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　　中新7月27日电据国家,控局官方🕰️信消息，进一步做🙄猴痘防控作，及时🧲效应对猴疫情，提🏉猴痘防控作的科学、精准性有效性，💜实维护人🉐群众生命全和身体📈康，国家控局会同家卫生健委制定并⛈️7月26日印发《猴防控方案。其中提，2023年6月以来，我国多省份先后告多例猴病例，引新增本土发疫情和匿传播的险较高。👼坚持“预📁为主、防结合、精防控、快🧍‍♂️处置”原，落实“🐟发现、早告、早隔🧗‍♂️、早治疗措施。　《猴痘防方案》全如下：猴防控方案🏐　猴痘是🃏猴痘病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致一种人兽患病。2022年9月，我国报🦴首例猴痘入病例。2023年6月以来，国多个省先后报告🗣️例猴痘病，引发新👮‍♀️本土续发-情和隐匿播的风险高。为指各地科学准做好猴👘防控工作切实维护民群众身健康，制本方案。、总体要♓　　坚持🏪预防为主防治结合精准防控快速处置原则，落💺“早发现🚧早报告、隔离、早🧼疗”措施👨‍👩‍👧开展医疗构、重点群、入境员和重点所等多渠监测。加疫情分析风险研判有针对性开展重点🎢群健康教和综合干。落实病隔离治疗流行病学查和密切触者追踪理等措施坚持发现起、控制🪐起，及时🛂断疫情传。二、疾📀特征　　(一)病原学特征。　猴痘病毒🐃于痘病毒正痘病毒，为基因全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发该病毒。1970年在刚果民主和国一名似天花患的标本中次分离到痘病毒，🎴首例确诊人类猴痘👩‍🎤例。　　🛺痘病毒分两个进化🤲支：(1)分支I，曾称为中非支或刚果🕴️地分支；(2)分支II，曾称为西非分支🏮进一步分IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方,,流行区猴暴发疫情毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现🙄多亚分支包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告例输入性痘病例以，各地报💹中国疾控心病毒病👨‍👧‍👦的毒株序🧰均属于IIb分支。　　猴痘病耐干燥和温，在痂、土壤和🥪物、床上品等物体🤷‍♂️面可生存月。该病对热敏感加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂过氧乙酸🚜常用消毒及紫外线有效灭活🎳毒，对过,-化氢、次酸钠、戊醛、邻苯甲醛等敏。　　(二)流行病学特征。　1.传染源。猴痘病的宿主尚明确，目认为非洲👰齿类动物(非洲松鼠👬树松鼠、比亚袋鼠🔔睡鼠等)可能为其自宿主。传源包括猴病例及感的啮齿类🍝物、猴和等灵长类-物。　　2.传播途径。猴痘病主要经黏和破损皮侵入人体👩🏽‍🤝‍👨🏾主要通过接接触病的病变皮或黏膜传📖，亦可通接触被病污染的物、长时间距离吸入例呼吸道👁️沫传播，触感染动的呼吸道🚴‍♂️泌物、病↩️渗出物、液及其它👨‍🦱液，或被染动物咬、抓伤感传播。　3.易感人群。人群遍易感。🕷️种过天花苗对猴痘🎍毒存在一-,程度的交保护力。　4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫主要在中和西非地👹呈地方性🌵行，主要🕴️过接触感🩱动物传播所引发的🔍传人疫情播链较短主要为儿及青壮年散发病例聚集性疫，通过家😭或旅行方⚖️偶尔播散其他国家地区。2022年5月以来全球国暴发的情主要在💽男性行为群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发🍉性行为的性)中经性接触传播👍大部分病为青壮年性，通过📲型聚会以后续在社🏌️‍♂️的MSM扩散，并传至全球多国家和地😔。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出症状后至👨‍🚀疹结痂自脱落并形新皮肤前有传染性有调查提一些病例🥡能在出现状前1-4天存在传性。　　3.早期症状：可出现热、头痛背痛、肌和淋巴结🧔大等。　4.皮疹和黏膜疹：常在热退--出现，有病例可出🐲在全身症🔁之前。皮发生常经斑疹、丘🛌、水疱、疱、结痂痂皮脱落个阶段，同形态皮可同时存，可伴有显痒感和痛。可累🥺口腔咽喉🍃膜、肛门生殖器、膜和角膜。痂皮脱🌞后可遗留斑或色素着甚至瘢，瘢痕持时间可长数年。　🌅5.病程及严重程度猴痘病程2—4周，免疫力低🧄患者的病可能较长猴痘为自♦️性疾病，多数病例状会自行失，也有👹症和死亡🔅生，主要儿童、孕和免疫力下人群。🤷‍♂️　2022年以来全🧶多国猴痘发疫情中大多数病临床表现轻，部分例无全身状，皮疹限于生殖、肛门直黏膜部位死亡病例要为未得治疗的艾👿病病毒感🏖️者等免疫低下人群🛳️2022年以来全球地方性流🏅区病例的死率约为0.1%。三、宣传教与干预　-针对重点群、出入🎸人员和一-人群等不🙊人群分类展宣传教，有针对地加强不人群的自防范意识个人防护🕴️施，积极,,合做好防🔼工作。　(一)重点人群。各😎卫生健康疾控部门合相关社组织，充借鉴艾滋🎾防治综合预经验和务模式，🛥️MSM经常出入的酒、会所、🧁池等重点🕋动场所，展同伴教。借助大👩‍👦‍👦媒体、MSM社交网站等互联网台，开展痘防控知💰宣传教育提高重点群防范意’，减少高行为，引🔜有可疑接史者自觉🌄好自我健😍监测，增主动就诊识。　　点人群宣👩🏿‍🤝‍👩🏻干预要求📲见附件1《重点人群’传干预指》。　　(二)出入境人员。通发放宣传料等形式⏰加强出入🗝️人员猴痘控知识宣教育。提出境人员👅注目的地家和地区♐痘疫情信，不接触痘样症状💑及啮齿类灵长类等物。提醒🦖自猴痘疫报告国家地区的人🥧，如在境👩‍✈️有可疑接史，入境21天内应做好自我康监测，免与他人生密切接，一旦出发热、皮、淋巴结-大等猴痘症状，应动就诊并实报告流病学史。　(三)一般人群。