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　　中新网7月27日电据国家疾控局官方微信消息为进一步做好猴-防控工作，及时🟫效应对猴痘疫情提升猴痘防控工的科学性、精准🐫和有效性，切实护人民群众生命全和身体健康，家疾控局会同国卫生健康委制定于7月26日印发《猴痘防控方案。其中提出，2023年6月以来，我国多个省份先报告多例猴痘病⚖️，引发新增本土发疫情和隐匿传的风险较高。要持“预防为主、治结合、精准防、快速处置”原，落实“早发现早报告、早隔离🤰早治疗”措施。　《猴痘防控方🛂》全文如下：猴🚄防控方案　　猴是由猴痘病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致的一种人兽患病。2022年9月，我国报告首例猴痘输入病例♈2023年6月以来，我国多个省🕌先后报告多例猴病例，引发新增,土续发疫情和隐🦮传播的风险较高🌅为指导各地科学-准做好猴痘防控作，切实维护人👩‍💼群众身体健康，定本方案。一、🚏体要求　　坚持🤦‍♂️预防为主、防治合、精准防控、速处置”原则，🕒实“早发现、早🕜告、早隔离、早疗”措施。开展🥃疗机构、重点人、入境人员和重场所等多渠道监。加强疫情分析风险研判，有针👨‍🔬性地开展重点人🧓健康教育和综合预。落实病例隔🍒治疗、流行病学查和密切接触者踪管理等措施。持发现一起、控🥄一起，及时阻断情传播。二、疾特征　　(一)病原学特征。　　痘病毒属于痘病🦨科正痘病毒属，基因组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中现该病毒。1970年在刚果民主共和国一名疑似天患者的标本中首分离到猴痘病毒为首例确诊的人猴痘病例。　　痘病毒分为两个化分支：(1)分支I，曾称为中非分支或刚果盆地支；(2)分支II，曾称为西非分支，进一步分为IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方性流行区猴痘暴发🤔情的毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较多分支，包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告首例输入性猴痘例以来，各地报🟪中国疾控中心病☂️病所的毒株序列-属于IIb分支。　　猴痘病毒耐燥和低温，在痂、土壤和衣物、👩‍🍳上用品等物体表可生存数月。该-毒对热敏感，加至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒、过氧乙酸等常消毒剂及紫外线有效灭活病毒，📸过氧化氢、次氯钠、戊二醛、邻二甲醛等敏感。　(二)流行病学特征。　　1.传染源。猴痘病毒宿主尚不明确，前认为非洲啮齿动物(非洲松鼠、树松鼠、冈比亚鼠、睡鼠等)可能为其自然宿主。染源包括猴痘病及感染的啮齿类物、猴和猿等灵👩🏽‍🤝‍👩🏻类动物。　　2.传播途径。猴痘📃毒主要经黏膜和➕损皮肤侵入人体🔌主要通过直接接病例的病变皮肤👩‍👩‍👧‍👦黏膜传播，亦可过接触被病毒污-,的物品、长时间距离吸入病例呼⛹️道飞沫传播，接🔏感染动物的呼吸👨‍❤️‍👨分泌物、病变渗👌物、血液及其它液，或被感染动--咬伤、抓伤感染播。　　3.易感人群。人群普遍感。接种过天花苗对猴痘病毒存🥱一定程度的交叉护力。　　4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫主要在中非和西-,地区呈地方性流，主要通过接触😖染动物传播，所发的人传人疫情播链较短，主要👨‍👩‍👦‍👦儿童及青壮年的发病例及聚集性,情，通过家庭或🛹行方式偶尔播散其他国家和地区2022年5月以来全球多国暴发👩‍💼疫情主要在男男行为人群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发生性🗝️为的男性)中经性接触传播，大部病例为青壮年男🍿，通过大型聚会↙️及后续在社区的MSM扩散，并传播至全球多个国家地区。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出现状后至皮疹结痂🚊然脱落并形成新🔢肤前具有传染性有调查提示一些🩳例可能在出现症🤚前1-4天存在传染性。　　3.早期症状：可出现🥵热、头痛、背痛肌痛和淋巴结肿🎠等。　　4.皮疹和黏膜疹：通常☑️热退后出现，有病例可出现在全症状之前。皮疹生常经过斑疹、疹、水疱、脓疱-,结痂至痂皮脱落个阶段，不同形皮疹可同时存在☀️可伴有明显痒感疼痛。可累及口咽喉黏膜、肛门’生殖器、结膜和膜等。痂皮脱落可遗留红斑或色沉着甚至瘢痕，🔳痕持续时间可长🤦‍♂️数年。　　5.病程及严重程度。痘病程约2—4周，免疫力低下患的病程可能较长猴痘为自限性疾，大多数病例症🎸会自行消失，也重症和死亡发生主要为儿童、孕和免疫力低下人。　　2022年以来全球多国猴🕵️‍♀️暴发疫情中，大-数病例临床表现轻，部分病例无身症状，皮疹仅于生殖器、肛门肠黏膜部位，死病例主要为未得🧖‍♀️治疗的艾滋病病感染者等免疫力🏵️下人群。2022年以来全球非地性流行区病例的死率约为0.1%。三、宣传教育干预　　针对重人群、出入境人和一般人群等不人群分类开展宣🤓教育，有针对性加强不同人群的🍒我防范意识和个防护措施，积极合做好防控工作　　(一)重点人群。各地卫生健👨🏿‍🤝‍👨🏾与疾控部门联合关社会组织，充借鉴艾滋病防治合干预经验和服模式，在MSM经常出入的酒吧、所、浴池等重点动场所，开展同🍞教育。借助大众,体、MSM社交网站等互联网平台开展猴痘防控知宣传教育，提高点人群防范意识减少高危行为，导有可疑接触史自觉做好自我健监测，增强主动诊意识。　　重人群宣传干预要🛺详见附件1《重点人群宣传干预指》。　　(二)出入境人员。通过🥿放宣传资料等形，加强出入境人猴痘防控知识宣教育。提醒出境-员关注目的地国🏋️和地区猴痘疫情息，不接触猴痘症状者及啮齿类👏灵长类等动物。醒来自猴痘疫情💄告国家和地区的🍑员，如在境外有疑接触史，入境21天内应做好自我健康监测，避与他人发生密切触，一旦出现发、皮疹、淋巴结🚣‍♂️大等猴痘样症状♂️应主动就诊并如报告流行病学史　　(三)一般人群。