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  中新7月27日电据国家🌐控局官方-,信消息,进一步做猴痘防控作,及时效应对猴💅疫情,提猴痘防控作的科学🎨、精准性👩‍💼有效性,🍱实维护人群众生命📯全和身体康,国家🕔控局会同家卫生健委制定并👩‍🔬7月26日印发《猴防控方案💽。其中提,2023年6月以来,我国多省份先后告多例猴病例,引新增本土发疫情和匿传播的险较高。坚持“预🚽为主、防🤠结合、精防控、快处置”原,落实“发现、早告、早隔😊、早治疗🟤措施。 《猴痘防🥼方案》全如下:猴👽防控方案 猴痘是猴痘病毒(Mpoxvirus,MPXV)感染所致一种人兽患病。2022年9月,我国报💖首例猴痘入病例。2023年6月以来,国多个省先后报告例猴痘病👨‍👨‍👧‍👧,引发新本土续发情和隐匿播的风险🕹️高。为指各地科学准做好猴,,,防控工作😁切实维护▫️民群众身⚪健康,制🦱本方案。、总体要👸  坚持预防为主防治结合精准防控快速处置👩‍🚒原则,落“早发现早报告、隔离、早疗”措施🕛开展医疗👭🏾构、重点群、入境员和重点所等多渠监测。加🦮疫情分析风险研判有针对性🔲开展重点群健康教💁‍♀️和综合干。落实病隔离治疗流行病学查和密切👩‍🦱触者追踪👙理等措施’坚持发现起、控制起,及时断疫情传🚀。二、疾特征  (一)病原学特征。 猴痘病毒于痘病毒正痘病毒,为基因👷全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发该病毒。1970年在刚果民主⏏️和国一名-似天花患的标本中次分离到痘病毒,首例确诊🍡人类猴痘例。  🦻痘病毒分-两个进化🟫支:(1)分支I,曾称为中非支或刚果地分支;(2)分支II,曾称为西非分支进一步分IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方流行区猴,暴发疫情🧀毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现🔨多亚分支包括A.1、A.2和B.1等亚分支,2022年9月我国报告例输入性痘病例以,各地报-中国疾控心病毒病的毒株序均属于IIb分支。  猴痘病⚓耐干燥和🔹温,在痂、土壤和物、床上品等物体面可生存月。该病🐱对热敏感🥁加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂过氧乙酸常用消毒👕及紫外线有效灭活毒,对过化氢、次酸钠、戊醛、邻苯🆚甲醛等敏。  (二)流行病学特征。 1.传染源。猴痘病🌗的宿主尚明确,目认为非洲齿类动物(非洲松鼠🧖‍♀️树松鼠、🕕比亚袋鼠睡鼠等)可能为其自宿主。传🌧️源包括猴病例及感的啮齿类物、猴和等灵长类物。  2.传播途径。猴痘病主要经黏和破损皮↗️侵入人体主要通过🖐️接接触病🌳的病变皮或黏膜传,亦可通接触被病污染的物🐖、长时间距离吸入例呼吸道🧚‍♀️沫传播,💂触感染动的呼吸道泌物、病渗出物、🌅液及其它--液,或被🦉染动物咬、抓伤感☪️传播。 🌦️3.易感人群。人群遍易感。📹种过天花苗对猴痘❎毒存在一程度的交-保护力。 4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫🟢主要在中和西非地呈地方性-行,主要过接触感动物传播所引发的传人疫情🍜播链较短⚫主要为儿及青壮年散发病例聚集性疫,通过家🐤或旅行方🩺偶尔播散其他国家地区。2022年5月以来全球🆑国暴发的情主要在男性行为群(Menwhohavesexwithmen,简称MSM,指与同性发⬛性行为的性)中经性接触传播大部分病为青壮年🤶性,通过型聚会以后续在社👁️的MSM扩散,并传至全球多国家和地。  (三)临床特征。  1.潜伏期:5-21天,多为6-13天。  2.传染期:病例出症状后至🦿疹结痂自脱落并形新皮肤前有传染性🎣有调查提一些病例能在出现💊状前1-4天存在传性。  3.早期症状:可出现热、头痛背痛、肌🛐和淋巴结⛹️‍♀️大等。 4.皮疹和黏膜疹:常在热退出现,有🔚病例可出在全身症⛲之前。皮🍈发生常经斑疹、丘🛹、水疱、疱、结痂🔴痂皮脱落🤢个阶段,同形态皮可同时存,可伴有显痒感和🧍痛。可累♨️口腔咽喉膜、肛门生殖器、膜和角膜🤾‍♂️。痂皮脱🤔后可遗留斑或色素着甚至瘢,瘢痕持🧢时间可长数年。 💂5.病程及严重程度猴痘病程🔑2—4周,免疫力低-患者的病可能较长猴痘为自性疾病,多数病例状会自行-,失,也有-症和死亡生,主要🍼儿童、孕和免疫力下人群。🟧 2022年以来全多国猴痘🍴发疫情中大多数病临床表现轻,部分▫️例无全身🧱状,皮疹🤷‍♀️限于生殖、肛门直黏膜部位-死亡病例要为未得治疗的艾病病毒感者等免疫低下人群2022年以来全球地方性流🍦区病例的🥓死率约为0.1%。三、宣传教与干预 针对重点群、出入人员和一人群等不人群分类展宣传教,有针对🕯️地加强不人群的自防范意识个人防护施,积极合做好防💟工作。 (一)重点人群。各卫生健康📒疾控部门🥥合相关社👩🏽‍🤝‍👨🏾组织,充借鉴艾滋防治综合🙋‍♀️预经验和务模式,,-MSM经常出入的酒、会所、池等重点动场所,展同伴教。借助大媒体、MSM社交网站等互联网📦台,开展痘防控知宣传教育提高重点群防范意,减少高🍖行为,引有可疑接史者自觉好自我健监测,增主动就诊❔识。  点人群宣干预要求见附件1《重点人群传干预指》。  (二)出入境人员。通发放宣传🏌️料等形式加强出入😳人员猴痘控知识宣⚠️教育。提出境人员⏬注目的地家和地区🤩痘疫情信-,不接触🏈痘样症状🦮及啮齿类灵长类等物。提醒自猴痘疫👊报告国家地区的人🗂️,如在境有可疑接史,入境🚹21天内应做好自我-康监测,免与他人生密切接🪑,一旦出🧑🏿‍🤝‍🧑🏾发热、皮、淋巴结大等猴痘症状,应动就诊并实报告流💮病学史。◻️ (三)一般人群。地充分发新媒体以🐕广播、电🧟、报纸等统媒体作🗄️,开展猴防控知识传教育,🐉高公众科防范意识四、疫情测和报告 (一)监测病例定📳。  