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　　中新网7月27日电据国家疾控局🥬方微信消息，为进步做好猴痘防控工，及时有效应对猴疫情，提升猴痘防工作的科学性、精🌒性和有效性，切实护人民群众生命安🎽和身体健康，国家控局会同国家卫生康委制定并于7月26日印发《猴痘防控方案》。其中提出-,-2023年6月以来，我国多个省份先🃏报告多例猴痘病例--引发新增本土续发☯️情和隐匿传播的风较高。要坚持“预为主、防治结合、🧯准防控、快速处置原则，落实“早发、早报告、早隔离早治疗”措施。　🥜《猴痘防控方案》🤼‍♂️文如下：猴痘防控案　　猴痘是由猴病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致的一种人🆙共患病。2022年9月，我国报告首例猴痘输入病例。2023年6月以来，我国多个省份先后报多例猴痘病例，引新增本土续发疫情隐匿传播的风险较。为指导各地科学准做好猴痘防控工，切实维护人民群身体健康，制定本案。一、总体要求　坚持“预防为主☁️防治结合、精准防🚛、快速处置”原则落实“早发现、早告、早隔离、早治💮”措施。开展医疗构、重点人群、入人员和重点场所等渠道监测。加强疫分析与风险研判，针对性地开展重点🐅群健康教育和综合预。落实病例隔离💁‍♀️疗、流行病学调查密切接触者追踪管等措施。坚持发现👨‍👦起、控制一起，及阻断疫情传播。二疾病特征　　(一)病原学特征。　　痘病毒属于痘病毒☺️正痘病毒属，为基组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发现该病毒。1970年在刚果民主共和国一名疑似天患者的标本中首次🏧离到猴痘病毒，为例确诊的人类猴痘例。　　猴痘病毒为两个进化分支：(1)分支I，曾称为中非分支或刚果盆分支；(2)分支II，曾称为西非分支，进一步分为IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方性流行区猴暴发疫情的毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较多分支，包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告首例输性猴痘病例以来，地报送中国疾控中病毒病所的毒株序均属于IIb分支。　　猴痘病毒耐干👌和低温，在痂皮、壤和衣物、床上用🧬等物体表面可生存月。该病毒对热敏，加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂过氧乙酸等常用消-剂及紫外线可有效活病毒，对过氧化、次氯酸钠、戊二、邻苯二甲醛等敏。　　(二)流行病学特征。　　1.传染源。猴痘病毒的,,主尚不明确，目前为非洲啮齿类动物(非洲松鼠、树松鼠🤒冈比亚袋鼠、睡鼠⤴️)可能为其自然宿主。传染源包括猴痘例及感染的啮齿类👁️物、猴和猿等灵长动物。　　2.传播途径。猴痘病毒主经黏膜和破损皮肤入人体，主要通过接接触病例的病变🧑🏿‍🤝‍🧑🏻肤或黏膜传播，亦通过接触被病毒污的物品、长时间近离吸入病例呼吸道沫传播，接触感染物的呼吸道分泌物💄病变渗出物、血液其它体液，或被感🧑🏾‍🤝‍🧑🏼动物咬伤、抓伤感🧏‍♀️传播。　　3.易感人群。人群普遍易。接种过天花疫苗猴痘病毒存在一定度的交叉保护力。　4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫情主要在中非和🚰非地区呈地方性流🖲️，主要通过接触感动物传播，所引发🍖人传人疫情传播链短，主要为儿童及壮年的散发病例及集性疫情，通过家或旅行方式偶尔播至其他国家和地区2022年5月以来全球多国暴发的疫主要在男男性行为群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发生性行为的男性)中经性接触传播，大部分例为青壮年男性，过大型聚会以及后-,在社区的MSM扩散，并传播至全球多国家和地区。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出现症状后☯️皮疹结痂自然脱落-形成新皮肤前具有染性。有调查提示些病例可能在出现🧍‍♀️状前1-4天存在传染性。　　3.