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  • 最后更新: 2024-05-21 14:26:14
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  中新网7月27日电据国家疾控局🩹方微信消息为进一步做猴痘防控工,及时有效🌙对猴痘疫情提升猴痘防工作的科学、精准性和😎效性,切实护人民群众-命安全和身健康,国家控局会同国卫生健康委🎹定并于7月26日印发《猴痘防控方案。其中提出🎓2023年6月以来,我多个省份先报告多例猴病例,引发增本土续发情和隐匿传的风险较高👫🏾要坚持“预为主、防治合、精准防、快速处置🏌️‍♂️原则,落实早发现、早告、早隔离🚙早治疗”措。  《猴防控方案》文如下:猴防控方案 猴痘是由猴😔病毒(Mpoxvirus,MPXV)感染所致的👨🏿‍🤝‍👨🏽种人兽共患,-。2022年9月,我国报告首例猴痘🌵入病例。2023年6月以来,我国多省份先后报多例猴痘病,引发新增土续发疫情隐匿传播的险较高。为🦴导各地科学准做好猴痘控工作,切维护人民群🌶️身体健康,🤓定本方案。、总体要求👨‍👩‍👦 坚持“预为主、防治🥌合、精准防、快速处置原则,落实早发现、早🧻告、早隔离早治疗”措™️。开展医疗☯️构、重点人、入境人员重点场所等渠道监测。强疫情分析风险研判,针对性地开重点人群健🔶教育和综合预。落实病隔离治疗、行病学调查🧥密切接触者踪管理等措。坚持发现起、控制一,及时阻断情传播。二👎疾病特征 (一)病原学特征。  痘病毒属于🎿病毒科正痘🥽毒属,为基组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中🦷现该病毒。1970年在刚果民主共和一名疑似天患者的标本首次分离到🦚痘病毒,为👛例确诊的人🌦️猴痘病例。 猴痘病毒为两个进化🧛‍♂️支:(1)分支I,曾称为中非分支或果盆地分支😴(2)分支II,曾称为西非分支,进步分为IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方性流,,,区猴痘暴发🤔情的毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较多分支,包括A.1、A.2和B.1等亚分支,2022年9月我国报告首例输性猴痘病例来,各地报中国疾控中病毒病所的株序列均属IIb分支。  猴痘病🤿耐干燥和低,在痂皮、壤和衣物、’上用品等物表面可生存月。该病毒🎁热敏感,加至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯毒剂、过氧酸等常用消剂及紫外线🔔有效灭活病,对过氧化、次氯酸钠戊二醛、邻二甲醛等敏。  (二)流行病学特🦖。  1.传染源。猴痘👩🏿‍🤝‍👩🏼毒的宿主尚🥰明确,目前为非洲啮齿动物(非洲松鼠、树松鼠冈比亚袋鼠🦪睡鼠等)可能为其自然宿。传染源包猴痘病例及染的啮齿类🚶物、猴和猿✊灵长类动物  2.传播途径。猴痘,毒主要经黏🎿和破损皮肤入人体,主’通过直接接病例的病变肤或黏膜传,亦可通过触被病毒污的物品、长间近距离吸病例呼吸道沫传播,接🤣感染动物的吸道分泌物病变渗出物⭐血液及其它液,或被感动物咬伤、伤感染传播  3.易感人群。人群遍易感。接过天花疫苗猴痘病毒存一定程度的叉保护力。 4.疫情特征。2021年以前的猴疫情主要在非和西非地呈地方性流,主要通过👘触感染动物播,所引发🐷人传人疫情播链较短,要为儿童及壮年的散发例及聚集性情,通过家或旅行方式-尔播散至其国家和地区2022年5月以来全球国暴发的疫主要在男男🏴‍☠️行为人群(Menwhohavesexwithmen,简称MSM,指与同性发生性行为🧙男性)中经性接触传播,🤾‍♀️部分病例为壮年男性,🩸过大型聚会及后续在社的MSM扩散,并传播至球多个国家🧮地区。  (三)临床特征。  1.潜伏期:5-21天,多为6-13天。  2.传染期:病例出现-状后至皮疹痂自然脱落️⃣形成新皮肤具有传染性有调查提示,些病例可能📝出现症状前1-4天存在传染性。  3.早期症状:可出现发热🦲头痛、背痛肌痛和淋巴💇‍♂️肿大等。 ⬆️4.皮疹和黏膜疹:通常热退后出现有些病例可现在全身症之前。皮疹😬生常经过斑、丘疹、水、脓疱、结👭🏼至痂皮脱落个阶段,不形态皮疹可时存在,可🙁有明显痒感疼痛。可累👨🏼‍🤝‍👨🏻口腔咽喉黏、肛门、生👩🏿‍🤝‍👩🏻器、结膜和📙膜等。痂皮落后可遗留斑或色素沉甚至瘢痕,🍨痕持续时间’长达数年。 5.病程及严重程度。痘病程约2—4周,免疫力低下患者的程可能较长😌猴痘为自限疾病,大多病例症状会🔐行消失,也重症和死亡生,主要为童、孕妇和疫力低下人。  2022年以来全球多国猴痘暴🧅疫情中,大数病例临床现较轻,部病例无全身🍅状,皮疹仅于生殖器、⤵️门直肠黏膜位,死亡病主要为未得治疗的艾滋病毒感染者免疫力低下群。2022年以来全球🍬地方性流行病例的病死🔇约为0.1%。三、宣传育与干预 针对重点人、出入境人🥐和一般人群不同人群分开展宣传教🦽,有针对性👱‍♂️加强不同人的自我防范🛬识和个人防措施,积极🤾‍♂️合做好防控作。  (一)重点人群。各地卫生健与疾控部门合相关社会织,充分借艾滋病防治合干预经验服务模式,MSM经常出入的酒吧、⚕️所、浴池等点活动场所开展同伴教,-。借助大众体、MSM社交网站等互网平台,开🏯猴痘防控知👬🏼宣传教育,高重点人群®️范意识,减🎓高危行为,导有可疑接史者自觉做,,自我健康监,增强主动💄诊意识。 重点人群宣🤬干预要求详附件1《重点人群宣传干指南》。 (二)出入境人员。通过放宣传资料形式,加强入境人员猴防控知识宣♏教育。提醒境人员关注的地国家和区猴痘疫情息,不接触🍂痘样症状者-,-啮齿类、灵类等动物。☢️醒来自猴痘情报告国家地区的人员如在境外有疑接触史,👢境后21天内应做好自我康监测,避♐与他人发生切接触,一🛒出现发热、疹、淋巴结大等猴痘样🦋状,应主动🐻诊并如实报💦流行病学史  (三)一般人群。