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　　中新网7月27日电据国家疾控局官方微消息，为进一🐊做好猴痘防控💦作，及时有效对猴痘疫情，升猴痘防控工的科学性、精🏾性和有效性，实维护人民群生命安全和身健康，国家疾局会同国家卫健康委制定并👬🏿7月26日印发《猴痘防控方🏆》。其中提出2023年6月以来，我国多🔤省份先后报告例猴痘病例，🍻发新增本土续🕯️疫情和隐匿传🏽的风险较高。坚持“预防为、防治结合、准防控、快速♉置”原则，落🥝“早发现、早告、早隔离、⛏️治疗”措施。　《猴痘防控🗽案》全文如下猴痘防控方案　猴痘是由猴病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致的一种人兽患病。2022年9月，我国报告首例猴痘输病例。2023年6月以来，我国多个省份先🤣报告多例猴痘🌤️例，引发新增⛎土续发疫情和匿传播的风险高。为指导各科学精准做好🚦痘防控工作，实维护人民群❌身体健康，制⛴️本方案。一、🤦‍♀️体要求　　坚“预防为主、🕺治结合、精准控、快速处置原则，落实“🛡️发现、早报告早隔离、早治”措施。开展😿疗机构、重点群、入境人员重点场所等多道监测。加强情分析与风险判，有针对性开展重点人群康教育和综合💊预。落实病例离治疗、流行学调查和密切💆‍♀️触者追踪管理Ⓜ️措施。坚持发🤸‍♀️一起、控制一，及时阻断疫传播。二、疾特征　　(一)病原学特征。　猴痘病毒属痘病毒科正痘毒属，为基因全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子发现该病毒。1970年在刚果民主共和国一♥️疑似天花患者🥻标本中首次分到猴痘病毒，首例确诊的人🧻猴痘病例。　猴痘病毒分为个进化分支：(1)分支I，曾称为中非分支刚果盆地分支(2)分支II，曾称为西非支，进一步分IIa和IIb分支。其中引2022年全球非地方性流行,,猴痘暴发疫情毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较亚分支，包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告首输入性猴痘病以来，各地报中国疾控中心毒病所的毒株列均属于IIb分支。　　猴病毒耐干燥和温，在痂皮、🍰壤和衣物、床用品等物体表可生存数月。🐪病毒对热敏感加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂过氧乙酸等常消毒剂及紫外可有效灭活病，对过氧化氢次氯酸钠、戊🖕醛、邻苯二甲🆎等敏感。　　(二)流行病学特征。　　1.传染源。猴痘病的宿主尚不明📱，目前认为非啮齿类动物(非洲松鼠、树松、冈比亚袋鼠🥭睡鼠等)可能为其自然宿主。染源包括猴痘例及感染的啮类动物、猴和🥧等灵长类动物👹　　2.传播途径。猴痘病毒🙌要经黏膜和破皮肤侵入人体主要通过直接👩🏽‍🤝‍👩🏻触病例的病变肤或黏膜传播亦可通过接触病毒污染的物、长时间近距吸入病例呼吸飞沫传播，接感染动物的呼道分泌物、病渗出物、血液-其它体液，或感染动物咬伤抓伤感染传播　　3.易感人群。人群普遍感。接种过天疫苗对猴痘病存在一定程度交叉保护力。📹　4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫情要在中非和西◽地区呈地方性👨‍⚖️行，主要通过触感染动物传,，所引发的人人疫情传播链短，主要为儿👨🏾‍🤝‍👨🏼及青壮年的散病例及聚集性情，通过家庭旅行方式偶尔散至其他国家🟪地区。2022年5月以来全球多国暴发的疫🚒主要在男男性🧇为人群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发生性行为的👩🏼‍🤝‍👨🏾性)中经性接触传播，大部分例为青壮年男，通过大型聚以及后续在社的MSM扩散，并传播至全球💹个国家和地区🌔　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出现症状后至疹结痂自然脱并形成新皮肤具有传染性。调查提示一些例可能在出现🎺状前1-4天存在传染性。　3.早期症状：可出现发热、痛、背痛、肌📙和淋巴结肿大。　　4.皮疹和黏膜疹：通在热退后出现有些病例可出在全身症状之。皮疹发生常过斑疹、丘疹水疱、脓疱、痂至痂皮脱落🏡个阶段，不同👚态皮疹可同时在，可伴有明痒感和疼痛。累及口腔咽喉膜、肛门、生器、结膜和角等。痂皮脱落可遗留红斑或素沉着甚至瘢，瘢痕持续时可长达数年。　5.病程及严重程度。猴痘程约2—4周，免疫力低下患👨‍⚖️的病程可能较。猴痘为自限,,,疾病，大多数例症状会自行失，也有重症死亡发生，主为儿童、孕妇🏰免疫力低下人🧢。　　2022年以来全球多🕠猴痘暴发疫情，大多数病例床表现较轻，🆚分病例无全身状，皮疹仅限生殖器、肛门🗝️肠黏膜部位，🚩亡病例主要为-得到治疗的艾🧢病病毒感染者免疫力低下人。2022年以来全球非地方😤流行区病例的死率约为0.1%。三、宣传教育与干预　　对重点人群、🎃入境人员和一人群等不同人分类开展宣传🍡育，有针对性加强不同人群自我防范意识👬🏿个人防护措施积极配合做好🕕控工作。　　(一)重点人群。各地卫生健康👩‍👩‍👧疾控部门联合👩🏽‍🤝‍👨🏼关社会组织，️⃣分借鉴艾滋病治综合干预经🏊‍♀️和服务模式，MSM经常出入的酒吧、会所☹️浴池等重点活场所，开展同教育。借助大媒体、MSM社交网站等互联🚴‍♀️平台，开展猴防控知识宣传育，提高重点群防范意识，少高危行为，导有可疑接触🥕者自觉做好自健康监测，增主动就诊意识　　重点人群传干预要求详附件1《重点人群宣传干预指》。　　(二)出入境人员。👶过发放宣传资#️⃣等形式，加强入境人员猴痘控知识宣传教,,,。提醒出境人关注目的地国🍺和地区猴痘疫信息，不接触⏫痘样症状者及齿类、灵长类动物。提醒来🚒猴痘疫情报告🏒家和地区的人，如在境外有疑接触史，入后21天内应做好自我健康监，避免与他人生密切接触，旦出现发热、-疹、淋巴结肿等猴痘样症状应主动就诊并实报告流行病史。　　(三)一般人群。