1.猴痘样症--者。不明因急性皮(面部或口腔黏膜、🦨肢、生殖或会阴、周等部位),伴发热(>37.3℃)或淋巴结肿大者  2.疑似病例。🧑‍🤝‍🧑痘样症状,发病前21天内具备以下流行🦃学史中的何一项:(1)有猴痘病例报告区旅居史(2)有猴痘确诊病或疑似病,-接触史;(3)有同性性行为,性伴有同🧑🏿‍🤝‍🧑🏾性行为史📜(4)有地方性流行可疑动物🐰触史。 3.确诊病例。猴痘👨‍🦳症状者、似病例及🥝切接触者经实验室测猴痘病,,,核酸阳性病毒分离性者。 (二)多渠道监测。〰️ 1.医疗机构监测各级各类疗机构要展猴痘样状监测,其是皮肤(性病)科、肛肠科、👭🏽滋病自愿询检测门等要重点🆓注猴痘样🩱状者。发♨️猴痘样症者,应主询问流行😯学史,记患者现住🥠及联系方,采集标送疾控机进行猴痘酸检测。备猴痘病➿检测能力猴痘病毒验活动资的医疗机也可开展测。  2.重点人群监测。各,各类医疗😟构、疾控构在对MSM等重点人群开展诊或检测咨服务时,主动询问否有猴痘👩‍🚒症状及其🙅‍♀️疑接触史如发现猴👦样症状者💔疑似病例应及时采⛵标本进行痘病毒核👨‍👩‍👦检测。 3.入境人员监测。关收到猴相关异常康申报或疫发现有📗痘样症状▪️入境人员应及时进🔒标本采集核酸检测🧭并发放《诊方便卡,要求其快就诊;于核酸检阳性者,相关信息报辖区疾机构,由🐡关部门进步调查处。  4.重点场所👫🏾水监测。👨‍🔬条件的地🏃‍♂️可根据当疫情形势👿经评估对MSM经常出入的酒吧会所、浴等重点活场所开展水监测。 (三)病例报告。- 相关医机构根据床表现、行病学和🥀验室检测果,及时🚵‍♂️患者进行🥯断。  👭🏻断的疑似例和确诊🈷️例应于24小时内通中国疾病♏防控制信😥系统的监报告管理块进行网🍺直报。如境外输入🎾例需填写🧟‍♀️入来源国✒️或地区。具备网络报条件的疗卫生机,-,需在规时限内将染病报告信息报告地乡镇卫院、社区🍒生服务中或县级疾🥏机构进行🎒络报告,🧸时传真或🌉送传染病告卡至代单位。负病例网络😮报的医疗生机构,根据实验🐦检测结果🥿流调进展🏙️时对病例息进行复、订正。🤬 各县(市、区)出现首例猴痘诊病例或🍟2例及以上存在流行🚽学关联的⛔诊病例,当在2小时内通过突📇公共卫生件报告管信息系统告,事件👩‍❤️‍👩别选择“🍏分级”。、疫情处😕  (一)病例管理  各地现猴痘疑病例和确病例应当时转运至😓疗机构进🎏隔离治疗如临床症🏹明显好转👨‍🎨病变部位结痂,可🎾为居家隔🧟治疗,直皮疹结痂💹然脱落,除居家隔。对病情💱轻且具备😲家隔离治条件的确病例,经🚆疗机构与控机构联评估后,🎳直接采取🧚‍♂️家隔离治。对于实👀居家隔离疗的确诊例发放《痘病例居隔离治疗康告知书(见附件2)。确诊病例居家隔治疗期间单人单间住,避免家人有皮或黏膜直接触,做被污染物的消毒,⚡必要不外,确须外,时穿长衣裤、佩戴🥗用外科口,避免前人群聚集🙈所,避免❤️其他人有肤或黏膜接接触;定医疗机安排专人责上门或📙话随访,🔞供健康咨🏸和医疗指。  (二)流行病学调查。 ⛹️县(市、区)级疾控机构接到辖👮‍♀️疑似病例确诊病例👩🏽‍🤝‍👨🏻告后,及组织开展行病学调,查找感来源,掌、追踪和🦦理密切接-,-者,分析播链及传特征,及🩸发现潜在风险人群🆖其范围、征,有针性地开展传教育和合干预。查过程中挥多部门防联控的🪁同作用,可能获取面准确的调信息。 调查内主要包括例基本信、发病就🏳️情况、临表现、转🗓️及实验室🎴测;发病21天内与可疑感染源的接触、接触场及接触方,;发病后隔离治疗的具体活地点、与🚆有皮肤或🐞膜直接接🔳者,以及🖥️病前4天内与其有性触者。 猴痘疫情👩‍🦰行病学调🌟要求详见件3《猴痘疫情流行-,学调查指🦁》。  (三)密切接触者的判和管理。🚶‍♂️ 1.密切接触者定。直接接病例的病部位及其污染物品👷‍♂️或感染动及其分泌⛏️、渗出物污染物;及职业暴或长时间距离吸入例呼吸道沫等,经🔌估有感染险的人员  2.密切接触者🦿定。根据🧛‍♂️行病学调及暴露风评估结果疾控机构🦙责及时对切接触者行判定。🧗 3.密切接触者管。疾控机🏋️‍♂️或基层医卫生机构导密切接者做好自健康监测🧙‍♀️健康监测限为最后切接触之起21天。  密切🕷️触者自我🧇康监测期可正常生🔇与工作,避免与他发生性接等密切接,避免捐血液等;持每天做体温测量症状监测出现猴痘症状应及🚙就诊并主报告可疑触史。辖💽疾控机构基层医疗生机构应密切接触自我健康测第7、14、21天上门或电对其进行🦹‍♀️访,提供询指导,现异常情及时进行🏍️置。  切接触者🦗定管理要详见附件4《猴痘密✨接触者判和管理指》。  (四)消毒与人员防护⛹️‍♀️  做好🐲例衣物、,巾、床单餐具等个用品,以可能被病😅分泌物、⏰出物、体,等污染的🦾境和物体面的消毒从事病例治护理、行病学调、环境清消毒、标采集和实室检测等作人员在作期间做🏏个人防护  消毒人员防护🧤求详见附🎼5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个防护指南。六、实室检测 猴痘病毒酸检测首皮肤或黏病变部位本,可同🧜‍♂️采集口咽✋子标本。省首例猴🐺确诊病例🎾本应送中👩🏾‍🤝‍👨🏻疾控中心🍘毒病所进复核;本疫情中的发或早期诊病例、💕早期病例流行病学🌭联的关键诊病例、染来源不,-的本土确病例、境输入确诊例阳性标🌅等,荧光量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因-序。所有🦀序原始数💎、组装序及测序样送检单应获得序列48小时内报送中国疾中心病毒📵所进行汇、分析。上确诊病应至少采一套标本(包括核酸测阳性者皮肤或黏🧑🏿‍🤝‍🧑🏼病变标本😴口咽拭子本以及发急性期和复期双份清)送中国疾控中心毒病所。 实验室测具体要详见附件7《猴痘病实验室检🌯技术指南-。七、院,,,感染控制 医疗机应当严格-,好院内感控制。疑病例和确病例应安在隔离病🐢,疑似病👺单间隔离医务人员行标准预,采取经触传播和🥅飞沫传播病的隔离预防措施👩‍🏭佩戴一次乳胶手套KN95/N95及以上级别的😈罩、防护👨‍💻屏或护目🈂️、一次性🚹离衣等,🏙️时做好手,生。