各充分发挥新体以及广播🔧电视、报纸🚝传统媒体作🌳,开展猴痘控知识宣传育,提高公科学防范意。四、疫情🖕测和报告 (一)监测病例定义。 1.猴痘样症状者。不明因急性皮疹(面部或口腔膜、四肢、🙅‍♀️殖器或会阴肛周等部位),伴发热(>37.3℃)或淋巴结肿者。  2.疑似病例。痘样症状者发病前21天内具备以下行病学史中任何一项:(1)有猴痘病例报告地区🚋居史;(2)有猴痘确诊例或疑似病接触史;(3)有同性性行为,或性伴同性性行为;(4)有地方性流行区疑动物接触🪓。  3.确诊病例。猴样症状者、似病例及密接触者,经验室检测猴病毒核酸阳🎗️或病毒分离🎫性者。  (二)多渠道监测。  1.医疗机构监👔。各级各类疗机构要开猴痘样症状测,尤其是肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨检测门诊等重点关注猴样症状者。现猴痘样症者,应主动问流行病学,记录患者住址及联系🏸式,采集标🛅送疾控机构行猴痘核酸测。具备猴病毒检测能及猴痘病毒验活动资质医疗机构也😽开展检测。🗞️ 2.重点人群监测。各🌱各类医疗机、疾控机构对MSM等重点人群开展🀄疗或检测咨🦽服务时,应动询问是否猴痘样症状其可疑接触。如发现猴🥠样症状者和似病例,应时采集标本🥟行猴痘病毒酸检测。 3.入境人员监测。海关🦄到猴痘相关常健康申报检疫发现有痘样症状的-境人员,应时进行标本📓集和核酸检🙅,并发放《诊方便卡》🍘要求其尽快📅诊;对于核检测阳性者🤯将相关信息报辖区疾控构,由相关🔑门进一步调💮处置。  4.重点场所污水监测。有’件的地区可据当地疫情势,经评估🚄MSM经常出入的酒吧、👩🏽‍🤝‍👩🏻所、浴池等🙁点活动场所展污水监测  (三)病例报告。 相关医疗机-根据临床表、流行病学实验室检测🌑果,及时对🥼者进行诊断  诊断的似病例和确病例应于24小时内通过--国疾病预防制信息系统监测报告管模块进行网直报。如为外输入病例填写输入来国家或地区不具备网络🐁报条件的医🈶卫生机构,在规定时限将传染病报卡信息报告地乡镇卫生🅰️、社区卫生🚂务中心或县👩‍❤️‍👩疾控机构进网络报告,🙇时传真或寄-传染病报告至代报单位负责病例网🧢直报的医疗生机构,要据实验室检结果、流调🏚️展及时对病信息进行复、订正。 各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例者2例及以上存在流行病🎁关联的确诊例,应当在2小时内通过🔆发公共卫生件报告管理🎂息系统报告事件级别选“未分级”五、疫情处  (一)病例管理。 📄各地发现猴疑似病例和诊病例应当--时转运至医机构进行隔治疗,如临📱症状明显好🉑,病变部位结痂,可转居家隔离治,直至皮疹痂自然脱落解除居家隔。对病情较🐹且具备居家离治疗条件确诊病例,医疗机构与控机构联合估后,可直采取居家隔治疗。对于行居家隔离疗的确诊病发放《猴痘例居家隔离👨‍🦽疗健康告知》(见附件2)。确诊病例居家隔离治期间,单人间居住,避--与家人有皮🅰️或黏膜直接触,做好被👨‍👦‍👦染物品的消,非必要不出,确须外时穿长衣长🏒、佩戴医用🏃‍♀️科口罩,避前往人群聚场所,避免其他人有皮或黏膜直接触;指定医机构安排专负责上门或话随访,提健康咨询和疗指导。 (二)流行病学调查。 ,,,县(市、区)级疾控机构到辖区疑似例和确诊病报告后,及🩹组织开展流病学调查,找感染来源掌握、追踪管理密切接🗨️者,分析传链及传播特,及时发现在的风险人及其范围、--征,有针对地开展宣传育和综合干。调查过程发挥多部门防联控的协作用,尽可🅾️获取全面准😏的流调信息🦛  调查内✒️主要包括病基本信息、病就诊情况临床表现、🐓归及实验室测;发病前21天内与可疑感染来源的触史、接触所及接触方❓;发病后至🈂️离治疗前的体活动地点与其有皮肤🍷黏膜直接接🩹者,以及发前4天内与其有性接触者  猴痘疫流行病学调要求详见附3《猴痘疫情流行病学调指南》。 👔(三)密切接触者的判定🐏管理。  1.密切接触者定义。直接触病例的病部位及其被-染物品,或染动物及其📙泌物、渗出等污染物;及职业暴露👩‍🍳长时间近距吸入病例呼道飞沫等,🐙评估有感染险的人员。 2.密切接触者判定。据流行病学查及暴露风评估结果,控机构负责✔️时对密切接.者进行判定  3.密切接触者管理疾控机构或层医疗卫生♒构指导密切触者做好自健康监测,🍠康监测期限⏹️最后密切接🕔之日起21天。  密切🤜触者自我健监测期间可常生活与工,需避免与人发生性接等密切接触避免捐献血等;坚持每做好体温测👩‍❤️‍👨和症状监测出现猴痘样状应及时就并主动报告疑接触史。区疾控机构基层医疗卫机构应在密🔉接触者自我康监测第7、14、21天上门或电话其进行随访提供咨询指,发现异常况及时进行-置。  密接触者判定😎理要求详见件4《猴痘密切接触者判👨🏿‍🤝‍👨🏾和管理指南🛬。  (四)消毒与人员护。  做病例衣物、巾、床单、具等个人用👨‍✈️,以及可能🐭病例分泌物渗出物、体等污染的环和物体表面消毒。从事例诊治护理🏑流行病学调,、环境清洁🦀毒、标本采和实验室检等工作人员🎁工作期间做个人防护。 消毒与人防护要求详附件5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个人防🆙指南》。六实验室检测🎋 猴痘病毒🎄酸检测首选肤或黏膜病部位标本,🃏同时采集口拭子标本。省首例猴痘诊病例标本送中国疾控🍶心病毒病所行复核;本🐌疫情中的首或早期确诊例、与早期--例有流行病关联的关键诊病例、感来源不明的土确诊病例境外输入确🌺病例阳性标💑等,荧光定PCR检测Ct值≤32时进行病毒基😜测序。所有序原始数据组装序列及,序样本送检应在获得序48小时内报送中国疾控心病毒病所行汇总、分。以上确诊👊例应至少采一套标本(包括核酸检测性者的皮肤黏膜病变标、口咽拭子👱‍♀️本以及发病性期和恢复双份血清)送中国疾控中病毒病所。 实验室检具体要求详📊附件7《猴痘病毒实验室测技术指南😦。七、院内染控制  疗机构应当格做好院内染控制。疑病例和确诊例应安置在离病房,疑⬇️病例单间隔,,。