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　　中新🏋️‍♀️7月27日电据国家,控局官方信消息，进一步做猴痘防控作，及时效应对猴疫情，提️⃣猴痘防控作的科学👳‍♂️、精准性有效性，实维护人群众生命全和身体康，国家控局会同家卫生健🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿委制定并🚶‍♀️7月26日印发《猴防控方案🧍‍♂️。其中提，2023年6月以来，我国多省份先后告多例猴病例，引👈新增本土发疫情和匿传播的险较高。坚持“预为主、防👇结合、精防控、快处置”原，落实“发现、早告、早隔、早治疗措施。　📷《猴痘防方案》全😽如下：猴防控方案　猴痘是猴痘病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致一种人兽👨‍👨‍👦患病。2022年9月，我国报🔱首例猴痘入病例。2023年6月以来，国多个省先后报告🕘例猴痘病，引发新本土续发情和隐匿播的风险高。为指🎆各地科学准做好猴防控工作切实维护民群众身健康，制本方案。、总体要　　坚持预防为主防治结合精准防控快速处置原则，落“早发现早报告、隔离、早🛄疗”措施开展医疗构、重点🚋群、入境员和重点所等多渠🧸监测。加疫情分析风险研判有针对性开展重点群健康教和综合干。落实病隔离治疗流行病学查和密切🏖️触者追踪👩🏿‍🤝‍👨🏾理等措施坚持发现♈起、控制起，及时-断疫情传。二、疾🔶特征　　(一)病原学特征。　猴痘病毒于痘病毒正痘病毒，为基因全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发🏩该病毒。1970年在刚果民主和国一名似天花患的标本中🚵‍♀️次分离到痘病毒，首例确诊🎓人类猴痘例。　　📆痘病毒分👩‍🦱两个进化支：(1)分支I，曾称为中非支或刚果地分支；(2)分支II，曾称为西非分支进一步分IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方流行区猴🚂暴发疫情毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现🚎多亚分支包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告例输入性-痘病例以，各地报中国疾控心病毒病的毒株序均属于IIb分支。　　猴痘病耐干燥和🚺温，在痂、土壤和物、床上品等物体🥖面可生存月。该病对热敏感🍭加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂过氧乙酸常用消毒及紫外线有效灭活毒，对过化氢、次🌶️酸钠、戊醛、邻苯甲醛等敏。　　(二)流行病学特征。　1.传染源。猴痘病的宿主尚🍌明确，目认为非洲齿类动物(非洲松鼠树松鼠、比亚袋鼠睡鼠等)可能为其自宿主。传源包括猴病例及感🔳的啮齿类物、猴和等灵长类♓物。　　2.传播途径。猴痘病♎主要经黏和破损皮🛋️侵入人体主要通过接接触病🍵的病变皮或黏膜传🕢，亦可通接触被病污染的物🧑🏼‍🤝‍🧑🏼、长时间距离吸入例呼吸道沫传播，触感染动的呼吸道🍔泌物、病渗出物、🤐液及其它🚱液，或被染动物咬、抓伤感传播。　👍3.易感人群。人群遍易感。种过天花苗对猴痘毒存在一程度的交保护力。　4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫主要在中和西非地😣呈地方性🛄行，主要🌨️过接触感动物传播所引发的’传人疫情☠️播链较短♏主要为儿及青壮年散发病例📁聚集性疫，通过家或旅行方偶尔播散其他国家地区。2022年5月以来全球国暴发的情主要在男性行为群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发性行为的性)中经性接触传播🛕大部分病为青壮年👩‍⚖️性，通过型聚会以🚓后续在社的MSM扩散，并传至全球多国家和地。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出症状后至🌤️疹结痂自脱落并形新皮肤前有传染性有调查提🔁一些病例能在出现状前1-4天存在传性。　　3.早期症状：可出现热、头痛背痛、肌🤣和淋巴结大等。　4.皮疹和黏膜疹：💒常在热退出现，有病例可出🏊‍♂️在全身症➖之前。皮发生常经斑疹、丘、水疱、疱、结痂痂皮脱落💰个阶段，同形态皮可同时存，可伴有显痒感和痛。可累👩🏽‍🤝‍👨🏼口腔咽喉膜、肛门💝生殖器、膜和角膜️⃣。痂皮脱后可遗留斑或色素着甚至瘢🏄，瘢痕持🎠时间可长🌷数年。　♠️5.病程及严重程度猴痘病程👟2—4周，免疫力低☪️患者的病可能较长猴痘为自性疾病，多数病例🦃状会自行失，也有症和死亡生，主要儿童、孕🪀和免疫力下人群。🚋　2022年以来全多国猴痘发疫情中大多数病临床表现轻，部分🎵例无全身🥭状，皮疹限于生殖、肛门直🅾️黏膜部位◾死亡病例😭要为未得治疗的艾🧨病病毒感👫🏾者等免疫低下人群🥞2022年以来全球地方性流👩🏼‍🤝‍👨🏿区病例的死率约为0.1%。三、宣传教与干预　针对重点群、出入人员和一人群等不🦕人群分类🐖展宣传教，有针对地加强不🧑🏿‍🤝‍🧑🏻人群的自防范意识个人防护施，积极合做好防工作。　🏣(一)重点人群。各👎卫生健康疾控部门合相关社组织，充借鉴艾滋防治综合预经验和务模式，MSM经常出入的酒🧑🏿‍🤝‍🧑🏿、会所、🥘池等重点动场所，👨‍👩‍👦展同伴教🔧。借助大媒体、MSM社交网站等互联网👩🏼‍🤝‍👨🏻台，开展🧵痘防控知宣传教育提高重点🐪群防范意💖，减少高行为，引有可疑接史者自觉好自我健🏊‍♀️监测，增🖱️主动就诊识。　　点人群宣干预要求见附件1《重点人群🦹传干预指》。　　(二)出入境人员。通发放宣传👩‍🏫料等形式加强出入人员猴痘🐕‍🦺控知识宣教育。提出境人员注目的地家和地区痘疫情信，不接触痘样症状🧳及啮齿类灵长类等物。提醒自猴痘疫报告国家地区的人，如在境🛴有可疑接🧓史，入境21天内应做好自我康监测，免与他人🛺生密切接，一旦出发热、皮🎦、淋巴结大等猴痘症状，应😍动就诊并👩‍💻实报告流病学史。　