各地充分发🧱新媒体以及广播🩸电视、报纸等传⏹️媒体作用，开展痘防控知识宣传育，提高公众科防范意识。四、🥺情监测和报告　🌩️(一)监测病例定义。　　1.猴痘样症状者。不明因急性皮疹(面部或口腔黏膜、四、生殖器或会阴肛周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿大者。　　2.疑似病例。猴痘样症者，发病前21天内具备以下流行学史中的任何一▫️：(1)有猴痘病例报告地区旅居；(2)有猴痘确诊病例或疑似病接触史；(3)有同性性行为，或伴有同性性行为；(4)有地方性流行区可疑动物🚧触史。　　3.确诊病例。猴痘样📤状者、疑似病例👩‍🏭密切接触者，经验室检测猴痘病🚫核酸阳性或病毒离阳性者。　　(二)多渠道监测。　　1.医疗机构监测。各级各类疗机构要开展猴样症状监测，尤是皮肤(性病)科、肛肠科、艾滋自愿咨询检测门等要重点关注猴样症状者。发现🧄痘样症状者，应动询问流行病学-，记录患者现住及联系方式，采标本送疾控机构行猴痘核酸检测具备猴痘病毒检🚒能力及猴痘病毒验活动资质的医机构也可开展检。　　2.重点人群监测。各级各⏩医疗机构、疾控,,构在对MSM等重点人群开展诊疗检测咨询服务时应主动询问是否猴痘样症状及其疑接触史。如发猴痘样症状者和似病例，应及时集标本进行猴痘🤔毒核酸检测。　3.入境人员监测。海关收到猴痘关异常健康申报检疫发现有猴痘症状的入境人员👈应及时进行标本集和核酸检测，👨‍🏫发放《就诊方便🥛》，要求其尽快诊；对于核酸检阳性者，将相关息通报辖区疾控🧛‍♀️构，由相关部门🥏一步调查处置。　4.重点场所污水监测。有条件地区可根据当地情形势，经评估MSM经常出入的酒吧、会所、浴🚧等重点活动场所展污水监测。　(三)病例报告。　　相关医疗机根据临床表现、行病学和实验室测结果，及时对者进行诊断。　诊断的疑似病例确诊病例应于24小时内通过中国💘病预防控制信息统的监测报告管模块进行网络直,。如为境外输入例需填写输入来国家或地区。不🏃‍♂️备网络直报条件👨‍👨‍👦医疗卫生机构，在规定时限内将😝染病报告卡信息☯️告属地乡镇卫生、社区卫生服务心或县级疾控机进行网络报告，时传真或寄送传病报告卡至代报位。负责病例网直报的医疗卫生构，要根据实验-检测结果、流调😮展及时对病例信进行复核、订正　　各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例或者2例及以上存在流行病关联的确诊病例应当在2小时内通过突发公共卫生件报告管理信息统报告，事件级选择“未分级”◽五、疫情处置　(一)病例管理。　　各地发现猴🧴疑似病例和确诊🌽例应当及时转运医疗机构进行隔治疗，如临床症明显好转，病变🈯位已结痂，可转居家隔离治疗，🟡至皮疹结痂自然落，解除居家隔。对病情较轻且🧑🏽‍🤝‍🧑🏽备居家隔离治疗件的确诊病例，医疗机构与疾控构联合评估后，直接采取居家隔🧔治疗。对于实行家隔离治疗的确病例发放《猴痘👰例居家隔离治疗康告知书》(见附件2)。确诊病例居家隔离治疗期，单人单间居住🛡️避免与家人有皮或黏膜直接接触做好被污染物品消毒，非必要不出，确须外出时😃长衣长裤、佩戴用外科口罩，避前往人群聚集场🛄，避免与其他人🥶皮肤或黏膜直接🏝️触；指定医疗机安排专人负责上或电话随访，提-健康咨询和医疗导。　　(二)流行病学调查。　县(市、区)级疾控机构接到辖区似病例和确诊病报告后，及时组🎧开展流行病学调，查找感染来源🛳️掌握、追踪和管密切接触者，分传播链及传播特🎢，及时发现潜在风险人群及其范、特征，有针对地开展宣传教育综合干预。调查程中发挥多部门♻️防联控的协同作，尽可能获取全💂‍♀️准确的流调信息　　调查内容主👩‍👩‍👧‍👦包括病例基本信🔨、发病就诊情况🟦临床表现、转归🚵‍♀️实验室检测；发前21天内与可疑感染来源的接触、接触场所及接方式；发病后至离治疗前的具体动地点、与其有肤或黏膜直接接者，以及发病前4天内与其有性接🔫者。　　猴痘疫流行病学调查要️⃣详见附件3《猴痘疫情流行病学调指南》。　　(三)密切接触者的判定和管理。　　1.密切接触者定义。直接接触病例💏病变部位及其被染物品，或感染🕒物及其分泌物、出物等污染物；及职业暴露或长间近距离吸入病-呼吸道飞沫等，评估有感染风险人员。　　2.密切接触者判定。据流行病学调查💥暴露风险评估结，疾控机构负责时对密切接触者行判定。　　3.密切接触者管理疾控机构或基层🆓疗卫生机构指导🧑🏽‍🤝‍🧑🏼切接触者做好自健康监测，健康测期限为最后密接触之日起21天。　　密切接触自我健康监测期可正常生活与工📹，需避免与他人🎥生性接触等密切触，避免捐献血👩‍🔬等；坚持每天做体温测量和症状测，出现猴痘样状应及时就诊并🧝‍♀️动报告可疑接触。辖区疾控机构基层医疗卫生机应在密切接触者我健康监测第7、14、21天上门或电话对其进行访，提供咨询指，发现异常情况时进行处置。　密切接触者判定理要求详见附件4《猴痘密切接触📺判定和管理指南🧣。　　(四)消毒与人员防护。　🆒做好病例衣物、巾、床单、餐具个人用品，以及🐲能被病例分泌物👯‍♂️渗出物、体液等-染的环境和物体面的消毒。从事例诊治护理、流,病学调查、环境洁消毒、标本采和实验室检测等作人员在工作期😩做好个人防护。　消毒与人员防要求详见附件5《猴痘消毒技术指-》和附件6《猴痘个人防护指南》🧑🏽‍🤝‍🧑🏽六、实验室检测🔵　猴痘病毒核酸测首选皮肤或黏👩‍💼病变部位标本，同时采集口咽拭标本。各省首例痘确诊病例标本送中国疾控中心🈸毒病所进行复核本土疫情中的首或早期确诊病例与早期病例有流病学关联的关键诊病例、感染来不明的本土确诊例、境外输入确🚐病例阳性标本等荧光定量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因测♿。所有测序原始📔据、组装序列及序样本送检单应获得序列48小时内报送中国疾控👭🏿心病毒病所进行总、分析。以上诊病例应至少采一套标本(包括核酸检测阳性者的’肤或黏膜病变标🔌、口咽拭子标本🐳及发病急性期和🥕复期双份血清)送中国疾控中心病病所。　　实验🗳️检测具体要求详🔣附件7《猴痘病毒实验室检测技术南》。七、院内🥨染控制　　医疗构应当严格做好内感染控制。疑🥝病例和确诊病例安置在隔离病房疑似病例单间隔。