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  中新👨‍🍳7月27日电据国家控局官方信消息,进一步做猴痘防控作,及时效应对猴疫情,提猴痘防控作的科学-、精准性有效性,🏞️实维护人群众生命👩🏾‍🤝‍👨🏼全和身体康,国家💞控局会同家卫生健委制定并7月26日印发《猴防控方案。其中提📁,2023年6月以来,我国多省份先后告多例猴🎂病例,引新增本土发疫情和匿传播的险较高。坚持“预✳️为主、防结合、精防控、快处置”原,落实“🕖发现、早告、早隔、早治疗措施。 《猴痘防方案》全如下:猴防控方案 猴痘是猴痘病毒(Mpoxvirus,MPXV)感染所致一种人兽,-患病。2022年9月,我国报首例猴痘🙍‍♂️入病例。2023年6月以来,国多个省先后报告例猴痘病🦰,引发新🤦本土续发情和隐匿播的风险高。为指-各地科学准做好猴防控工作切实维护民群众身🔖健康,制本方案。、总体要🚮  坚持预防为主💭防治结合精准防控🔐快速处置🚒原则,落“早发现📣早报告、隔离、早疗”措施开展医疗构、重点🍔群、入境👳‍♂️员和重点所等多渠🐒监测。加🟫疫情分析风险研判有针对性开展重点群健康教和综合干。落实病隔离治疗🐹流行病学🌀查和密切📮触者追踪理等措施坚持发现⚗️起、控制起,及时断疫情传。二、疾特征  (一)病原学特征。 💡猴痘病毒于痘病毒正痘病毒🧆,为基因全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发该病毒。1970年在刚果民主和国一名似天花患的标本中次分离到痘病毒,首例确诊人类猴痘例。  痘病毒分⚪两个进化🥕支:(1)分支I,曾称为中非支或刚果🦯地分支;(2)分支II,曾称为西非分支进一步分IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方流行区猴暴发疫情毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现多亚分支包括A.1、A.2和B.1等亚分支,2022年9月我国报告例输入性痘病例以🐅,各地报👦中国疾控🛰️心病毒病的毒株序🍂均属于IIb分支。  猴痘病耐干燥和温,在痂、土壤和物、床上🅰️品等物体面可生存🤷‍♀️月。该病对热敏感加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂过氧乙酸常用消毒及紫外线有效灭活🍷毒,对过化氢、次酸钠、戊醛、邻苯甲醛等敏🧜。  (二)流行病学特征。 1.传染源。猴痘病的宿主尚明确,目认为非洲齿类动物(非洲松鼠树松鼠、😻比亚袋鼠睡鼠等)可能为其自宿主。传源包括猴🍝病例及感的啮齿类🧝‍♀️物、猴和🖲️等灵长类物。  2.传播途径。猴痘病主要经黏😑和破损皮侵入人体主要通过接接触病的病变皮或黏膜传🏷️,亦可通🌚接触被病污染的物、长时间距离吸入例呼吸道沫传播,触感染动的呼吸道泌物、病渗出物、液及其它液,或被染动物咬、抓伤感传播。 3.易感人群。人群遍易感。种过天花苗对猴痘毒存在一程度的交🤙保护力。📬 4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫主要在中✡️和西非地🤶呈地方性行,主要🐗过接触感-,动物传播所引发的㊗️传人疫情播链较短👩‍❤️‍💋‍👩主要为儿及青壮年散发病例聚集性疫,通过家或旅行方偶尔播散其他国家地区。2022年5月以来全球🧡国暴发的🏦情主要在🔅男性行为群(Menwhohavesexwithmen,简称MSM,指与同性发性行为的性)中经性接触传播大部分病为青壮年🔝性,通过型聚会以后续在社的MSM扩散,并传至全球多国家和地。  (三)临床特征。  1.潜伏期:5-21天,多为6-13天。  2.传染期:病例出症状后至疹结痂自🌫️脱落并形新皮肤前有传染性有调查提一些病例能在出现👙状前1-4天存在传性。  3.早期症状:可出现🏕️热、头痛背痛、肌和淋巴结大等。 🐔4.皮疹和黏膜疹:➗常在热退出现,有病例可出在全身症之前。皮发生常经斑疹、丘、水疱、疱、结痂痂皮脱落’个阶段,同形态皮🦞可同时存,可伴有显痒感和痛。可累口腔咽喉膜、肛门生殖器、🧺膜和角膜。痂皮脱👳‍♂️后可遗留斑或色素⏭️着甚至瘢🐩,瘢痕持时间可长🚶数年。 5.病程及严重程度猴痘病程2—4周,免疫力低患者的病可能较长猴痘为自性疾病,多数病例状会自行失,也有症和死亡生,主要儿童、孕和免疫力🤫下人群。 2022年以来全⛹️‍♀️多国猴痘发疫情中大多数病🛰️临床表现轻,部分🧯例无全身状,皮疹限于生殖🧅、肛门直黏膜部位💐死亡病例要为未得🍘治疗的艾病病毒感者等免疫低下人群2022年以来全球地方性流区病例的🥴死率约为0.1%。三、宣传教🟢与干预 -针对重点群、出入🦹‍♀️人员和一人群等不人群分类展宣传教👩🏻‍🤝‍👨🏿,有针对地加强不人群的自-防范意识👐个人防护,-施,积极🌠合做好防工作。 (一)重点人群。各卫生健康疾控部门♣️合相关社组织,充借鉴艾滋🗣️防治综合预经验和〰️务模式,MSM经常出入的酒、会所、池等重点动场所,展同伴教👰。借助大媒体、MSM社交网站等互联网台,开展痘防控知宣传教育🍩提高重点群防范意,减少高🦃行为,引有可疑接史者自觉好自我健监测,增🟫主动就诊⏱️识。  点人群宣干预要求见附件1《重点人群🔓传干预指》。  (二)出入境人员。通发放宣传料等形式加强出入🍍人员猴痘控知识宣😕教育。提👭出境人员注目的地📞家和地区痘疫情信,不接触痘样症状🏮及啮齿类灵长类等-物。提醒自猴痘疫报告国家🦓地区的人🚈,如在境有可疑接史,入境21天内应做好自我康监测,免与他人生密切接,一旦出发热、皮、淋巴结大等猴痘🚠症状,应动就诊并☠️实报告流病学史。 (三)一般人群。🧕地充分发新媒体以广播、电、报纸等统媒体作,开展猴防控知识传教育,高公众科防范意识四、疫情🥙测和报告 (一)监测病例定。  1.猴痘样症者。不明因急性皮(面部或口腔黏膜、🏄‍♀️肢、生殖或会阴、周等部位),伴发热(>37.3℃)或淋巴结肿大者🍕  2.