各🛷充分发挥新媒以及广播、电📴、报纸等传统👨‍🦰体作用，开展痘防控知识宣教育，提高公科学防范意识四、疫情监测报告　　(一)监测病例定义　　1.猴痘样症状者。不明🥯因急性皮疹(面部或口腔黏膜四肢、生殖器🏟️会阴、肛周等位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿大❤️。　　2.疑似病例。猴痘样⚙️状者，发病前21天内具备以下流行病学史中任何一项：(1)有猴痘病例报告地区旅居史(2)有猴痘确诊病例或疑似例接触史；(3)有同性性行为，或性伴有同🦵性行为史；(4)有地方性流行区可疑动物接😆史。　　3.确诊病例。猴痘症状者、疑似-例及密切接触，经实验室检猴痘病毒核酸性或病毒分离🔱性者。　　(二)多渠道监测。　　1.医疗机构监测。各级类医疗机构要展猴痘样症状测，尤其是皮(性病)科、肛肠科、艾滋病愿咨询检测门🚷等要重点关注🔭痘样症状者。💋现猴痘样症状📖，应主动询问行病学史，记患者现住址及系方式，采集本送疾控机构行猴痘核酸检。具备猴痘病检测能力及猴病毒实验活动质的医疗机构可开展检测。,　2.重点人群监测。各级各医疗机构、疾机构在对MSM等重点人群开-,-诊疗或检测咨🔻服务时，应主询问是否有猴样症状及其可接触史。如发猴痘样症状者🐰疑似病例，应时采集标本进猴痘病毒核酸测。　　3.入境人员监测。🙀关收到猴痘相异常健康申报检疫发现有猴🥧样症状的入境员，应及时进标本采集和核❌检测，并发放就诊方便卡》要求其尽快就👩‍❤️‍👩；对于核酸检阳性者，将相⚽信息通报辖区控机构，由相🉑部门进一步调处置。　　4.重点场所污水💓测。有条件的区可根据当地情形势，经评💚对MSM经常出入的酒吧、会📢、浴池等重点动场所开展污监测。　　(三)病例报告。　　相关医疗机根据临床表现-流行病学和实室检测结果，🐓时对患者进行📛断。　　诊断疑似病例和确’病例应于24小时内通过中国病预防控制信📼系统的监测报♣️管理模块进行络直报。如为外输入病例需写输入来源国🥥或地区。不具网络直报条件医疗卫生机构需在规定时限👩‍✈️将传染病报告信息报告属地镇卫生院、社卫生服务中心县级疾控机构🈺行网络报告，↘️时传真或寄送染病报告卡至报单位。负责例网络直报的👩‍👩‍👦疗卫生机构，根据实验室检结果、流调进及时对病例信🚁进行复核、订🦄。　　各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例者2例及以上存在流行病学关🏟️的确诊病例，🧿当在2小时内通过突发公共卫事件报告管理🤝息系统报告，件级别选择“分级”。五、情处置　　(一)病例管理。　　各地发现猴🧎‍♂️疑似病例和确🌠病例应当及时运至医疗机构行隔离治疗，🍐临床症状明显转，病变部位📥结痂，可转为家隔离治疗，至皮疹结痂自,-脱落，解除居隔离。对病情轻且具备居家🧽离治疗条件的诊病例，经医机构与疾控机联合评估后，直接采取居家离治疗。对于行居家隔离治的确诊病例发🎊《猴痘病例居隔离治疗健康知书》(见附件2)。确诊病例居家隔离治疗,间，单人单间住，避免与家🌦️有皮肤或黏膜接接触，做好🐅污染物品的消，非必要不外🦉，确须外出时长衣长裤、佩医用外科口罩避免前往人群集场所，避免🤱其他人有皮肤黏膜直接接触🏁指定医疗机构排专人负责上✊或电话随访，🌘供健康咨询和疗指导。　　(二)流行病学调查。　　县(市、区)级疾控机构接到辖区疑🐉病例和确诊病报告后，及时🍶织开展流行病调查，查找感来源，掌握、☑️踪和管理密切触者，分析传🔁链及传播特征及时发现潜在风险人群及其围、特征，有对性地开展宣🥥教育和综合干Ⓜ️。调查过程中挥多部门联防控的协同作用尽可能获取全准确的流调信💇。　　调查内主要包括病例👩🏼‍🤝‍👩🏻本信息、发病诊情况、临床现、转归及实室检测；发病21天内与可疑感染来源的接史、接触场所接触方式；发后至隔离治疗的具体活动地、与其有皮肤黏膜直接接触，以及发病前4天内与其有性触者。　　猴疫情流行病学查要求详见附3《猴痘疫情流行病学调查指》。　　(三)密切接触者的定和管理。　1.密切接触者定义。直接接病例的病变部及其被污染物，或感染动物其分泌物、渗🍖物等污染物；及职业暴露或时间近距离吸病例呼吸道飞🧙‍♂️等，经评估有🕵️‍♂️染风险的人员　　2.密切接触者判定。根-流行病学调查,,暴露风险评估果，疾控机构🧑🏾‍🤝‍🧑🏼责及时对密切触者进行判定　　3.密切接触者管理。疾🎚️机构或基层医卫生机构指导切接触者做好我健康监测，康监测期限为后密切接触之起21天。　　密切接触者自健康监测期间正常生活与工，需避免与他🍹发生性接触等切接触，避免献血液等；坚每天做好体温量和症状监测出现猴痘样症❎应及时就诊并动报告可疑接史。辖区疾控构或基层医疗👩‍🚒生机构应在密⛽接触者自我健监测第7、14、21天上门或电话对其进行💈访，提供咨询👨‍💼导，发现异常💯况及时进行处。　　密切接✊者判定管理要详见附件4《猴痘密切接触者定和管理指南。　　(四)消毒与人员防护⏫　　做好病例物、毛巾、床、餐具等个人品，以及可能病例分泌物、,,出物、体液等🕞染的环境和物表面的消毒。事病例诊治护、流行病学调、环境清洁消、标本采集和验室检测等工😘人员在工作期做好个人防护　　消毒与人防护要求详见➿件5《猴痘消毒技术指南》和🗓️件6《猴痘个人防护指南》。、实验室检测　猴痘病毒核检测首选皮肤黏膜病变部位本，可同时采口咽拭子标本各省首例猴痘诊病例标本应中国疾控中心🍺毒病所进行复；本土疫情中👊首发或早期确病例、与早期例有流行病学联的关键确诊例、感染来源明的本土确诊例、境外输入诊病例阳性标等，荧光定量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因测序。有测序原始数、组装序列及序样本送检单在获得序列48小时内报送中😽疾控中心病毒🐤所进行汇总、析。以上确诊例应至少采集套标本(包括核酸检测阳性者皮肤或黏膜病🌔标本、口咽拭👩‍🎓标本以及发病性期和恢复期份血清)送中国疾控中心病毒所。　　实验🚨检测具体要求见附件7《猴痘病毒实验室检🌂技术指南》。🏑、院内感染控　　医疗机构当严格做好院💉感染控制。疑🥇病例和确诊病应安置在隔离🍘房，疑似病例间隔离。