(三)一般人群。地充分发⛪新媒体以广播、电、报纸等🍠统媒体作🤩，开展猴🍨防控知识传教育，高公众科🚉防范意识四、疫情测和报告🎨　(一)监测病例定🎖️。　　1.猴痘样症者。不明’因急性皮(面部或口腔黏膜、肢、生殖或会阴、-周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿大者　　2.疑似病例。🛴痘样症状🐅，发病前21天内具备以下流行学史中的何一项：(1)有猴痘病例报告区旅居史⛄(2)有猴痘确诊病或疑似病接触史；(3)有同性性行为，性伴有同性行为史🏥(4)有地方性流行可疑动物🐓触史。　3.确诊病例。猴痘症状者、似病例及切接触者经实验室测猴痘病核酸阳性-,病毒分离性者。　🤔(二)多渠道监测。　1.医疗机构监测各级各类🧘‍♀️疗机构要展猴痘样😾状监测，其是皮肤(性病)科、肛肠科、🥞滋病自愿询检测门🚣‍♂️等要重点-注猴痘样状者。发猴痘样症者，应主询问流行🕊️学史，记患者现住🧏‍♀️及联系方，采集标送疾控机进行猴痘🕞酸检测。备猴痘病🎆检测能力猴痘病毒验活动资🏘️的医疗机也可开展测。　　2.重点人群监测。各各类医疗构、疾控构在对MSM等重点人群开展诊或检测咨服务时，主动询问否有猴痘症状及其疑接触史如发现猴🐮样症状者疑似病例应及时采标本进行痘病毒核检测。　3.入境人员监测。关收到猴相关异常康申报或疫发现有痘样症状,-入境人员应及时进标本采集-核酸检测🧗并发放《😲诊方便卡，要求其快就诊；于核酸检阳性者，相关信息报辖区疾机构，由关部门进步调查处。　　4.重点场所水监测。条件的地可根据当疫情形势经评估对MSM经常出入的酒吧会所、浴🧏‍♂️等重点活场所开展水监测。　(三)病例报告。👂　相关医-,-机构根据床表现、行病学和验室检测果，及时患者进行断。　　断的疑似例和确诊例应于24小时内通✨中国疾病防控制信系统的监报告管理😒块进行网↗️直报。如↘️境外输入🌹例需填写入来源国-或地区。🚴具备网络🌌报条件的疗卫生机👩🏾‍🤝‍👨🏼，需在规时限内将染病报告信息报告地乡镇卫👩‍💼院、社区生服务中或县级疾机构进行络报告，时传真或送传染病👩告卡至代单位。负病例网络🐳报的医疗生机构，根据实验检测结果流调进展时对病例息进行复🦷、订正。🚃　各县(市、区)出现首例猴痘👩‍✈️诊病例或2例及以上存在流行👩‍🚒学关联的🦹诊病例，当在2小时内通过突💩公共卫生件报告管信息系统告，事件别选择“分级”。🧍‍♀️、疫情处　　(一)病例管理⚔️　　各地现猴痘疑🏦病例和确病例应当🛃时转运至疗机构进隔离治疗如临床症明显好转病变部位结痂，可为居家隔治疗，直皮疹结痂然脱落，除居家隔。对病情轻且具备家隔离治条件的确病例，经疗机构与控机构联评估后，直接采取--家隔离治。对于实居家隔离疗的确诊💪例发放《,痘病例居🌌隔离治疗🍳康告知书(见附件2)。确诊病例居家隔治疗期间单人单间✔️住，避免家人有皮👯‍♀️或黏膜直接触，做被污染物🍇的消毒，🥅必要不外🌁，确须外时穿长衣🙉裤、佩戴用外科口，避免前人群聚集所，避免其他人有肤或黏膜🙆‍♂️接接触；定医疗机👫安排专人责上门或话随访，供健康咨和医疗指。　　(二)流行病学调查。　县(市、区)级疾控机构接到辖疑似病例确诊病例告后，及组织开展行病学调✳️，查找感🙋来源，掌♦️、追踪和理密切接👀者，分析⚕️播链及传特征，及🕋发现潜在风险人群其范围、征，有针性地开展⏬传教育和合干预。查过程中挥多部门防联控的同作用，🈯可能获取🆕面准确的调信息。　调查内主要包括例基本信、发病就情况、临🧻表现、转及实验室测；发病😔21天内与可疑感染🦑源的接触-、接触场⤴️及接触方🏣；发病后🎰隔离治疗的具体活地点、与有皮肤或🍄膜直接接者，以及病前4天内与其有性👩‍👩‍👧触者。　猴痘疫情⏮️行病学调💕要求详见件3《猴痘疫情流行☹️学调查指⛳》。　　(三)密切接触者的判和管理。　1.密切接触者定。直接接🍟病例的病部位及其📆污染物品🕠或感染动及其分泌😄、渗出物污染物；及职业暴或长时间距离吸入例呼吸道沫等，经估有感染🧛‍♀️险的人员⏩　　2.密切接触者定。根据行病学调👴及暴露风评估结果疾控机构责及时对切接触者行判定。　3.密切接触者管。疾控机⤵️或基层医卫生机构👨‍👩‍👧‍👧导密切接者做好自健康监测🎄健康监测限为最后切接触之起21天。　　密切⭕触者自我♈康监测期可正常生🥺与工作，避免与他发生性接等密切接，避免捐🌁血液等；持每天做👯体温测量症状监测🚹出现猴痘症状应及就诊并主报告可疑触史。辖疾控机构基层医疗生机构应密切接触🧙自我健康👩🏻‍🤝‍👨🏽测第7、14、21天上门或电🚆对其进行访，提供询指导，现异常情及时进行置。　　切接触者定管理要详见附件4《猴痘密接触者判和管理指》。　　(四)消毒与人员防护😺　　做好例衣物、🌆巾、床单餐具等个用品，以可能被病🚩分泌物、出物、体等污染的🐦境和物体面的消毒🌻从事病例治护理、行病学调、环境清消毒、标🍏采集和实🖌️室检测等🦗作人员在🏪作期间做个人防护⬅️　　消毒人员防护求详见附🍈5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个-防护指南。六、实💾室检测　猴痘病毒酸检测首-皮肤或黏病变部位-本，可同采集口咽子标本。省首例猴👩🏽‍🤝‍👩🏼确诊病例🐶本应送中疾控中心毒病所进复核；本🩰疫情中的🗡️发或早期诊病例、早期病例🥬流行病学联的关键,诊病例、🛢️染来源不的本土确♋病例、境输入确诊例阳性标💈等，荧光👨‍🍳量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因🥃序。所有序原始数、组装序及测序样送检单应获得序列48小时内报送中国疾💨中心病毒所进行汇、分析。上确诊病应至少采一套标本(包括核酸测阳性者皮肤或黏🛳️病变标本口咽拭子👩‍🦼本以及发急性期和👛复期双份清)送中国疾控中心🗽毒病所。　实验室🧝‍♀️测具体要详见附件7《猴痘病🙉实验室检技术指南🐯。七、院-感染控制🙆‍♂️　医疗机应当严格好院内感🧙‍♀️控制。