早期症状：可出现发热-头痛、背痛、肌痛淋巴结肿大等。　🍂4.皮疹和黏膜疹：通常在热退后出现有些病例可出现在身症状之前。皮疹🏃‍♂️生常经过斑疹、丘、水疱、脓疱、结至痂皮脱落几个阶，不同形态皮疹可时存在，可伴有明痒感和疼痛。可累🏥口腔咽喉黏膜、肛🧑🏽‍🤝‍🧑🏽、生殖器、结膜和💜膜等。痂皮脱落后遗留红斑或色素沉甚至瘢痕，瘢痕持🍏时间可长达数年。　5.病程及严重程度。猴痘病程约2—4周，免疫力低下患者的病程可能较长👩🏼‍🤝‍👨🏿猴痘为自限性疾病大多数病例症状会行消失，也有重症死亡发生，主要为童、孕妇和免疫力下人群。　　2022年以来全球多国猴痘暴发疫情中，大数病例临床表现较,，部分病例无全身🏳️状，皮疹仅限于生器、肛门直肠黏膜位，死亡病例主要未得到治疗的艾滋病毒感染者等免疫低下人群。2022年以来全球非地方流行区病例的病死约为0.1%。三、宣传教育与干预　针对重点人群、出境人员和一般人群不同人群分类开展传教育，有针对性加强不同人群的自防范意识和个人防-措施，积极配合做防控工作。　　(一)重点人群。各地卫生健康与疾控部门合相关社会组织，分借鉴艾滋病防治合干预经验和服务式，在MSM经常出入的酒吧、会所、➰池等重点活动场所开展同伴教育。借大众媒体、MSM社交网站等互联网平，开展猴痘防控知-,宣传教育，提高重人群防范意识，减高危行为，引导有疑接触史者自觉做,,,自我健康监测，增👠主动就诊意识。　重点人群宣传干预求详见附件1《重点人群宣传干预指南。　　(二)出入境人员。通过发放宣资料等形式，加强入境人员猴痘防控识宣传教育。提醒🕥境人员关注目的地❎家和地区猴痘疫情🧍息，不接触猴痘样🖱️状者及啮齿类、灵😰类等动物。提醒来猴痘疫情报告国家地区的人员，如在🙃外有可疑接触史，境后21天内应做好自我健康监测，避与他人发生密切接🦨，一旦出现发热、疹、淋巴结肿大等痘样症状，应主动诊并如实报告流行学史。　　(三)一般人群。各地充分挥新媒体以及广播电视、报纸等传统💌体作用，开展猴痘🐒控知识宣传教育，⏪高公众科学防范意。四、疫情监测和告　　(一)监测病例定义。　　1.猴痘样症状者。不明因急性皮疹(面部或口腔黏膜、四肢、🏿殖器或会阴、肛周部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿大者。　　2.疑似病例。猴痘样状者，发病前21天内具备以下流行病史中的任何一项：(1)有猴痘病例报告地区旅居史；(2)有猴痘确诊病例或🧭似病例接触史；(3)有同性性行为，或性伴有同性性行为🌜；(4)有地方性流行区可疑动物接触。　　3.确诊病例。猴痘样症状者、似病例及密切接触，经实验室检测猴🧃病毒核酸阳性或病分离阳性者。　　(二)多渠道监测。　　1.医疗机构监测。各级各类医疗机要开展猴痘样症状🐤测，尤其是皮肤(性病)科、肛肠科、艾滋病自愿咨询检测🚻诊等要重点关注猴🏃‍♂️样症状者。发现猴样症状者，应主动问流行病学史，记患者现住址及联系式，采集标本送疾机构进行猴痘核酸测。具备猴痘病毒🌆测能力及猴痘病毒验活动资质的医疗🤒构也可开展检测。　2.重点人群监测。各级各类医疗机-、疾控机构在对MSM等重点人群开展诊疗或检测咨询服务，应主动询问是否♊猴痘样症状及其可接触史。如发现猴样症状者和疑似病，应及时采集标本行猴痘病毒核酸检。　　3.入境人员监测。海关收到猴🏏相关异常健康申报检疫发现有猴痘样状的入境人员，应👿时进行标本采集和酸检测，并发放《🙅‍♀️诊方便卡》，要求尽快就诊；对于核👫🏼检测阳性者，将相🚂信息通报辖区疾控🏰构，由相关部门进步调查处置。　　4.重点场所污水监测。有条件的地区可据当地疫情形势，🏔️评估对MSM经常出入的酒吧、会所、池等重点活动场所展污水监测。　　(三)病例报告。　　相关医疗机构根据床表现、流行病学🙉实验室检测结果，🙋‍♀️时对患者进行诊断　　诊断的疑似病和确诊病例应于24小时内通过中国疾预防控制信息系统监测报告管理模块行网络直报。如为外输入病例需填写入来源国家或地区🎶不具备网络直报条的医疗卫生机构，,在规定时限内将传病报告卡信息报告地乡镇卫生院、社卫生服务中心或县疾控机构进行网络告，同时传真或寄传染病报告卡至代单位。负责病例网🛀直报的医疗卫生机😈，要根据实验室检结果、流调进展及对病例信息进行复、订正。　　