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　　中新网7月27日电据国家疾控局💚方微信消息为进一步做😩猴痘防控工，及时有效🚗对猴痘疫情〽️提升猴痘防工作的科学、精准性和😒效性，切实护人民群众命安全和身健康，国家控局会同国卫生健康委定并于7月26日印发《猴痘防控方案。其中提出2023年6月以来，我多个省份先报告多例猴病例，引发增本土续发情和隐匿传的风险较高要坚持“预😩为主、防治合、精准防、快速处置原则，落实早发现、早告、早隔离🥛早治疗”措。　　《猴防控方案》🌟文如下：猴👩‍🎓防控方案　猴痘是由猴病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致的🤰种人兽共患。2022年9月，我国报告首例猴痘入病例。2023年6月以来，我国多省份先后报🤕多例猴痘病-，引发新增💁‍♂️土续发疫情隐匿传播的险较高。为导各地科学🙉准做好猴痘📀控工作，切维护人民群📜身体健康，定本方案。、总体要求　坚持“预为主、防治-合、精准防😡、快速处置原则，落实🕎早发现、早🈶告、早隔离🐤早治疗”措。开展医疗构、重点人、入境人员重点场所等渠道监测。强疫情分析风险研判，针对性地开重点人群健🔜教育和综合预。落实病💨隔离治疗、--行病学调查密切接触者🐐踪管理等措。坚持发现起、控制一，及时阻断情传播。二疾病特征　👩🏻‍🤝‍👨🏿(一)病原学特征。　　痘病毒属于📨病毒科正痘🦹毒属，为基组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中现该病毒。1970年在刚果民主共和一名疑似天患者的标本💻首次分离到痘病毒，为例确诊的人猴痘病例。　猴痘病毒为两个进化支：(1)分支I，曾称为中非分支或果盆地分支(2)分支II，曾称为西非分支，进,步分为IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方性流区猴痘暴发情的毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较多分支，包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告首例输性猴痘病例来，各地报🈴中国疾控中🔜病毒病所的株序列均属🏏IIb分支。　　猴痘病耐干燥和低，在痂皮、☝️壤和衣物、上用品等物🦮表面可生存月。该病毒🦦热敏感，加至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯毒剂、过氧酸等常用消剂及紫外线有效灭活病👜，对过氧化🤎、次氯酸钠戊二醛、邻👬🏿二甲醛等敏。　　(二)流行病学特。　　1.传染源。猴痘毒的宿主尚明确，目前为非洲啮齿🐁动物(非洲松鼠、树松鼠冈比亚袋鼠🧟‍♀️睡鼠等)可能为其自然宿。传染源包猴痘病例及染的啮齿类物、猴和猿🙅灵长类动物　　2.传播途径。猴痘📡毒主要经黏和破损皮肤入人体，主👭🏿通过直接接病例的病变肤或黏膜传，亦可通过🧑🏽‍🤝‍🧑🏽触被病毒污的物品、长间近距离吸病例呼吸道🌅沫传播，接感染动物的吸道分泌物病变渗出物血液及其它-液，或被感🍠动物咬伤、🕵️伤感染传播　　3.易感人群。人群⛳遍易感。接过天花疫苗猴痘病毒存一定程度的叉保护力。　4.疫情特征。2021年以前的猴📒疫情主要在非和西非地🔩呈地方性流🧑🏼‍🤝‍🧑🏼，主要通过触感染动物👩‍❤️‍💋‍👩播，所引发人传人疫情播链较短，要为儿童及壮年的散发例及聚集性💮情，通过家🙊或旅行方式尔播散至其国家和地区⬇️2022年5月以来全球⬆️国暴发的疫主要在男男行为人群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发生性行为男性)中经性接触传播，部分病例为-壮年男性，-过大型聚会及后续在社⏪的MSM扩散，并传播至😰球多个国家地区。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出现状后至皮疹痂自然脱落形成新皮肤具有传染性😰有调查提示些病例可能出现症状前1-4天存在传染性。　　3.早期症状：可出现发热头痛、背痛肌痛和淋巴肿大等。　4.皮疹和黏膜疹：通常热退后出现有些病例可现在全身症☠️之前。皮疹生常经过斑☪️、丘疹、水🦙、脓疱、结🐟至痂皮脱落个阶段，不♊形态皮疹可时存在，可有明显痒感疼痛。可累口腔咽喉黏、肛门、生🟫器、结膜和膜等。痂皮落后可遗留🌃斑或色素沉甚至瘢痕，痕持续时间长达数年。　5.病程及严重程度。痘病程约2—4周，免疫力低下患者的程可能较长猴痘为自限疾病，大多病例症状会行消失，也重症和死亡🏬生，主要为🍇童、孕妇和疫力低下人👩🏽‍🤝‍👨🏿。　　2022年以来全球多国猴痘暴疫情中，大数病例临床现较轻，部病例无全身😜状，皮疹仅🛷于生殖器、门直肠黏膜📊位，死亡病主要为未得治疗的艾滋病毒感染者🔣免疫力低下群。2022年以来全球地方性流行👭🏿病例的病死约为0.1%。三、宣传育与干预　针对重点人、出入境人⏮️和一般人群☸️不同人群分🗜️开展宣传教，有针对性加强不同人的自我防范🧩识和个人防措施，积极’合做好防控作。　　(一)重点人群。各地卫生健与疾控部门👩‍👧‍👧合相关社会织，充分借#️⃣艾滋病防治合干预经验服务模式，⛄MSM经常出入的酒吧、所、浴池等点活动场所🍦开展同伴教。借助大众体、MSM社交网站等互网平台，开猴痘防控知宣传教育，🎾高重点人群-范意识，减高危行为，导有可疑接史者自觉做自我健康监，增强主动诊意识。　️⃣重点人群宣干预要求详附件1《重点人群宣传干指南》。　(二)出入境人员。通过放宣传资料形式，加强入境人员猴防控知识宣教育。提醒🦜境人员关注的地国家和区猴痘疫情息，不接触痘样症状者啮齿类、灵类等动物。醒来自猴痘情报告国家地区的人员如在境外有疑接触史，🖲️境后21天内应做好自我🤸‍♀️康监测，避与他人发生切接触，一出现发热、🤸疹、淋巴结大等猴痘样状，应主动诊并如实报流行病学史　　(三)一般人群。各充分发挥新体以及广播电视、报纸传统媒体作👙，开展猴痘控知识宣传🏢育，提高公科学防范意️⃣。四、疫情🥱测和报告　(一)监测病例定义。　🍐1.猴痘样症状者。