疑病例和确病例应安在隔离病，疑似病单间隔离🔢医务人员🦊行标准预，采取经触传播和飞沫传播💎病的隔离♊预防措施佩戴一次🚸乳胶手套KN95/N95及以上级别的📇罩、防护屏或护目、一次性离衣等，时做好手生。严格照《医疗构消毒技🚝规范》对🐄例的体液血液、排🔌物、分泌等进行规☹️处理，做诊疗环境(空气、物📻表面、地等)、医疗器械、病使用物品❄️的清洁消。根据《💕疗废物管条例》《疗卫生机💣医疗废物理办法》🍾好医疗废的处置和理。八、-作要求　(一)加强组织协调各地卫生康、疾控门加强与关等有关👩‍👧门的密切作和信息🚧享，及时现与处置痘疫情，实猴痘病🔣发现、疫报告、诊隔离、密接触者追管理等工，防止疫扩散和蔓。各地在痘疫情防过程中应😌意保护病️⃣、密切接者和重点👈群等个人私。　　(二)加强宣传引导。地要及时布辖区猴疫情相关🔖息，做好策解读和众健康提🪀。通过多🧚‍♂️方式和渠开展猴痘👩‍🏭控知识宣，加强重人群宣传育的针对和实效性及时回应会关切，导公众科认识猴痘　　(三)加强人员🚖训。各地加强对各疾控机构医疗机构业人员的训。对医人员重点展猴痘病👩🏾‍🤝‍👩🏼的识别与🙄断、病例♊现与报告🍅病例管理相关知识训，强化📯治意识。疾控人员点开展流病学调查密切接触的判定和理、实验🪂检测、重人群宣传预等相关👩‍❤️‍💋‍👩识培训，👨‍🏫高猴痘疫防控和应💯处置能力　　附件　　1.重点人群宣🚮干预指南　2.猴痘病例居家离治疗健告知书　3.猴痘疫情流行病调查指南　4.猴痘密切接触判定和管指南　　5.猴痘消毒技术指南　6.猴痘个人防护南　　7.猴痘病毒🧍验室检测术指南　-附件1　　重点人群🗓️传干预指🥓　　2022年5月以来，全球地方性流区发生的痘疫情以男性行为群(MSM)为主。为充分利用国艾滋病治综合干💄服务体系开展MSM等重点人宣传干预😞防范猴痘情传播扩,，形成常’化艾滋病⛏️猴痘综合控一体化对机制，👩🏾‍🤝‍👨🏻定本指南一、实施📚略　　在有艾滋病🔻治综合干服务体系础上，综运用行为干预方法手段，通宣传教育🈸促进安全,-行为、动检测、外服务、同教育和互👓网干预等从个体、体和社会🔪多个层面😅目标人群供猴痘综-干预服务二、组织施　　各医疗机构疾控机构加强重点-室和艾滋自愿咨询测门诊工人员猴痘识培训，重点人群供猴痘防🟥知识宣传💆检测咨询🧟‍♀️动员、治和关怀等务。各级控机构应积极推动地有能力具有良好滋病防治验的MSM志愿者或▫️会组织共参与猴痘治宣传工🍵，在工作程中注意护重点人个人隐私三、形势析　　各要加强对点人群猴疫情、防🈸现状、影🗣️因素及出境情况的查，及时析研判猴🚤疫情形势🎴为制定本🦸‍♀️高危行为预工作计-提供依据具体内容括：1.重点人群基、活动形和特点、🌈动场所、🥨入境的时🌛及地区等2.猴痘知识、态度高危行为3.猴痘疫情水平及📑影响因素🎷4.猴痘防治政策及🌉业机构已🙎‍♀️展的工作🚂5.包括志愿者在内有关组织个人已开⏳的干预活⏺️；6.影响猴痘防治作的困难问题。四🎫宣传干预　(一)宣传教育。级疾控机或健康教🚓专业机构供技术支，社会组参与，共研究制定合当地特🧸的猴痘预🏠宣传材料🎢加强警示🍋传教育。过大众媒、MSM网站和以移终端为载的交友软等平台，传国际、内及本地痘疫情信和防控知，提高重人群猴痘🤧范意识。　(二)同伴教育。级疾控机🕴️要加强同教育员挑、招募和训，组织🙆‍♀️支持同伴传活动，强人群猴风险防范识，推动动检测。期组织同教育员工例会，了猴痘干预作存在的🌈难和问题,,,有针对性给予帮助支持。　🧯(三)外展服务。各疾控机构预工作人定期到重人群活动所开展猴,,宣传、咨、发放宣🌡️材料等外🍎服务活动🥖提高重点👩🏻‍🤝‍👨🏿群猴痘防意识和知水平，推重点人群强自我健🦞管理，主寻求检测询服务。　(四)检测咨询。✝️级疾控机通过互联👾、同伴教🚐、外展活等多种形动员有猴👩‍⚕️样症状或疑接触史✋重点人群😊行猴痘检。各级各医疗机构肤(性病)科、肛肠、艾滋病愿咨询检门诊发现痘样症状，应主动问其流行✉️学史及性触史，记患者现住及联系方，采集标送疾控机进行猴痘酸检测，备猴痘检👨‍🦽能力及猴病毒实验动资质的疗机构也开展检测对于已建,互联网+HIV检测平台的地区可增加猴检测内容实现互联在线检测约和结果询。五、点场所干　　重点动场所包实体和虚两类场所实体场所括酒吧、所、浴池🐉经营性场🤟，虚拟场包括移动联网和社🤙媒体。　(一)实体场所干预　　各级控机构负组织干预作人员在地MSM经常出入的吧、会所浴池等活场所，开💓猴痘预防预宣传，要包括：　1.在MSM经常出入的酒吧会所、浴🌟等实体场，张贴醒的健康教🎹宣传图片设置健康育资料公栏；　　2.强化个人健康责任识，开展痘健康咨👍，推动开自我风险估；　　3.提供转介服务信息🍙告知明确诊疗流程👨🏽‍🤝‍👨🏻及相关检⏸️、医疗机💐名称、联🤳人等信息🥜　　各地-加强对猴♦️确诊病例💻病前21天内活动过场所以及水监测阳🦏场所的干宣传，重目标人群个人隐私🎤护，加强社会组织伴教育员痘防治知👏培训，建规范的行👨‍👨‍👦‍👦干预流程提高自我🥞护技能。　(二)虚拟场所干。　　各🐮疾控机构🏨责组织指当地有序🔹展猴痘线☦️宣传，在关网站、交媒体平🙉及时发布更新猴痘’传教育内，形成面🆑重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣🌡️干预服务系。　　🧆级疾控机支持社会⛹️织或同伴育员利用站、信箱社交媒体👍台，组织🗻展在线咨👩‍👩‍👧‍👦和交流。时解答网提出的各猴痘相关题。针对同时期猴传播特点定期或不期组织专-、专业人、同伴教员利用互网和社交体平台进在线宣教各级疾控构要定期-导更新相⛸️专业信息确保宣传容科学、效。　　件2　　附件3　　猴痘疫情流病学调查南　　为👩🏿‍🤝‍👨🏾导各地疾机构规范展猴痘疑病例、确🐞病例和聚性疫情的行病学调💗，及时掌🕜病例暴露、接触史🦃流行病学关信息，🧛实密切接👨🏿‍🤝‍👨🏾者的追踪定，防止🧎情传播扩📅，制定本南。一、🏫查目的　(一)查找感染来源掌握、追和管理密🍆接触者。　(二)分析传播链🌵传播特征🔣　　(三)及时发现在的风险群及其特、范围，针对性地展宣传教和综合干。二、调💁‍♀️对象　　️⃣似病例、诊病例和集性疫情三、调查🏙️法和内容　通过查资料，询病例、诊医生、家🍈和知情人🐸进行流行💂‍♂️学调查。