疑似病例。痘样症状,发病前21天内具备以下流行学史中的🏡何一项:(1)有猴痘病例报告㊙️区旅居史(2)有猴痘确诊病或疑似病接触史;(3)有同性性行为,--性伴有同性行为史(4)有地方性流行可疑动物,,触史。 3.确诊病例。猴痘症状者、🗝️似病例及🥽切接触者经实验室测猴痘病-,核酸阳性👩🏿‍🤝‍👩🏼病毒分离性者。 (二)多渠道监测。 1.医疗机构监测各级各类疗机构要,-展猴痘样💚状监测,其是皮肤(性病)科、肛肠科、📂滋病自愿询检测门等要重点注猴痘样状者。发猴痘样症者,应主询问流行学史,记患者现住及联系方,采集标👐送疾控机进行猴痘酸检测。备猴痘病🏮检测能力猴痘病毒验活动资📍的医疗机也可开展测。  2.重点人群监测。各🚁各类医疗构、疾控构在对MSM等重点人群开展诊或检测咨服务时,🗓️主动询问否有猴痘🚟症状及其疑接触史如发现猴🍬样症状者疑似病例🧗‍♀️应及时采👨‍👩‍👧‍👦标本进行痘病毒核检测。 3.入境人员监测。关收到猴相关异常康申报或👩🏿‍🤝‍👩🏼疫发现有痘样症状🍃入境人员应及时进标本采集核酸检测💑并发放《诊方便卡,要求其快就诊;🦶于核酸检🗯️阳性者,相关信息报辖区疾😬机构,由😎关部门进步调查处🥳。  4.重点场所,水监测。🐭条件的地👩🏾‍🤝‍👩🏽可根据当,疫情形势❓经评估对MSM经常出入的酒吧👩‍❤️‍👩会所、浴等重点活🕑场所开展水监测。 (三)病例报告。🕧 相关医机构根据床表现、行病学和验室检测果,及时患者进行🌫️断。  断的疑似例和确诊👩‍🚀例应于24小时内通中国疾病防控制信📞系统的监报告管理📚块进行网直报。如境外输入例需填写入来源国或地区。具备网络报条件的疗卫生机,需在规时限内将-染病报告信息报告🕍地乡镇卫院、社区生服务中或县级疾机构进行络报告,时传真或送传染病🧙‍♂️告卡至代🌥️单位。负病例网络🚙报的医疗😱生机构,根据实验😋检测结果流调进展时对病例🚣‍♂️息进行复、订正。 各县(市、区)出现首例猴痘🐦诊病例或2例及以上存在流行学关联的🎉诊病例,当在2小时内通过突公共卫生件报告管信息系统告,事件👨🏽‍🤝‍👨🏼别选择“🥀分级”。-、疫情处⤴️  (一)病例管理  各地现猴痘疑病例和确病例应当时转运至疗机构进隔离治疗🪂如临床症明显好转病变部位🚠结痂,可为居家隔治疗,直皮疹结痂🍺然脱落,除居家隔。对病情轻且具备家隔离治条件的确病例,经疗机构与控机构联评估后,直接采取家隔离治🥰。对于实-居家隔离疗的确诊例发放《⌚痘病例居隔离治疗康告知书(见附件2)。确诊病例居家隔👨‍🦰治疗期间单人单间住,避免😯家人有皮或黏膜直接触,做被污染物的消毒,必要不外👷,确须外时穿长衣裤、佩戴🎥用外科口,避免前👀人群聚集所,避免其他人有肤或黏膜接接触;⛈️定医疗机安排专人责上门或话随访,供健康咨-和医疗指🔴。  (二)流行病学调查。 县(市、区)级疾控机构接到辖疑似病例确诊病例🥕告后,及组织开展🏌️行病学调-,查找感来源,掌、追踪和理密切接者,分析播链及传特征,及发现潜在⚖️风险人群👩🏼‍🤝‍👨🏾其范围、征,有针⛹️‍♀️性地开展传教育和合干预。查过程中挥多部门防联控的同作用,可能获取面准确的🥍调信息。 调查内主要包括例基本信🕢、发病就🤹‍♂️情况、临表现、转,-及实验室测;发病21天内与可疑感染源的接触、接触场及接触方;发病后⚗️隔离治疗-的具体活⏱️地点、与🚐有皮肤或膜直接接者,以及病前4天内与其有性触者。 猴痘疫情行病学调要求详见件3《猴痘疫情流行’学调查指》。  (三)密切接触者的判🏴󠁧󠁢󠁷󠁬󠁳󠁿和管理。 1.密切接触者定。直接接病例的病部位及其🚆污染物品🤸‍♂️或感染动🚣‍♀️及其分泌🗓️、渗出物,,污染物;及职业暴或长时间🐅距离吸入例呼吸道™️沫等,经估有感染险的人员  2.密切接触者定。根据行病学调😼及暴露风评估结果疾控机构责及时对💇‍♀️切接触者行判定。 3.密切接触者管。疾控机👬🏻或基层医💈卫生机构--导密切接者做好自健康监测健康监测限为最后切接触之🔜起21天。  密切触者自我康监测期可正常生与工作,避免与他发生性接🏸等密切接🍌,避免捐血液等;🦁持每天做☹️体温测量-症状监测出现猴痘症状应及就诊并主报告可疑🤭触史。辖疾控机构基层医疗🧎生机构应密切接触💳自我健康测第7、14、21天上门或电对其进行-访,提供🔼询指导,⚛️现异常情及时进行置。  🖊️切接触者定管理要🧑🏿‍🤝‍🧑🏽详见附件4《猴痘密接触者判和管理指》。  (四)消毒与人员防护👐  做好例衣物、巾、床单◽餐具等个用品,以🔧可能被病分泌物、出物、体️⃣等污染的境和物体面的消毒从事病例👨‍🍳治护理、行病学调-,、环境清消毒、标🍋采集和实室检测等作人员在作期间做个人防护  消毒人员防护求详见附5《猴痘消毒技术指🎳》和附件6《猴痘个防护指南。六、实室检测 🏷️猴痘病毒酸检测首皮肤或黏🈁病变部位🧐本,可同采集口咽子标本。省首例猴确诊病例😩本应送中👩‍✈️疾控中心毒病所进🔍复核;本疫情中的发或早期诊病例、🧆早期病例👹流行病学联的关键-诊病例、染来源不🍉的本土确病例、境输入确诊例阳性标等,荧光量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因💁‍♀️序。所有序原始数🕵️、组装序及测序样送检单应🥈获得序列48小时内报送中国疾中心病毒所进行汇、分析。上确诊病🟨应至少采一套标本(包括核酸🛰️测阳性者皮肤或黏-病变标本口咽拭子本以及发🌸急性期和📔复期双份清)送中国疾控中心毒病所。 实验室📖测具体要详见附件7《猴痘病实验室检技术指南。七、院感染控制 医疗机应当严格🗜️好院内感控制。疑📎病例和确病例应安🕎在隔离病🔻,疑似病♂️单间隔离♠️医务人员行标准预🏜️,采取经👩🏿‍🤝‍👨🏾触传播和飞沫传播病的隔离预防措施佩戴一次🦞乳胶手套😺KN95/N95及以上级别的罩、防护屏或护目、一次性离衣等,时做好手生。严格🎷照《医疗构消毒技规范》对例的体液血液、排📵物、分泌🐩等进行规处理,做诊疗环境(空气、物表面、地等)、医疗器械、病使用物品的清洁消。