医务员执行标准预，采取经接触播和经飞沫传🎎疾病的隔离与😳防措施，佩戴📝次性乳胶手套KN95/N95及以上级别的口罩、防护面或护目镜、一性隔离衣等，时做好手卫生🧣严格按照《医机构消毒技术🥜范》对病例的液、血液、排物、分泌物等行规范处理，好诊疗环境(空气、物体表面地面等)、医疗器械、病例使🔜物品等的清洁🧙‍♀️毒。根据《医废物管理条例🐖《医疗卫生机医疗废物管理☦️法》做好医疗物的处置和管。八、工作要　　(一)加强组织协调。各💈卫生健康、疾🏌️‍♀️部门加强与海🪒等有关部门的切协作和信息🎊享，及时发现处置猴痘疫情-落实猴痘病例🕗现、疫情报告诊疗隔离、密接触者追踪管等工作，防止情扩散和蔓延各地在猴痘疫防控过程中应意保护病例、切接触者和重人群等个人隐。　　(二)加强宣传引导。地要及时发布区猴痘疫情相信息，做好政解读和公众健提示。通过多方式和渠道开😼猴痘防控知识,-传，加强重点群宣传教育的对性和实效性及时回应社会切，引导公众学认识猴痘。🚈　(三)加强人员培训。各地加强对各级疾机构和医疗机专业人员的培。对医务人员点开展猴痘病的识别与诊断,,病例发现与报、病例管理等关知识培训，化诊治意识。疾控人员重点👩🏿‍🤝‍👩🏾展流行病学调⏺️、密切接触者判定和管理、-验室检测、重人群宣传干预相关知识培训提高猴痘疫情🏄‍♀️控和应急处置⤵️力。　　附件　　1.重点人群宣传干预指　　2.猴痘病例居家隔离治健康告知书　📬3.猴痘疫情流行病学调查指　　4.猴痘密切接触者判定管理指南　　5.猴痘消毒技术指南　　6.猴痘个人防护指🔙　　7.猴痘病毒实验室检测🚳术指南　　附1　　重点人群宣传干预指南🍹　2022年5月以来，全球地方性流行区👨‍👩‍👦‍👦生的猴痘疫情男男性行为人(MSM)为主。为充分利用国艾滋病防治合干预服务体，开展MSM等重点人群宣传预，防范猴痘情传播扩散，成常态化艾滋与猴痘综合防’一体化应对机🏃，制定本指南🎑一、实施策略　在现有艾滋⭕防治综合干预务体系基础上综合运用行为👨🏾‍🤝‍👨🏽干预方法和手，通过宣传教、促进安全性为、动员检测🕛外展服务、同-教育和互联网预等，从个体群体和社会等个层面为目标群提供猴痘综干预服务。二组织实施　　级医疗机构和控机构要加强点科室和艾滋自愿咨询检测诊工作人员猴知识培训，对👩‍💼点人群提供猴防控知识宣传🕥检测咨询与动🍂、治疗和关怀服务。各级疾🌑机构应当积极动当地有能力具有良好艾滋😹防治经验的MSM志愿者或社会组织共同参与痘防治宣传工，在工作过程注意保护重点群个人隐私。🚹、形势分析　各地要加强对点人群猴痘疫、防控现状、响因素及出入情况的调查，时分析研判猴,疫情形势，为🆒定本地高危行🔡干预工作计划供依据。具体🦊容包括：1.重点人群基数、🟣动形式和特点✴️活动场所、出境的时间及地📭等；2.猴痘知识、态度和高行为；3.猴痘疫情水平及其响因素；4.猴痘防治政策及📐业机构已开展㊙️工作；5.包括志愿者在内的关组织和个人开展的干预活🥟；6.影响猴痘防治工作的困和问题。四、传干预　　(一)宣传教育。各级疾控机构或康教育专业机提供技术支持社会组织参与共同研究制定🌽合当地特点的痘预防宣传材，加强警示宣👪教育。通过大媒体、MSM网站和以移动终为载体的交友件等平台，宣国际、国内及地猴痘疫情信和防控知识，高重点人群猴防范意识。　🍿(二)同伴教育。各级疾控机🗿要加强同伴教👥员挑选、招募🉑培训，组织和持同伴宣传活，增强人群猴风险防范意识♦️推动主动检测定期组织同伴育员工作例会了解猴痘干预作存在的困难问题，有针对地给予帮助和🖥️持。　　(三)外展服务。各疾控机构干预🚔作人员定期到点人群活动场🍩开展猴痘宣传咨询、发放宣材料等外展服活动，提高重人群猴痘防范👨‍🦯识和知识水平🤶推动重点人群强自我健康管-，主动寻求检😭咨询服务。　🟪(四)检测咨询。各级疾控机🍟通过互联网、伴教育、外展动等多种形式😹员有猴痘样症或可疑接触史重点人群进行👨‍👩‍👦痘检测。各级🦨类医疗机构皮(性病)科、肛肠科、艾滋病愿咨询检测门🛁发现猴痘样症👵者，应主动询其流行病学史性接触史，记患者现住址及系方式，采集本送疾控机构行猴痘核酸检，具备猴痘检能力及猴痘病实验活动资质💡医疗机构也可展检测。对于建立互联网+HIV检测平台的地区，可增加🕑痘检测内容，现互联网在线📤测预约和结果🦝询。五、重点🐫所干预　　重🥯活动场所包括💺体和虚拟两类所，实体场所括酒吧、会所浴池等经营性所，虚拟场所括移动互联网社交媒体。　♻️(一)实体场所干预。　　各🛤️疾控机构负责织干预工作人👩🏻‍🤝‍👨🏽在当地MSM经常出入的酒吧会所、浴池等动场所，开展痘预防干预宣🚸，主要包括：💩　1.在MSM经常出入的酒、会所、浴池实体场所，张👨‍🌾醒目的健康教宣传图片，设健康教育资料告栏；　　2.强化个人健康任意识，开展痘健康咨询，🥊动开展自我风🛫评估；　　3.提供转介服务息，告知明确诊疗流程以及👭🏻关检测、医疗构名称、联系等信息。　　地要加强对猴确诊病例发病21天内活动过的场所以及污🧑🏿‍🤝‍🧑🏿监测阳性场所干预宣传，重🔳目标人群的个,隐私保护，加对社会组织同🎰教育员猴痘防知识培训，建规范的行为干流程，提高自防护技能。　(二)虚拟场所干预。　　各疾控机构负责织指导当地有🌈开展猴痘线上传，在相关网🔍、社交媒体平及时发布和更猴痘宣传教育-容，形成面向点人群的猴痘🦁测-咨询-诊疗的线上宣传干服务体系。　👨‍🦽各级疾控机构持社会组织或☸️伴教育员利用站、信箱或社✊媒体平台，组👿开展在线咨询交流。及时解❗网友提出的各猴痘相关问题针对不同时期痘传播特点，期或不定期组专家、专业人、同伴教育员🗼用互联网和社媒体平台进行线宣教。各级控机构要定期导更新相关专信息，确保宣🥈内容科学、有📰。　　附件2　　附件3　　猴痘疫情流行病调查指南　　🧑🏾‍🤝‍🧑🏾指导各地疾控👨‍🎨构规范开展猴疑似病例、确病例和聚集性💇‍♂️情的流行病学查，及时掌握例暴露史、接史等流行病学关信息，落实🥼切接触者的追判定，防止疫🤹传播扩散，制本指南。一、查目的　　(一)查找感染来源，掌握、追踪管理密切接触🦸‍♂️。　　(二)分析传播链及传特征。　　(三)及时发现潜在的风险人群及特征、范围，👓针对性地开展传教育和综合🙎预。二、调查象　　疑似病、确诊病例和集性疫情。三调查方法和内　　通过查阅料，询问病例〽️诊治医生、家😹和知情人等进♒流行病学调查如病例的病情🤫许，调查时应💆调查病例本人再对其诊治医、家属和知情进行调查。　