不明因急性皮疹(面部或口腔膜、四肢、殖器或会阴肛周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿者。　　2.疑似病例。痘样症状者🍓发病前21天内具备以下🏚️行病学史中任何一项：(1)有猴痘病例报告地区居史；(2)有猴痘确诊例或疑似病接触史；(3)有同性性行为，或性伴😋同性性行为；(4)有地方性流行区疑动物接触。　　3.确诊病例。猴样症状者、🔁似病例及密接触者，经验室检测猴病毒核酸阳或病毒分离性者。　　(二)多渠道监测。　　1.医疗机构监👩🏼‍🤝‍👩🏻。各级各类🏼疗机构要开猴痘样症状测，尤其是肤(性病)科、肛肠科、👨‍🎤滋病自愿咨检测门诊等重点关注猴👩‍🚒样症状者。现猴痘样症者，应主动问流行病学，记录患者住址及联系🧑🏿‍🤝‍🧑🏿式，采集标送疾控机构,-行猴痘核酸🐀测。具备猴,-病毒检测能👨🏾‍🤝‍👨🏼及猴痘病毒🦒验活动资质🆚医疗机构也👭🏽开展检测。　2.重点人群监测。各各类医疗机🙏、疾控机构对MSM等重点人群开展疗或检测咨服务时，应👨‍🦽动询问是否猴痘样症状其可疑接触。如发现猴,,样症状者和似病例，应🌼时采集标本🧎行猴痘病毒酸检测。　3.入境人员监测。海关到猴痘相关常健康申报检疫发现有🎐痘样症状的👨‍👩‍👧‍👧境人员，应🤽时进行标本✍️集和核酸检，并发放《诊方便卡》要求其尽快诊；对于核-,检测阳性者🧞将相关信息🧲报辖区疾控💍构，由相关门进一步调处置。　　4.重点场所污水监测。有件的地区可据当地疫情势，经评估MSM经常出入的酒吧、👨‍❤️‍💋‍👨所、浴池等🎭点活动场所展污水监测　　(三)病例报告。　相关医疗机根据临床表、流行病学实验室检测果，及时对者进行诊断　　诊断的似病例和确病例应于24小时内通过国疾病预防,制信息系统监测报告管模块进行网🥏直报。如为😶外输入病例填写输入来国家或地区🚅不具备网络,-报条件的医卫生机构，在规定时限♎将传染病报卡信息报告地乡镇卫生🉐、社区卫生务中心或县疾控机构进网络报告，时传真或寄传染病报告至代报单位🟪负责病例网直报的医疗🗓️生机构，要据实验室检结果、流调💂‍♂️展及时对病信息进行复、订正。　⏯️各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例者2例及以上存在流行病关联的确诊例，应当在2小时内通过发公共卫生件报告管理息系统报告事件级别选“未分级”五、疫情处　　(一)病例管理。　各地发现猴👩🏽‍🤝‍👩🏻疑似病例和诊病例应当时转运至医😎机构进行隔治疗，如临症状明显好🍰，病变部位💾结痂，可转-,居家隔离治，直至皮疹🏥痂自然脱落🚳解除居家隔。对病情较🚼且具备居家🔉离治疗条件-确诊病例，🔧医疗机构与控机构联合估后，可直采取居家隔,,治疗。对于行居家隔离疗的确诊病,发放《猴痘😀例居家隔离📲疗健康告知》(见附件2)。确诊病例居家隔离治🥍期间，单人间居住，避与家人有皮’或黏膜直接🐃触，做好被染物品的消🌆，非必要不出，确须外时穿长衣长、佩戴医用科口罩，避前往人群聚场所，避免其他人有皮📂或黏膜直接触；指定医机构安排专👩‍⚕️负责上门或💸话随访，提🧟健康咨询和疗指导。　(二)流行病学调查。　县(市、区)级疾控机构到辖区疑似👛例和确诊病🕝报告后，及组织开展流🤩病学调查，找感染来源📓掌握、追踪管理密切接者，分析传链及传播特，及时发现🕘在的风险人及其范围、--征，有针对地开展宣传🌃育和综合干。调查过程发挥多部门防联控的协作用，尽可获取全面准的流调信息　　调查内主要包括病↗️基本信息、病就诊情况-临床表现、归及实验室️⃣测；发病前21天内与可疑感染来源的触史、接触所及接触方🌚；发病后至📼离治疗前的体活动地点与其有皮肤黏膜直接接👩‍🦽者，以及发🛬前4天内与其有性接触者　　猴痘疫💁‍♂️流行病学调要求详见附,,3《猴痘疫情流行病学调💇‍♂️指南》。　(三)密切接触者的判定管理。　　1.密切接触者定义。直接触病例的病部位及其被染物品，或染动物及其💝泌物、渗出等污染物；📎及职业暴露😾长时间近距吸入病例呼🛢️道飞沫等，评估有感染险的人员。⌛　2.密切接触者判定。🔗据流行病学查及暴露风评估结果，👩‍👦控机构负责时对密切接😹者进行判定　　3.密切接触者管理疾控机构或🚆层医疗卫生构指导密切触者做好自👰健康监测，康监测期限💏最后密切接之日起21天。　　密切🖌️触者自我健监测期间可常生活与工📇，需避免与⛸️人发生性接等密切接触避免捐献血等；坚持每做好体温测和症状监测出现猴痘样状应及时就并主动报告疑接触史。区疾控机构基层医疗卫机构应在密接触者自我康监测第7、14、21天上门或电话🍂其进行随访提供咨询指，发现异常况及时进行置。　　密接触者判定理要求详见件4《猴痘密切接触者判和管理指南。　　(四)消毒与人员护。　　做病例衣物、巾、床单、具等个人用🐑，以及可能病例分泌物🖍️渗出物、体等污染的环🥖和物体表面消毒。从事🏇例诊治护理🙀流行病学调、环境清洁毒、标本采和实验室检✅等工作人员工作期间做🔻个人防护。　消毒与人👸防护要求详附件5《猴痘消毒技术指👩‍🔧》和附件6《猴痘个人防指南》。六实验室检测-　猴痘病毒酸检测首选肤或黏膜病🌲部位标本，同时采集口拭子标本。省首例猴痘诊病例标本送中国疾控心病毒病所行复核；本🛣️疫情中的首🏪或早期确诊例、与早期例有流行病🏜️关联的关键诊病例、感来源不明的土确诊病例境外输入确病例阳性标等，荧光定🧀PCR检测Ct值≤32时进行病毒基🏠测序。所有序原始数据组装序列及📹序样本送检应在获得序48小时内报送中国疾控心病毒病所行汇总、分👫🏻。以上确诊例应至少采一套标本(包括核酸检测⚪性者的皮肤黏膜病变标、口咽拭子本以及发病✒️性期和恢复双份血清)送中国疾控中病毒病所。　实验室检具体要求详⚾附件7《猴痘病毒实验室测技术指南。七、院内染控制　　🚌疗机构应当🩳格做好院内染控制。疑💇病例和确诊例应安置在离病房，疑🟢病例单间隔🚲。医务人员🏳️行标准预防🥃采取经接触播和经飞沫播疾病的隔与预防措施佩戴一次性胶手套、KN95/N95及以上级别口罩、防护🔫屏或护目镜一次性隔离🧔等，同时做手卫生。严按照《医疗构消毒技术范》对病例体液、血液排泄物、分物等进行规👩‍🦽处理，做好疗环境(空气、物体表面地面等)、医疗器械、病使用物品等清洁消毒。据《医疗废管理条例》医疗卫生机👩‍👧‍👦医疗废物管办法》做好疗废物的处和管理。