医务人员执行准预防，采取经🛫触传播和经飞沫播疾病的隔离与🧞防措施，佩戴一性乳胶手套、KN95/N95及以上级别的口罩、⛱️护面屏或护目镜一次性隔离衣等🦙同时做好手卫生严格按照《医疗构消毒技术规范对病例的体液、液、排泄物、分物等进行规范处，做好诊疗环境(空气、物体表面地面等)、医疗器械、病例使用物等的清洁消毒。📲据《医疗废物管条例》《医疗卫机构医疗废物管办法》做好医疗物的处置和管理🎤八、工作要求　(一)加强组织协调。各地卫生健、疾控部门加强海关等有关部门密切协作和信息享，及时发现与置猴痘疫情，落猴痘病例发现、🏅情报告、诊疗隔🧨、密切接触者追管理等工作，防疫情扩散和蔓延各地在猴痘疫情控过程中应注意护病例、密切接者和重点人群等人隐私。　　(二)加强宣传引导。各地要及时发布区猴痘疫情相关--息，做好政策解和公众健康提示通过多种方式和道开展猴痘防控识宣传，加强重人群宣传教育的对性和实效性。时回应社会关切🌞引导公众科学认猴痘。　　(三)加强人员培训。🙌地要加强对各级控机构和医疗机专业人员的培训对医务人员重点展猴痘病例的识与诊断、病例发与报告、病例管等相关知识培训强化诊治意识。疾控人员重点开流行病学调查、切接触者的判定🏼管理、实验室检-、重点人群宣传🛴预等相关知识培😀，提高猴痘疫情控和应急处置能。　　附件：　1.重点人群宣传干预指南　　2.猴痘病例居家隔🏊‍♂️治疗健康告知书　3.猴痘疫情流行病学调查指南　4.猴痘密切接触者判定和管理😦南　　5.猴痘消毒技术指南　　6.猴痘个人防护指南　　7.猴痘病毒实验室检测技指南　　附件1　　重点人群宣传预指南　　2022年5月以来，全球非地方性流行发生的猴痘疫情🔢男男性行为人群(MSM)为主。为充分利用我国艾病防治综合干预务体系，开展MSM等重点人群宣传干预，防范猴痘情传播扩散，形常态化艾滋病与痘综合防控一体🟧应对机制，制定指南。一、实施🦹‍♂️略　　在现有艾病防治综合干预务体系基础上，合运用行为学干方法和手段，通宣传教育、促进全性行为、动员🥇测、外展服务、’伴教育和互联网♋预等，从个体、体和社会等多个🏿面为目标人群提猴痘综合干预服。二、组织实施　各级医疗机构疾控机构要加强🛌点科室和艾滋病愿咨询检测门诊作人员猴痘知识训，对重点人群🖨️供猴痘防控知识传、检测咨询与员、治疗和关怀👫🏻服务。各级疾控构应当积极推动地有能力、具有好艾滋病防治经的MSM志愿者或社会组织共同参猴痘防治宣传工🩺，在工作过程中意保护重点人群▪️人隐私。三、形分析　　各地要强对重点人群猴🌽疫情、防控现状影响因素及出入情况的调查，及分析研判猴痘疫形势，为制定本高危行为干预工计划提供依据。体内容包括：1.重点人群基数、动形式和特点、📜动场所、出入境,-时间及地区等；2.猴痘知识、态度和高危行为；3.猴痘疫情水平及👩‍🦱影响因素；4.猴痘防治政策及专机构已开展的工；5.包括志愿者在内的有关组织🔘个人已开展的干活动；6.影响猴痘防治工作的困和问题。四、宣🎋干预　　(一)宣传教育。各级疾机构或健康教育业机构提供技术🧑🏾‍🤝‍🧑🏼持，社会组织参，共同研究制定😷合当地特点的猴预防宣传材料，强警示宣传教育通过大众媒体、MSM网站和以移动终端为载体的交软件等平台，宣🆔国际、国内及本🚴‍♀️猴痘疫情信息和⛑️控知识，提高重人群猴痘防范意。　　(二)同伴教育。各级疾控️⃣构要加强同伴教员挑选、招募和训，组织和支持伴宣传活动，增🛐人群猴痘风险防意识，推动主动测。定期组织同教育员工作例会了解猴痘干预工存在的困难和问，有针对性地给帮助和支持。　(三)外展服务。各级疾控机构干📈工作人员定期到,,点人群活动场所展猴痘宣传、咨、发放宣传材料外展服务活动，高重点人群猴痘🦸范意识和知识水🐅，推动重点人群☀️强自我健康管理主动寻求检测咨服务。　　(四)检测咨询。各级控机构通过互联、同伴教育、外活动等多种形式,,,员有猴痘样症状🎧可疑接触史的重人群进行猴痘检。各级各类医疗构皮肤(性病)科、肛肠科、艾滋🌊自愿咨询检测门发现猴痘样症状，应主动询问其🍜行病学史及性接史，记录患者现🛰️址及联系方式，集标本送疾控机进行猴痘核酸检♣️，具备猴痘检测力及猴痘病毒实活动资质的医疗构也可开展检测对于已建立互联+HIV检测平台的地区，可增加痘检测内容，实互联网在线检测约和结果查询。、重点场所干预　重点活动场所括实体和虚拟两场所，实体场所⛸️括酒吧、会所、😵池等经营性场所🦾虚拟场所包括移互联网和社交媒。　　(一)实体场所干预。　　级疾控机构负责织干预工作人员当地MSM经常出入的酒吧、会所浴池等活动场所开展猴痘预防干宣传，主要包括　　1.在MSM经常出入的酒吧会所、浴池等实场所，张贴醒目健康教育宣传图，设置健康教育料公告栏；　　2.强化个人健康责任意识，开展猴🛌健康咨询，推动🤹展自我风险评估　　3.提供转介服务信息，告知确的诊疗流程以相关检测、医疗构名称、联系人信息。　　各地加强对猴痘确诊#️⃣例发病前21天内活动过的场所以污水监测阳性场的干预宣传，重目标人群的个人私保护，加强对会组织同伴教育📹猴痘防治知识培，建立规范的行干预流程，提高👩‍❤️‍👩我防护技能。　🚎(二)虚拟场所干预。　　各级疾机构负责组织指当地有序开展猴线上宣传，在相网站、社交媒体台及时发布和更😱猴痘宣传教育内，形成面向重点-群的猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣传干预服务体系　　各级疾控机支持社会组织或👨‍💻伴教育员利用网、信箱或社交媒🍥平台，组织开展线咨询和交流。时解答网友提出各种猴痘相关问。针对不同时期痘传播特点，定或不定期组织专🏸、专业人员、同🍿教育员利用互联和社交媒体平台行在线宣教。各疾控机构要定期🥀导更新相关专业息，确保宣传内科学、有效。　附件2　　附件3　　猴痘疫情流病学调查指南　为指导各地疾控构规范开展猴痘🧑似病例、确诊病和聚集性疫情的行病学调查，及掌握病例暴露史💇‍♀️接触史等流行病🍎相关信息，落实切接触者的追踪定，防止疫情传扩散，制定本指。一、调查目的　(一)查找感染来源，掌握、追和管理密切接触。　　(二)分析传播链及传播特📜。　　(三)及时发现潜在的风险🎦群及其特征、范，有针对性地开宣传教育和综合预。二、调查对,　　疑似病例、🚢诊病例和聚集性情。三、调查方和内容　　通过🎅阅资料，询问病、诊治医生、家和知情人等进行-行病学调查。