医务人员💻行标准预防🤹‍♀️采取经接触播和经飞沫👩🏻‍🤝‍👨🏿播疾病的隔与预防措施佩戴一次性胶手套、KN95/N95及以上级别口罩、防护屏或护目镜一次性隔离等,同时做手卫生。严🤚按照《医疗,构消毒技术🧘‍♂️范》对病例体液、血液排泄物、分物等进行规㊙️处理,做好疗环境(空气、物体表面👩‍🔧地面等)、医疗器械、病🕯️使用物品等清洁消毒。🦾据《医疗废管理条例》医疗卫生机医疗废物管办法》做好⛩️疗废物的处和管理。八🏆工作要求 (一)加强组织协调。各🖐️卫生健康、控部门加强海关等有关门的密切协和信息共享🔸及时发现与置猴痘疫情落实猴痘病发现、疫情告、诊疗隔、密切接触追踪管理等作,防止疫扩散和蔓延各地在猴痘情防控过程应注意保护💗例、密切接者和重点人等个人隐私👩🏻‍🤝‍👨🏽  (二)加强宣传引导⛈️各地要及时🛄布辖区猴痘🍕情相关信息,,做好政策解,和公众健康示。通过多方式和渠道’展猴痘防控识宣传,加重点人群宣教育的针对和实效性。⏸️时回应社会切,引导公-,科学认识猴。  (三)加强人员培😗。各地要加’对各级疾控构和医疗机专业人员的训。对医务员重点开展痘病例的识与诊断、病发现与报告病例管理等关知识培训强化诊治意-。对疾控人重点开展流病学调查、,切接触者的定和管理、验室检测、点人群宣传预等相关知培训,提高痘疫情防控应急处置能️⃣。  附件🔊  1.重点人群宣传干指南  2.猴痘病例居隔离治疗健📒告知书  3.猴痘疫情流行病学调查🐶南  4.猴痘密切接触判定和管理南  5.猴痘消毒技术🧬南  6.猴痘个人防护南  7.猴痘病毒实验检测技术指  附件1  重点人群传干预指南💯 2022年5月以来,全球非地方性行区发生的🏫痘疫情以男👲性行为人群(MSM)为主。为充分利🈯我国艾滋病治综合干预务体系,开MSM等重点人群宣传干,防范猴痘🕐情传播扩散🍠形成常态化🧱滋病与猴痘🧚‍♂️合防控一体应对机制,定本指南。、实施策略 在现有艾病防治综合预服务体系础上,综合用行为学干方法和手段通过宣传教、促进安全行为、动员🕎测、外展服、同伴教育👨‍👨‍👦‍👦互联网干预,从个体、体和社会等🙃个层面为目人群提供猴综合干预服。二、组织施  各级疗机构和疾机构要加强点科室和艾🌑病自愿咨询测门诊工作员猴痘知识-训,对重点,群提供猴痘🦝控知识宣传检测咨询与员、治疗和🤨怀等服务。🌉级疾控机构当积极推动地有能力、🚫有良好艾滋防治经验的MSM志愿者或社会组织共参与猴痘防宣传工作,工作过程中🍽️意保护重点群个人隐私三、形势分  各地要📛强对重点人▶️猴痘疫情、控现状、影😳因素及出入情况的调查及时分析研猴痘疫情形,为制定本高危行为干工作计划提🏇依据。具体容包括:1.重点人群基👨‍🦽、活动形式特点、活动所、出入境时间及地区🏀;2.猴痘知识、态度和危行为;3.猴痘疫情水及其影响因🚨;4.猴痘防治政策及专📞机构已开展🎬工作;5.包括志愿者在😴的有关组织个人已开展🌭干预活动;6.影响猴痘防治工作的困👨‍👨‍👧‍👧和问题。四宣传干预 (一)宣传教育。各级疾机构或健康育专业机构-供技术支持社会组织参,共同研究⏪定适合当地点的猴痘预宣传材料,🦝强警示宣传💹育。通过大媒体、MSM网站和以移-终端为载体交友软件等💜台,宣传国、国内及本猴痘疫情信🌩️和防控知识🏌️‍♀️提高重点人🤷猴痘防范意。  (二)同伴教育。级疾控机构加强同伴教🤓员挑选、招和培训,组和支持同伴传活动,增🎡人群猴痘风防范意识,😫动主动检测定期组织同-教育员工作会,了解猴干预工作存的困难和问👨‍👨‍👧,有针对性给予帮助和☯️持。  (三)外展服务。各级疾控机’干预工作人定期到重点👰群活动场所展猴痘宣传🤸‍♂️咨询、发放传材料等外服务活动,高重点人群痘防范意识知识水平,🤼‍♂️动重点人群强自我健康理,主动寻检测咨询服。  (四)检测咨询。级疾控机构🤥过互联网、🐎伴教育、外活动等多种🖍️式动员有猴样症状或可🚖接触史的重人群进行猴检测。各级类医疗机构肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨检测门诊发猴痘样症状🦍,应主动询其流行病学♑及性接触史记录患者现址及联系方,采集标本疾控机构进猴痘核酸检,具备猴痘测能力及猴病毒实验活资质的医疗构也可开展测。对于已立互联网+HIV检测平台的地区,可加猴痘检测容,实现互🟨网在线检测🏊‍♀️约和结果查。五、重点☝️所干预  点活动场所括实体和虚两类场所,体场所包括🎻吧、会所、池等经营性所,虚拟场包括移动互网和社交媒。  (一)实体场所干🤳。  各级-控机构负责织干预工作员在当地MSM经常出入的酒吧、会所浴池等活动🐠所,开展猴预防干预宣,主要包括  1.在MSM经常出入的酒吧、会、浴池等实场所,张贴目的健康教🧘‍♂️宣传图片,置健康教育料公告栏;🔩 2.强化个人健康责任☀️识,开展猴🕜健康咨询,动开展自我险评估; 3.提供转介服务信息,知明确的诊🤼‍♂️流程以及相☝️检测、医疗构名称、联人等信息。🏒 各地要加-对猴痘确诊例发病前21天内活动过场所以及污🛠️监测阳性场的干预宣传重视目标人的个人隐私护,加强对会组织同伴育员猴痘防知识培训,🔰立规范的行干预流程,高自我防护🧡能。  (二)虚拟场所干预。  各☠️疾控机构负组织指导当有序开展猴线上宣传,相关网站、交媒体平台时发布和更🤡猴痘宣传教内容,形成向重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣传干预务体系。 各级疾控机支持社会组🦦或同伴教育利用网站、箱或社交媒平台,组织展在线咨询交流。及时答网友提出各种猴痘相👫🏿问题。针对同时期猴痘播特点,定或不定期组🍔专家、专业员、同伴教🙊员利用互联和社交媒体台进行在线’教。各级疾机构要定期导更新相关业信息,确👨🏿‍🤝‍👨🏾宣传内容科、有效。 附件2  附件3  猴痘疫情流行病调查指南 为指导各地👨‍🌾控机构规范展猴痘疑似🖨️例、确诊病和聚集性疫🐮的流行病学👮‍♂️查,及时掌病例暴露史接触史等流🤺病学相关信,落实密切🐻触者的追踪🤎定,防止疫传播扩散,🏗️定本指南。、调查目的 (一)查找感染来源,握、追踪和理密切接触。  (二)分析传播链🌻传播特征。