八工作要求　(一)加强组织协调。各卫生健康、控部门加强💯海关等有关♉门的密切协和信息共享及时发现与✂️置猴痘疫情落实猴痘病发现、疫情告、诊疗隔、密切接触追踪管理等作，防止疫❎扩散和蔓延,各地在猴痘情防控过程☪️应注意保护例、密切接者和重点人🧑🏾‍🤝‍🧑🏼等个人隐私😆　　(二)加强宣传引导各地要及时布辖区猴痘🙉情相关信息做好政策解和公众健康示。通过多-,方式和渠道展猴痘防控👭🏾识宣传，加💎重点人群宣教育的针对和实效性。时回应社会切，引导公🤔科学认识猴🌜。　　(三)加强人员培🕑。各地要加对各级疾控构和医疗机-,专业人员的训。对医务🌭员重点开展痘病例的识⏏️与诊断、病💂‍♀️发现与报告病例管理等关知识培训🧑🏾‍🤝‍🧑🏻强化诊治意。对疾控人🥌重点开展流👩🏾‍🤝‍👩🏽病学调查、切接触者的-定和管理、验室检测、🎃点人群宣传预等相关知培训，提高痘疫情防控’应急处置能。　　附件　　1.重点人群宣传干指南　　2.猴痘病例居隔离治疗健👩🏿‍🤝‍👨🏽告知书　　3.猴痘疫情流行病学调查南　　4.猴痘密切接触判定和管理🍤南　　5.猴痘消毒技术🗝️南　　6.猴痘个人防护南　　7.猴痘病毒实验检测技术指🧑🏽‍🤝‍🧑🏼　　附件1　　重点人群传干预指南　2022年5月以来，全球非地方性行区发生的痘疫情以男性行为人群(MSM)为主。为充分利我国艾滋病治综合干预务体系，开MSM等重点人群宣传干，防范猴痘👳‍♂️情传播扩散形成常态化滋病与猴痘合防控一体应对机制，定本指南。🪀、实施策略　在现有艾病防治综合预服务体系础上，综合用行为学干方法和手段通过宣传教🍹、促进安全🔥行为、动员😹测、外展服、同伴教育互联网干预，从个体、体和社会等个层面为目人群提供猴💝综合干预服。二、组织施　　各级👩‍🔧疗机构和疾机构要加强点科室和艾病自愿咨询测门诊工作员猴痘知识训，对重点群提供猴痘🦿控知识宣传-检测咨询与🍙员、治疗和怀等服务。级疾控机构当积极推动🏋️‍♀️地有能力、有良好艾滋防治经验的MSM志愿者或社会组织共参与猴痘防宣传工作，🥄工作过程中🚿意保护重点🖖群个人隐私三、形势分😸　　各地要强对重点人猴痘疫情、控现状、影因素及出入情况的调查及时分析研猴痘疫情形👭🏽，为制定本高危行为干工作计划提依据。具体容包括：1.重点人群基、活动形式😊特点、活动-所、出入境时间及地区；2.猴痘知识、态度和😕危行为；3.猴痘疫情水及其影响因；4.猴痘防治政策及专机构已开展工作；5.包括志愿者在的有关组织个人已开展干预活动；6.影响猴痘防治工作的困和问题。四宣传干预　(一)宣传教育。各级疾🧝机构或健康🦙育专业机构供技术支持社会组织参，共同研究🌈定适合当地🤔点的猴痘预宣传材料，强警示宣传育。通过大🐙媒体、MSM网站和以移〽️终端为载体交友软件等台，宣传国、国内及本猴痘疫情信和防控知识🦽提高重点人猴痘防范意。　　(二)同伴教育。🍌级疾控机构加强同伴教✔️员挑选、招🖲️和培训，组和支持同伴传活动，增人群猴痘风-防范意识，,,,动主动检测定期组织同教育员工作会，了解猴干预工作存🛹的困难和问🥚，有针对性给予帮助和持。　　(三)外展服务。各级疾控机干预工作人定期到重点群活动场所展猴痘宣传咨询、发放传材料等外😀服务活动，高重点人群😡痘防范意识知识水平，动重点人群强自我健康理，主动寻检测咨询服。　　(四)检测咨询。级疾控机构过互联网、伴教育、外👨‍👩‍👦活动等多种式动员有猴🍰样症状或可接触史的重🔗人群进行猴检测。各级类医疗机构肤(性病)科、肛肠科、💢滋病自愿咨检测门诊发💃猴痘样症状，应主动询👩🏽‍🤝‍👨🏼其流行病学及性接触史👹记录患者现址及联系方-，采集标本疾控机构进-,猴痘核酸检，具备猴痘测能力及猴病毒实验活资质的医疗构也可开展测。对于已-,立互联网+HIV检测平台的地区，可加猴痘检测容，实现互网在线检测⛳约和结果查。五、重点所干预　　点活动场所括实体和虚两类场所，体场所包括吧、会所、池等经营性🥓所，虚拟场💢包括移动互⛴️网和社交媒。　　(一)实体场所干。　　各级控机构负责织干预工作员在当地MSM经常出入的酒吧、会所⚡浴池等活动所，开展猴预防干预宣，主要包括　　1.在MSM经常出入的酒吧、会👭、浴池等实场所，张贴目的健康教👩‍✈️宣传图片，👼置健康教育🏐料公告栏；　2.强化个人健康责任👠识，开展猴🅾️健康咨询，动开展自我险评估；　3.提供转介服务信息，知明确的诊流程以及相检测、医疗构名称、联🎵人等信息。🔣　各地要加对猴痘确诊例发病前21天内活动过🤹‍♂️场所以及污监测阳性场的干预宣传重视目标人✉️的个人隐私护，加强对会组织同伴🧉育员猴痘防知识培训，立规范的行👑干预流程，高自我防护🍝能。　　(二)虚拟场所干预。　　各🤝疾控机构负组织指导当🧲有序开展猴线上宣传，🦏相关网站、交媒体平台🤐时发布和更🔟猴痘宣传教👨‍🦱内容，形成向重点人群🍒猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣传干预务体系。　各级疾控机支持社会组💁‍♀️或同伴教育利用网站、箱或社交媒平台，组织展在线咨询交流。及时答网友提出各种猴痘相🔳问题。针对同时期猴痘🧑🏿‍🤝‍🧑🏾播特点，定或不定期组专家、专业员、同伴教员利用互联↪️和社交媒体台进行在线👩‍🏭教。各级疾机构要定期导更新相关业信息，确宣传内容科、有效。　附件2　　附件3　　猴痘疫情流行病🦸‍♀️调查指南　为指导各地👖控机构规范展猴痘疑似例、确诊病和聚集性疫的流行病学查，及时掌病例暴露史接触史等流📒病学相关信❗，落实密切触者的追踪定，防止疫传播扩散，🦿定本指南。😸、调查目的🚍　(一)查找感染来源，♟️握、追踪和🦇理密切接触。　　(二)分析传播链传播特征。　(三)及时发现潜在的😽险人群及其征、范围，针对性地开宣传教育和合干预。二⏏️调查对象　疑似病例、诊病例和聚🧃性疫情。三调查方法和容　　通过阅资料，询病例、诊治生、家属和情人等进行行病学调查如病例的病允许，调查应先调查病本人，再对诊治医生、属和知情者行调查。　开展个案调时，要认真详细了解和录病例基本🌞息、发病就情况、临床现、转归及验室检测信；发病前21天内与可疑染来源的接🦓史、接触场及接触方式发病后至隔🍲治疗前的具活动地点、其有皮肤或⏹️膜直接接触👨‍🦰，以及发病4天内与其有性接触者。　