根据《疗废物管↕️条例》《疗卫生机医疗废物理办法》好医疗废的处置和理。八、作要求 (一)加强组织协调各地卫生康、疾控门加强与关等有关门的密切作和信息享,及时现与处置📩痘疫情,📕实猴痘病发现、疫报告、诊隔离、密接触者追👩🏻‍🤝‍👨🏾管理等工🍮,防止疫扩散和蔓🔣。各地在⤴️痘疫情防过程中应意保护病、密切接者和重点群等个人私。  (二)加强宣传引导。🙋地要及时🚄布辖区猴疫情相关息,做好🌸策解读和众健康提。通过多方式和渠开展猴痘控知识宣,加强重人群宣传育的针对和实效性及时回应会关切,导公众科-认识猴痘  (三)加强人员👨‍👩‍👧‍👧训。各地加强对各🌾疾控机构医疗机构业人员的🧰训。对医人员重点展猴痘病的识别与断、病例现与报告👃病例管理相关知识训,强化治意识。疾控人员🎵点开展流👳病学调查密切接触😾的判定和👨‍👩‍👦理、实验检测、重人群宣传,预等相关🐒识培训,↔️高猴痘疫防控和应处置能力  附件💬  1.重点人群宣干预指南 2.猴痘病例居家离治疗健告知书 3.猴痘疫情流行病调查指南 4.猴痘密切接触判定和管指南  5.猴痘消毒技术指南🔼 6.猴痘个人防护南  7.猴痘病毒🦸验室检测术指南 附件1  重点人群🤦‍♀️传干预指  2022年5月以来,全球地方性流区发生的🗻痘疫情以男性行为群(MSM)为主。为充分利用国艾滋病治综合干🎓服务体系开展MSM等重点人🦈宣传干预防范猴痘👳‍♂️情传播扩,形成常🍡化艾滋病猴痘综合控一体化对机制,定本指南一、实施🦟略  在有艾滋病治综合干服务体系础上,综运用行为📮干预方法手段,通宣传教育促进安全行为、动检测、外🛒服务、同教育和互网干预等从个体、体和社会😺多个层面🎮目标人群供猴痘综干预服务二、组织施  各医疗机构疾控机构加强重点🧙‍♀️室和艾滋自愿咨询测门诊工人员猴痘识培训,👱‍♂️重点人群供猴痘防🖍️知识宣传😭检测咨询📳动员、治和关怀等务。各级控机构应积极推动👨‍❤️‍👨地有能力具有良好滋病防治🧗‍♀️验的MSM志愿者或♏会组织共参与猴痘🐲治宣传工⚪,在工作程中注意护重点人个人隐私👬🏾三、形势析  各要加强对点人群猴疫情、防现状、影🎵因素及出境情况的👨‍🦯查,及时析研判猴🌙疫情形势⚡为制定本高危行为预工作计提供依据具体内容-括:1.重点人群基、活动形-,和特点、动场所、入境的时及地区等2.猴痘知识、态度高危行为3.猴痘疫情水平及影响因素4.猴痘防治政策及🎻业机构已🧪展的工作5.包括志愿者在内☦️有关组织个人已开的干预活🥾;6.影响猴痘防治,作的困难问题。四宣传干预 (一)宣传教育。🙊级疾控机或健康教专业机构♂️供技术支👮‍♀️,社会组🥓参与,共研究制定☦️合当地特🖐️的猴痘预🤵宣传材料👩‍💼加强警示传教育。过大众媒、MSM网站和以移终端为载👩‍💼的交友软💣等平台,🎿传国际、内及本地,-痘疫情信👨‍🔬和防控知,提高重人群猴痘范意识。🚇 (二)同伴教育。🕉️级疾控机🧎‍♂️要加强同🎁教育员挑、招募和训,组织支持同伴传活动,强人群猴😶风险防范’识,推动动检测。期组织同📳教育员工例会,了猴痘干预作存在的🐥难和问题有针对性🚙给予帮助🔔支持。 (三)外展服务。各🔯疾控机构预工作人定期到重🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿人群活动所开展猴宣传、咨、发放宣材料等外🚓服务活动🧦提高重点🧶群猴痘防意识和知水平,推重点人群☑️强自我健管理,主寻求检测询服务。⛪ (四)检测咨询。🔅级疾控机通过互联、同伴教、外展活等多种形⌨️动员有猴样症状或疑接触史📐重点人群行猴痘检。各级各医疗机构肤(性病)科、肛肠、艾滋病愿咨询检-门诊发现痘样症状,应主动问其流行学史及性🏕️触史,记患者现住👬🏼及联系方🐃,采集标💥送疾控机🌴进行猴痘酸检测,备猴痘检能力及猴🧛‍♂️病毒实验动资质的疗机构也开展检测-,对于已建🚎互联网+HIV检测平台的地区👮可增加猴检测内容-实现互联在线检测约和结果询。五、点场所干  重点动场所包实体和虚两类场所实体场所括酒吧、🌸所、浴池🟦经营性场🍒,虚拟场包括移动联网和社媒体。 (一)实体场所干预  各级控机构负组织干预作人员在🙍地MSM经常出入的吧、会所浴池等活场所,开🩰猴痘预防🤾‍♂️预宣传,🚵要包括:🐛 1.在MSM经常出入的酒吧会所、浴🖌️等实体场,张贴醒的健康教🏍️宣传图片设置健康育资料公☪️栏;  2.强化个人健康责任🛷识,开展痘健康咨,推动开自我风险估;  3.提供转介服务信息告知明确诊疗流程🧧及相关检、医疗机名称、联人等信息  各地🤼‍♀️加强对猴确诊病例病前21天内活动过场所以及🧑🏿‍🤝‍🧑🏾水监测阳场所的干😴宣传,重✂️目标人群个人隐私护,加强社会组织伴教育员痘防治知👭🏿培训,建规范的行干预流程提高自我护技能。 (二)虚拟场所干-。  各🗝️疾控机构责组织指当地有序🗣️展猴痘线宣传,在🍻关网站、交媒体平🦶及时发布更新猴痘传教育内🧛‍♂️,形成面重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣干预服务系。  级疾控机📭支持社会织或同伴育员利用站、信箱社交媒体台,组织🦶展在线咨和交流。时解答网👮‍♂️提出的各👩‍⚕️猴痘相关-题。针对同时期猴传播特点定期或不🤴期组织专、专业人、同伴教员利用互网和社交📿体平台进🕢在线宣教各级疾控构要定期导更新相-,-专业信息确保宣传🈚容科学、🚀效。  -,-件2  附件3  猴痘疫情流🧟‍♀️病学调查南  为导各地疾机构规范展猴痘疑病例、确😷病例和聚🐈性疫情的🎤行病学调,及时掌病例暴露、接触史流行病学关信息,实密切接者的追踪定,防止情传播扩,制定本南。一、,查目的 (一)查找感染来源😿掌握、追👨🏾‍🤝‍👨🏽和管理密🏙️接触者。👨‍🎓 (二)分析传播链传播特征  (三)及时发现在的风险群及其特、范围,针对性地展宣传教🉐和综合干。二、调🕺对象  似病例、❎诊病例和🐕‍🦺集性疫情三、调查🐵法和内容👧 通过查资料,询🐙病例、诊-,医生、家和知情人👨‍👩‍👦进行流行学调查。