如例的病情允许，查时应先调查病🕌本人，再对其诊-,-医生、家属和知者进行调查。　开展个案调查时要认真、详细了和记录病例基本🔰息、发病就诊情、临床表现、转🚁及实验室检测信-；发病前21天内与可疑感染来源,接触史、接触场及接触方式；发后至隔离治疗前具体活动地点、🧨其有皮肤或黏膜接接触者，以及病前4天内与其有性接触者。　　(一)基本情况。如姓名、性别、年🥏、住址、国籍、系方式等。　　(二)发病就诊情况。临床表现、实💒室检测、发病就经过和病情变化转归。　　(三)感染来源调查。🍽️病例发病前21天内的暴露史开展查，包括境内外痘病例报告地区行史或居住史，可疑的感染来源详细询问接触时、方式、频次、点及接触时采取防护措施等，特是性接触史。调时，若发现调查中未列入，但具重要流行病学意⏪的内容也应进行细询问和记录。🧑🏿‍🤝‍🧑🏽　(四)密切接触者调查及判定。👨‍👨‍👦‍👦病例传染期的活情况和人群接触况进行追踪和排后，判定其密切触者。密切接触判定和管理按照猴痘密切接触者定和管理指南》(附件4)执行。　　详见附件3-1《猴痘病例个案查表》。四、组与实施　　按照属地化管理”原😿，由病例现住址😱在的县(市、区)级疾控部门组织🥏区疾控机构开展痘病例的流行病🪁调查，就诊医疗🛺构提供诊疗信息调查单位应根据查计划和调查目，确定调查人员成和职责分工，时开展病例流行学个案调查。调过程中发挥多部联防联控的协同用，尽可能获取面准确的流调信。调查期间，调人员要做好个人护。五、信息的🔏报与分析　　疾👩🏼‍🤝‍👩🏻机构完成调查后-应做好病例分析🚡结，及时将流行🕕学个案调查表、查报告等资料逐报送上级疾控机🏃‍♂️，并做好调查资的保管和存档。🥞例流调信息要按关规定，严格做🍴信息安全和个人🕹️私信息保护。　附件：3-1.猴痘病例个案调查　　附件4　　猴痘密切接触者判和管理指南　　指导各地做好猴🚦密切接触者判定管理，有效控制痘疫情的传播，定本指南。一、切接触者判定标　　密切接触者指直接接触病例👋病变部位及其被染物品，或感染-物及其分泌物、出物等污染物的员；以及职业暴或长时间近距离入病例呼吸道飞等，经评估有感风险的人员。具情形包括：　　1.与疑似病例或确诊病例发病后有肤或黏膜直接接🔃的人员，接触方包括性接触、抚、拥抱和亲吻等👺　　2.与有皮疹症状的疑似病例🙇‍♀️确诊病例共用衣、被褥、餐具等🎭品的人员；　　3.医疗诊疗、采样或实验室检测等作过程中可能暴👵于病毒，经评估感染风险的医疗生工作人员；　4.与疑似病例或确诊病例发病前4天内有性接触，✝️经流行病学调查业人员评估有感⛱️风险的人员，亦,判定为密切接触🦳；　　5.在狭小密闭空间与疑似🦊例或确诊病例长间近距离接触(如长时间共处同一闭空间)，经流行病学调查专业人评估有感染风险🦪人员，亦可判定密切接触者；　🐔6.接触感染猴痘病毒的动物及其泌物、渗出物等🌶️染物，而未采取效个人防护的人-；　　7.其他可能存在病毒暴露险的人员。二、❇️切接触者管理　-1.管理期限与方式。病例发现地💽控机构或密切接者所在地疾控机应于追踪到密切触者当天及时开-猴痘病毒核酸检，通知并指导密🖲️接触者做好自我康监测，健康监期限为自最后密接触之日算起21天。自我健康监期间可正常生活工作，需避免与人发生性接触等切接触，避免捐🦠血液等。　　2.知情告知。实施🐇康监测时，疾控构或基层医疗卫机构应口头告知康监测的缘由、🐂限、注意事项和🏒病相关知识，以🕙负责随访疾控机或基层医疗卫生构联系人和联系🔞式，并发放《猴🐕‍🦺密切接触者健康知书》。　　3.定期随访。疾控构或基层医疗卫机构应在第7、14、21天电话或上门主动询问密接触者自我健康测情况，提供咨指导建议。发现🏺常情况，及时调处置。　　4.自我健康监测。坚每天做好体温测🦴和症状监测，主症状包括发热(＞37.3℃)、皮疹、浅表淋巴结大等。密切接触🦾一旦出现相关症👱‍♀️应及时前往医疗构就诊或与随访系人取得联系，受猴痘病毒核酸测。　　附件：4-1.猴痘密切接触者健康告知书　附件5　　猴痘消毒技术指南　--为进一步规范猴😸疫情相关的消毒作，落实科学消、精准消毒，减猴痘病毒对公众康造成的危害，定本指南。一、🚹源地消毒　　(一)适用范围。　　适用于出现猴痘🚧例后，对其可能🚎染的场所和物品🕰️行的随时消毒和末消毒。　　(二)消毒原则。　　1.范围和对象确定。　　根据流病学调查结果，定现场消毒的范和对象。对病例🍔住院、转运期间能污染的环境和品，进行随时消🔍。对病例居住或动过的场所，如住场所、工作场、学习场所、诊场所、转运工具🔬及其他可能受到🏕️染的场所，在其开后(如住院、转院、出院、死亡)进行终末消毒。　2.方法选择。　　(1)诊疗用品消毒。尽量选一次性诊疗用品非一次性诊疗用🈳应首选压力蒸汽菌，不耐热物品选择化学消毒剂低温灭菌设备进😞消毒或灭菌。　(2)手消毒。建议使用手消毒剂搓双手进行消毒也可选择75%乙醇、过氧化氢等毒剂。　　(3)环境和物体表面毒。可选择含氯毒剂、二氧化氯过氧乙酸、过氧氢等消毒剂擦拭,-喷洒或浸泡消毒🙇‍♀️　　(4)衣物、床单等纺织品消。可选择热力消、含氯消毒剂或铵盐类消毒剂浸等消毒方式。　🏙️(三)常见污染对象的消毒方法。　1.手消毒。　　可选用速干手毒剂，或直接选75%乙醇进行擦拭消毒；醇类过🧕者，可选择季铵类等有效的非醇🦗手消毒剂。有肉可见污染物时，🥔先使用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六步洗手法🧫洗双手，然后按👨‍🦳述方法消毒。　🈁2.皮肤、黏膜。　　皮肤被污染污染时，应立即🧦除污染物，再用次性吸水材料沾0.5%碘伏或过氧化氢消毒剂擦♌消毒3分钟以上，使用清水清洗干🍅；粘膜应用大量🙏理盐水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。　　3.床单、毛巾、衣服等织品。　　病例用的床单、毛巾衣服等纺织品，🌞肉眼可见污染物，若需重复使用可用流通蒸汽或🧜‍♂️沸消毒30分钟；或用有效氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒剂浸泡30分钟后，按照常规洗；或用其他有🖱️的消毒方法。不,,湿的衣物可选用氧乙烷或干热方进行消毒处理。　有分泌物、渗液、排泄物、血🧞‍♂️、体液等污染物，建议按医疗废集中处理。　　4.