-,病例的病允许，调⚾时应先调🚻病例本人再对其诊🚞医生、家和知情者行调查。😾　开展个🩱调查时，认真、详了解和记😰病例基本息、发病🤹‍♂️诊情况、床表现、归及实验检测信息发病前21天内与可感染来源接触史、触场所及🈳触方式；📽️病后至隔治疗前的体活动地、与其有🔊肤或黏膜接接触者🟢以及发病4天内与其有性接触。　　(一)基本情况。如姓名性别、年、住址、♍籍、联系式等。　(二)发病就诊情况临床表现实验室检、发病就经过和病🖨️变化与转。　　(三)感染来源调查。对🥜例发病前21天内的暴露史开展查，包括内外猴痘例报告地旅行史或👬🏽住史，对疑的感染📙源要详细问接触时、方式、🐕‍🦺次、地点接触时采的防护措等，特别性接触史调查时，发现调查中未列入但具备重💇‍♂️流行病学义的内容应进行详🚖询问和记。　　(四)密切接触者调查及定。对病🦓传染期的动情况和🌞群接触情📋进行追踪排查后，定其密切触者。密接触者判和管理按《猴痘密💸接触者判🧬和管理指🏃‍♂️》(附件4)执行。　　详见附👻3-1《猴痘病例个调查表》👭🏼四、组织🕠实施　　照“属地管理”原，由病例住址所在县(市、区)级疾控部门组织辖疾控机构🐭展猴痘病的流行病调查，就医疗机构供诊疗信🟤。调查单应根据调计划和调🧙‍♂️目的，确调查人员成和职责工，及时🚶‍♀️展病例流病学个案查。调查程中发挥部门联防控的协同😷用，尽可🧍获取全面确的流调🧱息。调查间，调查👩🏾‍🤝‍👩🏽员要做好👖人防护。、信息的🥒报与分析　疾控机完成调查😧，应做好例分析总，及时将行病学个🚼调查表、↔️查报告等料逐级报上级疾控构，并做💹调查资料🎎保管和存。病例流信息要按🍘关规定，格做好信安全和个隐私信息护。　　✒️件：3-1.猴痘病例个案调查　　附件4　　猴痘切接触者定和管理-南　　为导各地做猴痘密切触者判定😛管理，有控制猴痘🦻情的传播制定本指🔫。一、密接触者判标准　　切接触者指直接接🧥病例的病部位及其污染物品或感染动😯及其分泌、渗出物🍽️污染物的员；以及业暴露或⚱️时间近距吸入病例吸道飞沫🍖，经评估😦感染风险🥩人员。具情形包括　　1.与疑似病例确诊病例🔌病后有皮或黏膜直🤠接触的人👩🏾‍🤝‍👨🏻，接触方包括性接🎰、抚摸、💺抱和亲吻；　　2.与有皮疹🐱状的疑似例或确诊例共用衣💚、被褥、具等物品人员；　3.医疗诊疗、采样实验室检等操作过中可能暴于病毒，评估有感风险的医卫生工作员；　　4.与疑似病例或确诊例发病前4天内有性触，并经行病学调🔧专业人员估有感染险的人员亦可判定密切接触🎀；　　5.在狭小密空间与疑病例或确☂️病例长时🧖‍♀️近距离接(如长时间共处同一💰闭空间)，经流行病📛调查专业员评估有染风险的🚷员，亦可🔥定为密切触者；　6.接触感染猴痘病的动物及分泌物、🧑🏿‍🤝‍🧑🏽出物等污物，而未取有效个◽防护的人；　　7.其他可能在病毒暴’风险的人。二、密接触者管📺　　1.管理期限与式。病例👽现地疾控构或密切🔛触者所在疾控机构于追踪到切接触者,-天及时开猴痘病毒酸检测，知并指导切接触者👩🏾‍🤝‍👩🏽好自我健监测，健🏒监测期限👨‍👩‍👦自最后密接触之日起21天。自我健康测期间可常生活与作，需避与他人发🧎性接触等切接触，免捐献血等。　　2.知情告知。实施健🍽️监测时，控机构或🚢层医疗卫机构应口告知健康👩🏾‍🤝‍👩🏽测的缘由期限、注事项和疾相关知识以及负责访疾控机🪐或基层医🔱卫生机构系人和联方式，并放《猴痘切接触者康告知书🦡。　　3.定期随访疾控机构基层医疗🤍生机构应第7、14、21天电话或上门🏯动询问密接触者自健康监测况，提供🧑🏻‍🤝‍🧑🏻询指导建。发现异情况，及调查处置　　4.自我健康监。坚持每👷做好体温量和症状测，主要👵状包括发(＞37.3℃)、皮疹、浅表巴结肿大👩‍🦽。密切接🚵‍♀️者一旦出相关症状及时前往疗机构就或与随访系人取得系，接受痘病毒核检测。　,,,附件：4-1.猴痘密切接触者康告知书　附件5　　猴痘消技术指南　为进一规范猴痘情相关的毒工作，实科学消🤨、精准消😄，减少猴病毒对公健康造成危害，制本指南。、疫源地毒　　(一)适用范围。　　适于出现猴病例后，其可能污的场所和品进行的时消毒和🌗末消毒。💧　(二)消毒原则。　1.范围和对象确。　　根流行病学查结果，定现场消的范围和象。对病在住院、运期间可😱污染的环和物品，行随时消。对病例🪐住或活动的场所，居住场所工作场所👁️学习场所诊疗场所转运工具及其他可受到污染场所，在离开后(如住院、转、出院、亡)进行终末消毒。📚　2.方法选择。　(1)诊疗用品消毒尽量选择🤾次性诊疗,品，非一性诊疗用应首选压😅蒸汽灭菌🤬不耐热物可选择化消毒剂或温灭菌设进行消毒灭菌。　(2)手消毒。建议用手消毒👭🏿揉搓双手行消毒，🕹️可选择75%乙醇、过氧化氢等毒剂。　(3)环境和物体表🥒消毒。可🛷择含氯消🌇剂、二氧氯、过氧酸、过氧氢等消毒,擦拭、喷或浸泡消。　　(4)衣物、床单等纺织消毒。可择热力消、含氯消剂或季铵类消毒剂♾️泡等消毒🛬式。　　(三)常见污染对象的毒方法。　1.手消毒。　　👨🏿‍🤝‍👨🏽选用速干消毒剂，,,,直接选用75%乙醇进行擦拭消；醇类过⛔者，可选季铵盐类有效的非🚊类手消毒🐭。有肉眼见污染物，应先使😺洗手液(或肥皂)在流动水下按🥌六步洗手🤕清洗双手-然后按上方法消毒　　2.皮肤、黏膜🏄　　皮肤污染物污💂时，应立👩‍🏭清除污染🦼，再用一🎭性吸水材沾取0.5%碘伏或过氧化氢消剂擦拭消🧽3分钟以上，使用清清洗干净粘膜应用量生理盐冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒　　3.床单、毛巾衣服等纺-品。　　例使用的单、毛巾--衣服等纺品，无肉可见污染时，若需复使用，用流通蒸或煮沸消30分钟；或用有效👩🏻‍🤝‍👨🏾500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒浸泡30分钟后，按⏰常规清洗或用其他效的消毒🗂️法。不耐🛹的衣物可用环氧乙👩‍👧‍👧或干热方进行消毒🥎理。　　分泌物、⛱️出液、排物、血液体液等污物时，建♠️按医疗废集中处理⏩　　4.餐(饮)具。　　