开展个案调查，要认真、详了解和记录病🩲基本信息、发🛷就诊情况、临表现、转归及👨‍👩‍👧‍👦验室检测信息Ⓜ️发病前21天内与可疑感染来的接触史、接场所及接触方；发病后至隔🕧治疗前的具体📚动地点、与其皮肤或黏膜直接触者，以及病前4天内与其有性接触者。　(一)基本情况。如姓名、别、年龄、住、国籍、联系式等。　　(二)发病就诊情况。临床表现、🧏‍♂️验室检测、发就诊经过和病变化与转归。👩‍👩‍👦‍👦　(三)感染来源调查。对病发病前21天内的暴露史开展查，包括境内👨‍👨‍👦猴痘病例报告区旅行史或居史，对可疑的染来源要详细问接触时间、式、频次、地及接触时采取防护措施等，别是性接触史-,调查时，若发🔗调查表中未列💖，但具备重要🥘行病学意义的容也应进行详🙄询问和记录。🐮　(四)密切接触者调查及判👨‍👩‍👦。对病例传染的活动情况和群接触情况进追踪和排查后🤮判定其密切接者。密切接触🎑判定和管理按🚛《猴痘密切接-者判定和管理南》(附件4)执行。　　详😀附件3-1《猴痘病例个案调表》。四、组与实施　　按“属地化管理原则，由病例’住址所在的县(市、区)级疾控部门组织辖区控机构开展猴病例的流行病🚬调查，就诊医机构提供诊疗👌息。调查单位根据调查计划调查目的，确调查人员组成🏞️职责分工，及开展病例流行学个案调查。🔺查过程中发挥部门联防联控协同作用，尽能获取全面准的流调信息。查期间，调查员要做好个人护。五、信息上报与分析　疾控机构完成查后，应做好例分析总结，🛰️时将流行病学案调查表、调报告等资料逐📫报送上级疾控构，并做好调资料的保管和🈲档。病例流调息要按有关规➡️，严格做好信🐒安全和个人隐信息保护。　附件：3-1.猴痘病例个案查表　　附件4　　猴痘密切触者判定和管🏨指南　　为指各地做好猴痘切接触者判定👩🏽‍🤝‍👩🏼管理，有效控猴痘疫情的传，制定本指南🦌一、密切接触判定标准　　切接触者是指👑接接触病例的变部位及其被🦷染物品，或感动物及其分泌🧜、渗出物等污物的人员；以职业暴露或长间近距离吸入✍️例呼吸道飞沫，经评估有感风险的人员。体情形包括：,　1.与疑似病例或确诊病例病后有皮肤或膜直接接触的员，接触方式括性接触、抚😁、拥抱和亲吻；　　2.与有皮疹症状的疑病例或确诊病👩‍🦲共用衣物、被、餐具等物品😱人员；　　3.医疗诊疗、采🧃或实验室检测操作过程中可暴露于病毒，评估有感染风的医疗卫生工🐎人员；　　4.与疑似病例或诊病例发病前4天内有性接触并经流行病学查专业人员评💅有感染风险的🙎‍♂️员，亦可判定密切接触者；　5.在狭小密闭空间与疑似📜例或确诊病例时间近距离接(如长时间共处同一封闭空间)，经流行病学查专业人员评🤍有感染风险的⌚员，亦可判定🥰密切接触者；　6.接触感染猴痘病毒的动及其分泌物、⚡出物等污染物而未采取有效🕵️人防护的人员　　7.其他可能存在病毒暴风险的人员。🍮、密切接触者理　　1.管理期限与方式。例发现地疾控🚁构或密切接触🐏所在地疾控机应于追踪到密接触者当天及📺开展猴痘病毒酸检测，通知🧟‍♂️指导密切接触做好自我健康测，健康监测♍限为自最后密接触之日算起21天。自我健康监测期间可正生活与工作，避免与他人发性接触等密切触，避免捐献液等。　　2.知情告知。实健康监测时，控机构或基层🗞️疗卫生机构应头告知健康监的缘由、期限注意事项和疾相关知识，以负责随访疾控构或基层医疗生机构联系人联系方式，并放《猴痘密切触者健康告知》。　　3.定期随访。疾控构或基层医疗生机构应在第7、14、21天电话或上门主☁️询问密切接触自我健康监测👩‍🏭况，提供咨询导建议。发现🧙‍♀️常情况，及时查处置。　　4.自我健康监测。坚持每天做体温测量和症🦀监测，主要症包括发热(＞37.3℃)、皮疹、浅表淋巴肿大等。密切🍐触者一旦出现⛰️关症状应及时🐆往医疗机构就👨‍🦱或与随访联系👩‍💻取得联系，接猴痘病毒核酸🎹测。　　附件4-1.猴痘密切接触者健康知书　　附件5　　猴痘消毒术指南　　为一步规范猴痘🌫️情相关的消毒作，落实科学毒、精准消毒❇️减少猴痘病毒公众健康造成🧞危害，制定本南。一、疫源-消毒　　(一)适用范围。　适用于出现猴病例后，对其💄能污染的场所物品进行的随消毒和终末消。　　(二)消毒原则。　　1.范围和对象确定。　　根据行病学调查结，确定现场消的范围和对象对病例在住院转运期间可能染的环境和物，进行随时消。对病例居住活动过的场所如居住场所、作场所、学习所、诊疗场所转运工具，及他可能受到污的场所，在其开后(如住院、转院、出院、📤亡)进行终末消毒。　　2.方法选择。　　(1)诊疗用品消毒。尽量选择次性诊疗用品非一次性诊疗品应首选压力汽灭菌，不耐物品可选择化消毒剂或低温菌设备进行消或灭菌。　　(2)手消毒。建议使用手消毒揉搓双手进行毒，也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒剂　　(3)环境和物体表面消👩‍❤️‍👩。可选择含氯毒剂、二氧化、过氧乙酸、氧化氢等消毒,擦拭、喷洒或泡消毒。　　(4)衣物、床单等纺织品消毒可选择热力消📐、含氯消毒剂季铵盐类消毒浸泡等消毒方👩🏻‍🤝‍👨🏼。　　(三)常见污染对象的毒方法。　　1.手消毒。　　可选用速干手毒剂，或直接用75%乙醇进行擦拭消毒；类过敏者，可👨‍👦择季铵盐类等效的非醇类手毒剂。有肉眼见污染物时，先使用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六步手法清洗双手然后按上述方消毒。　　2.皮肤、黏膜。　皮肤被污染污染时，应立清除污染物，用一次性吸水料沾取0.5%碘伏或过氧化😬消毒剂擦拭消3分钟以上，使用清水清洗干🏵️；粘膜应用大生理盐水冲洗0.05%碘伏冲洗消毒。　🦸3.床单、毛巾、衣服等纺织。　　病例使🚐的床单、毛巾🤔衣服等纺织品无肉眼可见污💆‍♀️物时，若需重使用，可用流蒸汽或煮沸消🩹30分钟；或用有效氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒剂浸30分钟后，按照常规清洗；用其他有效的🈳毒方法。不耐的衣物可选用氧乙烷或干热法进行消毒处。　　有分泌🕷️、渗出液、排物、血液、体等污染物时，议按医疗废物中处理。　　