严格⛎照《医疗构消毒技,,,规范》对例的体液血液、排物、分泌🦼等进行规📁处理,做诊疗环境(空气、物表面、地等)、医疗器械、病使用物品的清洁消。根据《疗废物管条例》《疗卫生机医疗废物理办法》好医疗废🍴的处置和©️理。八、作要求 (一)加强组织协调各地卫生康、疾控🔈门加强与关等有关门的密切作和信息享,及时🔀现与处置痘疫情,实猴痘病发现、疫--报告、诊隔离、密接触者追💳管理等工,防止疫扩散和蔓✋。各地在痘疫情防👮‍♂️过程中应意保护病、密切接者和重点群等个人私。  (二)加强宣传引导。地要及时布辖区猴疫情相关息,做好策解读和’众健康提。通过多🌮方式和渠开展猴痘🕧控知识宣,加强重🧴人群宣传育的针对👨‍👩‍👧‍👧和实效性及时回应会关切,-,导公众科认识猴痘  (三)加强人员训。各地加强对各🗻疾控机构医疗机构业人员的训。对医人员重点展猴痘病的识别与断、病例现与报告🈴病例管理相关知识训,强化治意识。疾控人员点开展流病学调查密切接触🗺️的判定和⛳理、实验检测、重人群宣传预等相关识培训,🧰高猴痘疫--防控和应处置能力🎤  附件-  1.重点人群宣干预指南 2.猴痘病例居家离治疗健💃告知书 👩🏽‍🤝‍👩🏼3.猴痘疫情流行病调查指南 4.猴痘密切接触判定和管指南  5.猴痘消毒技术指南🥓 6.猴痘个人防护🙆‍♀️南  7.猴痘病毒验室检测👈术指南 附件1  重点人群传干预指👤  2022年5月以来,全球-地方性流🖐️区发生的痘疫情以男性行为群(MSM)为主。为充分利用国艾滋病治综合干服务体系🦻开展MSM等重点人宣传干预🥏防范猴痘情传播扩,形成常化艾滋病猴痘综合控一体化对机制,定本指南一、实施,,,略  在有艾滋病治综合干服务体系础上,综🔠运用行为干预方法手段,通宣传教育促进安全行为、动🤿检测、外服务、同-教育和互网干预等从个体、⛴️体和社会多个层面目标人群供猴痘综干预服务二、组织🕐施  各医疗机构疾控机构🟠加强重点室和艾滋🕶️自愿咨询🎩测门诊工🎎人员猴痘💶识培训,重点人群供猴痘防知识宣传💩检测咨询动员、治和关怀等务。各级-控机构应积极推动地有能力,具有良好🔼滋病防治🚫验的MSM志愿者或会组织共参与猴痘治宣传工,在工作🖨️程中注意护重点人🍀个人隐私三、形势析  各要加强对点人群猴--疫情、防现状、影因素及出💧境情况的🈸查,及时析研判猴疫情形势🎭为制定本,-高危行为预工作计提供依据👱‍♂️具体内容括:1.重点人群基🥫、活动形和特点、👯动场所、入境的时及地区等◼️2.猴痘知识、态度高危行为3.猴痘疫情水平及影响因素🦪4.猴痘防治政策及业机构已🏛️展的工作5.包括志愿者在内有关组织🔞个人已开📣的干预活;6.影响猴痘防治🤽‍♂️作的困难问题。四宣传干预🚯 (一)宣传教育。级疾控机♋或健康教专业机构供技术支,社会组’参与,共🥩研究制定㊙️合当地特💆的猴痘预宣传材料🧏‍♀️加强警示💢传教育。过大众媒、MSM网站和以移终端为载的交友软等平台,传国际、-,内及本地痘疫情信和防控知+,提高重人群猴痘👩‍❤️‍💋‍👨范意识。 (二)同伴教育。级疾控机要加强同教育员挑、招募和🎟️训,组织支持同伴🏴‍☠️传活动,强人群猴🎅风险防范识,推动动检测。期组织同教育员工🥔例会,了猴痘干预作存在的难和问题有针对性给予帮助支持。 🧥(三)外展服务。各👬🏼疾控机构预工作人定期到重🧟‍♂️人群活动所开展猴宣传、咨--、发放宣材料等外服务活动提高重点群猴痘防意识和知📘水平,推🦯重点人群强自我健🖖管理,主寻求检测询服务。,- (四)检测咨询。级疾控机通过互联🔆、同伴教、外展活🐷等多种形🦢动员有猴♨️样症状或疑接触史重点人群行猴痘检。各级各医疗机构肤(性病)科、肛肠↗️、艾滋病愿咨询检门诊发现痘样症状🎸,应主动🧔问其流行学史及性触史,记-患者现住及联系方🥚,采集标🈷️送疾控机进行猴痘酸检测,👩🏻‍🤝‍👨🏿备猴痘检能力及猴👩‍👦‍👦病毒实验动资质的疗机构也🦈开展检测对于已建互联网+HIV检测平台的地区👬可增加猴检测内容实现互联在线检测约和结果询。五、点场所干  重点😝动场所包👨‍✈️实体和虚两类场所👩🏼‍🤝‍👨🏿实体场所🤠括酒吧、所、浴池经营性场,虚拟场🥊包括移动联网和社👩🏾‍🤝‍👩🏻媒体。 (一)实体场所干预  各级控机构负组织干预作人员在地MSM经常出入的🧞‍♂️吧、会所浴池等活场所,开猴痘预防预宣传,要包括: 1.在MSM经常出入的酒吧🧙‍♂️会所、浴等实体场💅,张贴醒的健康教宣传图片设置健康育资料公栏;  2.强化个人健康责任识,开展,,,痘健康咨👭🏼,推动开自我风险🔎估;  3.提供转介服务信息告知明确--诊疗流程及相关检、医疗机📣名称、联人等信息🙋‍♀️  各地加强对猴🧭确诊病例🧮病前21天内活动过🏿场所以及水监测阳场所的干🖊️宣传,重目标人群个人隐私护,加强👩🏼‍🤝‍👨🏽社会组织伴教育员痘防治知培训,建规范的行干预流程提高自我⌚护技能。 (二)虚拟场所干。  各疾控机构责组织指当地有序展猴痘线宣传,在关网站、交媒体平及时发布⤴️更新猴痘🤸‍♀️传教育内,形成面🕖重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣干预服务系。  级疾控机支持社会织或同伴育员利用站、信箱🦐社交媒体台,组织展在线咨🔣和交流。时解答网提出的各猴痘相关题。针对同时期猴传播特点定期或不期组织专、专业人📆、同伴教员利用互网和社交体平台进在线宣教各级疾控构要定期🦳导更新相专业信息确保宣传容科学、效。  ©️件2  附件3  猴痘疫情流病学调查南  为👣导各地疾机构规范🚽展猴痘疑病例、确病例和聚性疫情的行病学调-,,及时掌病例暴露🍾、接触史流行病学关信息,实密切接👨🏾‍🤝‍👨🏼者的追踪-定,防止情传播扩,制定本南。一、🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿查目的 (一)查找感染来源🕠掌握、追和管理密👩🏾‍🤝‍👩🏻接触者。