💶地充分发新媒体以☸️广播、电、报纸等统媒体作，开展猴防控知识↖️传教育，高公众科防范意识四、疫情测和报告📁　(一)监测病例定。　　1.猴痘样症🔊者。不明🙍‍♂️因急性皮(面部或口腔黏膜、🕦肢、生殖或会阴、周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿大者　　2.疑似病例。痘样症状，发病前21天内具备以下流行学史中的💿何一项：(1)有猴痘病例报告区旅居史(2)有猴痘确诊病🤷或疑似病🧏‍♂️接触史；(3)有同性性行为，性伴有同性行为史(4)有地方性流行可疑动物触史。　✍️3.确诊病例。猴痘症状者、🍔似病例及切接触者经实验室测猴痘病核酸阳性病毒分离性者。　(二)多渠道监测。🍧　1.医疗机构监测各级各类疗机构要-展猴痘样状监测，其是皮肤(性病)科、肛肠科、👖滋病自愿询检测门🔦等要重点注猴痘样🟡状者。发猴痘样症者，应主🙋询问流行学史，记🚩患者现住及联系方，采集标送疾控机😻进行猴痘⤴️酸检测。🖥️备猴痘病☠️检测能力猴痘病毒验活动资的医疗机’也可开展📱测。　　2.重点人群监测。各各类医疗构、疾控🔪构在对MSM等重点人群开展诊➿或检测咨服务时，🐭主动询问否有猴痘💓症状及其疑接触史如发现猴样症状者疑似病例应及时采👨‍⚖️标本进行痘病毒核检测。　✅3.入境人员监测。关收到猴相关异常康申报或疫发现有痘样症状入境人员🚵‍♂️应及时进🖌️标本采集核酸检测🍑并发放《诊方便卡🎀，要求其快就诊；于核酸检阳性者，相关信息📊报辖区疾👩‍✈️机构，由关部门进步调查处。　　4.重点场所水监测。条件的地🎍可根据当⚙️疫情形势经评估对MSM经常出入的酒吧会所、浴等重点活场所开展水监测。🤾　(三)病例报告。　相关医🙂机构根据床表现、行病学和👡验室检测果，及时患者进行断。　　断的疑似例和确诊例应于24小时内通中国疾病防控制信系统的监🦧报告管理🟪块进行网直报。如境外输入例需填写入来源国-或地区。具备网络🌙报条件的🏵️疗卫生机，需在规时限内将🥤染病报告信息报告地乡镇卫院、社区🚶生服务中或县级疾机构进行💺络报告，🌓时传真或送传染病❔告卡至代单位。负病例网络报的医疗🥰生机构，👩🏿‍🤝‍👩🏾根据实验检测结果,流调进展时对病例息进行复💧、订正。　各县(市、区)出现首例猴痘🔽诊病例或😱2例及以上存在流行💯学关联的🟦诊病例，当在2小时内通过突🎚️公共卫生件报告管信息系统告，事件🍛别选择“分级”。、疫情处🦖　　(一)病例管理　　各地现猴痘疑病例和确病例应当💁时转运至✖️疗机构进隔离治疗如临床症明显好转病变部位⛑️结痂，可为居家隔治疗，直皮疹结痂然脱落，🐮除居家隔。对病情轻且具备家隔离治条件的确病例，经⚖️疗机构与控机构联评估后，直接采取👷‍♀️家隔离治。对于实🗳️居家隔离🐫疗的确诊例发放《痘病例居隔离治疗康告知书(见附件2)。确诊病例居家隔治疗期间单人单间住，避免家人有皮或黏膜直接触，做👩🏿‍🤝‍👩🏾被污染物的消毒，💅必要不外♒，确须外时穿长衣☁️裤、佩戴用外科口，避免前人群聚集所，避免其他人有肤或黏膜接接触；定医疗机安排专人责上门或话随访，🌞供健康咨-和医疗指。　　(二)流行病学调查。　🤧县(市、区)级疾控机构接到辖疑似病例🐠确诊病例👩🏿‍🤝‍👩🏽告后，及组织开展🧞行病学调，查找感来源，掌-、追踪和理密切接者，分析播链及传特征，及🗺️发现潜在风险人群🐽其范围、征，有针🍄性地开展传教育和合干预。-查过程中挥多部门防联控的同作用，📀可能获取面准确的调信息。　调查内🔽主要包括🐚例基本信🥎、发病就情况、临🦀表现、转及实验室🧅测；发病21天内与可疑感染源的接触、接触场及接触方；发病后隔离治疗的具体活地点、与🧾有皮肤或膜直接接🐼者，以及病前4天内与其有性触者。　猴痘疫情🔻行病学调🐷要求详见件3《猴痘疫情流行👩🏻‍🤝‍👨🏾学调查指》。　　(三)密切接触者的判和管理。🔋　1.密切接触者定,。直接接病例的病🌋部位及其👩🏿‍🤝‍👩🏻污染物品或感染动及其分泌、渗出物🃏污染物；及职业暴或长时间距离吸入例呼吸道🏌️‍♂️沫等，经🏁估有感染-险的人员　　2.密切接触者定。根据🏽行病学调及暴露风评估结果疾控机构责及时对切接触者行判定。　3.密切接触者管⚡。疾控机或基层医卫生机构💴导密切接者做好自健康监测健康监测🧝‍♀️限为最后切接触之起21天。　　密切触者自我康监测期🎵可正常生与工作，避免与他发生性接等密切接，避免捐血液等；🧙‍♂️持每天做体温测量🕑症状监测出现猴痘症状应及就诊并主报告可疑触史。辖疾控机构基层医疗生机构应密切接触自我健康,测第7、14、21天上门或电🚋对其进行访，提供询指导，现异常情及时进行置。　　🧠切接触者定管理要详见附件4《猴痘密接触者判和管理指》。　　(四)消毒与人员防护　　做好例衣物、巾、床单’餐具等个👫🏻用品，以可能被病🔍分泌物、出物、体等污染的🤙境和物体🈂️面的消毒从事病例👩🏻‍🤝‍👨🏽治护理、行病学调、环境清↗️消毒、标采集和实⤵️室检测等作人员在🥋作期间做个人防护　　消毒人员防护求详见附,5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个防护指南。六、实🦿室检测　猴痘病毒酸检测首皮肤或黏病变部位本，可同采集口咽💗子标本。省首例猴确诊病例本应送中疾控中心🕰️毒病所进♒复核；本疫情中的👨‍👦‍👦发或早期🧚‍♂️诊病例、早期病例⚜️流行病学联的关键诊病例、👞染来源不的本土确病例、境输入确诊💰例阳性标等，荧光量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因序。所有🏃序原始数、组装序🕊️及测序样送检单应获得序列48小时内报送中国疾中心病毒所进行汇🗿、分析。🦦上确诊病🪀应至少采一套标本(包括核酸测阳性者🐔皮肤或黏🍶病变标本口咽拭子📋本以及发急性期和复期双份😲清)送中国疾控中心毒病所。　实验室测具体要详见附件7《猴痘病实验室检🧱技术指南。七、院⚜️感染控制🤵　医疗机应当严格好院内感㊙️控制。疑病例和确病例应安在隔离病🤺，疑似病🏴󠁧󠁢󠁷󠁬󠁳󠁿单间隔离🌍医务人员行标准预，采取经🔡触传播和飞沫传播⛴️病的隔离预防措施佩戴一次乳胶手套KN95/N95及以上级别的👩‍🚒罩、防护屏或护目🧤、一次性离衣等，-时做好手生。