病例使用的碗盘、筷、等餐(饮)具清除食✍️残渣后，🚩沸消毒30分钟，或🔔用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再用清水净。　　5.污染物。　　对病😚分泌物、️⃣出液、排-物、血液体液等少污染物可👨🏼‍🤝‍👨🏻一次性吸🕵️‍♂️材料(如纱布、抹布)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消👩‍👩‍👧‍👦剂(或能达到高水平毒的消毒巾/干巾)小心移除　　对病分泌物、-,出液、排物、血液👩‍❤️‍👩体液等大污染物应用含吸水分的消毒或漂白粉🐚全覆盖，用一次性水材料完覆盖后用📟量的有效5000-10000mg/L的含氯消毒🆖浇在吸水🥪料上，作30分钟以上(或能达到高水平毒的消毒巾)，小心清除干净🧃清除过程⚔️避免接触-,染物，清的污染物医疗废物中处置。　病例的泌物等应专门容器集，用有氯20000mg/L的含氯消剂，按物🚙药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污物后，应污染的环👞和物体表进行消毒盛放污染⛹️的容器可有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟，然清洗干净👊　　6.地面、墙壁　　有肉可见污染时，应先全清除污物再消毒👨‍👨‍👧‍👧无肉眼可污染物时可用有效1000mg/L的含氯消毒剂500mg/L的二氧化氯消毒擦拭或喷-消毒；不腐蚀的地和墙壁，㊗️可用2000mg/L的季铵盐消毒剂喷或擦拭；毒作用时不少于30分钟。　🖱️7.物体表面。　　疗设施设🥡表面以及围栏、床👅柜、家具门把手、生洁具和居用品等肉眼可见染物时，先完全清污染物再毒。无肉可见污染时，用有🏺氯1000mg/L的含氯消毒🏴‍☠️或500mg/L的二氧化氯消剂，不耐蚀的物体面也可用2000mg/L的季铵盐类消毒进行喷洒擦拭或浸消毒，作30分钟后清水擦拭🈶净。　　8.污水和粪便。　　🗓️进入市政水管网前进行消毒理，消毒🚄污水应当👶合《医疗构水污染排放标准(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃。　　病生活垃圾医疗废物理。　　10.医疗废物。　　疗废物的置应遵循医疗废物🛵理条例》《医疗卫机构医疗物管理办》的要求规范使用#️⃣层黄色医🗽废物收集封装后，常规流程行处置。　11.室内空气。🚶‍♀️　如经科评估，需室内空气行消毒，🛩️在无人情,-下，可选💈5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢😚二氧化氯(浓度按产🌯说明书)等消毒剂，20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒也可采用验证安全🚠效的其他毒方法。、注意事　　现场毒应确保🙋用消毒产合法有效所选消毒😵法科学可。现场消时，根据场情况和关标准要，选择合有效的个防护装备在做好个🦇防护的前下，严格照工作方,-实施消毒🐾　　消毒施单位应备现场消能力，操人员应经消毒专业训，掌握-,毒和个人护基本知🌈，熟悉消器械的使和消毒剂配制等。　每次开消毒工作均应做好毒记录，括消毒对😩、消毒面(体积)、消毒剂浓(或消毒器械强度)、剂量、作🤢时间等。时，相关🦝门和单位😋做好消毒作的监督-理和评价　　附件6　　猴痘🌽人防护指　　为加公众、疫👨🏽‍🤝‍👨🏻处置相关☯️作人员和务人员的🅰️人防护，免猴痘病暴露感染🚆制定本指。一、居👯‍♀️隔离治疗病例等相人员　　(一)适用范围。　　⤵️用于居家离治疗的例(疑似病例和确诊例)、照护人员或共居住者的人防护。🗽　(二)居家隔离区要求。　1.应选择有自然通、独立卫间的房间🐂为隔离区。　　2.应配备专的餐具，单、毛巾床上用品消毒剂和罩等个人👹护用品，视和平板脑等电子备。　　3.卫生间宜配备专用洗衣机，😷漏应有水👩‍✈️。　　(三)病例管理要求。　👩‍🎤1.应能够进行自我护。　　2.应每天做好体温测和症状监🎁，避免与人共用个物品。　🥃3.避免与他人发生接触，避与免疫力下人员、🤽童、老人孕妇及其人员的直🌁接触，避与宠物等物接触，免捐献血等。　　4.外出就诊时，应佩医用外科罩，着长长裤，确遮住所有🦠伤皮肤，👩‍👩‍👦免与他人切接触，免乘坐公交通工具　　(四)照护人员🦼求。　　1.应每天做好体温测和症状监。　　2.应尽量避进入隔离域。如需,,,入隔离区🐔，应佩戴🚋用外科口🔫和一次性套，与病保持至少1米的距离在离开隔区域之后🛄应加强手生，并对下的口罩🤓手套进行毒处理后👩‍✈️弃。　　3.在拿放和清洗居家离治疗病的床单、服和处理圾的过程😁，应避免🌜动。用湿布拖地，👨‍👩‍👧免干扫。湿抹布清家居用品面，地毯🎁用蒸汽清，避免使吸尘器。　4.应将居家隔离疗病例的具、床单😎毛巾和衣单独洗涤消毒，可🐌择热力消👑、含氯消🤞剂或季铵🚵类消毒剂-泡等消毒🐦式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同居者出现任🔑症状或不🚣‍♂️表现，应及时前往🦳定医疗机就诊并主🍴报告可疑触史。　📡2.对其接触的物品💇‍♀️活动的区等结合风🧑🏿‍🤝‍🧑🏿评估结果行消毒处🎭。二、疫👩‍👩‍👧处置相关🐉作人员　☹️(一)适用范围。　适用于猴’疫情期间🚱行病学调、环境清消毒人员✍️个人防护🏃‍♂️　　(二)流行病学查人员防要求。　1.个人防护装备。次性乳胶套、医用科口罩、🍻次性隔离等。　　2.个人防护要求。规佩戴口罩加强手卫，与被调人员保持🔓少1米的距离。　　3.废物管理。调查结后，废弃👨‍🏫个人防护备暂存、理和处置按照《医👩‍👩‍👧废物管理例》执行　　4.应急处置。在调查过中出现口脱落、直接触了病皮肤或分🟠物等情况要结合被--查人员的床诊断结、空间的🧟闭性、接的时间和离等进行👩‍🎨险评估，合风险评结果，采相应的处措施。　👩‍👩‍👦(三)环境清洁消毒员防护要#️⃣。　　1.个人防护-备。一次乳胶手套医用外科罩、一次隔离衣、水靴套等　　2.个人防护要。规范佩口罩，加🐔手卫生，量减少与消毒物品直接接触🤸‍♀️　　3.