餐(饮)具。　　病例所使用的、盘、筷、杯等(饮)具清除食物残渣后，煮沸消30分钟，或使用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再用清水洗净。　5.污染物。　　对病例分泌物,,渗出液、排泄物血液、体液等少污染物可用一次💿吸水材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒剂(或能达到高水平消😺的消毒湿巾/干巾)小心移除。　　对病例分泌物、出液、排泄物、液、体液等大量染物应使用含吸成分的消毒粉或白粉完全覆盖，用一次性吸水材完全覆盖后用足的有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒剂浇在吸水材料上作用30分钟以上(或能达到高水平消毒的消毒干巾)，小心清除干净清除过程中避免’触污染物，清理污染物按医疗废集中处置。　　’例的分泌物等应专门容器收集，有效氯20000mg/L的含氯消毒剂，按物、药例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污染物后，应对,染的环境和物体面进行消毒。盛污染物的容器可🔷有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液浸泡消毒30分钟，然后清洗干净。　　6.地面、墙壁。　　肉眼可见污染物🌭，应先完全清除🤸‍♂️染物再消毒。无眼可见污染物时可用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂擦拭或喷🏁消毒；不耐腐蚀♻️地面和墙壁，也用2000mg/L的季铵盐类消毒剂喷洒或擦拭；毒作用时间不少📩30分钟。　　7.物体表面。　　诊疗设施设备表以及床围栏、床🍞柜、家具、门把、卫生洁具和家◽用品等有肉眼可污染物时，应先全清除污染物再毒。无肉眼可见染物时，用有效⛱️1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂，耐腐蚀的物体表😎也可用2000mg/L的季铵盐类消毒剂进行喷洒擦拭或浸泡消毒作用30分钟后清水擦拭干净。　👷8.污水和粪便。　　在进入市政水管网前需进行毒处理，消毒后水应当符合《医🛕机构水污染物排🩹标准》(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃圾。　　例生活垃圾按医废物处理。　　10.医疗废物。　　医疗废物的处🩸应遵循《医疗废管理条例》和《疗卫生机构医疗物管理办法》的求，规范使用双⚙️黄色医疗废物收🤾‍♀️袋封装后，按常流程进行处置。　11.室内空气。　　如经科学🧑估，需对室内空进行消毒，则在🛷人情况下，可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化(浓度按产品说明书)等消毒剂，按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。也可采用经验安全有效的其他毒方法。二、注事项　　现场消🦍应确保所用消毒品合法有效，所消毒方法科学可。现场消毒时，据现场情况和相标准要求，选择格有效的个人防装备，在做好个防护的前提下，🧩格按照工作方案施消毒。　　消实施单位应具备场消毒能力，操人员应经过消毒业培训，掌握消和个人防护基本识，熟悉消毒器🧑🏽‍🤝‍🧑🏻的使用和消毒剂配制等。　　每🐁开展消毒工作时应做好消毒记录🛠️包括消毒对象、毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作用时间等同时，相关部门-,-单位应做好消毒作的监督管理和价。　　附件6　　猴痘个人防护,南　　为加强公🌯、疫情处置相关🐇作人员和医务人的个人防护，避猴痘病毒暴露感，制定本指南。、居家隔离治疗病例等相关人员　(一)适用范围。　　适用于居隔离治疗的病例(疑似病例和确诊例)、照护人员或共同居住者的个🔆防护。　　(二)居家隔离区域要。　　1.应选择有自然通风、独🥗卫生间的房间作隔离区域。　　2.应配备专用的餐具，床单、毛巾🐶床上用品，消毒和口罩等个人防用品，电视和平电脑等电子设备👫🏻　　3.卫生间宜配备专用的洗衣🍒，地漏应有水封🧛‍♀️　　(三)病例管理要求。　　1.应能够进行自我护。　　2.应每天做好体温测量🍘症状监测，避免他人共用个人物。　　3.避免与他人发生性接触避免与免疫力低人员、儿童、老、孕妇及其他人的直接接触，避与宠物等动物接⤵️，避免捐献血液-。　　4.外出就诊时，应佩戴医外科口罩，着长长裤，确保遮住有损伤皮肤，避与他人密切接触📑避免乘坐公共交🔴工具。　　(四)照护人员要求。⏫　1.应每天做好体温测量和症状-测。　　2.应尽量避免进入隔离🌧️域。如需进入隔区域，应佩戴医外科口罩和一次手套，与病例保至少1米的距离。在离开隔离区域后，应加强手卫👩‍👩‍👧‍👦，并对脱下的口🤠和手套进行消毒理后废弃。　　3.在拿放和清洗居家隔离治疗病例床单、衣服和处垃圾的过程中，避免抖动。用湿🖨️布拖地，避免干。用湿抹布清洁--居用品表面，地🍌应用蒸汽清洗，免使用吸尘器。　4.应将居家隔离治疗病例的餐、床单、毛巾和🔈物单独洗涤和消，可选择热力消、含氯消毒剂或铵盐类消毒剂浸-等消毒方式。　🔮(五)应急处置。　　1.照护人员或共同居住者出任何症状或不适👌现，应当及时前指定医疗机构就并主动报告可疑触史。　　2.对其接触的物品、-动的区域等结合🏪险评估结果进行毒处理。二、疫🎲处置相关工作人🏅　　(一)适用范围。　　适用于🤙痘疫情期间流行🏘️学调查、环境清消毒人员的个人护。　　(二)流行病学调查人员护要求。　　1.个人防护装备。🧿次性乳胶手套、😌用外科口罩、一性隔离衣等。　2.个人防护要求。规范佩戴口罩加强手卫生，与💫调查人员保持至🚭1米的距离。　　3.废物管理。调查结束后，废弃个人防护装备暂🍬、处理和处置应照《医疗废物管👩‍🔧条例》执行。　4.应急处置。如在调查过程中出口罩脱落、直接触了病例皮肤或泌物等情况，要⏭️合被调查人员的床诊断结果、空的密闭性、接触时间和距离等进🌯风险评估，结合险评估结果，采相应的处置措施　　(三)环境清洁消毒人员防护求。　　1.个人防护装备。