🖇️ (二)分析传播链🥝传播特征🚛  (三)及时发现在的风险群及其特、范围,针对性地👩🏼‍🤝‍👩🏻展宣传教和综合干。二、调对象  似病例、,,诊病例和集性疫情三、调查😝法和内容 通过查👨‍🦼资料,询病例、诊医生、家和知情人,,,进行流行学调查。病例的病允许,调时应先调病例本人再对其诊医生、家和知情者行调查。 开展个调查时,认真、详了解和记🚏病例基本息、发病诊情况、床表现、归及实验检测信息发病前21天内与可-感染来源😰接触史、触场所及👭🏾触方式;🦾病后至隔🦿治疗前的体活动地、与其有-肤或黏膜👩‍👩‍👧‍👦接接触者以及发病4天内与其有性接触。  (一)基本情况。如姓名性别、年、住址、籍、联系式等。 (二)发病就诊情况临床表现🎞️实验室检、发病就经过和病变化与转。  (三)感染来源调查。对例发病前21天内的暴露史开展☎️查,包括内外猴痘例报告地旅行史或住史,对🏦疑的感染源要详细✨问接触时、方式、次、地点接触时采的防护措等,特别性接触史调查时,🔧发现调查中未列入-,-但具备重流行病学义的内容应进行详⬆️询问和记。  (四)密切接触者调查及定。对病🗾传染期的🕎动情况和👩🏾‍🤝‍👨🏽群接触情进行追踪排查后,定其密切触者。密👩🏽‍🤝‍👨🏾接触者判👩‍🦰和管理按🧍‍♂️《猴痘密接触者判🤷‍♂️和管理指👅》(附件4)执行。  详见附3-1《猴痘病例个调查表》四、组织实施  照“属地管理”原,由病例🕥住址所在县(市、区)级疾控部门组织辖🚗疾控机构📻展猴痘病的流行病🏐调查,就⬆️医疗机构🚣‍♂️供诊疗信😿。调查单应根据调计划和调目的,确调查人员📂成和职责🎤工,及时😳展病例流🎸病学个案查。调查程中发挥🛺部门联防💻控的协同用,尽可获取全面😦确的流调息。调查间,调查员要做好🏋️人防护。🍕、信息的报与分析🩸 疾控机完成调查📳,应做好例分析总,及时将🙎‍♀️行病学个调查表、查报告等料逐级报上级疾控构,并做调查资料🆘保管和存。病例流信息要按关规定,👏格做好信安全和个⛄隐私信息护。  件:3-1.猴痘病例个案调查😑  附件4  猴痘切接触者🐰定和管理⛽南  为导各地做猴痘密切触者判定管理,有😎控制猴痘情的传播🤤制定本指。一、密接触者判标准  👨‍🦽切接触者指直接接病例的病💁部位及其污染物品或感染动📸及其分泌、渗出物污染物的🟤员;以及业暴露或🧵时间近距吸入病例🥢吸道飞沫,经评估感染风险人员。具🆙情形包括  1.与疑似病例确诊病例病后有皮或黏膜直接触的人,接触方-包括性接、抚摸、😴抱和亲吻;  2.与有皮疹🎥状的疑似💦例或确诊例共用衣、被褥、具等物品人员; 3.医疗诊疗、采样🧷实验室检等操作过🐐中可能暴于病毒,评估有感风险的医卫生工作员;  4.与疑似病例或确诊例发病前4天内有性🥦触,并经行病学调专业人员估有感染险的人员亦可判定密切接触;  5.在狭小密👨🏾‍🤝‍👨🏻空间与疑病例或确病例长时近距离接📷(如长时间共处同一闭空间),经流行病调查专业员评估有染风险的员,亦可定为密切🗓️触者; 6.接触感染猴痘病的动物及分泌物、出物等污🦄物,而未取有效个防护的人;  7.其他可能在病毒暴风险的人。二、密🗂️接触者管🏃‍♂️  1.管理期限与🤞式。病例现地疾控构或密切👨‍💼触者所在💍疾控机构于追踪到切接触者天及时开👢猴痘病毒酸检测,知并指导切接触者好自我健监测,健💇监测期限🚬自最后密接触之日起21天。自我健康测期间可常生活与作,需避与他人发性接触等切接触,免捐献血等。  2.知情告知。实施健监测时,👨‍👩‍👦控机构或层医疗卫机构应口告知健康测的缘由📭期限、注-事项和疾相关知识↔️以及负责访疾控机,或基层医️⃣卫生机构系人和联方式,并放《猴痘切接触者康告知书。  3.定期随访疾控机构基层医疗生机构应📵第7、14、21天电话或上门动询问密👩‍✈️接触者自健康监测况,提供询指导建🐎。发现异情况,及🐮调查处置🔌  4.自我健康监。坚持每做好体温😏量和症状测,主要状包括发👷(>37.3℃)、皮疹、浅表巴结肿大。密切接者一旦出相关症状➿及时前往疗机构就或与随访系人取得系,接受痘病毒核✏️检测。 附件:4-1.猴痘密切接触者康告知书 附件5  猴痘消技术指南 为进一⛑️规范猴痘情相关的毒工作,👻实科学消、精准消🧝,减少猴-,-病毒对公健康造成危害,制本指南。、疫源地毒  (一)适用范围。  适于出现猴病例后,🚖其可能污的场所和品进行的时消毒和末消毒。 (二)消毒原则。 1.范围和对象确。  根流行病学🖨️查结果,定现场消的范围和象。对病在住院、🤦‍♂️运期间可污染的环和物品,行随时消。对病例住或活动的场所,🐹居住场所⚛️工作场所学习场所诊疗场所🧚‍♀️转运工具及其他可受到污染场所,在-离开后(如住院、转、出院、亡)进行终末消毒。 2.方法选择。 (1)诊疗用品消毒尽量选择次性诊疗🐓品,非一🚈性诊疗用应首选压蒸汽灭菌不耐热物可选择化🚧消毒剂或温灭菌设进行消毒灭菌。 🔢(2)手消毒。建议用手消毒👄揉搓双手🤽‍♀️行消毒,可选择75%乙醇、过氧化氢等🐍毒剂。 (3)环境和物体表消毒。可择含氯消👫🏻剂、二氧氯、过氧🦸‍♂️酸、过氧氢等消毒🦆擦拭、喷或浸泡消✌️。  (4)衣物、床单等纺织👨‍👧‍👦消毒。可择热力消、含氯消剂或季铵类消毒剂泡等消毒式。  (三)常见污染对象的毒方法。 1.手消毒。  🤢选用速干消毒剂,💁直接选用75%乙醇进行擦拭消🥕;醇类过--者,可选-季铵盐类有效的非类手消毒。有肉眼见污染物,应先使洗手液(或肥皂)在流动水下按六步洗手清洗双手🍲然后按上方法消毒  2.皮肤、黏膜  皮肤污染物污🚕时,应立清除污染,再用一性吸水材沾取0.5%碘伏或过氧化氢消🦍剂擦拭消3分钟以上,使用清🔹清洗干净粘膜应用量生理盐冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒  3.床单、毛巾衣服等纺,品。  