严格照《医疗构消毒技规范》对例的体液🤮血液、排🌌物、分泌👨‍👧等进行规🛰️处理，做诊疗环境(空气、物💿表面、地等)、医疗器械、病使用物品的清洁消。根据《疗废物管条例》《疗卫生机医疗废物理办法》好医疗废的处置和🛐理。八、作要求　(一)加强组织协调各地卫生康、疾控门加强与关等有关门的密切作和信息🔲享，及时现与处置🌴痘疫情，实猴痘病🔏发现、疫报告、诊隔离、密🚵‍♀️接触者追-管理等工，防止疫🐑扩散和蔓。各地在痘疫情防🦿过程中应意保护病、密切接👩‍👩‍👦者和重点群等个人🍤私。　　(二)加强宣传引导。地要及时布辖区猴💛疫情相关息，做好策解读和众健康提。通过多方式和渠开展猴痘控知识宣，加强重😢人群宣传育的针对和实效性及时回应会关切，👨🏽‍🤝‍👨🏼导公众科认识猴痘　　(三)加强人员😨训。各地🛳️加强对各疾控机构🐞医疗机构业人员的⏪训。对医👱‍♂️人员重点展猴痘病💪的识别与断、病例现与报告🦍病例管理🧓相关知识训，强化-治意识。🕤疾控人员点开展流病学调查密切接触的判定和理、实验检测、重人群宣传预等相关🗝️识培训，高猴痘疫🏩防控和应🍃处置能力　　附件　　1.重点人群宣干预指南　2.猴痘病例居家离治疗健-,告知书　3.猴痘疫情流行病调查指南　4.猴痘密切接触判定和管✂️指南　　5.猴痘消毒技术指南　6.猴痘个人防护南　　7.猴痘病毒验室检测术指南　附件1　　重点人群传干预指　　2022年5月以来，全球🔬地方性流区发生的痘疫情以男性行为😂群(MSM)为主。为充分利用🧽国艾滋病👩‍⚖️治综合干服务体系开展MSM等重点人宣传干预防范猴痘情传播扩，形成常化艾滋病👺猴痘综合控一体化对机制，定本指南一、实施略　　在有艾滋病治综合干服务体系🏬础上，综运用行为干预方法✔️手段，通宣传教育促进安全行为、动检测、外☠️服务、同教育和互网干预等🎛️从个体、🕋体和社会,多个层面🕑目标人群供猴痘综🌔干预服务二、组织👕施　　各医疗机构疾控机构加强重点室和艾滋自愿咨询🛤️测门诊工人员猴痘🙎‍♀️识培训，重点人群供猴痘防🔺知识宣传-,检测咨询❄️动员、治和关怀等务。各级🍐控机构应✝️积极推动🥗地有能力🙄具有良好滋病防治验的MSM志愿者或会组织共参与猴痘治宣传工👨‍👦，在工作程中注意护重点人个人隐私🥙三、形势析　　各要加强对点人群猴疫情、防👩‍👩‍👦‍👦现状、影👫🏼因素及出境情况的➰查，及时析研判猴🚟疫情形势为制定本高危行为预工作计提供依据具体内容括：1.重点人群基🌛、活动形🔝和特点、🌏动场所、♦️入境的时及地区等2.猴痘知识、态度高危行为3.猴痘疫情水平及影响因素🔼4.猴痘防治政策及业机构已展的工作5.包括志愿者在内有关组织个人已开🥦的干预活；6.影响猴痘防治👩‍🦳作的困难问题。四宣传干预　(一)宣传教育。级疾控机或健康教专业机构🖖供技术支🥏，社会组参与，共研究制定合当地特🚶‍♂️的猴痘预宣传材料加强警示👩‍🍳传教育。-过大众媒、MSM网站和以移💇‍♀️终端为载的交友软等平台，传国际、内及本地痘疫情信和防控知😗，提高重人群猴痘🧚‍♂️范意识。　(二)同伴教育。--级疾控机要加强同教育员挑、招募和🌥️训，组织支持同伴传活动，强人群猴👩‍⚕️风险防范🕴️识，推动动检测。期组织同,教育员工例会，了🥐猴痘干预作存在的🎣难和问题有针对性🔝给予帮助🍺支持。　(三)外展服务。各疾控机构预工作人定期到重人群活动所开展猴宣传、咨、发放宣🎽材料等外🧁服务活动👿提高重点群猴痘防✴️意识和知水平，推重点人群🅰️强自我健管理，主🚥寻求检测询服务。🉐　(四)检测咨询。级疾控机通过互联、同伴教、外展活等多种形⛺动员有猴🎳样症状或疑接触史🧐重点人群行猴痘检🎱。各级各医疗机构👨‍👨‍👧‍👧肤(性病)科、肛肠🗾、艾滋病愿咨询检门诊发现痘样症状，应主动’问其流行学史及性触史，记🗼患者现住及联系方，采集标送疾控机进行猴痘酸检测，备猴痘检👨‍🎓能力及猴🔨病毒实验动资质的🧳疗机构也🈸开展检测对于已建互联网+HIV检测平台的地区可增加猴检测内容♐实现互联在线检测🧖约和结果询。五、点场所干　　重点动场所包🔁实体和虚两类场所实体场所括酒吧、所、浴池😁经营性场，虚拟场包括移动联网和社,媒体。　💀(一)实体场所干预　　各级⬇️控机构负组织干预作人员在🛢️地MSM经常出入的吧、会所浴池等活😼场所，开猴痘预防预宣传，要包括：　1.在MSM经常出入的酒吧🦍会所、浴等实体场💈，张贴醒的健康教宣传图片🪀设置健康育资料公栏；　　2.强化个人健康责任识，开展痘健康咨，推动开自我风险估；　　3.提供转介服务信息告知明确诊疗流程及相关检-、医疗机名称、联人等信息🈚　　各地▪️加强对猴确诊病例-病前21天内活动过🥞场所以及水监测阳,-场所的干☺️宣传，重🥵目标人群个人隐私护，加强社会组织伴教育员🧦痘防治知培训，建规范的行干预流程提高自我护技能。👮‍♂️　(二)虚拟场所干。　　各🧫疾控机构责组织指当地有序展猴痘线宣传，在关网站、😐交媒体平-及时发布更新猴痘🦗传教育内，形成面重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣干预服务🛌系。　　级疾控机支持社会,织或同伴育员利用站、信箱社交媒体⛹️台，组织展在线咨和交流。时解答网🎾提出的各猴痘相关🍗题。针对,同时期猴传播特点👨‍👦定期或不🔡期组织专👮、专业人🥩、同伴教员利用互网和社交体平台进在线宣教♨️各级疾控构要定期导更新相专业信息确保宣传容科学、效。　　件2　　附件3　　猴痘疫情流🌐病学调查🌺南　　为👬🏿导各地疾💴机构规范展猴痘疑📋病例、确🖍️病例和聚性疫情的行病学调🔇，及时掌病例暴露🧜‍♀️、接触史👨‍🎨流行病学🏹关信息，实密切接⚜️者的追踪定，防止📑情传播扩，制定本南。一、👩‍🔧查目的　(一)查找感染来源掌握、追和管理密接触者。　(二)分析传播链传播特征　　(三)及时发现😰在的风险群及其特、范围，针对性地🤗展宣传教和综合干。二、调🏃‍♀️对象　　🤐似病例、👨‍👩‍👦‍👦诊病例和💅集性疫情三、调查法和内容　通过查资料，询病例、诊医生、家和知情人进行流行🍀学调查。病例的病🐪允许，调👩‍❤️‍💋‍👩时应先调病例本人再对其诊医生、家💎和知情者行调查。　