(一)基本情况。如姓、性别、年、住址、国、联系方式。　　(二)发病就诊情。临床表现实验室检测发病就诊经,和病情变化转归。　　(三)感染来源调查。对病🙏发病前21天内的暴露史,展调查，包境内外猴痘例报告地区🏊行史或居住🏾，对可疑的🍨染来源要详🛰️询问接触时、方式、频、地点及接时采取的防🦸‍♂️措施等，特是性接触史⚠️调查时，若现调查表中列入，但具🙍重要流行病🤤意义的内容🤰应进行详细问和记录。　(四)密切接触者调查判定。对病传染期的活😤情况和人群🔦触情况进行😡踪和排查后判定其密切触者。密切👩‍👧‍👧触者判定和理按照《猴️⃣密切接触者定和管理指,》(附件4)执行。　　见附件3-1《猴痘病例↙️案调查表》🏋️‍♂️四、组织与施　　按照🔒属地化管理🅰️原则，由病现住址所在县(市、区)级疾控部门织辖区疾控🚮构开展猴痘💁‍♂️例的流行病调查，就诊疗机构提供👩🏾‍🤝‍👨🏿疗信息。调-单位应根据➡️查计划和调目的，确定👩‍🔧查人员组成职责分工，🈁时开展病例👀行病学个案查。调查过中发挥多部联防联控的🍠同作用，尽能获取全面确的流调信。调查期间调查人员要⏲️好个人防护💳五、信息的报与分析　疾控机构完📞调查后，应好病例分析☺️结，及时将行病学个案查表、调查告等资料逐🏄‍♀️报送上级疾机构，并做调查资料的管和存档。😢例流调信息按有关规定严格做好信-安全和个人🐳私信息保护　　附件：3-1.猴痘病例个案调查　　附件4　　猴痘密切触者判定和理指南　　🧘‍♂️指导各地做🥾猴痘密切接者判定和管💩，有效控制痘疫情的传，制定本指。一、密切触者判定标　　密切接者是指直接触病例的病🏊部位及其被👩‍❤️‍💋‍👨染物品，或染动物及其😑泌物、渗出等污染物的员；以及职👮‍♀️暴露或长时🌥️近距离吸入例呼吸道飞📰等，经评估-感染风险的员。具体情包括：　　1.与疑似病例或确诊病例病后有皮肤🦱黏膜直接接的人员，接🏨方式包括性触、抚摸、抱和亲吻等　　2.与有皮疹症状的似病例或确病例共用衣🧂、被褥、餐🤐等物品的人💸；　　3.医疗诊疗、采或实验室检⛓️等操作过程可能暴露于毒，经评估感染风险的🚫疗卫生工作️⃣员；　　4.与疑似病例🔓确诊病例发前4天内有性接触，并经行病学调查业人员评估感染风险的🏛️员，亦可判🏣为密切接触🎐；　　5.在狭小密闭空🤝与疑似病例😻确诊病例长间近距离接(如长时间共处同一封闭间)，经流行病学调查专人员评估有染风险的人，亦可判定🍝密切接触者　　6.接触感染猴痘病的动物及其泌物、渗出✈️等污染物，未采取有效人防护的人；　　7.其他可能存在毒暴露风险人员。二、切接触者管　　1.管理期限与方式病例发现地-控机构或密接触者所在疾控机构应追踪到密切触者当天及开展猴痘病核酸检测，📂知并指导密接触者做好我健康监测健康监测期为自最后密接触之日算🦷21天。自我健康监测期可正常生活工作，需避与他人发生接触等密切触，避免捐,血液等。　2.知情告知。实施健康🐚测时，疾控构或基层医💐卫生机构应头告知健康测的缘由、限、注意事和疾病相关识，以及负随访疾控机或基层医疗生机构联系和联系方式并发放《猴密切接触者康告知书》　　3.定期随访。疾控构或基层医🎅卫生机构应🧩第7、14、21天电话或上门主动询🧰密切接触者我健康监测况，提供咨指导建议。现异常情况及时调查处。　　4.自我健康监测坚持每天做体温测量和🔔状监测，主症状包括发,(＞37.3℃)、皮疹、浅表淋巴结大等。密切触者一旦出➗相关症状应时前往医疗🙍‍♀️构就诊或与访联系人取🌵联系，接受痘病毒核酸测。　　附：4-1.猴痘密切接触️⃣健康告知书　附件5　　猴痘消毒技指南　　为一步规范猴疫情相关的毒工作，落科学消毒、准消毒，减猴痘病毒对众健康造成🔀危害，制定指南。一、🌲源地消毒　(一)适用范围。　　适🛴于出现猴痘例后，对其🆘能污染的场和物品进行随时消毒和末消毒。　🍸(二)消毒原则。　　1.范围和对象😀定。　　根流行病学调结果，确定场消毒的范和对象。对👞例在住院、运期间可能染的环境和品，进行随消毒。对病居住或活动的场所，如住场所、工场所、学习所、诊疗场、转运工具及其他可能到污染的场，在其离开(如住院、转院、出院、🧦亡)进行终末消毒。　　2.方法选择。　　(1)诊疗用品消毒尽量选择一性诊疗用品非一次性诊用品应首选力蒸汽灭菌不耐热物品🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿选择化学消剂或低温灭设备进行消-,或灭菌。　🥰(2)手消毒。建议使用消毒剂揉搓👨‍🦳手进行消毒也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒🚀。　　(3)环境和物体面消毒。可择含氯消毒、二氧化氯过氧乙酸、氧化氢等消剂擦拭、喷🧻或浸泡消毒　　(4)衣物、床单等织品消毒。🧠选择热力消、含氯消毒或季铵盐类毒剂浸泡等🦌毒方式。　(三)常见污染对象的消方法。　　1.手消毒。　　可选用速手消毒剂，直接选用75%乙醇进行擦拭消毒；醇过敏者，可👨🏼‍🤝‍👨🏻择季铵盐类有效的非醇手消毒剂。肉眼可见污物时，应先用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六洗手法清洗😀手，然后按述方法消毒　　2.皮肤、黏膜。　皮肤被污染污染时，应即清除污染，再用一次🥒吸水材料沾0.5%碘伏或过氧化氢毒剂擦拭消3分钟以上，使用清水清干净；粘膜♀️用大量生理水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。　💺3.床单、毛巾、衣服等织品。　　例使用的床👩‍👧‍👦、毛巾、衣等纺织品，--肉眼可见污物时，若需复使用，可流通蒸汽或沸消毒30分钟；或用有氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消剂浸泡30分钟后，按照🌬️规清洗；或🆚其他有效的毒方法。不湿的衣物可🥃用环氧乙烷干热方法进🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿消毒处理。　有分泌物-渗出液、排物、血液、液等污染物，建议按医废物集中处。　　4.餐(饮)具。　　