4.餐(饮)具。　　病例所使-的碗、盘、筷♣️杯等餐(饮)具清除食物残渣，煮沸消毒30分钟，或使用🌪️效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再用清水净。　　5.污染物。　　对例分泌物、渗液、排泄物、液、体液等少污染物可用一性吸水材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒剂(或能达到高水平消⛱️的消毒湿巾/干巾)小心移除。　　对病例分#️⃣物、渗出液、⏲️泄物、血液、液等大量污染应使用含吸水分的消毒粉或🕳️白粉完全覆盖或用一次性吸-材料完全覆盖用足量的有效5000-10000mg/L的含氯消毒剂👩‍✈️在吸水材料上🗿作用30分钟以上(或能达到高水平消毒的消干巾)，小心清除干净。清除程中避免接触染物，清理的染物按医疗废集中处置。　病例的分泌物应有专门容器集，用有效氯20000mg/L的含氯消毒剂，按物、药比-,1:2浸泡消毒2小时。　　清除污染物后，-,对污染的环境物体表面进行毒。盛放污染的容器可用有氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液浸泡消30分钟，然后清洗干净。　✈️6.地面、墙壁。　　有肉眼见污染物时，⛎先完全清除污物再消毒。无眼可见污染物，可用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂500mg/L的二氧化氯消🥗剂擦拭或喷洒毒；不耐腐蚀😦地面和墙壁，可用2000mg/L的季铵盐类消毒剂喷洒擦拭；消毒作时间不少于30分钟。　　7.物体表面。　诊疗设施设备面以及床围栏床头柜、家具💇门把手、卫生具和家居用品有肉眼可见污物时，应先完👼清除污染物再毒。无肉眼可污染物时，用’效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂，不腐蚀的物体表📺也可用2000mg/L的季铵盐类消毒剂进喷洒、擦拭或泡消毒，作用30分钟后清水擦拭干净。　　8.污水和粪便。　　在进入市排水管网前需行消毒处理，毒后污水应当合《医疗机构污染物排放标》(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃圾。　病例生活垃按医疗废物处👩‍👩‍👧‍👦。　　10.医疗废物。　　疗废物的处置遵循《医疗废管理条例》和医疗卫生机构-疗废物管理办》的要求，规使用双层黄色🥼疗废物收集袋装后，按常规程进行处置。🟫　11.室内空气。　　如经学评估，需对内空气进行消，则在无人情下，可选择5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧氯(浓度按产品说明书)等消毒剂，按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒’也可采用经验安全有效的其🎃消毒方法。二注意事项　　场消毒应确保用消毒产品合有效，所选消方法科学可行现场消毒时，据现场情况和关标准要求，,-择合格有效的⬅️人防护装备，👨‍🦯做好个人防护🕙前提下，严格照工作方案实消毒。　　消实施单位应具现场消毒能力-操作人员应经🗺️消毒专业培训掌握消毒和个防护基本知识熟悉消毒器械📖使用和消毒剂配制等。　　☺️次开展消毒工时均应做好消记录，包括消🎼对象、消毒面(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作用时间。同时，相关门和单位应做消毒工作的监管理和评价。　附件6　　猴痘个人防护指🩱　　为加强公、疫情处置相🪕工作人员和医人员的个人防-，避免猴痘病👛暴露感染，制本指南。一、家隔离治疗的例等相关人员🍉　(一)适用范围。　　适用居家隔离治疗病例(疑似病例和确诊病例)、照护人员或共⚗️居住者的个人🥵护。　　(二)居家隔离区域-求。　　1.应选择有自然通◻️、独立卫生间🏋️房间作为隔离域。　　2.应配备专用的餐，床单、毛巾🥙床上用品，消剂和口罩等个防护用品，电🚧和平板电脑等🤪子设备。　　3.卫生间宜配备专用的洗衣机地漏应有水封　　(三)病例管理要求。　,1.应能够进行自我照护。　💏2.应每天做好体温测量和症♂️监测，避免与人共用个人物。　　3.避免与他人发生性触，避免与免力低下人员、童、老人、孕及其他人员的接接触，避免宠物等动物接，避免捐献血🤕等。　　4.外出就诊时，应❓戴医用外科口，着长衣长裤确保遮住所有🤽‍♂️伤皮肤，避免他人密切接触避免乘坐公共通工具。　　(四)照护人员要求。　　1.应每天做好体温,量和症状监测-　　2.应尽量避免进入隔离😽域。如需进入离区域，应佩医用外科口罩一次性手套，病例保持至少1米的距离。在开隔离区域之，应加强手卫-，并对脱下的罩和手套进行-毒处理后废弃　　3.在拿放和清洗居家隔治疗病例的床、衣服和处理圾的过程中，避免抖动。用-拖布拖地，避干扫。用湿抹清洁家居用品👦面，地毯应用汽清洗，避免用吸尘器。　4.应将居家隔离治疗病例的😕具、床单、毛😅和衣物单独洗🧶和消毒，可选🚺热力消毒、含消毒剂或季铵类消毒剂浸泡🀄消毒方式。　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同居者出现任何症-或不适表现，当及时前往指医疗机构就诊主动报告可疑触史。　　2.对其接触的物、活动的区域结合风险评估🥱果进行消毒处🥻。二、疫情处☃️相关工作人员　(一)适用范围。　　适用猴痘疫情期间行病学调查、境清洁消毒人的个人防护。🙆‍♀️　(二)流行病学调查人员防要求。　　1.个人防护装备一次性乳胶手、医用外科口、一次性隔离等。　　2.个人防护要求。范佩戴口罩，强手卫生，与👨‍👨‍👦‍👦调查人员保持少1米的距离。　　3.废物管理。调查结束🎣，废弃的个人⛔护装备暂存、🍏理和处置应按《医疗废物管条例》执行。　4.应急处置。如在调查过🚔中出现口罩脱、直接接触了🎥例皮肤或分泌等情况，要结被调查人员的床诊断结果、🏬间的密闭性、触的时间和距等进行风险评，结合风险评🩱结果，采取相的处置措施。　