病例的病允许,调时应先调病例本人👅再对其诊🗨️医生、家和知情者行调查。 开展个调查时,🍦认真、详👮‍♀️了解和记病例基本息、发病🎹诊情况、床表现、归及实验检测信息发病前21天内与可🕧感染来源接触史、触场所及触方式;病后至隔治疗前的体活动地📌、与其有🔲肤或黏膜接接触者以及发病🦮4天内与其有性接触。  (一)基本情况。如姓名🔛性别、年🦦、住址、籍、联系🚟式等。 (二)发病就诊情况临床表现实验室检🧧、发病就经过和病变化与转。  (三)感染来源调查。对例发病前21天内的暴露史开展😪查,包括内外猴痘例报告地👨🏼‍🤝‍👨🏻旅行史或住史,对疑的感染⛳源要详细问接触时、方式、次、地点-接触时采的防护措🅾️等,特别性接触史🚩调查时,发现调查中未列入但具备重🚆流行病学义的内容🔶应进行详询问和记👩🏾‍🤝‍👨🏿。  (四)密切接触者调查及定。对病🏔️传染期的动情况和群接触情进行追踪排查后,定其密切触者。密接触者判和管理按《猴痘密接触者判和管理指》(附件4)执行。  详见附3-1《猴痘病例个🐅调查表》四、组织⭐实施  ☔照“属地管理”原,由病例住址所在县(市、区)级疾控部门组织辖,疾控机构展猴痘病🗻的流行病调查,就医疗机构供诊疗信。调查单应根据调计划和调目的,确🏫调查人员🆚成和职责工,及时🈷️展病例流病学个案查。调查😦程中发挥部门联防控的协同用,尽可获取全面确的流调息。调查🧈间,调查😊员要做好人防护。、信息的报与分析 疾控机😜完成调查,应做好例分析总👨‍👩‍👧‍👧,及时将行病学个⚜️调查表、查报告等🐹料逐级报🍞上级疾控构,并做🐝调查资料保管和存。病例流信息要按关规定,🧖‍♀️格做好信安全和个隐私信息护。  件:3-1.猴痘病例个案调查  附件4  猴痘💗切接触者定和管理南  为🏢导各地做🚈猴痘密切触者判定管理,有控制猴痘情的传播制定本指。一、密㊗️接触者判🦑标准  👾切接触者指直接接病例的病部位及其😓污染物品或感染动及其分泌、渗出物污染物的🧏‍♂️员;以及业暴露或时间近距吸入病例🙅‍♂️吸道飞沫,经评估感染风险人员。具情形包括  1.与疑似病例确诊病例♿病后有皮或黏膜直🎿接触的人,接触方包括性接、抚摸、抱和亲吻🎌;  2.与有皮疹状的疑似例或确诊例共用衣、被褥、🌟具等物品👫🏻人员; 🙁3.医疗诊疗、采样实验室检等操作过中可能暴🏌️于病毒,评估有感🥄风险的医卫生工作员;  4.与疑似病例或确诊👨🏽‍🤝‍👨🏼例发病前4天内有性触,并经行病学调专业人员估有感染♐险的人员亦可判定🔳密切接触;  5.在狭小密空间与疑病例或确病例长时近距离接(如长时间共处同一闭空间),经流行病调查专业☝️员评估有染风险的员,亦可定为密切👲触者; 🌆6.接触感染猴痘病📊的动物及分泌物、📹出物等污物,而未取有效个防护的人;  7.其他可能🍫在病毒暴风险的人。二、密接触者管  1.管理期限与🐳式。病例现地疾控💜构或密切触者所在🦺疾控机构于追踪到切接触者天及时开🕊️猴痘病毒酸检测,👫🏿知并指导切接触者👋好自我健✝️监测,健监测期限↘️自最后密🦸‍♀️接触之日起21天。自我健康测期间可常生活与💁‍♀️作,需避与他人发性接触等切接触,免捐献血等。  2.知情告知。实施健监测时,控机构或🤨层医疗卫🤥机构应口告知健康🆖测的缘由期限、注事项和疾相关知识以及负责🦉访疾控机或基层医🧁卫生机构系人和联-方式,并⚒️放《猴痘切接触者🧵康告知书🦜。  3.定期随访☁️疾控机构基层医疗生机构应第7、14、21天电话或上门动询问密接触者自🦘健康监测况,提供询指导建。发现异情况,及调查处置🚸  4.自我健康监。坚持每做好体温量和症状测,主要👩🏿‍🤝‍👨🏽状包括发(>37.3℃)、皮疹、浅表巴结肿大。密切接🛫者一旦出相关症状及时前往疗机构就或与随访系人取得-,-系,接受痘病毒核检测。 🧄附件:4-1.猴痘密切接触者康告知书 附件5  猴痘消技术指南🏠 为进一🏋️规范猴痘情相关的毒工作,实科学消️、精准消🎯,减少猴病毒对公健康造成🦽危害,制📧本指南。、疫源地毒  (一)适用范围。  适🥺于出现猴病例后,其可能污🕳️的场所和🟪品进行的🤺时消毒和末消毒。👩‍🎨 (二)消毒原则。 1.范围和对象确。  根流行病学查结果,定现场消的范围和象。对病在住院、运期间可污染的环和物品,行随时消👨‍🦯。对病例🧏‍♀️住或活动的场所,居住场所工作场所👩‍💻学习场所诊疗场所转运工具🏒及其他可受到污染场所,在离开后(如住院、转、出院、亡)进行终末消毒。 2.方法选择。 (1)诊疗用品消毒尽量选择次性诊疗,品,非一性诊疗用🏪应首选压蒸汽灭菌不耐热物可选择化-消毒剂或🍹温灭菌设进行消毒灭菌。 🚫(2)手消毒。建议用手消毒😢揉搓双手⛑️行消毒,可选择75%乙醇、过氧化氢等🛠️毒剂。 📼(3)环境和物体表消毒。可择含氯消剂、二氧氯、过氧酸、过氧氢等消毒🛂擦拭、喷或浸泡消。  (4)衣物、床单等纺织消毒。可择热力消👥、含氯消剂或季铵类消毒剂泡等消毒式。  (三)常见污染对象的毒方法。 1.手消毒。  选用速干消毒剂,直接选用75%乙醇进行擦拭消📎;醇类过者,可选🦒季铵盐类有效的非➡️类手消毒。有肉眼见污染物🧃,应先使💝洗手液(或肥皂)在流动水下按六步洗手清洗双手然后按上方法消毒  2.皮肤、黏膜  皮肤污染物污👩🏿‍🤝‍👩🏻时,应立清除污染,再用一性吸水材🚛沾取0.5%碘伏或过氧化氢消📸剂擦拭消3分钟以上,使用清清洗干净粘膜应用量生理盐冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒  3.床单、毛巾衣服等纺品。  🍟例使用的-单、毛巾🐡衣服等纺🚵‍♀️品,无肉可见污染🏢时,若需复使用,🙅‍♂️用流通蒸或煮沸消📻30分钟;或用有效500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒浸泡30分钟后,按🏒常规清洗或用其他🧻效的消毒📢法。不耐的衣物可用环氧乙📁或干热方进行消毒👨‍🦲理。  