液、唾等其它标本🎶用于研究,据工作需要集。  6.污水或其它境生物材料🤽‍♂️本根据实际作需要进行集。  (二)标本采集要求。  采皮肤(黏膜)病变部位标时应使用无⏳聚酯纤维、龙或类似材拭子,避免用棉拭子。集疑似病例🛌标本前应避使用75%乙醇等消毒剂洁病变部位👨‍🍳每种类型的肤(黏膜)病变应尽可能集两个以上子,每个病应同时采集体不同部位外观不同的2-3种病变标本。采集皮(黏膜)病变部位标本时🌟适当用力。肤(黏膜)病变部位、痘或分泌物等同拭子标本放置于不同🍿采样管中。行病毒分离-应采集干拭标本(无采样液)或以非灭活型病毒采📅液保存。根实验室活动质确定使用灭活型或灭型采样液采标本。  (三)标本采集方法。  1.斑疹、丘疹、水疱或脓🥘等皮肤(黏膜)病变部位标本:一手紧采样拭子尾,手与拭子♀️部保持一寸上距离。采时适当用力压拭子,在损表面来回拭至少2-3次,然后以🚢子另一面再复擦拭2-3次。如果在,,拭过程中痘破裂,要确采集到痘疱。采样后将子放置于无采样管中(可含病毒采样或不含液体),折断拭子🥻,去除拭子部,盖上管,以消毒纸🦎擦拭消毒采管,以封口密封管盖后采样管保存送检。  2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本:采样🌱应确保实验可检测此类本。使用无镊子或其他头器械夹取✂️部痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮,放置干燥、无菌采样管中,样完成后以可贴覆盖患。  3.口咽拭子标本被采集人员🤬部微仰,嘴大,露出两🐓扁桃体,将子越过舌根在被采集者侧扁桃体稍用力来回擦至少3次,然后再在咽后上下擦拭至🧞‍♀️3次,将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中置于不含液(干拭子)的无菌管中,🐉部弃去,旋👩‍🦲管盖。  4.血液标本:尽量采集急期(发病7天内)的血液标本,建议使含EDTA抗凝剂的真空血管采集5mL全血,可利用全血进行测,或室温置30分钟后,1500-2000rpm离心10分钟,收集血于无菌管中行检测。 5.血清标本:用真空负采血管采集🕙液标本5mL,室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集血清于无螺口塑料管。第一份血🍉应尽早(最好在发病后7天内)釆集,第二份血清应-发病后第3-4周采集,采集血液标本5mL后室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集血清♏无菌螺口塑管中,用于痘抗体检测  6.其他标本:依据计需求规范集。  (四)标本保存。  标本应收集后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下),并尽快进行检测可在1周内检测的标本可于4℃环境中保存;1周内无法检测的🙀本,短期可于-20℃环境中保存,-,期应置于-70℃或以下环境中保存。血分离血浆冷藏(2-8℃),分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存应设立专库专柜单独保标本,避免复冻融标本🏛️  猴痘病🚪及其相关标应由专人管🥨,准确记录毒及标本的源、编号、🙆量等信息,体要求可参《病原微生菌(毒)种保藏数据描述则》(T/CPMA011-2020)。应采取有措施确保病及标本安全严防发生误、恶意使用被盗、被抢丢失、泄露事件。  (五)标本送检。  标本集后应尽快低温条件下(冰袋或干冰)送往实验室如需长途运标本,应采干冰冷冻运方式进行保。  1.送检标本:病标本先由省🤬及以下疾控🚺构进行初步测,各省首猴痘阳性标👩🏻‍🤝‍👨🏼应送中国疾中心病毒病复核。每个性病例至少集一套标本(皮肤或黏膜变部位标本口咽拭子标及急性期、🐧复期双份血标本)送中国疾控中心病病所检测。↘️省级疾控机根据实际情制定省内样🦹‍♀️送检、复核程。  2.病原体及标👞运输:  (1)国内运输。猴痘病毒👨‍✈️其他潜在感性生物材料运输包装分属于A类,对应的联合国号为UN2814,包装符合国际民航👄织文件Doc9284《危险品航空安🛣️运输技术细》的PI602分类包装要求,通过其👩‍🏫交通工具运的可参照以🏯标准包装。痘病毒或其潜在感染性🏴󠁧󠁢󠁷󠁬󠁳󠁿料运输应按《可感染人的高致病性原微生物菌(毒)种或样本运输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运书》。污水环境标本暂😤普通生物样运输标准执。  (2)国际运输。痘毒株或样在国际间运🌪️的,应规范装,按照《入境特殊物卫生检疫管⚽规定》办理🚴‍♀️关手续,并足相关国家国际相关要。四、猴痘,,毒核酸检测🙂求及流程 (一)实验室资质要求。 