(三)环境清洁消毒人员防要求。　　1.个人防护装备一次性乳胶手、医用外科口、一次性隔离、防水靴套等　　2.个人防护要求。规范戴口罩，加强卫生，尽量减与被消毒物品💒直接接触。　3.废物管理。清洁消毒结束，废弃的个人护装备暂存、理和处置应按《医疗废物管◼️条例》执行。🖋️　4.应急处置。如在清洁消🛏️过程中出现口-,-脱落、皮肤损或直接接触排物、血液等情，要结合被清👩‍✈️消毒物品的类🥖、接触的时间空间的密闭性👫🏿进行风险评估结合风险评估👧果，采取相应处置措施。三💟医务人员的个🉐防护　　(一)适用范围。　适用于猴痘疫👨‍💻期间医务人员其工作环境的-,护。　　(二)基本要求。　1.个人防护装备要求。医务员执行标准预🚨，采取经接触📹播和经飞沫传疾病的隔离与🤳防措施，佩戴次性乳胶手套KN95/N95及以上级别的口罩、防护面或护目镜、一🚞性隔离衣等。⏮️　2.环境防护要求。医院环的清洁消毒应合附件5的要求。应避免干除、清扫或吸尘🤸‍♂️活动。首选湿清洁方法。　👶3.废物管理。个人防护装备-病例敷料等暂、处理和处置按照《医疗废管理条例》执。　　附件7　　猴痘病毒实室检测技术指　　为指导各🪔疾控部门和其😏相关机构规范⌨️展猴痘病毒实室检测工作，速、准确识别痘确诊病例，定本指南。本南主要介绍标采集以及猴痘-毒核酸荧光定👽PCR检测方法、生物安全要等内容。一、💥测对象　　(一)猴痘确诊病例和疑似病例；⚗️　(二)密切接触者；　　(三)感染或疑似感染猴痘病毒的👃物；　　(四)环境或其它生😾材料。二、技人员基本要求　(一)采样人员。从事猴痘🔻毒核酸检测标采集的技术人应当经过生物全培训，培训✂️格后方可从事,-样工作。采样员应熟悉采集本种类和采集法，熟练掌握本采集操作流👩🏾‍🤝‍👨🏿及注意事项，好标本信息记🔆，确保标本质🦘符合要求、标🧎及相关信息可🐆溯。　　1.采样人员个人防🧜‍♀️装备要求：KN95/N95及以上级别的口、防护面屏或🌽目镜、一次性离衣、一次性👩‍🔧胶手套(尽可能戴两层)、靴套；如果接触了🥄例血液、体液分泌物或排泄🦚，应及时更换✋套。污水采样员可根据实际🌠作需要，适当💴低防护级别。　2.住院病例的标本由所在👨‍✈️院医护人员采，根据实验室测工作的需要可结合病程多采样。　　3.密切接触者标由当地疾控机或医疗机构专人员采集。　4.感染或疑似感染猴痘病毒动物由当地疾机构协调动物🐠控部门专业采🤟人员负责采集　　5.环境或其它生物材料,-本由相关专业样人员负责采👲。　　(二)检测人员。实验🚎检测技术人员具备相关专业专以上学历或有中级及以上业技术资格，有2年以上实验室工作经历，受过核酸检测关培训，培训格后方可从事测工作。实验配备的工作人数量应与所开检测项目及标🤳量相适宜，确能够及时、熟🔠、准确地开展验室检测和报🔪结果。三、标采集、保存和输　　(一)标本采集种类。🧍　1.首选标本是皮肤(黏膜)病变部位标本🙋包括病变表面🚿子、痘疱液或疱渗出物拭子痘痂或痘痂拭,-等。　　2.呼吸道标本，如👨‍👩‍👧咽拭子，可用🗯️病例急性期检，也是密切接⬅️者检测最常用本。　　3.发病急性期可采👨‍👦EDTA抗凝血标本进行核酸测。　　4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检测。🥾　5.直肠拭子、尿液、精液唾液等其它标仅用于研究，🚮据工作需要采🧝。　　6.污水或其它环境生🙅‍♀️材料标本根据际工作需要进采集。　　(二)标本采集要求。　　采集皮(黏膜)病变部位标本时应使无菌聚酯纤维尼龙或类似材🤽‍♂️拭子，避免使棉拭子。采集⤴️似病例的标本应避免使用75%乙醇等消毒剂清洁病变部位每种类型的皮🚖(黏膜)病变应尽可能采集两以上拭子，每病例应同时采🦹身体不同部位💟外观不同的2-3种病变标本。采集皮肤(黏膜)病变部位标本时应适当用力🛠️皮肤(黏膜)病变部位、痘痂-,-分泌物等不同子标本应放置不同的采样管。进行病毒分时应采集干拭标本(无采样液)或以非灭活型病毒采样液保🦄。根据实验室动资质确定使非灭活型或灭型采样液采集本。　　(三)标本采集方法　　1.斑疹、丘疹、水疱或📞疱等皮肤(黏膜)病变部位标本：一手紧握采拭子尾部，手拭子头部保持寸以上距离。🏺样时适当用力压拭子，在皮表面来回擦拭少2-3次，然后以拭子另一再重复擦拭2-3次。如果在擦拭过程中痘疱🏂裂，要确保采-到痘疱液。采后将拭子放置无菌采样管中(可含病毒采样或不含液体)，折断拭子头，除拭子尾部，上管盖，以消纸巾擦拭消毒样管，以封口密封管盖后将样管保存或送。　　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样前应确保实验📮可检测此类标。使用无菌镊或其他钝头器夹取全部痘痂--面积至少4mm×4mm大小的痂皮，放置于燥、无菌的采管中，采样完后以创可贴覆患处。　　3.口咽拭子标本被采集人员头⚔️微仰，嘴张大露出两侧扁桃，将拭子越过根，在被采集两侧扁桃体稍用力来回擦拭少3次，然后再在咽后壁上下拭至少3次，将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中或于不含液体(干拭子)的无菌管中，尾部弃去旋紧管盖。　4.血液标本：尽量采集急性(发病7天内)的血液标本，🧦议使用含EDTA抗凝剂的真空采血管采集5mL全血，可利用全血进行检测或室温静置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血浆无菌管中进行🎶测。　　5.血清标本：用真负压采血管采血液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于菌螺口塑料管📁。第一份血清👩🏿‍🤝‍👨🏽尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份血应在发病后第3-4周采集，采集血液标本5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清🤽‍♂️无菌螺口塑料中，用于猴痘🚻体检测。　　6.其他标本：依据设计需求规采集。　　(四)标本保存。　　