一次乳胶手套、医用科口罩、一次性😿离衣、防水靴套。　　2.个人防护要求。规范佩口罩，加强手卫👐，尽量减少与被🐌毒物品的直接接👭🏿。　　3.废物管理。清洁消毒结后，废弃的个人,护装备暂存、处🔬和处置应按照《疗废物管理条例执行。　　4.应急处置。如在清消毒过程中出现罩脱落、皮肤损或直接接触排泄、血液等情况，🥩结合被清洁消毒品的类型、接触时间和空间的密性等进行风险评，结合风险评估🛥️果，采取相应的置措施。三、医人员的个人防护　(一)适用范围。　　适用于猴疫情期间医务人及其工作环境的护。　　(二)基本要求。　　1.个人防护装备要。医务人员执行准预防，采取经👗触传播和经飞沫播疾病的隔离与🤷防措施，佩戴一性乳胶手套、KN95/N95及以上级别的口罩、,,护面屏或护目镜🍡一次性隔离衣等　　2.环境防护要求。医院环境清洁消毒应符合件5的要求。应避免干除尘、清扫吸尘等活动。首🎑湿式清洁方法。👥　3.废物管理。个人防护装备、例敷料等暂存、👓理和处置应按照📲医疗废物管理条》执行。　　附7　　猴痘病毒实验室检测技术指🎬　　为指导各级🕙控部门和其他相机构规范开展猴病毒实验室检测作，快速、准确别猴痘确诊病例😍制定本指南。本南主要介绍标本集以及猴痘病毒酸荧光定量PCR检测方法、生物全要求等内容。、检测对象　　(一)猴痘确诊病例和疑似病例；　🏴󠁧󠁢󠁷󠁬󠁳󠁿(二)密切接触者；　　(三)感染或疑似感染猴痘毒的动物；　　(四)环境或其它生物材料。二、技💞人员基本要求　🍅(一)采样人员。从事猴痘病毒核📠检测标本采集的🙄术人员应当经过👨‍👩‍👧物安全培训，培合格后方可从事样工作。采样人应熟悉采集标本类和采集方法，练掌握标本采集作流程及注意事，做好标本信息录，确保标本质️⃣符合要求、标本🍠相关信息可追溯　　1.采样人员个人防护装备要🐟：KN95/N95及以上级别的口罩、防护面屏或目镜、一次性隔衣、一次性乳胶套(尽可能戴两层)、靴套；如果接触了病例血液、液、分泌物或排🧄物，应及时更换套。污水采样人可根据实际工作要，适当降低防级别。　　2.住院病例的标本由🛃在医院医护人员集，根据实验室测工作的需要，🕒结合病程多次采🔶。　　3.密切接触者标本由当地🈳控机构或医疗机⛰️专业人员采集。⬛　4.感染或疑似感染猴痘病毒的物由当地疾控机协调动物疫控部专业采样人员负♨️采集。　　5.环境或其它生物材🎣标本由相关专业样人员负责采集　　(二)检测人员。实验室检测术人员应具备相专业大专以上学🤸‍♀️或具有中级及以🎰专业技术资格，有2年以上实验室工作经历，接受核酸检测相关培，培训合格后方😄从事检测工作。验室配备的工作员数量应与所开检测项目及标本相适宜，确保能🦗及时、熟练、准地开展实验室检和报告结果。三🈹标本采集、保存运输　　(一)标本采集种类。　1.首选标本是皮肤(黏膜)病变部位标本，包括病表面拭子、痘疱或痘疱渗出物拭、痘痂或痘痂拭等。　　2.呼吸道标本，如口咽子，可用于病例性期检测，也是切接触者检测最用标本。　　3.发病急性期可采EDTA抗凝血标本进行核酸检测🕘　　4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检测。🥥　5.直肠拭子、尿液、精液、唾等其它标本仅用--研究，根据工作要采集。　　6.污水或其它环境物材料标本根据际工作需要进行⬇️集。　　(二)标本采集要求。　采集皮肤(黏膜)病变部位标本时使用无菌聚酯纤、尼龙或类似材👨‍💼拭子，避免使用💁‍♂️拭子。采集疑似例的标本前应避使用75%乙醇等消毒剂清洁病变🖤位。每种类型的肤(黏膜)病变应尽可能采集两个🐴上拭子，每个病应同时采集身体🧷同部位或外观不的2-3种病变标本。采集皮肤(黏膜)病变部位标本时应适当用力。肤(黏膜)病变部位、痘痂或分泌等不同拭子标本放置于不同的采🤦‍♂️管中。进行病毒离时应采集干拭标本(无采样液)或以非灭活型病✴️采样液保存。根实验室活动资质定使用非灭活型灭活型采样液采⌨️标本。　　(三)标本采集方法。👨‍👨‍👦‍👦　1.斑疹、丘疹、水疱或脓疱等肤(黏膜)病变部位标本：一手紧采样拭子尾部，🥟与拭子头部保持寸以上距离。采时适当用力下压🧜‍♀️子，在皮损表面回擦拭至少2-3次，然后以拭子🧀一面再重复擦拭2-3次。如果在擦拭过程中痘疱破，要确保采集到🚈疱液。采样后将子放置于无菌采管中(可含病毒采样液或不含液体)，折断拭子头，❓除拭子尾部，盖管盖，以消毒纸擦拭消毒采样管📝以封口膜密封管后将采样管保存送检。　　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样前应确保实验室可测此类标本。使无菌镊子或其他头器械夹取全部--痂或面积至少4mm×4mm大小的痂皮，放置于干、无菌的采样管，采样完成后以🔙可贴覆盖患处。’　3.口咽拭子标本：被采集人员部微仰，嘴张大露出两侧扁桃体🎴将拭子越过舌根在被采集者两侧桃体稍微用力来擦拭至少3次，然后再在咽后壁上擦拭至少3次，将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中或置于不液体(干拭子)的无菌管中，尾部去，旋紧管盖。　4.血液标本：尽量采集急性期(发病7天内)的血液标本，建议使含EDTA抗凝剂的真空采血管采5mL全血，可利用全血进行检测-或室温静置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血浆于无菌管中行检测。　　5.血清标本：用真🌐负压采血管采集液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清👟无菌螺口塑料管。第一份血清应早(最好在发病后7天内)釆集，第二份血清应在发后第3-4周采集，采集血液标本5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于无菌螺塑料管中，用于痘抗体检测。　👂6.其他标本：依据设计需求规范集。　　(四)标本保存。　　标应在收集后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行检测。可🥼1周内检测的标本可置于4℃环境中保存；1周内无法检测的标本，短👔可置于-20℃环境中保存，长期置于-70℃或以下环境中保存。