病例所使🏊的碗、盘、🧗‍♂️、杯等餐(饮)具清除食物残渣后，煮消毒30分钟，或使用有氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再🐸清水洗净。　5.污染物。　　对病,,分泌物、渗🍑液、排泄物♓血液、体液🎼少量污染物用一次性吸材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒(或能达到高水平消毒的毒湿巾/干巾)小心移除。　　对病例泌物、渗出🎸、排泄物、液、体液等量污染物应用含吸水成🌓的消毒粉或白粉完全覆，或用一次吸水材料完覆盖后用足-的有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒浇在吸水材上，作用30分钟以上(或能达到高水消毒的消毒🎌巾)，小心清除干净。清过程中避免📻触污染物，理的污染物医疗废物集处置。　　例的分泌物应有专门容收集，用有📀氯20000mg/L的含氯消毒剂，物、药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污染物🚴‍♂️，应对污染环境和物体面进行消毒盛放污染物🚠容器可用有🤹氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟，然后清📵干净。　　6.地面、墙壁。　　有肉🔏可见污染物，应先完全👫除污染物再毒。无肉眼见污染物时可用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂🏥拭或喷洒消；不耐腐蚀地面和墙壁🩰也可用2000mg/L的季铵盐类消剂喷洒或擦；消毒作用☑️间不少于30分钟。　　7.物体表面。　　诊疗设设备表面以床围栏、床柜、家具、把手、卫生具和家居用等有肉眼可污染物时，先完全清除🚽染物再消毒🟩无肉眼可见💌染物时，用效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯毒剂，不耐🔗蚀的物体表🤖也可用2000mg/L的季铵盐类消🐤剂进行喷洒擦拭或浸泡毒，作用30分钟后清水🏄拭干净。　8.污水和粪便。　　在🦇入市政排水网前需进行🚊毒处理，消👨‍💻后污水应当合《医疗机水污染物排🌔标准》(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃圾。　病例生活圾按医疗废🏋️‍♂️处理。　　10.医疗废物。　　医疗物的处置应循《医疗废管理条例》🐞《医疗卫生构医疗废物理办法》的求，规范使双层黄色医废物收集袋装后，按常❤️流程进行处👸。　　11.室内空气。　如经科学💣估，需对室空气进行消，则在无人况下，可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化(浓度按产品说明书)等消毒剂，按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。可采用经验安全有效的👩🏼‍🤝‍👨🏻他消毒方法二、注意事　　现场消应确保所用👩🏼‍🤝‍👩🏻毒产品合法效，所选消♐方法科学可💥。现场消毒🦺，根据现场👍况和相关标要求，选择格有效的个防护装备，做好个人防的前提下，格按照工作案实施消毒🧑🏾‍🤝‍🧑🏾　　消毒实单位应具备场消毒能力操作人员应👩🏽‍🤝‍👨🏼过消毒专业训，掌握消和个人防护本知识，熟🕓消毒器械的用和消毒剂配制等。　每次开展消工作时均应好消毒记录包括消毒对🐗、消毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。同，相关部门单位应做好毒工作的监管理和评价🚦　　附件6　　猴痘个人护指南　　🏺加强公众、情处置相关作人员和医🐖人员的个人😌护，避免猴病毒暴露感，制定本指🙅‍♀️。一、居家离治疗的病等相关人员🚳　(一)适用范围。　　用于居家隔治疗的病例(疑似病例和诊病例)、照护人员或共居住者的个,-防护。　　(二)居家隔离区域要求。👩🏿‍🤝‍👨🏽　1.应选择有自然通风独立卫生间房间作为隔区域。　　2.应配备专用的餐具，床、毛巾等床用品，消毒和口罩等个🙇防护用品，🌶️视和平板电等电子设备　　3.卫生间宜配备专的洗衣机，漏应有水封　　(三)病例管理要求　　1.应能够进行自我护。　　2.应每天做好🌚温测量和症🚑监测，避免他人共用个🕤物品。　　3.避免与他人发生性接触避免与免疫低下人员、🐭童、老人、妇及其他人的直接接触避免与宠物🚶动物接触，免捐献血液。　　4.外出就诊时，佩戴医用外口罩，着长长裤，确保住所有损伤💼肤，避免与人密切接触避免乘坐公交通工具。🕹️　(四)照护人员要求。　1.应每天做好体温测👞和症状监测📒　　2.应尽量避免进入离区域。如🦆进入隔离区，应佩戴医外科口罩和☝️次性手套，病例保持至🚏1米的距离。在离开隔离域之后，应强手卫生，🙄对脱下的口和手套进行-毒处理后废🐖。　　3.在拿放和清洗家隔离治疗😉例的床单、服和处理垃的过程中，避免抖动。湿拖布拖地避免干扫。🕜湿抹布清洁居用品表面地毯应用蒸清洗，避免用吸尘器。　4.应将居家隔离治疗例的餐具、单、毛巾和物单独洗涤👬消毒，可选热力消毒、氯消毒剂或👨‍⚕️铵盐类消毒🛋️浸泡等消毒式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同住者出现任症状或不适现，应当及🏾前往指定医机构就诊并动报告可疑触史。　　2.对其接触的物品、活动🏄‍♀️区域等结合险评估结果🧘行消毒处理二、疫情处相关工作人　　(一)适用范围。　,适用于猴痘情期间流行🧍‍♀️学调查、环💓清洁消毒人的个人防护　　(二)流行病学调查员防护要求　　1.个人防护装备。💂‍♂️次性乳胶手🍡、医用外科罩、一次性离衣等。　2.个人防护要求。规范戴口罩，加🗄️手卫生，与😎调查人员保至少1米的距离。　　3.废物管理。查结束后，👭🏾弃的个人防👕装备暂存、理和处置应照《医疗废管理条例》🥴行。　　4.应急处置。🙅‍♀️在调查过程😲出现口罩脱👨‍👦‍👦、直接接触病例皮肤或泌物等情况要结合被调人员的临床断结果、空👎的密闭性、触的时间和👘离等进行风😔评估，结合险评估结果采取相应的🟠置措施。　(三)环境清洁消毒人员🎉护要求。　1.个人防护装备。