开展猴痘毒核酸检测实验室,应🧹符合《病原生物实验室物安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因增检验实验🤜管理办法》(卫办医政发2010〕194号)有关规定,具备区的市级卫健康部门备的生物安全级(BSL-2)实验室及以上实验室件,并备案痘病毒相关验活动。独设置的医学验实验室还💡符合《医学验实验室基标准(试行)》《医学检实验室管理范(试行)》等要求。 开展猴痘病👨🏿‍🤝‍👨🏻分离、培养中和等涉及毒扩增、使等实验操作实验室应具↗️国家卫生健委批准的生安全三级(BSL-3)实验室及以上验室条件,👇获得猴痘病➰实验活动批。分离的猴病毒应送国病原微生物藏中心/国家病原微生物源库病毒分🦞保藏。  (二)实验室生物安全要求  根据2006年公布实施的《人间🦕染的病原微物名录》(简称《名录》),猴痘病毒物危害分类第一类,是种高致病性毒。按照《录》要求,🚷痘病毒的分、培养等涉病毒扩增及📦用的实验操需在BSL-3及以上实验室的生物安柜内进行;灭活采样液集的猴痘病样本的灭活🚹BSL-3实验室进行;本灭活后猴,-病毒DNA提取、检测可BSL-2及以上实验室PCR检测的专门区域或间进行。如名录》更新开展猴痘病操作的实验生物安全要🕖应按最新《录》执行。水样本的灭参照普通生样本。  (三)实验室分区要求。 原则上开展痘病毒核酸测的实验室当设置以下域:试剂储和准备区、💸本制备区、增和产物分区。三个区在物理空间应完全相互立,空气应向流通。各🕺功能分别是🥩  1.试剂储存和准备:贮存试剂制备、试剂分装和扩增应混合液的备,以及离管、吸头等🙅‍♀️耗品的贮存准备。  2.标本制备区:转运桶开、标本灭活核酸提取及🗂️入至扩增反🧑🏼‍🤝‍🧑🏼管等。  3.扩增和产物分析区:核🦯扩增和产物析。  根使用仪器的能,区域可当合并。如用标本处理核酸提取及😙增检测为一✋的自动化分仪,标本制区、扩增和物分析区可⛷️并。  (四)主要仪器设备。  实室应当配备🦃开展检验项👩‍🦼相适宜的仪🦧设备,包括二级生物安柜、高速台👩🏽‍🤝‍👨🏿离心机、干恒温器、荧☄️定量PCR仪、计时器、🚄液器。  (五)实验室猴痘病毒核酸测流程。 实验室接到本后,按照📙准操作程序行试剂准备标本前处理核酸提取、酸扩增、结分析及报告实验室应当立可疑标本阳性标本复流程。  1.试剂与材料。  (1)标本:包括变表面拭子👬🏽痘疱液或痘️⃣渗出液拭子🎳痘痂或痘痂子、咽拭子全血或血浆标本。  (2)核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒):组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。  (3)核酸检测试剂:  😮试剂:DNA聚合酶或预的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。  ②猴痘病检测引物、针:  ③性对照:涵💁‍♂️检测靶标序的质粒。 (4)灭菌去离子水、无乙醇  (5)消毒液  ①75%乙醇:用于手部↕️物体表面常消毒,开启-有效期为1周。  ②含👫🏽消毒液:现现配,含有🛡️氯1000mg/L的消毒液用于物体面常规消毒含有效氯5000mg/L的消毒液用感染性材料洒时的应急💁理。  (6)耗材:包括带滤芯的吸、螺旋口的心管、非螺🚰口的离心管含锆珠的粉管、PCR反应板和透明膜或PCR反应管和透明🧑🏾‍🤝‍🧑🏾。  (7)BSL-2个人防护用品包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一次隔离衣、防眼罩或面屏一次性帽子鞋套、靴套手套。  2.实验前的标本接收。 💅(1)核对被检标本编号姓名、性别🏳️年龄及检测目;  (2)待检标本的状态如有异🦻,需注明; (3)待检标本长期存在-70℃,短期存放可-20℃,避免反复冻融🤱  3.核酸检测操作步及注意事项  (1)病毒核酸(DNA)的制备  操作方法DNA提取试剂盒相应说书进行操作具体如下: ①提取试准备:第一开启试剂盒在使用前先漂洗液中加🤼‍♂️无水乙醇,入体积参照🔒上标签。所-试剂在使用应平衡至室;所有离心骤应在室温进行。  处理样本: A.痘疱液:干拭子标需以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本,加入80μL缓冲液,总量为180μL;标本体积不足100μL时用缓冲液补足体积至180μL;  B.病变皮疹或痘痂:取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体👩‍🔬含PS的PBS,研磨或匀浆处理,取80μL,然后加入100μL缓冲液;  C.