🕙血分离血浆前冷(2-8℃)，分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存。应设立库或专柜单独保🎫标本，避免反复融标本。　　猴病毒及其相关标🏃应由专人管理，确记录病毒及标的来源、编号、量等信息，具体求可参考《病原生物菌(毒)种保藏数据描述通则🏓(T/CPMA011-2020)。应采取有效措确保病毒及标本🚳全，严防发生误、恶意使用、被😘、被抢、丢失、露等事件。　　(五)标本送检。　　标本采集后应🥚快在低温条件下(冰袋或干冰)送往实验室，如需长-运输标本，应采🍇干冰冷冻运输方🧑🏾‍🤝‍🧑🏻进行保藏。　　1.送检标本：病例标本先由省级及下疾控机构进行步检测，各省首猴痘阳性标本应中国疾控中心病🦳病所复核。每个性病例至少采集套标本(皮肤或黏膜病变部位标本口咽拭子标本及性期、恢复期双💂血清标本)送中国疾控中心病毒病💗检测。各省级疾机构根据实际情🉑制定省内样本送🏧、复核流程。　2.病原体及标本运输：　　(1)国内运输。猴痘🍪毒或其他潜在感性生物材料的运包装分类属于A类，对应的联合国号为UN2814，包装符合国际航组织文件Doc9284《危险品航空安全运输技细则》的PI602分类包装要求，通过其他交通工🪔运输的可参照以🤼‍♂️标准包装。猴痘毒或其他潜在感性材料运输应按🌭《可感染人类的致病性病原微生菌(毒)种或样本运输管理规定》(原卫生部令第45号)办理《准运证书》。污水等环标本暂按普通生样本运输标准执🌛。　　(2)国际运输。猴痘毒株🧎‍♂️样本在国际间运的，应规范包装按照《出入境特物品卫生检疫管规定》办理相关续，并满足相关家和国际相关要。四、猴痘病毒酸检测要求及流　　(一)实验室资质要求。　　👵展猴痘病毒核酸测的实验室，应符合《病原微生🧾实验室生物安全理条例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床因扩增检验实验管理办法》(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定，具备设区🍸市级卫生健康部⚛️备案的生物安全级(BSL-2)实验室及以上实🍡室条件，并备案痘病毒相关实验动。独立设置的🤫学检验实验室还符合《医学检验验室基本标准(试行)》《医学检验实验室管理规范(试行)》等要求。　　开展猴痘病分离、培养、中🚓等涉及病毒扩增💗使用等实验操作👩🏿‍🤝‍👨🏽实验室应具备国卫生健康委批准生物安全三级(BSL-3)实验室及以上实验室条，且获得猴痘病实验活动批准。离的猴痘病毒应国家病原微生物藏中心/国家病原微生物资源库病📻分库保藏。　　(二)实验室生物安全要求。　　根2006年公布实施的《人间传染病原微生物名录(简称《名录》)，猴痘病毒生物害分类为第一类是一种高致病性📅毒。按照《名录👭🏾要求，猴痘病毒分离、培养等涉🔸病毒扩增及使用🚬实验操作需在BSL-3及以上实验室的生物安全柜🚾进行；非灭活采液采集的猴痘病样本的灭活在BSL-3实验室进行；样本灭活后猴🐷病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验室或PCR检测的专门区域或房间进行如《名录》更新开展猴痘病毒操-的实验室生物安要求应按最新《录》执行。污水🕕本的灭活参照普生物样本。　　(三)实验室分区要求。　　原则上展猴痘病毒核酸测的实验室应当✳️置以下区域：试储存和准备区、-本制备区、扩增产物分析区。三区域在物理空间应完全相互独立空气应定向流通各区功能分别是　　1.试剂储存和准备区：贮存🙍剂的制备、试剂分装和扩增反应😢合液的制备，以离心管、吸头等耗品的贮存和准。　　2.标本制备区：转运桶开、标本灭活，核提取及加入至扩🍩反应管等。　　3.扩增和产物分析区：核酸扩增和🔢物分析。　　根使用仪器的功能区域可适当合并🦮如采用标本处理核酸提取及扩增测为一体的自动分析仪，标本制🏔️区、扩增和产物🌽析区可合并。　(四)主要仪器设备。　　实验室🧖‍♀️当配备与开展检项目相适宜的仪设备，包括：二🤩生物安全柜、高台式离心机、干🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿恒温器、荧光定PCR仪、计时器、移液器。　　(五)实验室猴痘病毒核酸检测流程-　　实验室接到本后，按照标准㊙️作程序进行试剂备、标本前处理核酸提取、核酸增、结果分析及告。实验室应当🏷️立可疑标本和阳🕜标本复检流程。　1.试剂与材料。　　(1)标本：包括病变表面子、痘疱液或痘渗出液拭子、痘或痘痂拭子、咽🔎子、全血或血浆标本。　　(2)核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。　　(3)核酸检测试剂：　　①试👞：DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴痘病检测引物、探针　　③阳性对照涵盖检测靶标序🤟的质粒。　　(4)灭菌去离子水、无水乙醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用于手部和物体表面常👩‍❤️‍👨消毒，开启后有期为1周。　　②含氯消毒液：现现配，含有效氯1000mg/L的消毒液用于物体面常规消毒，含🍀效氯5000mg/L的消毒液用于感染性材料溢洒🧞的应急处理。　(6)耗材：包括带滤芯的吸头、🙉旋口的离心管、螺旋口的离心管含锆珠的粉碎管👩‍👧PCR反应板和透明封膜或PCR反应管和透明盖。🦿　(7)BSL-2个人防护用品：包括KN95/N95口罩及以上级别的口罩、一次隔离衣、防护眼或面屏、一次性子、鞋套、靴套手套。　　2.实验前的标本接收💪　　(1)核对被检标本编号、姓📜、性别、年龄及测项目；　　(2)待检标本的状态如有异常，需注；　　(3)待检标本长期存放在-70℃，短期存放可在-20℃，避免反复冻融。　3.核酸检测操作步骤及注意事项　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　操作方法DNA提取试剂盒相应说明书进行😸作，具体如下：　①提取试剂准💆：第一次开启试盒，在使用前先漂洗液中加入无乙醇，加入体积照瓶上标签。所😟试剂在使用前应衡至室温；所有心步骤应在室温🚊进行。　　