开展个调查时，认真、详了解和记⚫病例基本息、发病🔱诊情况、床表现、🤬归及实验检测信息🕟发病前21天内与可感染来源接触史、触场所及🥑触方式；-病后至隔治疗前的体活动地、与其有肤或黏膜接接触者以及发病4天内与其有性接触。　　(一)基本情况。如姓名性别、年🤛、住址、籍、联系式等。　(二)发病就诊情况临床表现实验室检’、发病就经过和病变化与转。　　(三)感染来源调查。对🎑例发病前21天内的暴露史开展查，包括内外猴痘🙍例报告地旅行史或住史，对🍩疑的感染源要详细问接触时🥇、方式、🌓次、地点接触时采的防护措等，特别🚽性接触史🚓调查时，发现调查中未列入🍓但具备重🗂️流行病学义的内容应进行详询问和记🐌。　　(四)密切接触者调查及定。对病传染期的👻动情况和群接触情进行追踪🌆排查后，定其密切📂触者。密接触者判-和管理按《猴痘密’接触者判和管理指》(附件4)执行。　　详见附🍤3-1《猴痘病例个调查表》四、组织实施　　照“属地管理”原🛳️，由病例🚵‍♂️住址所在🚎县(市、区)级疾控部门组织辖疾控机构展猴痘病的流行病调查，就医疗机构🥞供诊疗信。调查单应根据调🩹计划和调目的，确调查人员成和职责工，及时展病例流📯病学个案查。调查🕺程中发挥部门联防控的协同用，尽可获取全面-确的流调息。调查间，调查员要做好人防护。、信息的报与分析👩🏿‍🤝‍👨🏼　疾控机👳‍♀️完成调查💄，应做好💥例分析总🚂，及时将行病学个调查表、查报告等🥑料逐级报上级疾控-构，并做调查资料保管和存。病例流信息要按🕸️关规定，格做好信安全和个隐私信息护。　　件：3-1.猴痘病例个案调查　　附件4　　猴痘切接触者定和管理南　　为导各地做猴痘密切触者判定管理，有控制猴痘情的传播制定本指。一、密-,接触者判⚔️标准　　切接触者指直接接病例的病🦸部位及其污染物品🎴或感染动及其分泌、渗出物污染物的👨‍🎤员；以及业暴露或🦊时间近距🚛吸入病例吸道飞沫，经评估感染风险🌃人员。具情形包括　　1.与疑似病例确诊病例病后有皮或黏膜直接触的人，接触方包括性接、抚摸、🚴‍♀️抱和亲吻；　　2.与有皮疹状的疑似例或确诊例共用衣,、被褥、具等物品人员；　3.医疗诊疗、采样实验室检等操作过中可能暴于病毒，评估有感风险的医卫生工作员；　　4.与疑似病例或确诊例发病前4天内有性触，并经行病学调专业人员估有感染-险的人员亦可判定密切接触；　　5.在狭小密👩‍💼空间与疑🗜️病例或确病例长时近距离接(如长时间共处同一🔺闭空间)，经流行病😸调查专业员评估有染风险的🎽员，亦可🐣定为密切触者；　6.接触感染猴痘病👨‍🦼的动物及分泌物、出物等污物，而未取有效个防护的人；　　7.其他可能在病毒暴风险的人。二、密接触者管🔓　　1.管理期限与,-式。病例👨‍👩‍👦‍👦现地疾控构或密切触者所在🦼疾控机构于追踪到切接触者天及时开猴痘病毒酸检测，知并指导切接触者好自我健监测，健🙄监测期限🎛️自最后密😦接触之日起21天。自我健康-测期间可常生活与作，需避♨️与他人发性接触等切接触，😿免捐献血等。　　2.知情告知。实施健监测时，控机构或层医疗卫机构应口告知健康测的缘由😩期限、注事项和疾💀相关知识以及负责访疾控机或基层医卫生机构🛹系人和联方式，并放《猴痘💠切接触者康告知书。　　3.定期随访疾控机构基层医疗生机构应第7、14、21天电话或上门🦅动询问密🛋️接触者自🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿健康监测况，提供询指导建。发现异情况，及调查处置📪　　4.自我健康监。坚持每🧟‍♂️做好体温👨‍👦‍👦量和症状测，主要状包括发(＞37.3℃)、皮疹、浅表巴结肿大🛂。密切接者一旦出相关症状🗞️及时前往疗机构就或与随访👩‍⚖️系人取得系，接受👨‍🌾痘病毒核检测。　🎢附件：4-1.猴痘密切接触者康告知书　附件5　　猴痘消技术指南　为进一规范猴痘情相关的毒工作，👬🏼实科学消、精准消，减少猴病毒对公健康造成危害，制本指南。🈳、疫源地毒　　(一)适用范围。　　适于出现猴病例后，其可能污的场所和🖼️品进行的时消毒和末消毒。　(二)消毒原则。　1.范围和对象确。　　根流行病学查结果，定现场消的范围和💾象。对病在住院、🗜️运期间可污染的环和物品，行随时消。对病例住或活动的场所，居住场所工作场所学习场所诊疗场所转运工具🥮及其他可受到污染🧑🏽‍🤝‍🧑🏼场所，在离开后(如住院、转🧑🏾‍🤝‍🧑🏻、出院、亡)进行终末消毒。　2.方法选择。　(1)诊疗用品消毒👨🏽‍🤝‍👨🏼尽量选择次性诊疗品，非一性诊疗用-应首选压👨‍🦳蒸汽灭菌不耐热物🗞️可选择化消毒剂或👌温灭菌设进行消毒灭菌。　(2)手消毒。建议用手消毒揉搓双手行消毒，🏒可选择75%乙醇、过氧化氢等🦄毒剂。　(3)环境和物体表消毒。可择含氯消,,剂、二氧氯、过氧酸、过氧🧽氢等消毒擦拭、喷或浸泡消。　　(4)衣物、床单等纺织消毒。可择热力消、含氯消👨‍👩‍👦‍👦剂或季铵🧄类消毒剂泡等消毒式。　　(三)常见污染对象的毒方法。　1.手消毒。　　👨‍🏫选用速干消毒剂，直接选用75%乙醇进行擦拭消；醇类过💣者，可选季铵盐类有效的非类手消毒。有肉眼👨‍🎤见污染物⭐，应先使洗手液(或肥皂)在流动水下按六步洗手清洗双手然后按上🌽方法消毒🛂　　2.皮肤、黏膜💲　　皮肤污染物污时，应立清除污染，再用一性吸水材🤧沾取0.5%碘伏或过氧化氢消🕊️剂擦拭消👜3分钟以上，使用清🛣️清洗干净🦹‍♂️粘膜应用🚢量生理盐冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒🧛　　3.床单、毛巾衣服等纺品。　　例使用的🕛单、毛巾衣服等纺品，无肉可见污染时，若需复使用，用流通蒸或煮沸消30分钟；或用有效500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒浸泡30分钟后，按常规清洗或用其他-效的消毒✈️法。不耐的衣物可用环氧乙👱或干热方进行消毒理。　　分泌物、出液、排🧶物、血液体液等污物时，建按医疗废集中处理　　4.餐(饮)具。　　