废物管理。洁消毒结后，废弃-,个人防护🗼备暂存、🥤理和处置🥫按照《医废物管理例》执行　　4.应急处置。在清洁消过程中出口罩脱落皮肤损伤直接接触泄物、血等情况，--结合被清-消毒物品类型、接的时间和🦩间的密闭等进行风评估，结♎风险评估果，采取-,应的处置施。三、务人员的人防护　(一)适用范围。　🦹适用于猴👩‍🦱疫情期间务人员及工作环境防护。　(二)基本要求。　🤵1.个人防护装备要🍥。医务人执行标准防，采取接触传播经飞沫传🎼疾病的隔与预防措，佩戴一🚍性乳胶手、KN95/N95及以上级别💇‍♂️口罩、防面屏或护镜、一次🚋隔离衣等　　2.环境防护要🟠。医院环的清洁消🦴应符合附5的要求。应避免干🤦尘、清扫吸尘等活。首选湿🏰清洁方法　　3.废物管理。人防护装、病例敷👻等暂存、理和处置按照《医🥇废物管理例》执行　　附件7　　猴痘毒实验室测技术指　　为指👨🏿‍🤝‍👨🏻各级疾控门和其他关机构规开展猴痘毒实验室🥦测工作，速、准确别猴痘确病例，制本指南。指南主要🧗‍♀️绍标本采以及猴痘毒核酸荧定量PCR检测方法😩生物安全求等内容一、检测象　　(一)猴痘确诊病例和疑病例；　-(二)密切接触者；🌻　(三)感染或疑似染猴痘病的动物；　(四)环境或其它物材料。、技术人🚾基本要求　(一)采样人员。事猴痘病核酸检测🗿本采集的术人员应经过生物🌕全培训，训合格后可从事采🏻工作。采人员应熟采集标本类和采集法，熟练🐨握标本采😸操作流程注意事项🟢做好标本息记录，保标本质符合要求🐚标本及相👩🏼‍🤝‍👩🏻信息可追。　　1.采样人员人防护装🍹要求：KN95/N95及以上级别的口罩⚜️防护面屏护目镜、次性隔离、一次性胶手套(尽可能戴两🍝)、靴套；如果接触病例血液体液、分物或排泄，应及时👨🏿‍🤝‍👨🏻换手套。水采样人🏂可根据实工作需要适当降低👬🏻护级别。❕　2.住院病例的标👱由所在医医护人员集，根据验室检测🚤作的需要🛵可结合病-多次采样　　3.密切接触者本由当地控机构或疗机构专人员采集🈚　　4.感染或疑似☠️染猴痘病👨🏾‍🤝‍👨🏻的动物由地疾控机协调动物控部门专采样人员⚙️责采集。　5.环境或其它生-,材料标本相关专业样人员负采集。　(二)检测人员。实💲室检测技🙇人员应具相关专业专以上学或具有中及以上专🧿技术资格并有2年以上实验室作经历，受过核酸测相关培，培训合📉后方可从检测工作📴实验室配的工作人数量应与📸开展检测目及标本-相适宜，保能够及、熟练、确地开展验室检测报告结果↗️三、标本🔄集、保存运输　　(一)标本采集种类。　1.首选标本是皮🕧(黏膜)病变部位标🐂，包括病表面拭子痘疱液或疱渗出物子、痘痂痘痂拭子👨‍💼。　　2.呼吸道标-，如口咽,子，可用病例急性检测，也密切接触检测最常标本。　🥮3.发病急性期可采💖EDTA抗凝血标本行核酸检💧。　　4.采集发病🟧7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用抗体检测　　5.直肠拭子、液、精液唾液等其标本仅用-研究，根工作需要集。　　6.污水或其它环境生材料标本👩‍🦰据实际工需要进行集。　　(二)标本采集要求。　采集皮(黏膜)病变部位标时应使用♈菌聚酯纤♌、尼龙或似材质拭，避免使棉拭子。集疑似病🧑‍🤝‍🧑的标本前👩🏿‍🤝‍👩🏼避免使用75%乙醇等消毒剂清病变部位每种类型👩🏼‍🤝‍👩🏻皮肤(黏膜)病变应尽可能采集个以上拭,,,，每个病应同时采👩‍🍳身体不同🛋️位或外观同的2-3种病变标。采集皮🎖️(黏膜)病变部位标时应适当力。皮肤(黏膜)病变部位、痘🐨或分泌物不同拭子本应放置不同的采管中。进病毒分离应采集干子标本(无采样液)或以非灭活病毒采样保存。根实验室活资质确定用非灭活或灭活型🏡样液采集本。　　(三)标本采集方法。　1.斑疹、丘疹、疱或脓疱皮肤(黏膜)病变部位标本：一紧握采样子尾部，与拭子头保持一寸上距离。👩🏿‍🤝‍👩🏼样时适当力下压拭👩🏻‍🤝‍👨🏼，在皮损面来回擦至少2-3次，然后拭子另一😛再重复擦2-3次。如果在擦-过程中痘✔️破裂，要保采集到疱液。采后将拭子置于无菌样管中(可含病毒采,,液或不含体)，折断拭子头，除拭子尾，盖上管，以消毒巾擦拭消采样管，🚒封口膜密管盖后将🙆‍♂️样管保存送检。　🌓2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样前确保实验👨‍🦲可检测此标本。使无菌镊子,其他钝头👨‍❤️‍💋‍👨械夹取全痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮放置于干、无菌的⚔️样管中，样完成后创可贴覆患处。　3.口咽拭子标本：🛏️采集人员部微仰，🚻张大，露两侧扁桃⏺️，将拭子🕷️过舌根，被采集者侧扁桃体微用力来🆑擦拭至少3次，然后在咽后壁下擦拭至🔖3次，将拭子头浸入2-3mL病毒保存🛢️的管中或于不含液(干拭子)的无菌管🧲，尾部弃🔬，旋紧管。　　4.血液标本尽量采集😖性期(发病7天内)的血液标本🗺️建议使用EDTA抗凝剂的真采血管采5mL全血，可利用血进行检，或室温置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血于无菌管进行检测🌨️　　5.血清标本：真空负压血管采集液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清👩🏻‍🤝‍👨🏽无菌螺口🛩️料管中。一份血清--尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份清应在发后第3-4周采集，集血液标5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集⛩️清于无菌口塑料管，用于猴✌️抗体检测　　6.其他标本：据设计需规范采集🤬　　(四)标本保存　　标本在收集后1小时内冷(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行🐟测。可在1周内检测标本可置🧈4℃环境中保存；1周内无法检👨‍👨‍👧‍👦的标本，期可置于-20℃环境中保存，期应置于-70℃或以下环境中存。