例使用的🧏‍♂️单、毛巾衣服等纺❎品,无肉可见污染时,若需复使用,🌲用流通蒸或煮沸消️⃣30分钟;或用有效500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒👨‍🚒浸泡30分钟后,按常规清洗🍤或用其他效的消毒法。不耐🧆的衣物可用环氧乙🔔或干热方进行消毒理。  分泌物、🌩️出液、排🏊‍♂️物、血液体液等污物时,建按医疗废-集中处理  4.餐(饮)具。  病例使用的碗盘、筷、等餐(饮)具清除食残渣后,’沸消毒30分钟,或用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后,再用清水净。  5.污染物。  对病🤽分泌物、出液、排物、血液体液等少🤎污染物可-一次性吸材料(如纱布、抹布)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消剂(或能达到高水平👨‍🏭毒的消毒巾/干巾)小心移除  对病分泌物、出液、排😕物、血液🍗体液等大污染物应用含吸水分的消毒🪁或漂白粉🩺全覆盖,👳用一次性水材料完覆盖后用量的有效😻5000-10000mg/L的含氯消毒,浇在吸水料上,作30分钟以上(或能达到高水平🐤毒的消毒巾),小心清除干净清除过程避免接触染物,清的污染物医疗废物👩🏽‍🤝‍👩🏻中处置。 病例的泌物等应专门容器集,用有氯20000mg/L的含氯消🎩剂,按物药比例1:2浸泡消毒2小时。  清除污🥇物后,应污染的环和物体表进行消毒盛放污染的容器可有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟,然清洗干净  6.地面、墙壁  有肉可见污染™️时,应先全清除污👬🏼物再消毒🚵‍♂️无肉眼可污染物时🥬可用有效🛋️1000mg/L的含氯消毒剂500mg/L的二氧化氯消毒擦拭或喷消毒;不腐蚀的地🔻和墙壁,可用2000mg/L的季铵盐🏨消毒剂喷或擦拭;毒作用时🐛不少于30分钟。 7.物体表面。  🥣疗设施设表面以及♂️围栏、床柜、家具👷‍♀️门把手、生洁具和🗡️居用品等🎖️肉眼可见染物时,🥙先完全清污染物再毒。无肉可见污染时,用有氯1000mg/L的含氯消毒🏀或500mg/L的二氧化氯消,,,剂,不耐蚀的物体🚈面也可用2000mg/L的季铵盐类消毒进行喷洒擦拭或浸👔消毒,作🥈30分钟后清水擦拭净。  8.污水和粪便。  进入市政🤝水管网前😣进行消毒理,消毒,污水应当合《医疗-构水污染排放标准💢(GB18466-2005)。  9.病例生活垃。  病生活垃圾医疗废物理。  10.医疗废物。  疗废物的置应遵循医疗废物理条例》《医疗卫机构医疗📉物管理办👜》的要求规范使用层黄色医废物收集封装后,🥧常规流程行处置。 11.室内空气。 如经科评估,需室内空气行消毒,在无人情下,可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢🦆二氧化氯(浓度按产🗯️说明书)等消毒剂,20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒也可采用验证安全效的其他毒方法。、注意事➡️  现场毒应确保😸用消毒产合法有效所选消毒法科学可。现场消时,根据场情况和关标准要,选择合有效的个🦌防护装备在做好个🐠防护的前下,严格💨照工作方实施消毒↖️  消毒施单位应备现场消🟡能力,操人员应经消毒专业💽训,掌握毒和个人🏴󠁧󠁢󠁷󠁬󠁳󠁿护基本知,熟悉消器械的使和消毒剂配制等。 每次开消毒工作均应做好毒记录,🥣括消毒对、消毒面(体积)、消毒剂浓(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。👩‍👦时,相关门和单位做好消毒🧵作的监督理和评价  附件6  猴痘人防护指🅾️  为加--公众、疫处置相关作人员和🚜务人员的人防护,免猴痘病,,,暴露感染制定本指。一、居隔离治疗-病例等相人员  (一)适用范围。  用于居家-离治疗的🔟例(疑似病例和确诊例)、照护人员或共居住者的人防护。 (二)居家隔离区要求。 --1.应选择有自然通👫、独立卫间的房间为隔离区。  2.应配备专的餐具,单、毛巾床上用品消毒剂和罩等个人护用品,视和平板👨‍👨‍👦脑等电子备。  3.卫生间宜配备专用洗衣机,漏应有水。  (三)病例管理要求。 1.应能够进行自我护。  2.应每天做好体温测和症状监🟩,避免与⌚人共用个物品。 3.避免与他人发生接触,避⏬与免疫力-,下人员、童、老人孕妇及其-人员的直🥴接触,避与宠物等⬆️物接触,免捐献血等。  4.外出就诊时,应佩医用外科罩,着长长裤,确遮住所有🏿伤皮肤,免与他人切接触,免乘坐公🐲交通工具  (四)照护人员求。  1.应每天做好体温测⛸️和症状监。  2.应尽量避🔳进入隔离🚨域。如需🚕入隔离区,应佩戴-用外科口🐈和一次性套,与病保持至少1米的距离🚞在离开隔区域之后应加强手生,并对🧃下的口罩手套进行🧛毒处理后弃。  3.在拿放和清洗居家离治疗病的床单、服和处理🙁圾的过程,应避免🚋动。用湿布拖地,免干扫。湿抹布清家居用品🧻面,地毯♑用蒸汽清😸,避免使吸尘器。 4.应将居家隔离疗病例的⛹️具、床单毛巾和衣单独洗涤消毒,可🧰择热力消、含氯消🦮剂或季铵🧴类消毒剂泡等消毒式。  (五)应急处置。  1.照护人员或共同居👩‍🦯者出现任症状或不表现,应及时前往定医疗机就诊并主🧈报告可疑触史。 2.对其接触的物品活动的区等结合风评估结果行消毒处。二、疫🪐处置相关作人员 (一)适用范围。 🟠适用于猴疫情期间行病学调👨‍🍳、环境清消毒人员👋个人防护  (二)流行病学🥌查人员防要求。 🌐1.个人防护装备。👩🏼‍🤝‍👨🏻次性乳胶-套、医用科口罩、次性隔离等。  2.个人防护要求。规佩戴口罩加强手卫,与被调人员保持少1米的距离。  3.废物管理。调查结🚣‍♂️后,废弃个人防护备暂存、理和处置😠按照《医,-废物管理例》执行🟢  4.应急处置。