一次乳胶手套、🏸用外科口罩一次性隔离、防水靴套。　　2.个人防护要求规范佩戴口，加强手卫，尽量减少😌被消毒物品-直接接触。🌊　3.废物管理。清洁消结束后，废👬🏿的个人防护🎮备暂存、处和处置应按《医疗废物理条例》执。　　4.应急处置。如清洁消毒过中出现口罩落、皮肤损或直接接触’泄物、血液情况，要结被清洁消毒⛹️‍♀️品的类型、🚝触的时间和🐒间的密闭性进行风险评，结合风险估结果，采相应的处置施。三、医👩‍🌾人员的个人护　　(一)适用范围。　适用于猴疫情期间医人员及其工环境的防护　　(二)基本要求。　🔁1.个人防护装备要求。务人员执行👘准预防，采经接触传播经飞沫传播🧏‍♀️病的隔离与🗿防措施，佩♎一次性乳胶套、KN95/N95及以上级别的口、防护面屏护目镜、一性隔离衣等　　2.环境防护要求。🚲院环境的清消毒应符合件5的要求。应避免干除👽、清扫或吸🔢等活动。首湿式清洁方👇。　　3.废物管理。个防护装备、例敷料等暂、处理和处应按照《医废物管理条》执行。　🛑附件7　　猴痘病毒实验检测技术指　　为指导级疾控部门其他相关机规范开展猴病毒实验室,-测工作，快、准确识别👩‍👧‍👧痘确诊病例制定本指南本指南主要✊绍标本采集及猴痘病毒☝️酸荧光定量PCR检测方法、生物安全🚟求等内容。🧿、检测对象　(一)猴痘确诊病例和似病例；　👱(二)密切接触者；　　(三)感染或疑似感染猴痘毒的动物；　(四)环境或其它生物料。二、技人员基本要　　(一)采样人员。从猴痘病毒核⬜检测标本采☎️的技术人员❎当经过生物全培训，培🚚合格后方可💀事采样工作采样人员应悉采集标本类和采集方，熟练掌握🕗本采集操作程及注意事，做好标本息记录，确标本质量符要求、标本相关信息可🕹️溯。　　1.采样人员个🌋防护装备要：KN95/N95及以上级别的口罩-防护面屏或目镜、一次隔离衣、一性乳胶手套(尽可能戴两)、靴套；如果接触了病血液、体液分泌物或排物，应及时换手套。污👨‍🦽采样人员可👩‍💻据实际工作要，适当降防护级别。　2.住院病例的标本由在医院医护🍭员采集，根🐹实验室检测作的需要，结合病程多采样。　　3.密切接触者标本由当地控机构或医机构专业人👭采集。　　4.感染或疑似感染猴痘病的动物由当疾控机构协动物疫控部专业采样人负责采集。　5.环境或其它生物材标本由相关业采样人员责采集。　🛏️(二)检测人员。实验室,,测技术人员具备相关专大专以上学或具有中级☎️以上专业技⚙️资格，并有2年以上实验🏻工作经历，👊受过核酸检相关培训，训合格后方🌒从事检测工🆙。实验室配🔦的工作人员♈量应与所开检测项目及🦦本量相适宜确保能够及、熟练、准地开展实验🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿检测和报告果。三、标采集、保存运输　　(一)标本采集种类。　　1.首选标本是🍨肤(黏膜)病变部位标本🐕‍🦺包括病变表拭子、痘疱🤭或痘疱渗出拭子、痘痂痘痂拭子等　　2.呼吸道标本，如🅿️咽拭子，可于病例急性检测，也是-切接触者检最常用标本　　3.发病急性期可采🦴EDTA抗凝血标本进行酸检测。　4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检🆚。　　5.直肠拭子、尿、精液、唾等其它标本-用于研究，据工作需要集。　　6.污水或其它境生物材料本根据实际作需要进行集。　　(二)标本采集要求。　　采皮肤(黏膜)病变部位标时应使用无🤔聚酯纤维、龙或类似材拭子，避免👯‍♀️用棉拭子。集疑似病例🍶标本前应避🎩使用75%乙醇等消毒剂洁病变部位每种类型的肤(黏膜)病变应尽可能🤝集两个以上子，每个病应同时采集体不同部位外观不同的2-3种病变标本。采集皮(黏膜)病变部位标本时适当用力。🌤️肤(黏膜)病变部位、痘或分泌物等同拭子标本放置于不同⚗️采样管中。🦡行病毒分离应采集干拭标本(无采样液)或以非灭活型病毒采液保存。根实验室活动质确定使用灭活型或灭型采样液采🛂标本。　　(三)标本采集方法。　　1.斑疹、丘疹、水疱或脓🏰等皮肤(黏膜)病变部位标本：一手紧⭕采样拭子尾😛，手与拭子部保持一寸,上距离。采🕒时适当用力🏌️压拭子，在🎈损表面来回拭至少2-3次，然后以子另一面再复擦拭2-3次。如果在拭过程中痘破裂，要确采集到痘疱。采样后将子放置于无💹采样管中(可含病毒采样↗️或不含液体)，折断拭子，去除拭子部，盖上管，以消毒纸擦拭消毒采管，以封口密封管盖后🦄采样管保存送检。　　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样应确保实验可检测此类👃本。使用无镊子或其他头器械夹取#️⃣部痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮，放置🔦干燥、无菌采样管中，样完成后以可贴覆盖患。　　3.口咽拭子标本被采集人员部微仰，嘴大，露出两扁桃体，将子越过舌根在被采集者侧扁桃体稍用力来回擦至少3次，然后再在咽后上下擦拭至🎰3次，将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中🦹置于不含液(干拭子)的无菌管中，部弃去，旋管盖。　　4.血液标本：尽量采集急期(发病7天内)的血液标本，建议使含EDTA抗凝剂的真空血管采集5mL全血，可利用全血进行测，或室温👩🏾‍🤝‍👨🏿置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血于无菌管中行检测。　💁‍♂️5.血清标本：用真空负🛠️采血管采集🪂液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于无🎥螺口塑料管。第一份血应尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份血清应🥏发病后第3-4周采集，采集血液标本5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清👩‍❤️‍👨无菌螺口塑管中，用于痘抗体检测😩　　6.其他标本：依据计需求规范集。　　(四)标本保存。　　