标本应在收,后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行检测。在1周内检测的标本可置于4℃环境中保存；1周内无法检测标本，短期可-于-20℃环境中保存，长期置于-70℃或以下环境中保。全血分离血前冷藏(2-8℃)，分离出的血浆置于-20℃或以下环境保存。应设立😷库或专柜单独存标本，避免复冻融标本。🧹　猴痘病毒及相关标本应由🎀人管理，准确录病毒及标本👩🏼‍🤝‍👨🏿来源、编号、-,-量等信息，具要求可参考《原微生物菌(毒)种保藏数据描述通则》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措确保病毒及标安全，严防发误用、恶意使、被盗、被抢丢失、泄露等件。　　(五)标本送检。　🍂标本采集后应快在低温条件-(冰袋或干冰)送往实验室，需长途运输标🤳，应采用干冰冻运输方式进保藏。　　1.送检标本：病标本先由省级以下疾控机构行初步检测，’省首例猴痘阳⏯️标本应送中国控中心病毒病🆚复核。每个阳🌜病例至少采集套标本(皮肤或黏膜病变部位本、口咽拭子🌰本及急性期、复期双份血清🐕本)送中国疾控中心病毒病所测。各省级疾机构根据实际况制定省内样♎送检、复核流👩🏿‍🤝‍👨🏻。　　2.病原体及标本运输　　(1)国内运输。猴痘病🕛或其他潜在感性生物材料的🔺输包装分类属👩‍💼A类，对应的联合国编号为UN2814，包装符合国际民航织文件Doc9284《危险品航空安全运输术细则》的PI602分类包装要求，通过其-交通工具运输可参照以上标包装。猴痘病或其他潜在感性材料运输应照《可感染人,,,的高致病性病微生物菌(毒)种或样本运输理规定》(原卫生部令第45号)办理《准运证书》。污水等🎆境标本暂按普生物样本运输准执行。　　(2)国际运输。猴痘毒株或样🥂在国际间运输，应规范包装按照《出入境殊物品卫生检管理规定》办相关手续，并足相关国家和际相关要求。️⃣、猴痘病毒核检测要求及流🤠　　(一)实验室资质要求。　开展猴痘病核酸检测的实室，应当符合病原微生物实室生物安全管👱‍♂️条例》(国务院令第424号)或《医疗机构床基因扩增检实验室管理办-》(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定，具备设区市级卫生健康门备案的生物👞全二级(BSL-2)实验室及以上实验室条，并备案猴痘毒相关实验活💛。独立设置的学检验实验室🕝应符合《医学验实验室基本准(试行)》《医学检验实验管理规范(试行)》等要求。　　开展猴痘病分离、培养、和等涉及病毒增、使用等实操作的实验室⏬具备国家卫生👩‍🔧康委批准的生安全三级(BSL-3)实验室及以上实验室🐔件，且获得猴病毒实验活动准。分离的猴病毒应送国家原微生物保藏心/国家病原微生物资源库病分库保藏。　🚅(二)实验室生物安全要求。　根据2006年公布实施的人间传染的病微生物名录》(简称《名录》)，猴痘病毒生危害分类为第类，是一种高病性病毒。按《名录》要求猴痘病毒的分、培养等涉及▶️毒扩增及使用😞实验操作需在BSL-3及以上实验室的生物全柜内进行；灭活采样液采的猴痘病例样的灭活在BSL-3实验室进行；样本灭活后痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验室或PCR检测的专门区或房间进行。《名录》更新☔开展猴痘病毒作的实验室生安全要求应按新《名录》执🦛。污水样本的活参照普通生样本。　　(三)实验室分区要求。　　原则开展猴痘病毒酸检测的实验⏪应当设置以下域：试剂储存🥟准备区、标本🧄备区、扩增和物分析区。三区域在物理空上应完全相互立，空气应定流通。各区功分别是：　　1.试剂储存和准备区：贮存试的制备、试剂-分装和扩增反混合液的制备👩‍🔧以及离心管、头等消耗品的存和准备。　2.标本制备区：转运桶开启标本灭活，核🚙提取及加入至🤴增反应管等。　3.扩增和产物分析区：核↙️扩增和产物分。　　根据使仪器的功能，-域可适当合并如采用标本处、核酸提取及增检测为一体自动化分析仪标本制备区、增和产物分析可合并。　　(四)主要仪器设备。　　实验🦸‍♀️应当配备与开检验项目相适的仪器设备，☸️括：二级生物⛩️全柜、高速台离心机、干浴温器、荧光定😬PCR仪、计时器、移液器。　(五)实验室猴痘病毒核酸✊测流程。　　验室接到标本🚊，按照标准操-程序进行试剂,,,备、标本前处、核酸提取、🏯酸扩增、结果析及报告。实室应当建立可标本和阳性标🔹复检流程。　1.试剂与材料。　　(1)标本：包括病变面拭子、痘疱🙎‍♀️或痘疱渗出液🏐子、痘痂或痘拭子、咽拭子全血或血浆等本。　　(2)核酸提取试剂👩‍🦽(基因组DNA提取试剂盒)：组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。　(3)核酸检测试剂：　　试剂：DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴痘病检测引物、探：　　③阳性🤬照：涵盖检测标序列的质粒　　(4)灭菌去离子水、无乙醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用于手部和物体表常规消毒，开后有效期为1周。　　②含氯毒液：现用现，含有效氯1000mg/L的消毒液用于物表面常规消毒含有效氯5000mg/L的消毒液用于感染材料溢洒时的🚚急处理。　　(6)耗材：包括带滤芯的吸头螺旋口的离心👩🏽‍🤝‍👨🏿、非螺旋口的➖心管、含锆珠粉碎管、PCR反应板和透明膜或PCR反应管和透明盖。🚩　(7)BSL-2个人防护用品：包括KN95/N95口罩及以上级别的罩、一次性隔➗衣、防护眼罩面屏、一次性😟子、鞋套、靴🍄和手套。　　2.实验前的标本接收。　　(1)核对被检标本编号、姓名、👥别、年龄及检项目；　　(2)待检标本的状态如有异常，注明；　　(3)待检标本长期存放在-70℃，短期存放可🗨️-20℃，避免反复冻融。　3.核酸检测操作步骤及注意🥐项。　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　操作方法按DNA提取试剂盒相应说明书进行作，具体如下🏇　　①提取试😏准备：第一次启试剂盒，在用前先在漂洗中加入无水乙-，加入体积参🧚瓶上标签。