💃在调查过中出现口🎷脱落、直💎接触了病,皮肤或分🚵物等情况要结合被🆎查人员的🍆床诊断结、空间的闭性、接的时间和⛸️离等进行险评估,合风险评👭🏽结果,采相应的处措施。 🍛(三)环境清洁消毒员防护要。  1.个人防护🚲备。一次乳胶手套医用外科罩、一次🐒隔离衣、👨‍👧‍👧水靴套等  2.个人防护要。规范佩口罩,加手卫生,量减少与🔦消毒物品直接接触  3.废物管理。洁消毒结🗡️后,废弃⏺️个人防护备暂存、理和处置按照《医废物管理例》执行  4.应急处置。在清洁消过程中出🧎‍♀️口罩脱落皮肤损伤👩‍👦直接接触泄物、血等情况,结合被清🌊消毒物品🌶️类型、接的时间和间的密闭等进行风评估,结风险评估🌁果,采取应的处置🏖️施。三、务人员的🏚️人防护 🔕(一)适用范围。 适用于猴💡疫情期间务人员及工作环境防护。 (二)基本要求。 1.个人防护装备要。医务人执行标准防,采取🛃接触传播♠️经飞沫传疾病的隔与预防措,佩戴一性乳胶手🎪、KN95/N95及以上级别口罩、防面屏或护镜、一次隔离衣等  2.环境防护要。医院环的清洁消🚜应符合附5的要求。应避免干尘、清扫吸尘等活。首选湿清洁方法🚥  3.废物管理。’人防护装🚤、病例敷💯等暂存、⛩️理和处置🧕按照《医废物管理例》执行🏿  附件7  猴痘毒实验室’测技术指  为指各级疾控门和其他关机构规📱开展猴痘毒实验室测工作,速、准确-别猴痘确病例,制-本指南。指南主要绍标本采以及猴痘毒核酸荧🚤定量PCR检测方法生物安全求等内容一、检测象  (一)猴痘确诊病例和疑病例; (二)密切接触者; (三)感染或疑似👁️染猴痘病-的动物; (四)环境或其它物材料。、技术人基本要求🐗 (一)采样人员。事猴痘病😀核酸检测本采集的💼术人员应🥺经过生物🃏全培训,🍍训合格后可从事采🅾️工作。采⚫人员应熟采集标本类和采集法,熟练🏛️握标本采操作流程🦁注意事项做好标本息记录,保标本质符合要求标本及相🦖信息可追。  1.采样人员🥱人防护装-,要求:KN95/N95及以上级别的口罩🧽防护面屏护目镜、🥽次性隔离、一次性胶手套(尽可能戴两🍽️)、靴套;如果接触病例血液🏌️体液、分物或排泄-,,应及时换手套。水采样人可根据实工作需要适当降低护级别。🧆 2.住院病例的标由所在医医护人员集,根据验室检测作的需要可结合病多次采样  3.密切接触者🎏本由当地,-控机构或🙋疗机构专人员采集  4.感染或疑似🥯染猴痘病🥄的动物由地疾控机协调动物控部门专🆗采样人员责采集。 5.环境或其它生材料标本相关专业样人员负采集。 ⌨️(二)检测人员。实室检测技人员应具相关专业专以上学或具有中及以上专⛄技术资格并有2年以上实验室作经历,受过核酸👩‍👦‍👦测相关培,培训合后方可从检测工作实验室配的工作人数量应与开展检测--目及标本,-相适宜,保能够及、熟练、确地开展验室检测报告结果三、标本集、保存运输  (一)标本采集种类。 1.首选标本是皮(黏膜)病变部位标-,包括病表面拭子痘疱液或疱渗出物子、痘痂痘痂拭子。  2.呼吸道标,如口咽子,可用🧑病例急性检测,也🟠密切接触📍检测最常标本。 🕢3.发病急性期可采EDTA抗凝血标本🦷行核酸检。  4.采集发病7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用抗体检测😪  5.直肠拭子、液、精液唾液等其标本仅用研究,根工作需要集。  6.污水或其它环境生🏏材料标本据实际工需要进行👱集。  (二)标本采集要求。 采集皮(黏膜)病变部位标时应使用菌聚酯纤、尼龙或似材质拭,避免使棉拭子。集疑似病🦃的标本前避免使用75%乙醇等消毒剂清🥂病变部位每种类型🈂️皮肤(黏膜)病变应尽可能采集🌥️个以上拭👬🏻,每个病🍔应同时采身体不同🐸位或外观🚨同的2-3种病变标。采集皮♦️(黏膜)病变部位标时应适当力。皮肤(黏膜)病变部位、痘或分泌物-不同拭子🛑本应放置不同的采管中。进病毒分离◽应采集干子标本(无采样液)或以非灭活👕病毒采样保存。根实验室活资质确定用非灭活或灭活型样液采集,,本。  (三)标本采集方法。 1.斑疹、丘疹、疱或脓疱🦈皮肤(黏膜)病变部位标本:一🐃紧握采样🕛子尾部,🧑🏽‍🤝‍🧑🏼与拭子头保持一寸上距离。样时适当力下压拭🥑,在皮损面来回擦至少2-3次,然后🎸拭子另一再重复擦🍑2-3次。如果在擦过程中痘🈶破裂,要保采集到疱液。采后将拭子置于无菌🛏️样管中(可含病毒采液或不含体),折断拭子头,👫🏼除拭子尾🚑,盖上管,以消毒🏊‍♂️巾擦拭消👨‍🎨采样管,封口膜密,,,管盖后将👨‍🎨样管保存🥕送检。 2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本:采样前确保实验可检测此标本。使无菌镊子其他钝头械夹取全📶痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮放置于干、无菌的样管中,样完成后创可贴覆🕵️‍♀️患处。 3.口咽拭子标本:💻采集人员📝部微仰,张大,露两侧扁桃,将拭子过舌根,被采集者侧扁桃体微用力来擦拭至少3次,然后在咽后壁下擦拭至3次,将拭子头浸入👩‍🚀2-3mL病毒保存的管中或于不含液☸️(干拭子)的无菌管👭🏻,尾部弃,旋紧管。  4.血液标本尽量采集🧘性期(发病7天内)的血液标本建议使用🤔EDTA抗凝剂的真采血管采🌗5mL全血,可利用血进行检,或室温🤛置30分钟后,1500-2000rpm离心10分钟,收集血于无菌管进行检测  5.血清标本:真空负压血管采集液标本5mL,室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集血清无菌螺口料管中。🎱一份血清尽早(最好在发病后7天内)釆集,第二份清应在发后第3-4周采集,集血液标5mL后室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集🌜清于无菌口塑料管👴,用于猴🛺抗体检测  6.