标本应收集后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行检测可在1周内检测的标本可于4℃环境中保存；1周内无法检测的本，短期可♾️于-20℃环境中保存，期应置于-70℃或以下环境中保存。血分离血浆🦰冷藏(2-8℃)，分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存应设立专库🩹专柜单独保🌈标本，避免复冻融标本　　猴痘病及其相关标应由专人管，准确记录毒及标本的源、编号、量等信息，🔘体要求可参↗️《病原微生😛菌(毒)种保藏数据描述💢则》(T/CPMA011-2020)。应采取有措施确保病及标本安全严防发生误、恶意使用被盗、被抢丢失、泄露事件。　　(五)标本送检。　　标本集后应尽快低温条件下(冰袋或干冰)送往实验室如需长途运标本，应采💕干冰冷冻运🏫方式进行保。　　1.送检标本：病标本先由省及以下疾控构进行初步🍨测，各省首猴痘阳性标🥓应送中国疾中心病毒病复核。每个🈚性病例至少集一套标本(皮肤或黏膜🕉️变部位标本--口咽拭子标🥝及急性期、复期双份血标本)送中国疾控中心病病所检测。省级疾控机根据实际情制定省内样💝送检、复核程。　　2.病原体及标运输：　　(1)国内运输。猴痘病毒其他潜在感性生物材料-,运输包装分,-属于A类，对应的联合国🚤号为UN2814，包装符合国际民航--织文件Doc9284《危险品航空安运输技术细》的PI602分类包装要求，通过其交通工具运🚙的可参照以🥤标准包装。👳痘病毒或其潜在感染性料运输应按《可感染人-的高致病性原微生物菌(毒)种或样本运输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运🍂书》。污水环境标本暂普通生物样运输标准执-。　　(2)国际运输。痘毒株或样在国际间运的，应规范装，按照《入境特殊物🧟‍♀️卫生检疫管规定》办理关手续，并足相关国家👩‍👩‍👦国际相关要。四、猴痘毒核酸检测求及流程　🦋(一)实验室资质要求。　开展猴痘毒核酸检测实验室，应👼符合《病原👴生物实验室物安全管理🧑🏻‍🤝‍🧑🏻例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因增检验实验管理办法》(卫办医政发👨‍👨‍👧2010〕194号)有关规定，具备👽区的市级卫健康部门备↔️的生物安全级(BSL-2)实验室及以上实验室件，并备案-痘病毒相关🧗‍♀️验活动。独设置的医学验实验室还符合《医学🦒验实验室基标准(试行)》《医学检实验室管理范(试行)》等要求。　📟开展猴痘病分离、培养📃中和等涉及毒扩增、使等实验操作实验室应具国家卫生健委批准的生安全三级(BSL-3)实验室及以上🏧验室条件，获得猴痘病实验活动批。分离的猴病毒应送国👰病原微生物👩‍✈️藏中心/国家病原微生物源库病毒分保藏。　　(二)实验室生物安全要求　　根据2006年公布实施的《人间🛹染的病原微物名录》(简称《名录》)，猴痘病毒物危害分类⛩️第一类，是种高致病性毒。按照《📙录》要求，痘病毒的分、培养等涉病毒扩增及用的实验操需在BSL-3及以上实验室的生物安😆柜内进行；灭活采样液集的猴痘病样本的灭活BSL-3实验室进行；本灭活后猴🚅病毒DNA提取、检测可BSL-2及以上实验室PCR检测的专门区域或间进行。如名录》更新🦹‍♀️开展猴痘病操作的实验生物安全要👼应按最新《🥂录》执行。🗳️水样本的灭参照普通生样本。　　(三)实验室分区要求。　🈹原则上开展痘病毒核酸测的实验室当设置以下域：试剂储🐮和准备区、🈵本制备区、😥增和产物分区。三个区在物理空间🐢应完全相互立，空气应向流通。各功能分别是　　1.试剂储存和准备⏫：贮存试剂制备、试剂分装和扩增应混合液的备，以及离管、吸头等耗品的贮存准备。　　2.标本制备区：转运桶开、标本灭活🕎核酸提取及入至扩增反管等。　　3.扩增和产物分析区：核扩增和产物🚴‍♂️析。　　根使用仪器的能，区域可🎣当合并。如用标本处理核酸提取及增检测为一🔧的自动化分仪，标本制区、扩增和👩🏿‍🤝‍👨🏽物分析区可♒并。　　(四)主要仪器设备。　　实室应当配备开展检验项👨‍👧‍👧相适宜的仪设备，包括二级生物安柜、高速台离心机、干✔️恒温器、荧定量PCR仪、计时器、液器。　　(五)实验室猴痘病毒核酸🔙测流程。　🥥实验室接到本后，按照📳准操作程序行试剂准备标本前处理核酸提取、🧑‍🤝‍🧑酸扩增、结👘分析及报告实验室应当🕖立可疑标本阳性标本复流程。　　1.试剂与材料。　　(1)标本：包括变表面拭子痘疱液或痘渗出液拭子痘痂或痘痂🎷子、咽拭子全血或血浆标本。　　(2)核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。　　(3)核酸检测试剂：　　试剂：DNA聚合酶或预的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴痘病🔫检测引物、针：　　③性对照：涵检测靶标序的质粒。　(4)灭菌去离子水、无乙醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用于手部物体表面常消毒，开启有效期为1周。　　②含消毒液：现现配，含有氯1000mg/L的消毒液用于物体面常规消毒🧑🏽‍🤝‍🧑🏽含有效氯5000mg/L的消毒液用💻感染性材料洒时的应急理。　　(6)耗材：包括带滤芯的吸、螺旋口的心管、非螺口的离心管含锆珠的粉管、PCR反应板和透明膜或PCR反应管和透明。　　(7)BSL-2个人防护用品包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一次隔离衣、防眼罩或面屏一次性帽子鞋套、靴套手套。　　2.实验前的标本接收。　👩‍👩‍👧(1)核对被检标本编号姓名、性别年龄及检测🤽目；　　(2)待检标本的状态如有异💌，需注明；　(3)待检标本长期存在-70℃，短期存放可-20℃，避免反复冻融🐋　　3.核酸检测操作步及注意事项　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　操作方法DNA提取试剂盒相应说书进行操作具体如下：　①提取试准备：第一📿开启试剂盒🐜在使用前先漂洗液中加📠无水乙醇，入体积参照上标签。