咽拭子、其它拭子🚶从采样液中200μL标本,干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬,混匀’取200μL;  D.全血或血清:接取200μL标本。  ③加入20μL蛋白酶K溶液,混匀,液会变清亮若样本为病皮疹或其它织时,加入白酶K混匀后,在56℃放置,直至组,溶解,再进🍙下一步骤。🚙 ④加入200μL裂解缓冲液,充分👨🏾‍🤝‍👨🏻匀,70℃放置10分钟,或至溶液变亮,简短离以去除管盖👩‍🎨壁水珠。 需注意:加🥋裂解缓冲液可能会出现色絮状沉淀在70℃放置后会消失。溶液未变清,说明细胞解不彻底,🙅能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。  加200μL无水乙醇,🐌分混匀,此🚄可能会出现状沉淀,简离心以去除盖内壁水珠👑  ⑥将上-,步骤所得溶🧺和絮状沉淀加至吸附柱(吸附柱放入废液收集管📍),8000rpm离心1分钟,弃废-。  ⑦加500μL漂洗缓冲液1(使用前先检是否已加入水乙醇),8000rpm离心1分钟,弃废液。 🧚⑧加入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是否💓加入无水乙),最大转速13000rpm离心3min,弃废液。  ⑨将附柱放回废收集管中,大转速13000rpm离心1分钟,尽量去除漂洗。  ⑩将👨‍🏭附柱转入一干净的离心中(需自行准备,试剂盒未提供),加入50μL洗脱缓冲液或菌去离子水室温放置2-5分钟,8000rpm离心1分钟。收集滤出液,好标记,4℃或-20℃(短期)保存备用,-70℃长期保存。 (2)核酸检测:实时☃️光定量PCR(qPCR)方法检测猴病毒核酸(PCR实验室进行)。  ①反应体系的备:每孔20μL,加入5μL样本DNA,共计25μL;每次PCR反应,除检测标本外应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照;💁‍♀️有样本,包对照,应设孔。  ②样:每根反管中加入核或对照各5uL,盖紧管盖或封好透明-,置于荧光量PCR检测仪上。  扩增条件设🙇‍♀️:  ④仪检测通道选📗:使用荧光🥜量PCR检测仪,选择Fam荧光信号检测通道,收设在60℃。具体设置方参照各仪器用说明书。🕯️ ⑤结果分😑阈值设定:用荧光定量PCR检测仪进行结果分析,基线取3-10或6-15个循环的荧光信号,阈🔶设定原则为值线刚好超正常阴性对-扩增曲线最点,也可根🕚仪器噪音情🤣调整阈值。 (3)核酸检测结果判  ①Real-timePCR反应系统的质量控:反应结果同时符合以2个条件,否则试验结果效,应重新展检测。阴🌓对照无扩增为阴性。阳对照未出现性结果。 🩱②结果判定  A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值;  B.灰区:一孔Ct值>37;  C.阳性:双孔Ct值<37。  所有阳和处于灰区标本应重复测或经序列析进行确诊需注意:当本仅为咽拭或血清、血,且检测结🤷‍♀️为阴性时,🦖结合临床症🔟,慎重做出性诊断。 (4)表格记录  做好光定量实时PCR方法检测猴痘病毒核,,,原始记录。 五、猴痘毒全基因组💍序  1.测序标本选取-则。本土疫中的首发或🍃期病例、与🎼期病例有流-病学关联的键病例、感来源不明的👩🏻‍🤝‍👨🏿土病例、境-输入病例阳标本等。以标本在核酸🏇光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。  2.测序要求。以省为单确定开展猴病毒全基因🤶测序的机构建议使用扩子技术进行痘病毒全基组测序。测📮数据经质控格后方可用🙀后续生物信分析。二代序平台覆盖-,度应不低于10×,三代测序平台覆盖🤡度应不低于50×,全基因组测序覆盖应不低于98%。数据比对分析推荐参👫🏽猴痘基因组NC_063383.1。  各省应建本省输入、🦦土病例猴痘毒基因组数库,应具备列对比分析力。具备测条件的省份在接收标本48小时内开展测序工作关键样本要实验室收到-本后1周内提供测序结果告,所有测原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结🔋报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中病毒病所进序列汇总、💎析。病毒病应将序列分结果及时反各省,并将国猴痘病毒列汇总、分结果及时上🗽国家疾控局  3.分子分型。推荐用在线分析具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行子分型。 附件:  7-1猴痘病毒检测标本送🎵表  7-2猴痘病毒标🥮序列测定结报告单【编-:孙静波】
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