其他标本:据设计需♥️规范采集📀  (四)标本保存  标本,-在收集后1小时内冷(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下),并尽快进行🚵测。可在1周内检测标本可置4℃环境中保存;1周内无法检的标本,期可置于-20℃环境中保存,期应置于-70℃或以下环境中存。全血离血浆前藏(2-8℃),分离出的血浆于-20℃或以下环中保存。设立专库✅专柜单独⚓存标本,免反复冻标本。 --猴痘病毒👕其相关标应由专人理,准确🖥️录病毒及本的来源编号、数等信息,体要求可考《病原生物菌(毒)种保藏数据描述通🎪》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措🕞确保病毒👏标本安全🥘严防发生用、恶意用、被盗被抢、丢、泄露等件。  (五)标本送检。  本采集后尽快在低条件下(冰袋或干冰)送往实验,如需长运输标本🗒️应采用干冷冻运输🔂式进行保。  1.送检标本病例标本👨‍👨‍👦由省级及⛹️‍♀️下疾控机进行初步测,各省例猴痘阳🧑🏿‍🤝‍🧑🏽标本应送📧国疾控中病毒病所核。每个性病例至采集一套本(皮肤或黏膜病变位标本、🦥咽拭子标🏕️及急性期恢复期双🧝血清标本)送中国疾中心病毒所检测。省级疾控构根据实🍠情况制定内样本送、复核流。  2.病原体及🏌️‍♀️本运输: (1)国内运输。痘病毒或他潜在感性生物材的运输包分类属于A类,对应联合国编👩🏻‍🤝‍👨🏾为UN2814,包装符合国际航组织文Doc9284《危险品航空安👩‍🔬运输技术♐则》的PI602分类包装要求通过其他通工具运的可参照上标准包。猴痘病或其他潜👩‍👧‍👦感染性材运输应按《可感染类的高致性病原微物菌(毒)种或样本输管理规-》(原卫生部令第45号)办理《准运证书。污水等境标本暂普通生物本运输标执行。 (2)国际运输。猴毒株或样😗在国际间输的,应🍐范包装,照《出入特殊物品生检疫管规定》办📵相关手续🙈并满足相国家和国🔫相关要求四、猴痘毒核酸检🥎要求及流  (一)实验室资要求。 开展猴痘毒核酸检的实验室应当符合病原微生👭🏼实验室生安全管理👩🏿‍🤝‍👨🏾例》(国务院令第424号)或《医疗机构床基因扩检验实验管理办法(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定,具备区的市级生健康部🍣备案的生🍢安全二级(BSL-2)实验室及以上实验条件,并案猴痘病🐂相关实验👟动。独立📭置的医学验实验室应符合《学检验实室基本标(试行)》《医学检实验室管规范(试行)》等要求。  开猴痘病毒离、培养中和等涉病毒扩增使用等实操作的实🌵室应具备-家卫生健委批准的物安全三(BSL-3)实验室及以上实室条件,获得猴痘毒实验活批准。分的猴痘病应送国家🈚原微生物藏中心/国家病原微物资源库毒分库保🐦。  (二)实验室生物安全要。  根2006年公布实施🙁《人间传的病原微物名录》(简称《名🎪》),猴痘病毒生物害分类为一类,是🤾‍♂️种高致病病毒。按《名录》求,猴痘毒的分离培养等涉病毒扩增👷使用的实操作需在BSL-3及以上实验的生物安🛅柜内进行🛄非灭活采液采集的痘病例样的灭活在BSL-3实验室进行样本灭活猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验或PCR检测的专门域或房间️⃣行。如《录》更新,,,开展猴痘毒操作的🏰验室生物全要求应最新《名》执行。水样本的活参照普💕生物样本  (三)实验室分要求。 原则上开猴痘病毒酸检测的⚙️验室应当置以下区:试剂储和准备区😴标本制备、扩增和🙏物分析区三个区域物理空间🐀应完全相独立,空应定向流。各区功分别是:’ 1.试剂储存和准🪑区:贮存剂的制备试剂的分和扩增反混合液的♏备,以及🍏心管、吸等消耗品🤾‍♀️贮存和准。  2.标本制备🟠:转运桶启、标本活,核酸🚰取及加入🌌扩增反应等。  3.扩增和产物分析区核酸扩增🧚‍♂️产物分析  根据用仪器的能,区域💇‍♀️适当合并如采用标处理、核提取及扩🏉检测为一的自动化🕡析仪,标制备区、🐴增和产物析区可合。  (四)主要仪器设备。 🧙‍♀️实验室应🏗️配备与开检验项目适宜的仪🈯设备,包:二级生👱‍♂️安全柜、🍵速台式离机、干浴😓温器、荧定量PCR仪、计时、移液器  (五)实验室猴病毒核酸测流程。 实验室到标本后按照标准作程序进试剂准备标本前处、核酸提、核酸扩🕊️、结果分🐅及报告。📇验室应当立可疑标和阳性标🙂复检流程  1.试剂与材料🥻  (1)标本:包🏯病变表面子、痘疱或痘疱渗液拭子、痂或痘痂🧝‍♀️子、咽拭、全血或浆等标本🦏  (2)核酸提取🧲剂盒(基因组DNA提取试剂盒):组织基组DNA提取试剂盒🥙血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒🥒  (3)核酸检测👩‍👩‍👦‍👦剂:  试剂:DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。  ②猴病毒检测👩🏾‍🤝‍👨🏼物、探针  ③阳对照:涵检测靶标列的质粒🌻  (4)灭菌去离水、无水💛醇  (5)消毒液  ①75%乙醇:用手部和物表面常规💘毒,开启有效期为1周。  含氯消毒:现用现,含有效1000mg/L的消毒液用于体表面常消毒,含效氯5000mg/L的消毒液于感染性🦠料溢洒时应急处理  (6)耗材:包带滤芯的头、螺旋🥮的离心管非螺旋口离心管、😜锆珠的粉👩🏾‍🤝‍👨🏽管、PCR反应板和明封膜或PCR反应管和透明盖  (7)BSL-2个人防护品:包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一🔯性隔离衣防护眼罩面屏、一🍥性帽子、套、靴套👩🏾‍🤝‍👨🏻手套。 👨‍💼2.实验前的标本接🌲。  (1)核对被检标本编号🔚姓名、性🧑🏽‍🤝‍🧑🏽、年龄及🚴‍♀️测项目; (2)待检标本的态如有异🚳,需注明  (3)待检标本期存放在-70℃,短期存放可-20℃,避免反复融。  3.