👷‍♀️ (三)及时发现潜在的险人群及其征、范围,针对性地开宣传教育和合干预。二👬🏻调查对象 疑似病例、诊病例和聚🧓性疫情。三👩‍🌾调查方法和🙏容  通过阅资料,询病例、诊治生、家属和情人等进行行病学调查🧤如病例的病允许,调查🛎️应先调查病本人,再对💪诊治医生、🈵属和知情者行调查。 🚳开展个案调时,要认真😁详细了解和🚩录病例基本息、发病就情况、临床现、转归及验室检测信🚗;发病前21天内与可疑染来源的接史、接触场及接触方式发病后至隔治疗前的具活动地点、👩🏿‍🤝‍👨🏼其有皮肤或膜直接接触📥,以及发病4天内与其有性接触者。 (一)基本情况。如姓、性别、年、住址、国、联系方式。  (二)发病就诊情。临床表现实验室检测-发病就诊经’和病情变化转归。  (三)感染来源调查。对病发病前21天内的暴露史展调查,包🔪境内外猴痘例报告地区行史或居住,对可疑的😊染来源要详询问接触时、方式、频、地点及接🌡️时采取的防措施等,特是性接触史调查时,若现调查表中列入,但具-重要流行病💥意义的内容应进行详细💝问和记录。 (四)密切接触者调查判定。对病传染期的活🐭情况和人群触情况进行👩‍🍳踪和排查后🧸判定其密切🧢触者。密切触者判定和理按照《猴密切接触者定和管理指🐒》(附件4)执行。  💎见附件3-1《猴痘病例🐈案调查表》四、组织与施  按照属地化管理🌩️原则,由病现住址所在县(市、区)级疾控部门织辖区疾控构开展猴痘例的流行病调查,就诊疗机构提供疗信息。调单位应根据💋查计划和调-,-目的,确定查人员组成职责分工,时开展病例行病学个案查。调查过中发挥多部联防联控的🚪同作用,尽🌴能获取全面😳确的流调信。调查期间👨🏼‍🤝‍👨🏻调查人员要好个人防护五、信息的🌴报与分析 🎖️疾控机构完调查后,应好病例分析💙结,及时将行病学个案查表、调查👹告等资料逐报送上级疾😩机构,并做调查资料的管和存档。💓例流调信息按有关规定严格做好信安全和个人私信息保护👘  附件:3-1.猴痘病例个案调查  附件4  猴痘密切触者判定和👩‍⚕️理指南  指导各地做猴痘密切接👨‍👩‍👧者判定和管,有效控制💚痘疫情的传🍭,制定本指🦵。一、密切👫🏽触者判定标  密切接者是指直接触病例的病部位及其被染物品,或🚆染动物及其🍌泌物、渗出等污染物的员;以及职暴露或长时近距离吸入例呼吸道飞等,经评估感染风险的员。具体情包括:  1.与疑似病例或确诊病例病后有皮肤😈黏膜直接接的人员,接📒方式包括性触、抚摸、抱和亲吻等  2.与有皮疹症状的似病例或确病例共用衣、被褥、餐🍬等物品的人;  3.医疗诊疗、采或实验室检等操作过程可能暴露于毒,经评估感染风险的👩🏾‍🤝‍👨🏿疗卫生工作员;  4.与疑似病例🍘确诊病例发🏻前4天内有性接触,并经行病学调查业人员评估感染风险的员,亦可判👩‍👦‍👦为密切接触;  5.在狭小密闭空,-与疑似病例确诊病例长,,间近距离接(如长时间共处同一封闭📿间),经流行病学调查专人员评估有染风险的人🤷‍♂️,亦可判定密切接触者  6.接触感染猴痘病的动物及其泌物、渗出等污染物,未采取有效人防护的人🛒;  7.其他可能存在毒暴露风险人员。二、🎐切接触者管  1.管理期限与方式病例发现地控机构或密-,接触者所在疾控机构应追踪到密切触者当天及开展猴痘病核酸检测,💱知并指导密👩‍👩‍👦‍👦接触者做好我健康监测健康监测期为自最后密接触之日算📬21天。自我健康监测期✔️可正常生活工作,需避与他人发生接触等密切触,避免捐🈲血液等。 2.知情告知。实施健康👆测时,疾控构或基层医👨卫生机构应头告知健康测的缘由、’限、注意事和疾病相关识,以及负随访疾控机或基层医疗生机构联系🌰和联系方式并发放《猴密切接触者康告知书》-  3.定期随访。疾控👸构或基层医卫生机构应第7、14、21天电话或上门主动询密切接触者🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿我健康监测况,提供咨指导建议。-现异常情况😱及时调查处--。  4.自我健康监测坚持每天做体温测量和状监测,主🏊‍♀️症状包括发(>37.3℃)、皮疹、浅表淋巴结大等。密切😙触者一旦出相关症状应时前往医疗构就诊或与🐢访联系人取联系,接受痘病毒核酸🚻测。  附:4-1.猴痘密切接触健康告知书 附件5  猴痘消毒技指南  为一步规范猴疫情相关的毒工作,落科学消毒、准消毒,减❇️猴痘病毒对众健康造成危害,制定指南。一、🔰源地消毒 (一)适用范围。  适👩🏾‍🤝‍👨🏻于出现猴痘🏰例后,对其🚈能污染的场🔥和物品进行随时消毒和末消毒。 -(二)消毒原则。  1.范围和对象定。  根流行病学调🍿结果,确定⏮️场消毒的范和对象。对🧡例在住院、运期间可能🌩️染的环境和品,进行随消毒。对病-居住或活动的场所,如住场所、工🏆场所、学习所、诊疗场、转运工具及其他可能🥴到污染的场,在其离开(如住院、转院、出院、亡)进行终末消毒。  2.方法选择。  (1)诊疗用品消毒🦹‍♂️尽量选择一性诊疗用品非一次性诊用品应首选🆎力蒸汽灭菌不耐热物品选择化学消剂或低温灭设备进行消或灭菌。 🚣(2)手消毒。建议使用⛏️消毒剂揉搓手进行消毒也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒。  (3)环境和物体面消毒。可择含氯消毒、二氧化氯🚜过氧乙酸、👨‍🦼氧化氢等消剂擦拭、喷🟥或浸泡消毒  (4)衣物、床单等织品消毒。选择热力消、含氯消毒或季铵盐类毒剂浸泡等毒方式。 🕦(三)常见污染对象的消️⃣方法。  1.手消毒。  可选用速手消毒剂,直接选用75%乙醇进行擦拭消毒;醇过敏者,可择季铵盐类有效的非醇手消毒剂。🖌️肉眼可见污物时,应先用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六洗手法清洗🥿手,然后按🏳️‍🌈述方法消毒🏥  2.皮肤、黏膜。 🌅皮肤被污染☪️污染时,应即清除污染,再用一次吸水材料沾0.5%碘伏或过氧化氢毒剂擦拭消3分钟以上,使用清水清干净;粘膜用大量生理水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。 