②处📩样本：　　A.痘疱液：干拭子标需以适当体积的♠️PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本，加入80μL缓冲液，总量为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补足体积至180μL；　　B.病变皮疹或痘痂：取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体积含PS的PBS，研磨或匀浆处理取80μL，然后加入100μL缓冲液；　　C.咽拭子、其它拭子🌯从采样液中取200μL标本，干拭子标本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀后取200μL；　　D.全血或血清：直接取200μL标本。　　③加入20μL蛋白酶K溶液，混匀，溶液会变清亮若样本为病变皮或其它组织时，👧入蛋白酶K混匀后，在56℃放置，直至组织溶解，进行下一步骤。🐔　④加入200μL裂解缓冲液，充分混匀，70℃放置10分钟，或至溶液变清亮，简🎑离心以去除管盖壁水珠。　　需🅿️意：加入裂解缓液后可能会出现🧑🏿‍🤝‍🧑🏾色絮状沉淀，在70℃放置后会消失。如溶液未变清，说明细胞裂解彻底，可能导致取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　⑤加200μL无水乙醇，充分混匀，此时可会出现絮状沉淀简短离心以去除盖内壁水珠。　⑥将上一步骤所溶液和絮状沉淀加至吸附柱中(吸附柱放入废液收👩🏿‍🤝‍👩🏾管中)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　　加入500μL漂洗缓冲液1(使用前先检查是否已🎹入无水乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　　⑧加入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是否已加入无水乙🎳)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　　⑨将吸附放回废液收集管😄，最大转速13000rpm离心1分钟，尽量去除✒️洗液。　　⑩将🎍附柱转入一根干🍗的离心管中(需自行准备，试剂盒未提供)，加入50μL洗脱缓冲液或灭菌去离子水室温放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤出液，做好👩‍🚒记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　　(2)核酸检测：实时🧘‍♀️光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病毒核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体♑的准备：每孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检测标本外，应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；所有样本🥂包括对照，应设孔。　　②加样🕑每根反应管中加核酸或对照各5uL，盖紧管盖或封好透明膜，置于光定量PCR检测仪上。　　③扩条件设定：　　仪器检测通道选：使用荧光定量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道，收集设🏑60℃。具体设置方法参照各仪器用说明书。　　结果分析阈值设：使用荧光定量PCR检测仪进行结果分析时，基线📃3-10或6-15个循环的荧光信号，阈值设定原为阈值线刚好超正常阴性对照扩曲线最高点，也根据仪器噪音情调整阈值。　　(3)核酸检测结果判断　　①Real-timePCR反应系统的质量控制：反应结果同时符合以下2个条件，否则试验果无效，应重新展检测。阴性对🧖‍♂️无扩增，为阴性阳性对照未出现性结果。　　②-,果判定：　　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一孔Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳性和处于灰区的标应重复检测或经列分析进行确诊需注意：当标本为咽拭子或血清血浆，且检测结为阴性时，应结临床症状，慎重出阴性诊断。　🎳(4)表格记录　　做好荧光定量时PCR方法检测猴痘病毒核酸原记录。　　五、-痘病毒全基因组序　　1.测序标本选取原则。本疫情中的首发或✨期病例、与早期例有流行病学关的关键病例、感-来源不明的本土例、境外输入病阳性标本等。以标本在核酸荧光量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。以省为单👨‍🦰确定开展猴痘病全基因组测序的🥔构。建议使用扩子技术进行猴痘毒全基因组测序测序数据经质控格后方可用于后生物信息分析。👭🏽代测序平台覆盖🍊度应不低于10×，三代测序平台盖深度应不低于50×，全基因组测序覆盖度应不低98%。数据比对分析推荐参考猴基因组NC_063383.1。　　各省应建立本输入、本土病例◽痘病毒基因组数库，应具备序列🧺比分析能力。具测序条件的省份在接收标本后48小时内开展测序🦔作，关键样本要实验室收到标本1周内提供测序结果报告，所有测原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中🧟‍♂️病毒病所进行序汇总、分析。病病所应将序列分结果及时反馈各，并将全国猴痘🥣毒序列汇总、分结果及时上报国🏙️疾控局。　　3.分子分型。推荐用在线分析工具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行分子型。　　附件：　7-1猴痘病毒检测标本送检表⛎　7-2猴痘病毒标本序列测定结🧧报告单【编辑:孙静波

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