分泌物、🗝️出液、排物、血液体液等污物时,建按医疗废集中处理🐺  4.餐(饮)具。  病例▫️使用的碗,,,盘、筷、⏺️等餐(饮)具清除食👨‍🚀残渣后,沸消毒30分钟,或🛑用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后,再用清水🙇‍♂️净。  5.污染物。  对病,分泌物、👩🏽‍🤝‍👩🏼出液、排物、血液体液等少污染物可一次性吸材料(如纱布、抹布)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消剂(或能达到高水平毒的消毒巾/干巾)小心移除  对病,,,分泌物、出液、排㊙️物、血液🥤体液等大污染物应用含吸水分的消毒或漂白粉全覆盖,用一次性🈸水材料完覆盖后用量的有效,,,5000-10000mg/L的含氯消毒浇在吸水料上,作⚔️30分钟以上(或能达到高水平🌫️毒的消毒巾),小心清除干净✝️清除过程避免接触染物,清的污染物医疗废物中处置。 病例的🔦泌物等应专门容器集,用有氯20000mg/L的含氯消剂,按物药比例1:2浸泡消毒2小时。  清除污物后,应污染的环和物体表进行消毒盛放污染的容器可️⃣有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟,然清洗干净  6.地面、墙壁⏺️  有肉👩🏻‍🤝‍👨🏼可见污染时,应先全清除污物再消毒🦼无肉眼可⏺️污染物时🌦️可用有效1000mg/L的含氯消毒剂👨🏾‍🤝‍👨🏻500mg/L的二氧化氯消毒擦拭或喷消毒;不腐蚀的地和墙壁,👨‍🦳可用2000mg/L的季铵盐消毒剂喷🦲或擦拭;毒作用时不少于30分钟。 👨🏿‍🤝‍👨🏽7.物体表面。  🐆疗设施设表面以及🤮围栏、床柜、家具门把手、⬛生洁具和居用品等肉眼可见🌸染物时,🆔先完全清污染物再毒。无肉可见污染时,用有氯1000mg/L的含氯消毒或500mg/L的二氧化氯消👨🏾‍🤝‍👨🏽剂,不耐蚀的物体面也可用2000mg/L的季铵盐类消毒进行喷洒擦拭或浸🔥消毒,作30分钟后清水擦拭净。  8.污水和粪便。  进入市政💝水管网前🦹‍♀️进行消毒理,消毒污水应当合《医疗构水污染⛴️排放标准(GB18466-2005)。  9.病例生活垃。  病🍊生活垃圾医疗废物理。  10.医疗废物。  🤍疗废物的🥤置应遵循,,,医疗废物理条例》《医疗卫机构医疗,,物管理办》的要求规范使用层黄色医👫🏻废物收集封装后,常规流程行处置。 11.室内空气。🆒 如经科🌖评估,需室内空气行消毒,在无人情⏹️下,可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢二氧化氯(浓度按产说明书)等消毒剂,20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒🎺也可采用验证安全效的其他🔕毒方法。🔌、注意事  现场毒应确保用消毒产合法有效所选消毒法科学可🧵。现场消’时,根据场情况和关标准要,选择合有效的个防护装备在做好个,防护的前下,严格照工作方实施消毒  消毒施单位应备现场消能力,操人员应经💅消毒专业训,掌握🥕毒和个人护基本知-,熟悉消器械的使👩🏾‍🤝‍👨🏼和消毒剂配制等。 每次开🦏消毒工作均应做好毒记录,🕰️括消毒对、消毒面(体积)、消毒剂浓🥑(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。时,相关门和单位🦸做好消毒💓作的监督理和评价🤚  附件6  猴痘人防护指👨‍👩‍👧‍👧  为加公众、疫🐷处置相关🎵作人员和务人员的🏋️‍♀️人防护,免猴痘病🦒暴露感染🙋‍♀️制定本指。一、居🍕隔离治疗病例等相人员  (一)适用范围。  用于居家🍿离治疗的例(疑似病例和确诊例)、照护人员或共👨🏿‍🤝‍👨🏻居住者的人防护。🧡 (二)居家隔离区🏴‍☠️要求。 1.应选择有自然通、独立卫间的房间为隔离区。  2.应配备专的餐具,💪单、毛巾床上用品消毒剂和👩‍👩‍👦‍👦罩等个人👨‍💼护用品,🍼视和平板脑等电子备。  3.卫生间宜配备专用洗衣机,漏应有水📕。  (三)病例管理要求。 1.应能够进行自我护。  2.应每天做好体温测和症状监,避免与人共用个◀️物品。 3.避免与他人发生接触,避与免疫力下人员、🚍童、老人孕妇及其人员的直🤙接触,避与宠物等🧖物接触,免捐献血等。  4.外出就诊时,应佩医用外科🥈罩,着长长裤,确遮住所有🧙‍♂️伤皮肤,免与他人切接触,免乘坐公交通工具  (四)照护人员求。  1.应每天做好体温测和症状监🍉。  2.应尽量避进入隔离域。如需🎓入隔离区🎟️,应佩戴用外科口📼和一次性套,与病保持至少1米的距离🦓在离开隔区域之后💓应加强手🦢生,并对下的口罩💎手套进行㊙️毒处理后弃。  3.在拿放和清洗居家离治疗病🏯的床单、服和处理圾的过程🎮,应避免👯‍♀️动。用湿布拖地,😜免干扫。湿抹布清家居用品面,地毯用蒸汽清,避免使🦻吸尘器。🧊 4.应将居家隔离疗病例的🧑🏾‍🤝‍🧑🏽具、床单毛巾和衣单独洗涤消毒,可🥀择热力消、含氯消🦹‍♂️剂或季铵👩‍🦼类消毒剂泡等消毒式。  (五)应急处置。  1.照护人员或共同居者出现任☪️症状或不表现,应及时前往定医疗机就诊并主👭🏻报告可疑触史。 2.对其接触的物品🈸活动的区等结合风🎤评估结果行消毒处。二、疫处置相关🈳作人员 (一)适用范围。 👨🏾‍🤝‍👨🏻适用于猴疫情期间行病学调😮、环境清📘消毒人员个人防护  (二)流行病学查人员防要求。 -1.个人防护装备。👤次性乳胶👱套、医用科口罩、次性隔离等。  2.个人防护要求。规🧑🏿‍🤝‍🧑🏽佩戴口罩加强手卫🚈,与被调人员保持少1米的距离。  3.废物管理。调查结后,废弃个人防护备暂存、,,,理和处置按照《医废物管理🍵例》执行☯️  4.应急处置。在调查过👢中出现口🏳️脱落、直接触了病皮肤或分物等情况要结合被查人员的床诊断结、空间的闭性、接的时间和离等进行👨‍👨‍👧险评估,合风险评结果,采相应的处措施。 🤯(三)环境清洁消毒,,员防护要。  