全血离血浆前藏(2-8℃)，分离出的血浆于-20℃或以下环🛕中保存。设立专库专柜单独存标本，😗免反复冻标本。　👹猴痘病毒🏵️其相关标应由专人🦎理，准确️⃣录病毒及本的来源编号、数🕶️等信息，💴体要求可考《病原生物菌(毒)种保藏数据描述通》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措确保病毒标本安全严防发生👭用、恶意-用、被盗被抢、丢、泄露等件。　　(五)标本送检。　　本采集后🍛尽快在低条件下(冰袋或干冰)送往实验，如需长🖥️运输标本应采用干🏊‍♂️冷冻运输式进行保🛩️。　　1.送检标本病例标本由省级及下疾控机进行初步测，各省🦳例猴痘阳标本应送国疾控中🍝病毒病所核。每个性病例至采集一套本(皮肤或黏膜病变💆位标本、咽拭子标及急性期恢复期双血清标本)送中国疾▶️中心病毒所检测。,省级疾控⛹️构根据实情况制定内样本送、复核流。　　2.病原体及本运输：　(1)国内运输。,-痘病毒或他潜在感性生物材的运输包🌽分类属于A类，对应联合国编为UN2814，包装符合国际航组织文Doc9284《危险品航空安🌚运输技术则》的PI602分类包装要求通过其他通工具运的可参照上标准包。猴痘病或其他潜感染性材😨运输应按《可感染类的高致性病原微😍物菌(毒)种或样本输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运证书。污水等境标本暂普通生物本运输标执行。　(2)国际运输。猴毒株或样在国际间输的，应范包装，照《出入特殊物品生检疫管规定》办相关手续并满足相国家和国相关要求四、猴痘🤡毒核酸检要求及流　　(一)实验室资👉要求。　开展猴痘毒核酸检的实验室应当符合病原微生实验室生安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构👨🏿‍🤝‍👨🏽床基因扩检验实验管理办法(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定，具备区的市级👩🏿‍🤝‍👩🏼生健康部备案的生安全二级(BSL-2)实验室及以上实验条件，并案猴痘病相关实验动。独立置的医学验实验室应符合《学检验实室基本标📲(试行)》《医学检👨‍👦‍👦实验室管🐩规范(试行)》等要求。　　开猴痘病毒🦄离、培养中和等涉病毒扩增↗️使用等实📆操作的实室应具备家卫生健🔑委批准的物安全三(BSL-3)实验室及以上实室条件，获得猴痘💵毒实验活批准。分💧的猴痘病应送国家原微生物藏中心/国家病原微物资源库📨毒分库保。　　(二)实验室生物安全要🧑🏿‍🤝‍🧑🏼。　　根💊2006年公布实施《人间传‼️的病原微⛹️物名录》(简称《名》)，猴痘病毒生物害分类为一类，是种高致病-病毒。按✉️《名录》💹求，猴痘毒的分离📪培养等涉病毒扩增👸使用的实操作需在BSL-3及以上实验的生物安柜内进行🎞️非灭活采液采集的痘病例样的灭活在BSL-3实验室进行样本灭活猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验🔆或PCR检测的专门域或房间行。如《🐖录》更新🐝开展猴痘毒操作的验室生物全要求应👨‍🦳最新《名》执行。⛱️水样本的🔨活参照普-生物样本　　(三)实验室分要求。　,原则上开🐾猴痘病毒🔍酸检测的验室应当置以下区：试剂储👮‍♀️和准备区标本制备、扩增和🏝️物分析区-三个区域物理空间应完全相独立，空应定向流。各区功分别是：　1.试剂储存和准区：贮存剂的制备试剂的分和扩增反混合液的备，以及心管、吸等消耗品🛶贮存和准🐶。　　2.标本制备：转运桶🤸启、标本活，核酸️⃣取及加入扩增反应等。　　3.扩增和产物分析区核酸扩增产物分析⏹️　　根据用仪器的能，区域🌵适当合并如采用标处理、核提取及扩检测为一的自动化析仪，标制备区、🦀增和产物析区可合。　　(四)主要仪器设备。　实验室应配备与开,检验项目适宜的仪设备，包🗺️：二级生🦘安全柜、速台式离🖲️机、干浴温器、荧,,,定量PCR仪、计时、移液器　　(五)实验室猴-病毒核酸🎞️测流程。⚒️　实验室到标本后👩‍🍳按照标准作程序进试剂准备标本前处、核酸提、核酸扩、结果分🎠及报告。🍺验室应当🤪立可疑标和阳性标复检流程　　1.试剂与材料　　(1)标本：包🧃病变表面🤠子、痘疱或痘疱渗液拭子、痂或痘痂子、咽拭🧱、全血或浆等标本　　(2)核酸提取剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基组DNA提取试剂盒🛂血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒　　(3)核酸检测剂：　　试剂：DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴病毒检测🥒物、探针　　③阳对照：涵🌂检测靶标列的质粒　　(4)灭菌去离水、无水醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用👈手部和物🌎表面常规毒，开启有效期为1周。　　含氯消毒🕕：现用现，含有效1000mg/L的消毒液用于体表面常消毒，含效氯5000mg/L的消毒液于感染性🔁料溢洒时应急处理　　(6)耗材：包带滤芯的👨🏿‍🤝‍👨🏽头、螺旋的离心管非螺旋口👨‍🦼离心管、-锆珠的粉管、PCR反应板和明封膜或PCR反应管和透明盖　　(7)BSL-2个人防护品：包括KN95/N95口罩及以上级别💨口罩、一🦑性隔离衣防护眼罩面屏、一性帽子、套、靴套手套。　2.实验前的标本接。　　(1)核对被检标本编号姓名、性、年龄及测项目；　(2)待检标本的态如有异，需注明⌨️　　(3)待检标本🥱期存放在-70℃，短期存放可🧙‍♂️-20℃，避免反复融。　　3.核酸检测操作步骤注意事项-　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　🏦作方法按DNA提取试剂盒相应明书进行作，具体下：　　提取试剂🦴备：第一开启试剂😉，在使用先在漂洗中加入无🦺乙醇，加🏛️体积参照上标签。