所试剂在使用前平衡至室温；有离心步骤应室温下进行。🙇　②处理样本　　A.痘疱液：干拭子标本以适当体积的PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本，加入80μL缓冲液，总量为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补总体积至180μL；　　B.病变皮疹或痘：取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体积含PS的PBS，研磨或匀浆理，取80μL，然后加入100μL缓冲液；　　C.咽拭子、其它拭子：采样液中取200μL标本，干拭子标本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀后200μL；　　D.全血或血清：直接取200μL标本。　　③加入20μL蛋白酶K溶液，混匀，溶液变清亮。若样🍃为病变皮疹或🥛它组织时，加♉蛋白酶K混匀后，在56℃放置，直至组织溶，再进行下一骤。　　④加🐠200μL裂解缓冲液，充分匀，70℃放置10分钟，或至溶液变清亮，短离心以去除盖内壁水珠。　需注意：加裂解缓冲液后能会出现白色状沉淀，在70℃放置后会消-。如溶液未变亮，说明细胞解不彻底，可导致提取DNA量少或提取出🤭DNA不纯。　　⑤加200μL无水乙醇，充分混匀，此时能会出现絮状淀，简短离心去除管盖内壁🦈珠。　　⑥将🧑🏿‍🤝‍🧑🏾一步骤所得溶和絮状沉淀均🗓️至吸附柱中(吸附柱放入废液🆑集管中)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　　⑦加入500μL漂洗缓冲液1(使用前先检查是否已,入无水乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　　⑧入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是已加入无水乙)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　　🎷将吸附柱放回⚡液收集管中，大转速13000rpm离心1分钟，尽量去漂洗液。　　将吸附柱转入根干净的离心中(需自行准备，试剂盒中未供)，加入50μL洗脱缓冲液或灭菌去离子，室温放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤液，做好标记🦓4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　　(2)核酸检测：实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病毒核酸(PCR实验室进行)。　　①反应👬🏽系的准备：每20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检测-,本外，应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；所样本，包括对，应设复孔。🥃　②加样：每反应管中加入酸或对照各5uL，盖紧管盖或封好透明膜，于荧光定量PCR检测仪上。　　③扩增条件🌲定：　　④仪检测通道选择使用荧光定量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道，📋集设在60℃。具体设置方法照各仪器使用明书。　　⑤果分析阈值设：使用荧光定PCR检测仪进行结果分析时基线取3-10或6-15个循环的荧光信号💒阈值设定原则⚖️阈值线刚好超🤶正常阴性对照增曲线最高点📃也可根据仪器音情况调整阈。　　(3)核酸检测结果判😑　　①Real-timePCR反应系统的质量控制：反应果应同时符合下2个条件，否则试验结果无，应重新开展测。阴性对照扩增，为阴性阳性对照未出⛺阴性结果。　👨‍👧‍👧②结果判定：　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一孔Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳性和处于区的标本应重👲检测或经序列析进行确诊。️⃣注意：当标本为咽拭子或血🤧、血浆，且检结果为阴性时应结合临床症，慎重做出阴诊断。　　(4)表格记录　　做好荧光定量时PCR方法检测猴痘病毒核原始记录。　五、猴痘病毒基因组测序　-1.测序标本选取原则。本土情中的首发或🛕期病例、与早病例有流行病关联的关键病、感染来源不的本土病例、外输入病例阳标本等。以上本在核酸荧光量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。以省为单位确开展猴痘病毒👩‍⚕️基因组测序的构。建议使用👒增子技术进行痘病毒全基因🧀测序。测序数🕺经质控合格后🦇可用于后续生㊙️信息分析。二测序平台覆盖度应不低于10×，三代测序台覆盖深度应低于50×，全基因组测序覆度应不低于98%。数据比对分析推荐参考猴基因组NC_063383.1。　　各省应立本省输入、土病例猴痘病🩱基因组数据库应具备序列对分析能力。具#️⃣测序条件的省要在接收标本48小时内开展测序工作，关🥓样本要求实验收到标本后1周内提供测序结报告，所有测原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾中心病毒病所行序列汇总、析。病毒病所将序列分析结及时反馈各省并将全国猴痘毒序列汇总、🤝析结果及时上©️国家疾控局。🧴　3.分子分型。推荐使用在分析工具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行分子分型。🧟‍♂️　附件：　　7-1猴痘病毒检测标本送检表　7-2猴痘病毒标本序列测结果报告单【辑:孙静波】

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