所试剂在使用🙅‍♀️应平衡至室；所有离心骤应在室温进行。　　处理样本：　A.痘疱液：干拭子标🦸‍♂️需以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本，加入80μL缓冲液，总量为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补足体积至180μL；　　B.病变皮疹或痘痂：取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体含PS的PBS，研磨或匀浆处理，取80μL，然后加入100μL缓冲液；　　C.咽拭子、其它拭子从采样液中🎦200μL标本，干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀📙取200μL；　　D.全血或血清：接取200μL标本。　　③加入20μL蛋白酶K溶液，混匀，,-液会变清亮👩‍👧‍👧若样本为病皮疹或其它织时，加入❌白酶K混匀后，在56℃放置，直至组🏋️‍♀️溶解，再进⌚下一步骤。　④加入200μL裂解缓冲液，充分匀，70℃放置10分钟，或至溶液变🎒亮，简短离,,以去除管盖壁水珠。　-,需注意：加裂解缓冲液可能会出现色絮状沉淀🅾️在70℃放置后会消失。溶液未变清，说明细胞解不彻底，能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　加200μL无水乙醇，分混匀，此可能会出现状沉淀，简🎸离心以去除盖内壁水珠　　⑥将上🦳步骤所得溶和絮状沉淀加至吸附柱(吸附柱放入废液收集管🤶)，8000rpm离心1分钟，弃废。　　⑦加500μL漂洗缓冲液1(使用前先检是否已加入水乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　⑧加入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是否📀加入无水乙➰)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　　⑨将🆕附柱放回废🍢收集管中，大转速13000rpm离心1分钟，尽量去除漂洗⚒️。　　⑩将附柱转入一干净的离心中(需自行准备，试剂盒🎑未提供)，加入50μL洗脱缓冲液或菌去离子水室温放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤出液，🕳️好标记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。📃　(2)核酸检测：实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴病毒核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体系的备：每孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检测标本外🌟应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；📂有样本，包对照，应设🧪孔。　　②🚭样：每根反🐣管中加入核或对照各5uL，盖紧管盖或封好透明，置于荧光🌾量PCR检测仪上。　　扩增条件设：　　④仪🛐检测通道选🤘：使用荧光量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道，收设在60℃。具体设置方☂️参照各仪器🚷用说明书。　⑤结果分阈值设定：用荧光定量PCR检测仪进行结果分析,,,，基线取3-10或6-15个循环的荧光信号，阈设定原则为🦵值线刚好超正常阴性对扩增曲线最点，也可根仪器噪音情🗼调整阈值。　(3)核酸检测结果判👨‍👩‍👧‍👧　　①Real-timePCR反应系统的质量控👨🏾‍🤝‍👨🏼：反应结果同时符合以2个条件，否则试验结果效，应重新展检测。阴对照无扩增为阴性。阳对照未出现🏃性结果。　②结果判定　　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一孔Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳和处于灰区标本应重复🎞️测或经序列🎮析进行确诊需注意：当😟本仅为咽拭🥞或血清、血🚩，且检测结🤩为阴性时，结合临床症，慎重做出🚴‍♂️性诊断。　(4)表格记录　　做好🧲光定量实时PCR方法检测猴痘病毒核👩‍👦‍👦原始记录。📬　五、猴痘毒全基因组-序　　1.测序标本选取则。本土疫中的首发或🐈期病例、与🏕️期病例有流病学关联的◼️键病例、感来源不明的📥土病例、境输入病例阳标本等。以标本在核酸😁光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。以省为单确定开展猴病毒全基因🧴测序的机构建议使用扩🕞子技术进行痘病毒全基组测序。测🌻数据经质控🧧格后方可用后续生物信,,分析。二代序平台覆盖📕度应不低于10×，三代测序平台覆盖度应不低于50×，全基因组测序覆盖☑️应不低于98%。数据比对分析推荐参猴痘基因组NC_063383.1。　　各省应建本省输入、土病例猴痘毒基因组数库，应具备列对比分析💕力。具备测-条件的省份在接收标本48小时内开展测序工作关键样本要👛实验室收到本后1周内提供测序结果🥉告，所有测🏵️原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中病毒病所进序列汇总、析。病毒病应将序列分结果及时反各省，并将⏺️国猴痘病毒列汇总、分🎽结果及时上国家疾控局💨　　3.分子分型。推荐用在线分析具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行’子分型。　附件：　　7-1猴痘病毒检测标本送表　　7-2猴痘病毒标序列测定结🙍‍♂️报告单【编:孙静波】

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