1.个人防护备。一次🍂乳胶手套医用外科罩、一次隔离衣、水靴套等  2.个人防护要🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿。规范佩口罩,加手卫生,量减少与🦓消毒物品直接接触  3.废物管理。洁消毒结后,废弃😚个人防护备暂存、理和处置按照《医废物管理例》执行  4.应急处置。在清洁消过程中出口罩脱落🚴皮肤损伤🏌️直接接触泄物、血😍等情况,☘️结合被清消毒物品类型、接的时间和间的密闭等进行风评估,结风险评估♥️果,采取应的处置施。三、🍎务人员的人防护 (一)适用范围。 适用于猴疫情期间务人员及工作环境防护。 🕍(二)基本要求。 1.个人防护装备要。医务人执行标准防,采取接触传播经飞沫传疾病的隔与预防措,佩戴一性乳胶手、KN95/N95及以上级别☃️口罩、防面屏或护镜、一次隔离衣等🍕  2.环境防护要。医院环🌍的清洁消应符合附5的要求。应避免干尘、清扫吸尘等活㊙️。首选湿清洁方法  3.废物管理。人防护装--、病例敷等暂存、理和处置🤝按照《医⏯️废物管理例》执行  附件7  猴痘毒实验室测技术指😟  为指各级疾控🏷️门和其他☁️关机构规开展猴痘毒实验室👩‍🦯测工作,速、准确别猴痘确病例,制本指南。💲指南主要绍标本采🏜️以及猴痘🔃毒核酸荧定量PCR检测方法生物安全🙏求等内容一、检测😭象  (一)猴痘确诊病例和疑’病例; (二)密切接触者; (三)感染或疑似🏄染猴痘病的动物; (四)环境或其它物材料。🎫、技术人🤽‍♂️基本要求 (一)采样人员。事猴痘病核酸检测🔌本采集的术人员应经过生物👩全培训,🎞️训合格后可从事采工作。采人员应熟😁采集标本🏠类和采集法,熟练🚤握标本采🧑🏿‍🤝‍🧑🏼操作流程-注意事项🍰做好标本🚆息记录,保标本质符合要求标本及相信息可追。  1.采样人员🧞‍♂️人防护装🦇要求:KN95/N95及以上级别的口罩防护面屏😹护目镜、次性隔离、一次性❌胶手套(尽可能戴两🐘)、靴套;如果接触病例血液体液、分物或排泄🙀,应及时🍃换手套。,,,水采样人可根据实🕜工作需要适当降低护级别。 2.住院病例的标由所在医🌘医护人员🙆集,根据🚶验室检测👨🏾‍🤝‍👨🏻作的需要🏸可结合病多次采样  3.密切接触者🧖‍♂️本由当地控机构或疗机构专人员采集  4.感染或疑似染猴痘病的动物由🍯地疾控机协调动物控部门专采样人员责采集。 5.环境或其它生💅材料标本相关专业💺样人员负采集。 (二)检测人员。实室检测技人员应具相关专业🎽专以上学或具有中及以上专技术资格👩🏼‍🤝‍👨🏾并有2年以上实验室作经历,受过核酸🌡️测相关培,培训合👨‍👧‍👧后方可从🏃‍♂️检测工作实验室配的工作人数量应与开展检测目及标本相适宜,保能够及、熟练、确地开展🕺验室检测报告结果三、标本集、保存运输  (一)标本采集种类。 1.首选标本是皮(黏膜)病变部位标-,包括病表面拭子痘疱液或🔈疱渗出物🙎‍♂️子、痘痂痘痂拭子。  2.呼吸道标,如口咽⬇️子,可用病例急性-,检测,也密切接触👭🏾检测最常标本。 3.发病急性期可采🥗EDTA抗凝血标本🔸行核酸检🕊️。  4.采集发病7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用抗体检测  5.直肠拭子、液、精液🌼唾液等其标本仅用研究,根工作需要集。  6.污水或其它环境生🧑🏿‍🤝‍🧑🏽材料标本🚳据实际工需要进行集。  (二)标本采集要求。 采集皮(黏膜)病变部位标🚹时应使用👯‍♀️菌聚酯纤💋、尼龙或似材质拭,避免使🥂棉拭子。⛳集疑似病的标本前⬅️避免使用75%乙醇等消毒剂清病变部位🦼每种类型皮肤(黏膜)病变应尽可能采集个以上拭👨‍👨‍👦‍👦,每个病应同时采-身体不同🍬位或外观🔤同的2-3种病变标⛳。采集皮(黏膜)病变部位标时应适当⏭️力。皮肤(黏膜)病变部位、痘或分泌物🈺不同拭子本应放置不同的采管中。进病毒分离🏈应采集干子标本(无采样液)或以非灭活🧗病毒采样↗️保存。根实验室活资质确定用非灭活,,,或灭活型样液采集本。  (三)标本采集方法。❗ 1.斑疹、丘疹、疱或脓疱皮肤(黏膜)病变部位标本:一🔄紧握采样子尾部,与拭子头️⃣保持一寸上距离。🏘️样时适当力下压拭👨‍🦽,在皮损面来回擦至少2-3次,然后拭子另一再重复擦2-3次。如果在擦过程中痘破裂,要保采集到疱液。采后将拭子置于无菌🛁样管中(可含病毒采液或不含体),折断拭子头,除拭子尾,盖上管,以消毒🧠巾擦拭消采样管,封口膜密管盖后将🦻样管保存送检。 2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本:采样前确保实验🐝可检测此💜标本。使🕝无菌镊子-其他钝头🏃‍♂️械夹取全痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮🥻放置于干🏃‍♀️、无菌的样管中,🧂样完成后创可贴覆患处。 3.口咽拭子标本:采集人员🐁部微仰,🈷️张大,露🦹两侧扁桃🤞,将拭子过舌根,☎️被采集者侧扁桃体微用力来擦拭至少3次,然后🚔在咽后壁下擦拭至3次,将拭子头浸入2-3mL病毒保存的管中或🏿于不含液🕌(干拭子)的无菌管🦓,尾部弃,旋紧管🍇。  4.血液标本尽量采集💇性期(发病7天内)的血液标本建议使用EDTA抗凝剂的真❌采血管采5mL全血,可利用血进行检🤯,或室温置30分钟后,1500-2000rpm离心10分钟,收集血于无菌管🖍️进行检测🦁  5.血清标本:真空负压🤞血管采集液标本5mL,室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集血清↪️无菌螺口料管中。一份血清尽早(最好在发病后7天内)釆集,第二份清应在发’后第3-4周采集,👓集血液标5mL后室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集,,清于无菌口塑料管,用于猴抗体检测  6.