3.床单、毛巾、衣服等♑织品。  例使用的床🤫、毛巾、衣等纺织品,肉眼可见污🍟物时,若需复使用,可流通蒸汽或沸消毒30分钟;或用有氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消剂浸泡30分钟后,按照规清洗;或😪其他有效的🌖毒方法。不湿的衣物可用环氧乙烷干热方法进消毒处理。 有分泌物,渗出液、排物、血液、液等污染物,建议按医废物集中处。  4.餐(饮)具。  病例所使的碗、盘、、杯等餐(饮)具清除食物残渣后,煮消毒30分钟,或使用有氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后,再👳‍♀️清水洗净。 5.污染物。  对病👨‍🏫分泌物、渗液、排泄物血液、体液少量污染物🆖用一次性吸♉材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒(或能达到高水平消毒的毒湿巾/干巾)小心移除。  对病例泌物、渗出😆、排泄物、液、体液等量污染物应用含吸水成🦧的消毒粉或白粉完全覆,或用一次吸水材料完覆盖后用足😦的有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒浇在吸水材,,上,作用30分钟以上(或能达到高水消毒的消毒巾),小心清除干净。清过程中避免⛳触污染物,理的污染物医疗废物集处置。  例的分泌物🚴‍♀️应有专门容🐖收集,用有氯20000mg/L的含氯消毒剂,🤥物、药比例1:2浸泡消毒2小时。  清除污染物,应对污染环境和物体面进行消毒🦟盛放污染物🐝容器可用有氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟,然后清干净。  6.地面、墙壁。  有肉可见污染物,应先完全🟢除污染物再🐳毒。无肉眼见污染物时🤼‍♀️可用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂🧬拭或喷洒消👾;不耐腐蚀地面和墙壁-也可用2000mg/L的季铵盐类消剂喷洒或擦;消毒作用间不少于30分钟。  7.物体表面。  诊疗设设备表面以床围栏、床柜、家具、把手、卫生具和家居用等有肉眼可污染物时,先完全清除🩳染物再消毒🦱无肉眼可见染物时,用效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯毒剂,不耐蚀的物体表😆也可用2000mg/L的季铵盐类消剂进行喷洒擦拭或浸泡毒,作用30分钟后清水拭干净。 8.污水和粪便。  在📳入市政排水网前需进行毒处理,消后污水应当合《医疗机水污染物排🔸标准》(GB18466-2005)。  9.病例生活垃圾。 病例生活圾按医疗废处理。  10.医疗废物。  医疗👨物的处置应😓循《医疗废♀️管理条例》《医疗卫生构医疗废物👬🏿理办法》的求,规范使双层黄色医废物收集袋🗡️装后,按常流程进行处。  11.室内空气。 如经科学估,需对室空气进行消,则在无人⏫况下,可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化🧑🏾‍🤝‍🧑🏼(浓度按产品说明书)等消毒剂,按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。可采用经验🐆安全有效的他消毒方法二、注意事🐻  现场消🍅应确保所用毒产品合法效,所选消🔚方法科学可。现场消毒,根据现场况和相关标要求,选择格有效的个🕯️防护装备,做好个人防-,的前提下,🦧格按照工作案实施消毒  消毒实👨‍🔧单位应具备🍷场消毒能力操作人员应👨‍💼过消毒专业-训,掌握消🕯️和个人防护🔥本知识,熟消毒器械的用和消毒剂🕌配制等。 每次开展消工作时均应📸好消毒记录🟥包括消毒对、消毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。同,相关部门单位应做好毒工作的监管理和评价  附件6  猴痘个人护指南  🧂加强公众、🏯情处置相关作人员和医人员的个人🚹护,避免猴病毒暴露感🤢,制定本指。一、居家🔷离治疗的病🌯等相关人员 (一)适用范围。  ➡️用于居家隔🏃‍♀️治疗的病例(疑似病例和诊病例)、照护人员或共🌧️居住者的个防护。  (二)居家隔离区域要求。 1.应选择有自然通风独立卫生间🙅房间作为隔区域。  2.应配备专用的餐具,床、毛巾等床用品,消毒🤬和口罩等个防护用品,视和平板电🐂等电子设备  3.卫生间宜配备专的洗衣机,♦️漏应有水封  (三)病例管理要求-  1.应能够进行自我护。  2.应每天做好温测量和症监测,避免他人共用个物品。  3.避免与他人发生性接触避免与免疫低下人员、童、老人、妇及其他人的直接接触避免与宠物动物接触,免捐献血液🟨。  4.外出就诊时,佩戴医用外🥗口罩,着长长裤,确保住所有损伤肤,避免与人密切接触避免乘坐公交通工具。 (四)照护人员要求。🦱 1.应每天做好体温测和症状监测  2.应尽量避免进入离区域。如进入隔离区,应佩戴医🚑外科口罩和次性手套,病例保持至1米的距离。在离开隔离🦅域之后,应强手卫生,对脱下的口和手套进行毒处理后废。  3.在拿放和清洗家隔离治疗例的床单、服和处理垃🚪的过程中,避免抖动。-湿拖布拖地避免干扫。🏌️‍♀️湿抹布清洁居用品表面🛀地毯应用蒸清洗,避免📓用吸尘器。 4.应将居家隔离治疗☯️例的餐具、📚单、毛巾和物单独洗涤消毒,可选热力消毒、🐯氯消毒剂或铵盐类消毒🥑浸泡等消毒🦪式。  (五)应急处置。  1.照护人员或共同😞住者出现任症状或不适现,应当及前往指定医机构就诊并🥇动报告可疑触史。  2.对其接触的物品、活动🤞区域等结合☦️险评估结果行消毒处理二、疫情处相关工作人👩‍🍳  (一)适用范围。 适用于猴痘情期间流行学调查、环清洁消毒人的个人防护  (二)流行病学调查-员防护要求  1.个人防护装备。次性乳胶手、医用外科罩、一次性离衣等。 2.个人防护要求。