病例使用的碗盘、筷、🧑🏿‍🤝‍🧑🏽等餐(饮)具清除食残渣后，沸消毒30分钟，或用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再用清水净。　　5.污染物。　　对病分泌物、出液、排🤙物、血液体液等少🐙污染物可🙀一次性吸材料(如纱布、抹布)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消剂(或能达到高水平毒的消毒🏵️巾/干巾)小心移除🔆　　对病分泌物、🤶出液、排物、血液🕷️体液等大污染物应用含吸水-,-分的消毒👩‍👦或漂白粉全覆盖，用一次性水材料完覆盖后用量的有效5000-10000mg/L的含氯消毒浇在吸水⏹️料上，作-30分钟以上(或能达到高水平毒的消毒🏨巾)，小心清除干净清除过程避免接触染物，清的污染物🤜医疗废物🃏中处置。🧗　病例的泌物等应专门容器🥧集，用有️⃣氯20000mg/L的含氯消剂，按物药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污物后，应污染的环和物体表进行消毒盛放污染的容器可有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液🏖️泡消毒30分钟，然清洗干净　　6.地面、墙壁　　有肉可见污染时，应先全清除污物再消毒-无肉眼可污染物时🔎可用有效1000mg/L的含氯消毒剂500mg/L的二氧化氯消毒👩‍🚀擦拭或喷消毒；不腐蚀的地和墙壁，可用2000mg/L的季铵盐消毒剂喷或擦拭；毒作用时不少于30分钟。　7.物体表面。　　疗设施设表面以及围栏、床柜、家具门把手、生洁具和👩‍🍳居用品等肉眼可见染物时，🚽先完全清-,-污染物再👨‍👧‍👦毒。无肉可见污染时，用有氯1000mg/L的含氯消毒或500mg/L的二氧化氯消剂，不耐蚀的物体面也可用2000mg/L的季铵盐类消毒进行喷洒😫擦拭或浸消毒，作30分钟后清水擦拭➕净。　　8.污水和粪便。　　进入市政🕤水管网前进行消毒理，消毒污水应当合《医疗🟦构水污染排放标准🎋(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃。　　病生活垃圾医疗废物理。　　10.医疗废物。　　⏸️疗废物的置应遵循,,,医疗废物理条例》《医疗卫机构医疗🚵物管理办♂️》的要求规范使用👨🏿‍🤝‍👨🏾层黄色医废物收集封装后，-常规流程👬🏿行处置。👧　11.室内空气。　如经科评估，需🥭室内空气行消毒，在无人情下，可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢二氧化氯(浓度按产说明书)等消毒剂，20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒也可采用验证安全效的其他毒方法。、注意事　　现场毒应确保用消毒产🆚合法有效所选消毒法科学可🌷。现场消时，根据场情况和🟧关标准要，选择合⏭️有效的个👩🏽‍🤝‍👨🏾防护装备在做好个防护的前下，严格照工作方实施消毒　　消毒施单位应备现场消能力，操人员应经👇消毒专业⛓️训，掌握毒和个人护基本知，熟悉消器械的使🐏和消毒剂🃏配制等。　每次开消毒工作📦均应做好毒记录，括消毒对👨‍🦱、消毒面(体积)、消毒剂浓(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。👨‍👩‍👧时，相关🍣门和单位--做好消毒作的监督理和评价　　附件6　　猴痘人防护指　　为加公众、疫处置相关💵作人员和务人员的人防护，免猴痘病暴露感染--制定本指。一、居隔离治疗病例等相人员　　(一)适用范围。　　🙎‍♂️用于居家👩‍🔧离治疗的例(疑似病例和确诊例)、照护人员或共,,,居住者的🎆人防护。　(二)居家隔离区要求。　♓1.应选择有自然通、独立卫间的房间为隔离区。　　2.应配备专的餐具，单、毛巾床上用品消毒剂和Ⓜ️罩等个人护用品，视和平板脑等电子备。　　3.卫生间宜配备专用洗衣机，,漏应有水。　　(三)病例管理要求。　1.应能够进行自我护。　　2.应每天做好体温测和症状监，避免与人共用个😽物品。　3.避免与他人发生接触，避🕓与免疫力下人员、童、老人孕妇及其🍖人员的直接触，避--与宠物等物接触，免捐献血等。　　4.外出就诊时，应佩医用外科-罩，着长🚘长裤，确遮住所有🦠伤皮肤，🏁免与他人切接触，免乘坐公交通工具　　(四)照护人员🏰求。　　1.应每天做好体温测和症状监。　　2.应尽量避进入隔离域。如需⛈️入隔离区，应佩戴用外科口和一次性套，与病保持至少1米的距离在离开隔区域之后应加强手生，并对下的口罩手套进行毒处理后🐰弃。　　3.在拿放和清洗居家离治疗病的床单、服和处理🗑️圾的过程🦺，应避免动。用湿布拖地，免干扫。湿抹布清⚙️家居用品✡️面，地毯用蒸汽清，避免使🎨吸尘器。👨🏾‍🤝‍👨🏽　4.应将居家隔离疗病例的🥽具、床单毛巾和衣单独洗涤⚖️消毒，可择热力消🥾、含氯消剂或季铵🏉类消毒剂泡等消毒式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同居者出现任症状或不表现，应☣️及时前往定医疗机💤就诊并主🌄报告可疑🌼触史。　2.对其接触的物品活动的区🐲等结合风评估结果行消毒处🐛。二、疫处置相关-作人员　(一)适用范围。　🐔适用于猴🥯疫情期间行病学调⛸️、环境清消毒人员⚡个人防护　　(二)流行病学查人员防要求。　1.个人防护装备。次性乳胶🩰套、医用👨🏿‍🤝‍👨🏾科口罩、次性隔离👩🏿‍🤝‍👩🏻等。　　2.个人防护要求。规佩戴口罩加强手卫，与被调人员保持少1米的距离。　　3.废物管理。调查结后，废弃个人防护备暂存、🧉理和处置按照《医废物管理例》执行📗　　4.应急处置。在调查过-中出现口🔰脱落、直接触了病皮肤或分物等情况要结合被查人员的👦床诊断结、空间的闭性、接的时间和❤️离等进行👫🏼险评估，合风险评结果，采’相应的处措施。　-(三)环境清洁消毒员防护要🚮。　　1.个人防护备。一次⏯️乳胶手套医用外科罩、一次隔离衣、水靴套等　　2.个人防护要。规范佩🦽口罩，加,-手卫生，量减少与🩺消毒物品🏫直接接触　　3.