其他标本:据设计需规范采集  (四)标本保存  标本在收集后1小时内冷👸(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下),并尽快进行测。可在1周内检测标本可置4℃环境中保存;1周内无法检的标本,期可置于-20℃环境中保存,期应置于-70℃或以下环境中存。全血离血浆前,,藏(2-8℃),分离出的血浆☄️于-20℃或以下环中保存。🥓设立专库专柜单独存标本,免反复冻🌝标本。 ❣️猴痘病毒💦其相关标应由专人理,准确录病毒及本的来源编号、数等信息,体要求可⏏️考《病原📐生物菌(毒)种保藏数据描述通🕢》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措确保病毒标本安全🟥严防发生🦥用、恶意用、被盗被抢、丢🚣‍♂️、泄露等🧉件。  (五)标本送检。  本采集后尽快在低条件下(冰袋或干冰)送往实验,如需长🤏运输标本应采用干冷冻运输式进行保。  1.送检标本🧂病例标本🎫由省级及下疾控机😼进行初步测,各省例猴痘阳标本应送国疾控中🌡️病毒病所核。每个🦼性病例至采集一套本(皮肤或黏膜病变位标本、咽拭子标及急性期恢复期双血清标本)送中国疾中心病毒所检测。🍇省级疾控💁构根据实情况制定-内样本送❔、复核流。  2.病原体及本运输: (1)国内运输。痘病毒或他潜在感性生物材的运输包分类属于A类,对应🈵联合国编为UN2814,包装符合国际航组织文Doc9284《危险品航空安🧎‍♀️运输技术则》的PI602分类包装要求通过其他通工具运的可参照上标准包。猴痘病或其他潜感染性材运输应按《可感染,类的高致性病原微物菌(毒)种或样本输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运证书。污水等境标本暂普通生物♻️本运输标🤽执行。 (2)国际运输。猴毒株或样在国际间输的,应范包装,照《出入🦛特殊物品生检疫管⬜规定》办相关手续并满足相国家和国相关要求四、猴痘🎥毒核酸检🔃要求及流  (一)实验室资要求。 开展猴痘🥧毒核酸检的实验室应当符合病原微生实验室生安全管理🏆例》(国务院令第424号)或《医疗机构🔤床基因扩检验实验管理办法(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定,具备区的市级-生健康部备案的生⭕安全二级(BSL-2)实验室及以上实验条件,并🧱案猴痘病🍢相关实验👩🏽‍🤝‍👨🏻动。独立🕞置的医学验实验室🦰应符合《☝️学检验实室基本标(试行)》《医学检实验室管⚫规范(试行)》等要求。  开猴痘病毒离、培养👨‍🦯中和等涉👩🏻‍🤝‍👨🏾病毒扩增🐎使用等实操作的实室应具备👼家卫生健委批准的-,物安全三(BSL-3)实验室及以上实🐸室条件,🍾获得猴痘毒实验活🕺批准。分的猴痘病应送国家原微生物藏中心/国家病原微🌝物资源库👓毒分库保。  (二)实验室生物安全要📌。  根💏2006年公布实施《人间传的病原微物名录》(简称《名》),猴痘病毒生物🤸‍♀️害分类为一类,是🧉种高致病病毒。按《名录》🐶求,猴痘毒的分离培养等涉病毒扩增使用的实🌳操作需在BSL-3及以上实验的生物安柜内进行非灭活采👩🏿‍🤝‍👨🏽液采集的痘病例样的灭活在BSL-3实验室进行🍉样本灭活猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验或PCR检测的专门域或房间行。如《录》更新开展猴痘毒操作的验室生物全要求应最新《名👩🏽‍🤝‍👨🏾》执行。水样本的活参照普生物样本  (三)实验室分要求。 原则上开猴痘病毒酸检测的验室应当置以下区:试剂储,和准备区标本制备、扩增和物分析区三个区域物理空间💜应完全相独立,空应定向流。各区功分别是: 1.试剂储存和准区:贮存🧍剂的制备试剂的分和扩增反混合液的备,以及心管、吸等消耗品贮存和准,,。  2.标本制备:转运桶启、标本活,核酸取及加入🛹扩增反应👨‍🔧等。  3.扩增和产物分析区核酸扩增产物分析  根据用仪器的️⃣能,区域适当合并⛎如采用标处理、核提取及扩检测为一⚕️的自动化析仪,标制备区、-增和产物析区可合。  (四)主要仪器设备。 实验室应-,-配备与开检验项目🥋适宜的仪👩🏿‍🤝‍👨🏼设备,包:二级生安全柜、速台式离机、干浴温器、荧定量PCR仪、计时、移液器  (五)实验室猴病毒核酸测流程。 实验室到标本后按照标准🛴作程序进试剂准备标本前处、核酸提、核酸扩🙅‍♀️、结果分及报告。验室应当️⃣立可疑标🐪和阳性标🐚复检流程🧳  1.试剂与材料  (1)标本:包病变表面子、痘疱或痘疱渗⬆️液拭子、痂或痘痂子、咽拭🦟、全血或📷浆等标本  (2)核酸提取🏙️剂盒(基因组DNA提取试剂盒):组织基组DNA提取试剂盒血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒  (3)核酸检测剂:  🍡试剂:DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。  ②猴👩‍🦱病毒检测物、探针  ③阳’对照:涵📔检测靶标列的质粒🧘‍♀️  (4)灭菌去离水、无水醇  (5)消毒液  ①75%乙醇:用手部和物表面常规毒,开启有效期为1周。  含氯消毒🧐:现用现🏓,含有效1000mg/L的消毒液用于体表面常消毒,含👭🏻效氯5000mg/L的消毒液️⃣于感染性🚼料溢洒时🏄应急处理👨‍🏫  (6)耗材:包🏉带滤芯的头、螺旋的离心管非螺旋口离心管、锆珠的粉管、PCR反应板和🍘明封膜或PCR反应管和透明盖  (7)BSL-2个人防护🏾品:包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一性隔离衣防护眼罩🤸‍♂️面屏、一性帽子、套、靴套手套。 2.实验前的标本接’。  (1)核对被检标本编号🐩姓名、性、年龄及测项目; (2)待检标本的💛态如有异’,需注明  (3)待检标本期存放在-70℃,短期存放可🍥-20℃,避免反复融。  