核酸检测操作步骤注意事项  (1)病毒核酸(DNA)的制备  作方法按DNA提取试剂盒相应明书进行🥁作,具体下:  提取试剂备:第一开启试剂📫,在使用🏋️‍♂️先在漂洗⛽中加入无乙醇,加体积参照上标签。有试剂在用前应平至室温;有离心步应在室温进行。 ②处理样:  A.痘疱液:拭子标本以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。⏳100μL样本,加80μL缓冲液,总’为180μL;标本体积不足100μL时用缓冲液补👫🏿总体积至180μL;  B.病变皮疹或🙍‍♀️痂:取1块痂皮按质🚏/体积(1mg/50μL)加入相应体积PS的PBS,研磨或匀浆处理取80μL,然后加100μL缓冲液;👩‍👩‍👧‍👦 C.咽拭子、其它子:从采⁉️液中取200μL标本,干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬,混匀后200μL;  D.全血或血:直接取200μL标本。  加入20μL蛋白酶K溶液,混,溶液会清亮。若本为病变疹或其它织时,加蛋白酶K混匀后,在56℃放置,直至组织♀️解,再进下一步骤  ④加🔼200μL裂解缓冲,充分混,70℃放置10分钟,或至溶🧘变清亮,🌦️短离心以💓除管盖内🥳水珠。 需注意:-入裂解缓液后可能出现白色状沉淀,70℃放置后会消失📐如溶液未清亮,说细胞裂解🤸彻底,可导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。  ⑤加200μL无水乙醇,分混匀,时可能会现絮状沉🦂,简短离以去除管👠内壁水珠💺  ⑥将一步骤所溶液和絮-沉淀均加吸附柱中(吸附柱放废液收集中),8000rpm离心1分钟,弃废液🥮  ⑦加500μL漂洗缓冲📰1(使用前先检查是已加入无💖乙醇),8000rpm离心1分钟,弃废。  ⑧入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查否已加入🏄水乙醇),最大转速13000rpm离心3min,弃废液。 ⑨将吸附放回废液’集管中,🔪大转速13000rpm离心1分钟,尽量🈳除漂洗液🚸  ⑩将附柱转入根干净的心管中(需自行准备试剂盒中提供),加入50μL洗脱缓冲或灭菌去子水,室👟放置2-5分钟,8000rpm离心1分钟。收集滤⛹️‍♀️液,做好记,4℃或-20℃(短期)保存备用,-70℃长期保存。  (2)核酸检测:实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病核酸(PCR实验室进行)。  ①反应体的准备:孔20μL,加入5μL样本DNA,共计25μL;每次PCR反应,除检🌮标本外,📦加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照;所有🔻本,包括照,应设孔。  加样:每反应管中入核酸或照各5uL,盖紧管或封好透膜,置于⚪光定量PCR检测仪上。  ③增条件设:  ④器检测通选择:使荧光定量PCR检测仪,选择Fam荧光信号检测通道收集设在60℃。具体设置方法照各仪器用说明书  ⑤结分析阈值🛤️定:使用光定量PCR检测仪进行结果分时,基线3-10或6-15个循环的荧信号,阈设定原则阈值线刚🎅超过正常性对照扩曲线最高🔍,也可根仪器噪音,况调整阈。  (3)核酸检测结果判断 ①Real-timePCR反应系统的量控制:应结果应-时符合以2个条件,否则试验果无效,重新开展测。阴性照无扩增⛳为阴性。性对照未🔀现阴性结🥫。  ②果判定: A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值;  B.灰区:一🐿️Ct值>37;  C.阳性:双孔Ct值<37。  所有阳性处于灰区标本应重🧿检测或经列分析进🔢确诊。需意:当标👄仅为咽拭或血清、浆,且检,,,结果为阴时,应结临床症状慎重做出性诊断。 (4)表格记录 🐖做好荧光量实时PCR方法检测猴痘病毒酸原始记。  五猴痘病毒基因组测  1.测序标本选🟧原则。本-疫情中的发或早期-,-例、与早病例有流病学关联关键病例感染来源明的本土例、境外入病例阳🥦标本等。🆓上标本在👩🏼‍🤝‍👨🏽酸荧光定PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。  2.测序要求。省为单位,-定开展猴💒病毒全基组测序的构。建议😞用扩增子⛸️术进行猴病毒全基🚩组测序。序数据经控合格后👩🏽‍🤝‍👩🏼可用于后生物信息析。二代🥦序平台覆🍳深度应不于10×,三代测序🙉台覆盖深应不低于50×,全基因组测序盖度应不于98%。数据比对析推荐参猴痘基因NC_063383.1。  各省应建立省输入、土病例猴病毒基因🦦数据库,具备序列比分析能。具备测条件的省要在接收🏛️本后48小时内开展🏠序工作,键样本要👨‍🏭实验室收标本后1周内提供测结果报告🗡️所有测序始数据(一般为fastq格式)、组装序🛫(一般为fasta格式)和标本序列测定-果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报👩🏿‍🤝‍👨🏽中国疾控心病毒病进行序列总、分析病毒病所🥵将序列分结果及时馈各省,💟将全国猴病毒序列总、分析🐡果及时上国家疾控🎴。  3.分子分型推荐使用线分析工Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株--行分子分。  附:  7-1猴痘病毒检测标本🤏检表  7-2猴痘病毒标本序测定结果告单【编:孙静波】
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  • 于娜 2024-05-15
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