规范戴口罩,加手卫生,与🥰调查人员保至少1米的距离。  3.废物管理。🌤️查结束后,弃的个人防😠装备暂存、🏀理和处置应📪照《医疗废管理条例》行。  4.应急处置。在调查过程出现口罩脱、直接接触病例皮肤或泌物等情况🆚要结合被调🛁人员的临床📀断结果、空的密闭性、触的时间和离等进行风评估,结合🐍险评估结果采取相应的🌀置措施。 (三)环境清洁消毒人员😠护要求。 1.个人防护装备。一次乳胶手套、用外科口罩一次性隔离👆、防水靴套。  2.个人防护要求规范佩戴口,加强手卫👩🏽‍🤝‍👨🏻,尽量减少被消毒物品直接接触。 3.废物管理。清洁消结束后,废的个人防护备暂存、处,和处置应按《医疗废物理条例》执。  4.应急处置。如🧨清洁消毒过👑中出现口罩落、皮肤损或直接接触泄物、血液情况,要结被清洁消毒🏝️品的类型、触的时间和间的密闭性进行风险评,,,,结合风险估结果,采🖥️相应的处置🚦施。三、医-,人员的个人护  (一)适用范围。 适用于猴疫情期间医💊人员及其工-环境的防护🕷️  (二)基本要求。 1.个人防护装备要求。🧩务人员执行准预防,采经接触传播经飞沫传播🚣‍♀️病的隔离与🍷防措施,佩一次性乳胶套、KN95/N95及以上级别的口、防护面屏-,护目镜、一👨🏿‍🤝‍👨🏻性隔离衣等  2.环境防护要求。👷‍♂️院环境的清⌚消毒应符合件5的要求。应避免干除、清扫或吸⭐等活动。首湿式清洁方💂‍♂️。  3.废物管理。个防护装备、例敷料等暂📛、处理和处🥯应按照《医🕵️‍♂️废物管理条》执行。 附件7  猴痘病毒实验检测技术指💡  为指导🍿级疾控部门其他相关机规范开展猴病毒实验室测工作,快、准确识别痘确诊病例制定本指南本指南主要绍标本采集🔸及猴痘病毒⚱️酸荧光定量PCR检测方法、生物安全求等内容。、检测对象 (一)猴痘确诊病例和似病例; (二)密切接触者;  (三)感染或疑似感染猴痘-毒的动物;✍️ (四)环境或其它生物料。二、技人员基本要  (一)采样人员。从猴痘病毒核检测标本采的技术人员当经过生物🌯全培训,培👩🏻‍🤝‍👨🏼合格后方可事采样工作采样人员应📇悉采集标本-,类和采集方,熟练掌握⏫本采集操作程及注意事,做好标本息记录,确标本质量符🚈要求、标本相关信息可溯。  1.采样人员个♥️防护装备要:KN95/N95及以上级别的口罩🆙防护面屏或目镜、一次📮隔离衣、一🙇‍♂️性乳胶手套(尽可能戴两🌞)、靴套;如果接触了病⛔血液、体液分泌物或排物,应及时换手套。污采样人员可据实际工作要,适当降防护级别。 2.住院病例的标本由在医院医护员采集,根🍆实验室检测🔡作的需要,结合病程多👨🏼‍🤝‍👨🏻采样。  3.密切接触者标本由当地控机构或医机构专业人采集。  4.感染或疑似感染猴痘病🔢的动物由当疾控机构协动物疫控部专业采样人负责采集。 5.环境或其它生物材标本由相关业采样人员责采集。 🥾(二)检测人员。实验室’测技术人员具备相关专大专以上学或具有中级📑以上专业技🟧资格,并有2年以上实验工作经历,受过核酸检️⃣相关培训,训合格后方从事检测工。实验室配的工作人员量应与所开😂检测项目及本量相适宜确保能够及🚯、熟练、准地开展实验👙检测和报告果。三、标采集、保存🅿️运输  (一)标本采集种类。  1.首选标本是肤(黏膜)病变部位标本包括病变表拭子、痘疱或痘疱渗出拭子、痘痂🎄痘痂拭子等  2.呼吸道标本,如咽拭子,可于病例急性检测,也是切接触者检最常用标本  3.发病急性期可采🎫EDTA抗凝血标本进行🌔酸检测。 4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检。  5.直肠拭子、尿🔭、精液、唾等其它标本用于研究,据工作需要️⃣集。  6.污水或其它境生物材料本根据实际作需要进行集。  (二)标本采集要求。  采皮肤(黏膜)病变部位标时应使用无聚酯纤维、龙或类似材拭子,避免👬用棉拭子。集疑似病例标本前应避使用75%乙醇等消毒剂洁病变部位💛每种类型的肤(黏膜)病变应尽可能集两个以上子,每个病🌶️应同时采集🧝‍♂️体不同部位外观不同的2-3种病变标本。采集皮(黏膜)病变部位标本时适当用力。肤(黏膜)病变部位、痘或分泌物等同拭子标本🎞️放置于不同采样管中。👨🏽‍🤝‍👨🏻行病毒分离❗应采集干拭⬛标本(无采样液)或以非灭活型病毒采液保存。根实验室活动质确定使用灭活型或灭型采样液采标本。  (三)标本采集方法。  1.斑疹、丘疹、水疱或脓等皮肤(黏膜)病变部位标本:一手紧采样拭子尾,手与拭子部保持一寸🔁上距离。采时适当用力压拭子,在损表面来回拭至少2-3次,然后以子另一面再复擦拭2-3次。如果在拭过程中痘🛏️破裂,要确👩🏾‍🤝‍👨🏼采集到痘疱。采样后将子放置于无🤧采样管中(可含病毒采样或不含液体),折断拭子,去除拭子部,盖上管,以消毒纸🐋擦拭消毒采👩‍❤️‍👩管,以封口💗密封管盖后采样管保存🧂送检。  2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本:采样🏗️应确保实验可检测此类本。使用无👒镊子或其他头器械夹取部痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮,放置⏯️干燥、无菌采样管中,样完成后以可贴覆盖患。  3.口咽拭子标本被采集人员部微仰,嘴大,露出两扁桃体,将子越过舌根在被采集者侧扁桃体稍用力来回擦至少3次,然后再在咽后-上下擦拭至3次,将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中置于不含液👩🏽‍🤝‍👨🏻(干拭子)的无菌管中,部弃去,旋管盖。  4.血液标本:尽量采集急期(发病7天内)的血液标本,建议使🦛含EDTA抗凝剂的真空血管采集5mL全血,可利用全血进行测,或室温👩🏻‍🤝‍👨🏼置30分钟后,1500-2000rpm离心10分钟,收集血于无菌管中行检测。 5.血清标本:用真空负☣️采血管采集液标本5mL,室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集血清于无螺口塑料管🐷。