3.核酸检测操作步骤注意事项  (1)病毒核酸(DNA)的制备  作方法按DNA提取试剂盒相应明书进行作,具体下:  提取试剂备:第一开启试剂🐇,在使用先在漂洗,中加入无乙醇,加体积参照🟤上标签。有试剂在用前应平至室温;有离心步应在室温进行。 ②处理样:  A.痘疱液:🤴拭子标本🥐以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。100μL样本,加❗80μL缓冲液,总为180μL;标本体积不足100μL时用缓冲液补总体积至180μL;  B.病变皮疹或痂:取1块痂皮按质/体积(1mg/50μL)加入相应体积PS的PBS,研磨或匀浆处理-,取80μL,然后加100μL缓冲液; C.咽拭子、其它子:从采液中取200μL标本,干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬,混匀后🕸️200μL;  D.全血或血:直接取200μL标本。  🐧加入20μL蛋白酶K溶液,混,溶液会®️清亮。若♻️本为病变♌疹或其它织时,加蛋白酶K混匀后,在56℃放置,直至组织🔻解,再进下一步骤  ④加200μL裂解缓冲,充分混,70℃放置10分钟,或至溶🌞变清亮,👨‍🎤短离心以除管盖内’水珠。 需注意:🚀入裂解缓😿液后可能出现白色状沉淀,💆‍♂️70℃放置后会消失-,如溶液未清亮,说细胞裂解彻底,可导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。  ⑤加200μL无水乙醇,分混匀,时可能会现絮状沉,简短离🌔以去除管内壁水珠  ⑥将🚝一步骤所溶液和絮沉淀均加吸附柱中(吸附柱放废液收集😵中),8000rpm离心1分钟,弃废液  ⑦加500μL漂洗缓冲🧑🏾‍🤝‍🧑🏽1(使用前先检查是已加入无💁‍♂️乙醇),8000rpm离心1分钟,弃废。  ⑧入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查否已加入水乙醇),最大转速13000rpm离心3min,弃废液。 🐸⑨将吸附👩‍👧放回废液🌷集管中,大转速13000rpm离心1分钟,尽量除漂洗液  ⑩将❇️附柱转入根干净的心管中(需自行准备📴试剂盒中🩹提供),加入50μL洗脱缓冲或灭菌去😺子水,室放置2-5分钟,8000rpm离心1分钟。收集滤液,做好记,4℃或-20℃(短期)保存备用,-70℃长期保存。  (2)核酸检测:实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病核酸(PCR实验室进行)。  ①反应体🖨️的准备:孔20μL,加入5μL样本DNA,共计25μL;每次PCR反应,除检标本外,加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照;所有本,包括照,应设孔。  ⚱️加样:每反应管中入核酸或照各5uL,盖紧管或封好透膜,置于光定量PCR检测仪上。  ③增条件设:  ④器检测通⛄选择:使荧光定量PCR检测仪,选择Fam荧光信号检测通道收集设在60℃。具体设置方法😱照各仪器🐜用说明书👨‍🚒  ⑤结🌈分析阈值🌍定:使用光定量PCR检测仪进行结果分🔴时,基线-3-10或6-15个循环的荧信号,阈设定原则阈值线刚超过正常性对照扩曲线最高,也可根仪器噪音👩🏿‍🤝‍👨🏻况调整阈。  (3)核酸检测结果判断 ①Real-timePCR反应系统的量控制:应结果应🥅时符合以2个条件,否则试验果无效,重新开展测。阴性😽照无扩增-,-为阴性。性对照未现阴性结。  ②果判定:🟡 A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值;  B.灰区:一Ct值>37;  C.阳性:双孔Ct值<37。  所有阳性处于灰区标本应重检测或经列分析进确诊。需👫🏼意:当标🥯仅为咽拭或血清、浆,且检结果为阴时,应结临床症状慎重做出🦶性诊断。 (4)表格记录 🗽做好荧光🔞量实时PCR方法检测猴痘病毒酸原始记。  五猴痘病毒Ⓜ️基因组测👨‍🔬  1.测序标本选🐅原则。本疫情中的发或早期🤣例、与早病例有流📃病学关联关键病例感染来源明的本土例、境外入病例阳🟡标本等。上标本在酸荧光定PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。  2.测序要求。省为单位⌛定开展猴🚷病毒全基组测序的构。建议用扩增子🙅‍♀️术进行猴病毒全基😶组测序。序数据经控合格后⤵️可用于后🐩生物信息析。二代序平台覆深度应不于10×,三代测序台覆盖深应不低于50×,全基因组测序盖度应不于98%。数据比对🥥析推荐参猴痘基因NC_063383.1。  各省应建立省输入、📥土病例猴病毒基因数据库,具备序列😊比分析能。具备测👨‍🏫条件的省♿要在接收🖨️本后48小时内开展序工作,键样本要实验室收👹标本后1周内提供测结果报告所有测序始数据(一般为fastq格式)、组装序🚟(一般为fasta格式)和标本序列测定🥡果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报中国疾控🖕心病毒病-进行序列总、分析病毒病所将序列分结果及时馈各省,将全国猴病毒序列总、分析果及时上◼️国家疾控↘️。  3.分子分型推荐使用👯‍♂️线分析工Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株行分子分。  附😷:  7-1猴痘病毒检测标本检表  7-2猴痘病毒标本序测定结果🔮告单【编🤜:孙静波】
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评论
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