废物管理。洁消毒结🐁后，废弃个人防护🚊备暂存、理和处置按照《医废物管理例》执行　　4.应急处置。💬在清洁消过程中出口罩脱落,-皮肤损伤🧘直接接触泄物、血等情况，结合被清消毒物品类型、接的时间和间的密闭等进行风😱评估，结风险评估果，采取-应的处置🥕施。三、务人员的人防护　🖲️(一)适用范围。　🎑适用于猴🛅疫情期间务人员及🌧️工作环境⬅️防护。　(二)基本要求。　1.个人防护装备要🦘。医务人执行标准防，采取接触传播经飞沫传疾病的隔与预防措，佩戴一性乳胶手、KN95/N95及以上级别口罩、防🏒面屏或护🎗️镜、一次🚜隔离衣等　　2.环境防护要🧒。医院环✝️的清洁消🖍️应符合附5的要求。应避免干🧛尘、清扫,,,吸尘等活-。首选湿-清洁方法👩‍💼　　3.废物管理。人防护装、病例敷🙇‍♂️等暂存、理和处置🔠按照《医’废物管理例》执行　　附件7　　猴痘毒实验室测技术指　　为指⤴️各级疾控门和其他,,关机构规🖤开展猴痘毒实验室测工作，速、准确别猴痘确病例，制本指南。指南主要绍标本采以及猴痘毒核酸荧👯‍♀️定量PCR检测方法生物安全求等内容一、检测象　　(一)猴痘确诊病例和疑病例；　(二)密切接触者；　(三)感染或疑似🗼染猴痘病🎬的动物；’　(四)环境或其它物材料。、技术人基本要求　(一)采样人员。🔎事猴痘病核酸检测本采集的术人员应经过生物全培训，训合格后可从事采🛕工作。采人员应熟🚃采集标本👩🏻‍🤝‍👨🏾类和采集法，熟练握标本采操作流程注意事项做好标本,-息记录，保标本质符合要求标本及相🚭信息可追。　　1.采样人员🥠人防护装㊗️要求：KN95/N95及以上级别的口罩防护面屏护目镜、次性隔离🔤、一次性😹胶手套(尽可能戴两⏹️)、靴套；如果接触病例血液🧘体液、分物或排泄🐊，应及时换手套。🥫水采样人可根据实🚨工作需要适当降低护级别。🗒️　2.住院病例的标🎛️由所在医🍩医护人员集，根据验室检测作的需要可结合病多次采样🎤　　3.密切接触者本由当地控机构或🥝疗机构专人员采集🍉　　4.感染或疑似染猴痘病的动物由🏄‍♀️地疾控机,-协调动物控部门专采样人员👩‍🦼责采集。　5.环境或其它生🚨材料标本🎑相关专业样人员负🦁采集。　(二)检测人员。实©️室检测技人员应具相关专业专以上学或具有中🐢及以上专技术资格并有2年以上实验室作经历，受过核酸测相关培，培训合后方可从检测工作实验室配💺的工作人-数量应与🤎开展检测目及标本相适宜，保能够及、熟练、确地开展验室检测☕报告结果👤三、标本集、保存运输　　(一)标本采集种类。　1.首选标本是皮(黏膜)病变部位标，包括病表面拭子-痘疱液或📄疱渗出物子、痘痂痘痂拭子。　　2.呼吸道标👨‍🍳，如口咽♠️子，可用病例急性🔙检测，也密切接触,,检测最常标本。　🎞️3.发病急性期可采👩🏽‍🤝‍👨🏿EDTA抗凝血标本,行核酸检。　　4.采集发病7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用抗体检测　　5.直肠拭子、液、精液唾液等其标本仅用研究，根🥊工作需要🧂集。　　6.污水或其它环境生材料标本据实际工需要进行集。　　(二)标本采集要求。　采集皮(黏膜)病变部位标👳时应使用🦟菌聚酯纤👨‍🔧、尼龙或🌑似材质拭，避免使棉拭子。集疑似病🚽的标本前🐖避免使用75%乙醇等消毒剂清👩🏾‍🤝‍👨🏿病变部位,每种类型🪁皮肤(黏膜)病变应尽可能采集个以上拭🎛️，每个病应同时采身体不同🎀位或外观同的2-3种病变标🏄。采集皮(黏膜)病变部位标时应适当力。皮肤(黏膜)病变部位、痘或分泌物不同拭子本应放置不同的采👞管中。进病毒分离应采集干子标本(无采样液)或以非灭活🈚病毒采样👏保存。根实验室活资质确定用非灭活或灭活型样液采集本。　　(三)标本采集方法。　1.斑疹、丘疹、疱或脓疱皮肤(黏膜)病变部位标本：一紧握采样👛子尾部，与拭子头保持一寸上距离。样时适当力下压拭，在皮损面来回擦至少2-3次，然后拭子另一再重复擦2-3次。如果在擦过程中痘破裂，要🥍保采集到🎳疱液。采后将拭子置于无菌🚶‍♂️样管中(可含病毒采液或不含体)，折断拭子头，除拭子尾🏹，盖上管，以消毒巾擦拭消💱采样管，封口膜密管盖后将样管保存送检。　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样前🚳确保实验可检测此标本。使👨🏼‍🤝‍👨🏻无菌镊子其他钝头🤞械夹取全痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮放置于干🆗、无菌的样管中，🥾样完成后🎮创可贴覆患处。　🚘3.口咽拭子标本：采集人员👨🏾‍🤝‍👨🏼部微仰，张大，露两侧扁桃🅿️，将拭子过舌根，🔏被采集者👩🏽‍🤝‍👨🏻侧扁桃体微用力来🏕️擦拭至少3次，然后在咽后壁下擦拭至3次，将拭子头浸入👩🏿‍🤝‍👨🏻2-3mL病毒保存📢的管中或于不含液(干拭子)的无菌管，尾部弃，旋紧管🚪。　　4.血液标本尽量采集性期(发病7天内)的血液标本建议使用EDTA抗凝剂的真采血管采🎼5mL全血，可利用血进行检，或室温置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血--于无菌管进行检测　　5.血清标本：真空负压血管采集液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清♈无菌螺口料管中。🖊️一份血清尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份-清应在发👁️后第3-4周采集，😑集血液标🏆5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集🧪清于无菌口塑料管，用于猴抗体检测　　6.其他标本：据设计需规范采集　　(四)标本保存　　标本🟧在收集后1小时内冷(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行测。可在1周内检测🚌标本可置4℃环境中保存；1周内无法检-的标本，期可置于-20℃环境中保存，期应置于-70℃或以下环境中存。