第一份血应尽早(最好在发病后7天内)釆集,第二份血清应发病后第3-4周采集,采集血液标本5mL后室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集血清无菌螺口塑管中,用于痘抗体检测🎓  6.其他标本:依据🕺计需求规范,,集。  (四)标本保存。  标本应收集后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下),并尽快进行检测可在1周内检测的标本可于4℃环境中保存;1周内无法检测的本,短期可🧽于-20℃环境中保存,期应置于-70℃或以下环境中保存。血分离血浆冷藏(2-8℃),分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存应设立专库🟠专柜单独保👩🏻‍🤝‍👨🏾标本,避免复冻融标本  猴痘病及其相关标应由专人管,准确记录🗣️毒及标本的🏋️源、编号、量等信息,体要求可参《病原微生菌(毒)种保藏数据描述则》(T/CPMA011-2020)。应采取有🧞‍♀️措施确保病及标本安全严防发生误😚、恶意使用-被盗、被抢丢失、泄露事件。  (五)标本送检。  标本集后应尽快🏊‍♀️低温条件下(冰袋或干冰)送往实验室如需长途运标本,应采干冰冷冻运方式进行保。  1.送检标本:病标本先由省及以下疾控构进行初步-测,各省首📻猴痘阳性标应送中国疾♐中心病毒病复核。每个性病例至少👪集一套标本(皮肤或黏膜变部位标本口咽拭子标及急性期、复期双份血标本)送中国疾控中心病病所检测。🍅省级疾控机根据实际情制定省内样🚴‍♀️送检、复核程。  2.病原体及标运输:  (1)国内运输。猴痘病毒👫🏾其他潜在感🤷‍♂️性生物材料运输包装分属于A类,对应的联合国🎧号为UN2814,包装符合国际民航❗织文件Doc9284《危险品航空安🥾运输技术细》的PI602分类包装要求,通过其交通工具运的可参照以标准包装。☂️痘病毒或其潜在感染性料运输应按《可感染人的高致病性🎿原微生物菌(毒)种或样本运输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运书》。污水🥟环境标本暂普通生物样运输标准执📆。  (2)国际运输。痘毒株或样在国际间运的,应规范🎥装,按照《入境特殊物🥾卫生检疫管规定》办理关手续,并足相关国家🚩国际相关要。四、猴痘毒核酸检测求及流程 (一)实验室资质要求。 开展猴痘毒核酸检测实验室,应符合《病原生物实验室物安全管理⚙️例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因增检验实验管理办法》(卫办医政发-,2010〕194号)有关规定,具备区的市级卫健康部门备👩‍❤️‍👩的生物安全级(BSL-2)实验室及以上实验室件,并备案👨‍💼痘病毒相关验活动。独设置的医学验实验室还符合《医学👩🏾‍🤝‍👩🏼验实验室基🧙标准(试行)》《医学检实验室管理范(试行)》等要求。 -开展猴痘病🤥分离、培养中和等涉及毒扩增、使等实验操作实验室应具国家卫生健委批准的生安全三级(BSL-3)实验室及以上🧑‍🤝‍🧑验室条件,获得猴痘病实验活动批🥌。分离的猴病毒应送国📣病原微生物藏中心/国家病原微生物源库病毒分🗻保藏。  (二)实验室生物安全要求  根据2006年公布实施的《人间染的病原微,物名录》(简称《名录》),猴痘病毒😣物危害分类第一类,是⛽种高致病性毒。按照《录》要求,痘病毒的分、培养等涉👸病毒扩增及🦯用的实验操需在BSL-3及以上实验室的生物安🏵️柜内进行;🌱灭活采样液集的猴痘病🍘样本的灭活🚵BSL-3实验室进行;本灭活后猴病毒DNA提取、检测可⬆️BSL-2及以上实验室PCR检测的专门区域或间进行。如-名录》更新开展猴痘病🟫操作的实验生物安全要应按最新《录》执行。水样本的灭👎参照普通生✂️样本。  (三)实验室分区要求。 原则上开展🦃痘病毒核酸测的实验室当设置以下🤽‍♂️域:试剂储和准备区、本制备区、增和产物分区。三个区🐩在物理空间应完全相互🔐立,空气应向流通。各,-功能分别是🥋  1.试剂储存和准备🥕:贮存试剂制备、试剂分装和扩增应混合液的🧑🏼‍🤝‍🧑🏼备,以及离管、吸头等👨‍👧耗品的贮存准备。  2.标本制备区:转运桶开🏊、标本灭活核酸提取及入至扩增反-,管等。  3.扩增和产物分析区:核扩增和产物析。  根💺使用仪器的,,,能,区域可当合并。如用标本处理🦥核酸提取及增检测为一的自动化分仪,标本制区、扩增和物分析区可-并。  (四)主要仪器设备。  实室应当配备🐎开展检验项相适宜的仪设备,包括二级生物安柜、高速台离心机、干恒温器、荧定量PCR仪、计时器、液器。  (五)实验室猴痘病毒核酸测流程。 实验室接到本后,按照准操作程序行试剂准备标本前处理🎯核酸提取、-酸扩增、结分析及报告🦔实验室应当立可疑标本阳性标本复流程。  1.试剂与材料。  (1)标本:包括变表面拭子痘疱液或痘🥨渗出液拭子痘痂或痘痂子、咽拭子☮️全血或血浆标本。  (2)核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒):组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。  (3)核酸检测试剂:  试剂:DNA聚合酶或预的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。  ②猴痘病检测引物、🧉针:  ③性对照:涵💾检测靶标序的质粒。 (4)灭菌去离子水、无乙醇  (5)消毒液  ①75%乙醇:用于手部物体表面常消毒,开启有效期为1周。  ②含消毒液:现现配,含有氯1000mg/L的消毒液用于物体面常规消毒🌿含有效氯5000mg/L的消毒液用感染性材料📠洒时的应急理。  (6)耗材:包括带滤芯的吸😶、螺旋口的心管、非螺,口的离心管👐含锆珠的粉管、PCR反应板和透明✨膜或PCR反应管和透明。  (7)BSL-2个人防护用品🧮包括KN95/N95口罩及以上级别👞口罩、一次’隔离衣、防眼罩或面屏一次性帽子鞋套、靴套手套。  2.实验前的标本接收。 (1)核对被检标本编号姓名、性别年龄及检测🦀目;  (2)待检标本的状态如有异🔚,需注明; (3)待检标本长期存在-70℃,短期存放可🍘-20℃,避免反复冻融🚕  3.核酸检测操作步及注意事项  (1)病毒核酸(DNA)的制备  操作方法DNA提取试剂盒相应说书进行操作具体如下: ①提取试准备:第一🦁开启试剂盒在使用前先漂洗液中加无水乙醇,入体积参照上标签。所🔲试剂在使用,应平衡至室;所有离心骤应在室温👨‍🦱进行。  处理样本: A.痘疱液:干拭子标需以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本,加入80μL缓冲液,总量为180μL;标本体积不足100μL时用缓冲液补足体积至180μL;  B.病变皮疹或痘痂:取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体含PS的PBS,研磨或匀浆处理,取80μL,然后加入100μL缓冲液;  C.咽拭子、其它拭子🍫从采样液中🥉200μL标本,干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬,混匀👱‍♀️取200μL;  D.全血或血清:接取200μL标本。  ③加入20μL蛋白酶K溶液,混匀,液会变清亮若样本为病皮疹或其它织时,加入白酶K混匀后,在56℃放置,直至组溶解,再进下一步骤。 ④加入200μL裂解缓冲液,充分匀,70℃放置10分钟,或至溶液变亮,简短离👨‍🦽以去除管盖壁水珠。 需注意:加裂解缓冲液🍨可能会出现色絮状沉淀,,在70℃放置后会消失。👢溶液未变清,,说明细胞🏍️解不彻底,能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。  加200μL无水乙醇,🧪分混匀,此可能会出现状沉淀,简离心以去除盖内壁水珠  ⑥将上步骤所得溶和絮状沉淀加至吸附柱🧜(吸附柱放入废液收集管🚈),8000rpm离心1分钟,弃废。  ⑦加📋500μL漂洗缓冲液1(使用前先检是否已加入🥟水乙醇),8000rpm离心1分钟,弃废液。 👩‍🚒⑧加入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是否💇‍♂️加入无水乙),最大转速13000rpm离心3min,弃废液。  ⑨将👩‍❤️‍👩附柱放回废👢收集管中,大转速13000rpm离心1分钟,尽量去除漂洗。  ⑩将附柱转入一😥干净的离心中(需自行准备,试剂盒-未提供),加入50μL洗脱缓冲液或菌去离子水室温放置2-5分钟,8000rpm离心1分钟。收集滤出液,🖋️好标记,4℃或-20℃(短期)保存备用,-70℃长期保存。 (2)核酸检测:实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴病毒核酸(PCR实验室进行)。  ①反应体系的备:每孔20μL,加入5μL样本DNA,共计25μL;每次PCR反应,除检测标本外应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照;🚑有样本,包对照,应设孔。  ②样:每根反⚗️管中加入核或对照各5uL,盖紧管盖或封好透明🧄,置于荧光量PCR检测仪上。  扩增条件设🐩:  ④仪🔷检测通道选:使用荧光量PCR检测仪,选择Fam荧光信号检测通道,收设在60℃。具体设置方🍳参照各仪器用说明书。 ⑤结果分阈值设定:用荧光定量PCR检测仪进行结果分析,基线取3-10或6-15个循环的荧光信号,阈设定原则为值线刚好超正常阴性对扩增曲线最💉点,也可根仪器噪音情调整阈值。-, (3)核酸检测结果判  ①Real-timePCR反应系统的质量控:反应结果⭐同时符合以🌋2个条件,否则试验结果-效,应重新展检测。阴对照无扩增📉为阴性。阳对照未出现性结果。 ②结果判定  A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值;  B.灰区:一孔Ct值>37;  C.阳性:双孔Ct值<37。  所有阳和处于灰区标本应重复测或经序列析进行确诊需注意:当本仅为咽拭或血清、血🤲,且检测结为阴性时,结合临床症👩‍🍳,慎重做出性诊断。 (4)表格记录  做好光定量实时PCR方法检测猴痘病毒核原始记录。 五、猴痘毒全基因组序  1.测序标本选取则。本土疫中的首发或期病例、与期病例有流病学关联的️⃣键病例、感来源不明的土病例、境输入病例阳标本等。以标本在核酸光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。  2.测序要求。以省为单确定开展猴️⃣病毒全基因🏰测序的机构建议使用扩子技术进行痘病毒全基组测序。测数据经质控格后方可用后续生物信🤡分析。二代序平台覆盖度应不低于10×,三代测序平台覆盖度应不低于50×,全基因组测序覆盖-应不低于98%。数据比对分析推荐参猴痘基因组NC_063383.1。  各省应建本省输入、土病例猴痘毒基因组数库,应具备列对比分析力。具备测条件的省份在接收标本⛸️48小时内开展测序工作👩‍👧‍👦关键样本要实验室收到本后1周内提供测序结果告,所有测原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中病毒病所进👨‍✈️序列汇总、🏙️析。病毒病应将序列分💩结果及时反📄各省,并将️⃣国猴痘病毒列汇总、分-结果及时上️⃣国家疾控局  3.分子分型。推荐用在线分析具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行子分型。 附件:  7-1猴痘病毒检测标本送表  7-2猴痘病毒标序列测定结报告单【编:孙静波】
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