有试剂在用前应平👨‍🦼至室温；有离心步🔮应在室温🎰进行。　🎹②处理样：　　A.痘疱液：拭子标本以适当体🤔的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。100μL样本，加80μL缓冲液，总为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补总体积至180μL；　　B.病变皮疹或痂：取1块痂皮按质/体积(1mg/50μL)加入相应体积😪PS的PBS，研磨或匀浆处理取80μL，然后加100μL缓冲液；🏌️‍♀️　C.咽拭子、其它-子：从采液中取200μL标本，干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀后📺200μL；　　D.全血或血：直接取200μL标本。　　🥕加入20μL蛋白酶K溶液，混🖤，溶液会清亮。若👨‍🦽本为病变疹或其它-织时，加🎨蛋白酶K混匀后，在56℃放置，直至组织解，再进下一步骤　　④加200μL裂解缓冲👩🏼‍🤝‍👩🏻，充分混，70℃放置10分钟，或至溶🐘变清亮，短离心以除管盖内水珠。　需注意：🥨入裂解缓液后可能💥出现白色,,状沉淀，70℃放置后会消失如溶液未清亮，说细胞裂解🧹彻底，可导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　⑤加200μL无水乙醇，分混匀，时可能会现絮状沉🩺，简短离以去除管内壁水珠　　⑥将一步骤所溶液和絮沉淀均加吸附柱中(吸附柱放废液收集中)，8000rpm离心1分钟，弃废液🎐　　⑦加500μL漂洗缓冲1(使用前先检查是已加入无乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废。　　⑧-入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查否已加入水乙醇)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　📸⑨将吸附放回废液集管中，大转速13000rpm离心1分钟，尽量除漂洗液👨‍🚒　　⑩将👩🏽‍🤝‍👨🏾附柱转入根干净的️⃣心管中(需自行准备试剂盒中⌛提供)，加入50μL洗脱缓冲🩹或灭菌去子水，室放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤☘️液，做好记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　　(2)核酸检测：实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病🧍‍♂️核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体的准备：🎴孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检标本外，加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；所有本，包括照，应设⏯️孔。　　加样：每反应管中入核酸或照各5uL，盖紧管或封好透膜，置于,光定量PCR检测仪上。　　③增条件设：　　④器检测通👨‍👩‍👧‍👧选择：使荧光定量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道收集设在60℃。具体设置方法🌊照各仪器用说明书　　⑤结分析阈值定：使用光定量PCR检测仪进行结果分时，基线3-10或6-15个循环的荧信号，阈™️设定原则阈值线刚超过正常📎性对照扩曲线最高，也可根仪器噪音况调整阈。　　(3)核酸检测结果判断+　①Real-timePCR反应系统的🤫量控制：应结果应时符合以2个条件，否则试验,果无效，重新开展测。阴性照无扩增🏴为阴性。🆓性对照未现阴性结👓。　　②😢果判定：　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳性处于灰区标本应重🐏检测或经列分析进确诊。需意：当标↘️仅为咽拭😢或血清、浆，且检-结果为阴时，应结临床症状慎重做出性诊断。　(4)表格记录　做好荧光量实时PCR方法检测猴痘病毒酸原始记🤽‍♀️。　　五猴痘病毒🥍基因组测　　1.测序标本选原则。本疫情中的发或早期☢️例、与早病例有流病学关联📘关键病例感染来源明的本土🤸‍♂️例、境外🥐入病例阳🤬标本等。📧上标本在酸荧光定PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。省为单位定开展猴病毒全基组测序的构。建议🕗用扩增子🐰术进行猴病毒全基组测序。🌨️序数据经🧷控合格后👨‍✈️可用于后生物信息🥵析。二代️⃣序平台覆深度应不于10×，三代测序🩲台覆盖深🉑应不低于50×，全基因组测序盖度应不于98%。数据比对🏢析推荐参猴痘基因NC_063383.1。　　各省应建立省输入、土病例猴📗病毒基因数据库，🗳️具备序列比分析能。具备测条件的省要在接收本后48小时内开展序工作，键样本要🈺实验室收标本后1周内提供测结果报告所有测序🎆始数据(一般为fastq格式)、组装序(一般为fasta格式)和标本序列测定果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报中国疾控,-心病毒病🈶进行序列总、分析🆕病毒病所将序列分结果及时馈各省，将全国猴🦚病毒序列总、分析果及时上国家疾控🈴。　　3.分子分型🍔推荐使用线分析工,Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株🎤行分子分。　　附--：　　7-1猴痘病毒检测标本检表　　7-2猴痘病毒标本序测定结果告单【编🧡:孙静波】

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