全血-离血浆前藏(2-8℃)，分离出的血浆于-20℃或以下环中保存。设立专库专柜单独️⃣存标本，免反复冻标本。　,,猴痘病毒🛥️其相关标应由专人理，准确🤍录病毒及-本的来源👨‍🦼编号、数等信息，😽体要求可🍫考《病原生物菌(毒)种保藏数据描述通😫》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措🏷️确保病毒标本安全严防发生🔚用、恶意-用、被盗被抢、丢🎒、泄露等👨‍🏫件。　　(五)标本送检。　　❎本采集后尽快在低条件下(冰袋或干冰)送往实验😌，如需长运输标本应采用干📵冷冻运输式进行保🚺。　　1.送检标本病例标本由省级及下疾控机🔀进行初步👨‍👩‍👦‍👦测，各省例猴痘阳😉标本应送国疾控中病毒病所核。每个性病例至采集一套️⃣本(皮肤或黏膜病变位标本、👨‍👩‍👦‍👦咽拭子标🍀及急性期恢复期双👩‍❤️‍👩血清标本)送中国疾中心病毒所检测。省级疾控构根据实情况制定内样本送、复核流。　　2.病原体及🛵本运输：　(1)国内运输。痘病毒或🚝他潜在感性生物材🥱的运输包👶分类属于A类，对应联合国编为UN2814，包装符合国际🍥航组织文💃Doc9284《危险品航空安运输技术则》的PI602分类包装要求通过其他通工具运的可参照上标准包🔅。猴痘病或其他潜,,感染性材运输应按《可感染类的高致📢性病原微物菌(毒)种或样本🦲输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运证书。污水等🚞境标本暂普通生物,-本运输标执行。　🛢️(2)国际运输。猴毒株或样在国际间输的，应范包装，🍯照《出入特殊物品生检疫管规定》办相关手续并满足相🙇国家和国相关要求📱四、猴痘毒核酸检🤒要求及流🎴　　(一)实验室资要求。　开展猴痘毒核酸检的实验室应当符合病原微生实验室生安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构床基因扩检验实验管理办法(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定，具备区的市级生健康部备案的生安全二级(BSL-2)实验室及以上实验条件，并案猴痘病😬相关实验❄️动。独立置的医学验实验室👨‍🏭应符合《学检验实🎟️室基本标🎫(试行)》《医学检实验室管规范(试行)》等要求。　　开猴痘病毒🍆离、培养🌇中和等涉👐病毒扩增使用等实操作的实室应具备家卫生健委批准的☦️物安全三(BSL-3)实验室及以上实室条件，获得猴痘毒实验活🍅批准。分😅的猴痘病🦊应送国家原微生物藏中心/国家病原微物资源库毒分库保🚦。　　(二)实验室生物安全要。　　根2006年公布实施《人间传的病原微物名录》(简称《名⚕️》)，猴痘病毒生物害分类为一类，是种高致病病毒。按🧙‍♂️《名录》求，猴痘🖖毒的分离培养等涉-病毒扩增使用的实操作需在BSL-3及以上实验的生物安柜内进行非灭活采🥮液采集的痘病例样的灭活在BSL-3实验室进行♑样本灭活☺️猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验或PCR检测的专门域或房间🤤行。如《🔞录》更新开展猴痘🆕毒操作的-,-验室生物全要求应最新《名》执行。水样本的活参照普🆖生物样本　　(三)实验室分要求。　,原则上开📷猴痘病毒酸检测的-验室应当置以下区：试剂储️⃣和准备区️⃣标本制备🐪、扩增和🩹物分析区三个区域-物理空间🐧应完全相独立，空应定向流。各区功♍分别是：　1.试剂储存和准区：贮存剂的制备🙍‍♂️试剂的分和扩增反混合液的备，以及-,-心管、吸等消耗品🚵贮存和准。　　2.标本制备,,：转运桶启、标本活，核酸取及加入扩增反应等。　　3.扩增和产物分析区核酸扩增产物分析　　根据用仪器的能，区域🎮适当合并如采用标处理、核🧂提取及扩🧑🏿‍🤝‍🧑🏽检测为一的自动化析仪，标🥴制备区、💰增和产物析区可合’。　　(四)主要仪器设备。　实验室应配备与开检验项目适宜的仪📑设备，包：二级生安全柜、👂速台式离机、干浴温器、荧💴定量PCR仪、计时、移液器　　(五)实验室猴病毒核酸🕹️测流程。　实验室到标本后’按照标准作程序进🥙试剂准备标本前处⏹️、核酸提、核酸扩、结果分🚅及报告。验室应当立可疑标和阳性标,-复检流程　　1.试剂与材料　　(1)标本：包👩‍👩‍👦病变表面,-子、痘疱🍹或痘疱渗液拭子、痂或痘痂,,,子、咽拭、全血或浆等标本　　(2)核酸提取剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基🧽组DNA提取试剂盒👩🏿‍🤝‍👨🏼血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒　　(3)核酸检测剂：　　🤞试剂：DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴病毒检测物、探针📢　　③阳对照：涵检测靶标列的质粒　　(4)灭菌去离水、无水醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用手部和物表面常规毒，开启有效期为1周。　　含氯消毒：现用现，含有效1000mg/L的消毒液用于体表面常消毒，含效氯5000mg/L的消毒液于感染性料溢洒时应急处理　　(6)耗材：包🗄️带滤芯的头、螺旋的离心管非螺旋口👩🏾‍🤝‍👩🏼离心管、锆珠的粉管、PCR反应板和明封膜或PCR反应管和透明盖🧛‍♀️　　(7)BSL-2个人防护品：包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一性隔离衣防护眼罩🔄面屏、一性帽子、套、靴套手套。　2.实验前的标本接。　　(1)核对被检标本编号姓名、性、年龄及测项目；　(2)待检标本的态如有异，需注明🚌　　(3)待检标本期存放在-70℃，短期存放可-20℃，避免反复融。　　3.核酸检测操作步骤注意事项　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　作方法按DNA提取试剂盒相应明书进行-作，具体下：　　提取试剂备：第一开启试剂，在使用先在漂洗中加入无乙醇，加🛍️体积参照🚱上标签。有试剂在用前应平👍至室温；有离心步应在室温进行。　②处理样：　　A.痘疱液：拭子标本以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。100μL样本，加80μL缓冲液，总为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补总体积至180μL；　　B.病变皮疹或痂：取1块痂皮按质/体积(1mg/50μL)加入相应体积PS的PBS，研磨或匀浆处理取80μL，然后加100μL缓冲液；　C.咽拭子、其它子：从采液中取200μL标本，干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀后👨🏼‍🤝‍👨🏻200μL；　　D.全血或血：直接取200μL标本。　　加入20μL蛋白酶K溶液，混，溶液会💰清亮。若本为病变疹或其它织时，加🚷蛋白酶K混匀后，在56℃放置，直至组织©️解，再进📜下一步骤　　④加200μL裂解缓冲，充分混👨‍🎤，70℃放置10分钟，或至溶🍵变清亮，短离心以除管盖内水珠。　需注意：入裂解缓,液后可能出现白色😘状沉淀，70℃放置后会消失🆘如溶液未🏠清亮，说细胞裂解🔥彻底，可-导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　⑤加200μL无水乙醇，分混匀，时可能会现絮状沉，简短离😚以去除管🛩️内壁水珠🆎　　⑥将一步骤所溶液和絮♒沉淀均加吸附柱中(吸附柱放🟡废液收集🔫中)，8000rpm离心1分钟，弃废液　　⑦加500μL漂洗缓冲1(使用前先检查是已加入无乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废。　　⑧入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查🏷️否已加入🗽水乙醇)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　⑨将吸附放回废液集管中，大转速13000rpm离心1分钟，尽量👩‍🚒除漂洗液🍹　　⑩将附柱转入根干净的心管中(需自行准备试剂盒中提供)，加入50μL洗脱缓冲或灭菌去子水，室放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤液，做好记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　　(2)核酸检测：实时🐭光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病💟核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体的准备：🌎孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检❌标本外，🟢加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；所有🙌本，包括照，应设🏑孔。　　加样：每反应管中入核酸或🏥照各5uL，盖紧管或封好透膜，置于光定量PCR检测仪上。　　③增条件设：　　④器检测通🅾️选择：使👑荧光定量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道收集设在60℃。具体设置方法照各仪器用说明书📅　　⑤结分析阈值定：使用🏏光定量PCR检测仪进行结果分时，基线3-10或6-15个循环的荧🎞️信号，阈设定原则😇阈值线刚超过正常性对照扩曲线最高，也可根仪器噪音🥊况调整阈。　　(3)核酸检测结果判断　①Real-timePCR反应系统的量控制：应结果应时符合以2个条件，否则试验果无效，重新开展测。阴性🍕照无扩增🌘为阴性。🥈性对照未现阴性结。　　②果判定：-　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳性🕋处于灰区标本应重检测或经列分析进确诊。需意：当标仅为咽拭或血清、浆，且检结果为阴时，应结临床症状慎重做出性诊断。　(4)表格记录　做好荧光’量实时PCR方法检测猴痘病毒酸原始记。　　五⏩猴痘病毒基因组测　　1.测序标本选原则。本疫情中的🥐发或早期例、与早病例有流病学关联关键病例感染来源明的本土例、境外入病例阳标本等。上标本在☀️酸荧光定PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。省为单位定开展猴病毒全基组测序的🪕构。建议✒️用扩增子术进行猴病毒全基➿组测序。🃏序数据经🧞‍♀️控合格后可用于后♈生物信息🦿析。二代序平台覆深度应不️⃣于10×，三代测序台覆盖深应不低于50×，全基因组测序盖度应不于98%。数据比对析推荐参猴痘基因NC_063383.1。　　各省应建立省输入、📢土病例猴病毒基因💯数据库，具备序列比分析能💏。具备测条件的省要在接收本后48小时内开展序工作，键样本要实验室收标本后1周内提供测结果报告所有测序📑始数据(一般为fastq格式)、组装序(一般为fasta格式)和标本序列测定果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报💰中国疾控心病毒病进行序列总、分析病毒病所🚴‍♂️将序列分结果及时馈各省，将全国猴病毒序列总、分析果及时上国家疾控。　　3.分子分型👨‍👨‍👦推荐使用线分析工Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株行分子分。　　附：　　7-1猴痘病毒检测标本🚹检表　　7-2猴痘病毒标本序测定结果告单【编🚮:孙静波】

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