各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例或者2例及以上存在流行病🥝关联的确诊病例，当在2小时内通过突发公共卫生事件报管理信息系统报告✔️事件级别选择“未级”。五、疫情处🔨　　(一)病例管理。　　各地发现猴🔕疑似病例和确诊病应当及时转运至医机构进行隔离治疗如临床症状明显好，病变部位已结痂可转为居家隔离治，直至皮疹结痂自🧅脱落，解除居家隔👭。对病情较轻且具居家隔离治疗条件-确诊病例，经医疗构与疾控机构联合估后，可直接采取家隔离治疗。对于行居家隔离治疗的诊病例发放《猴痘🗂️例居家隔离治疗健告知书》(见附件2)。确诊病例居家隔离治疗期间，单人🥣间居住，避免与家🛴有皮肤或黏膜直接🤶触，做好被污染物😗的消毒，非必要不出，确须外出时穿衣长裤、佩戴医用科口罩，避免前往🥬群聚集场所，避免其他人有皮肤或黏👨‍🎤直接接触；指定医🍃机构安排专人负责门或电话随访，提健康咨询和医疗指🦙。　　(二)流行病学调查。　　县(市、区)级疾控机构接到辖区疑似病例和诊病例报告后，及组织开展流行病学查，查找感染来源掌握、追踪和管理切接触者，分析传链及传播特征，及发现潜在的风险人及其范围、特征，针对性地开展宣传🦹育和综合干预。调过程中发挥多部门防联控的协同作用尽可能获取全面准的流调信息。　　查内容主要包括病基本信息、发病就🍧情况、临床表现、归及实验室检测；🌙病前21天内与可疑感染来源的接触史接触场所及接触方；发病后至隔离治前的具体活动地点与其有皮肤或黏膜接接触者，以及发👬🏼前4天内与其有性接触者。　　猴痘疫流行病学调查要求🧑🏻‍🤝‍🧑🏻见附件3《猴痘疫情流行病学调查指南。　　(三)密切接触者的判定和管理　　1.密切接触者定义。直接接触病的病变部位及其被染物品，或感染动🎦及其分泌物、渗出等污染物；以及职暴露或长时间近距吸入病例呼吸道飞等，经评估有感染险的人员。　　2.密切接触者判定。据流行病学调查及露风险评估结果，🤑控机构负责及时对💅切接触者进行判定　　3.密切接触者管理。疾控机构或层医疗卫生机构指密切接触者做好自健康监测，健康监期限为最后密切接之日起21天。　　密切接触者自我健监测期间可正常生与工作，需避免与人发生性接触等密接触，避免捐献血🦌等；坚持每天做好温测量和症状监测🗺️出现猴痘样症状应时就诊并主动报告💺疑接触史。辖区疾机构或基层医疗卫机构应在密切接触自我健康监测第7、14、21天上门或电话对其进行随访💥提供咨询指导，发异常情况及时进行置。　　密切接触判定管理要求详见,件4《猴痘密切接触者判定和管理指南。　　(四)消毒与人员防护。　　做病例衣物、毛巾、🗒️单、餐具等个人用，以及可能被病例🚹泌物、渗出物、体🕹️等污染的环境和物🏸表面的消毒。从事例诊治护理、流行学调查、环境清洁毒、标本采集和实室检测等工作人员工作期间做好个人护。　　消毒与人防护要求详见附件5《猴痘消毒技术指🌷》和附件6《猴痘个人防护指南》。六实验室检测　　猴病毒核酸检测首选-肤或黏膜病变部位本，可同时采集口拭子标本。各省首👯猴痘确诊病例标本送中国疾控中心病病所进行复核；本--疫情中的首发或早确诊病例、与早期例有流行病学关联关键确诊病例、感来源不明的本土确病例、境外输入确病例阳性标本等，光定量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因测序。所有🙁序原始数据、组装列及测序样本送检🦂应在获得序列48小时内报送中国疾控心病毒病所进行汇、分析。以上确诊例应至少采集一套本(包括核酸检测阳性者的皮肤或黏膜变标本、口咽拭子🕝本以及发病急性期恢复期双份血清)送中国疾控中心病毒所。　　实验室检具体要求详见附件7《猴痘病毒实验室🚣‍♀️测技术指南》。七院内感染控制　　疗机构应当严格做院内感染控制。疑病例和确诊病例应置在隔离病房，疑病例单间隔离。医🥚人员执行标准预防采取经接触传播和飞沫传播疾病的隔🙆‍♀️与预防措施，佩戴次性乳胶手套、KN95/N95及以上级别的口罩、防护📌屏或护目镜、一次隔离衣等，同时做手卫生。严格按照医疗机构消毒技术🧙‍♀️范》对病例的体液血液、排泄物、分物等进行规范处理🔪做好诊疗环境(空气、物体表面、地面👨‍🎤)、医疗器械、病例使用物品等的清洁毒。根据《医疗废🌶️管理条例》《医疗生机构医疗废物管办法》做好医疗废💱的处置和管理。八工作要求　　(一)加强组织协调。各卫生健康、疾控部加强与海关等有关门的密切协作和信共享，及时发现与置猴痘疫情，落实痘病例发现、疫情💇‍♂️告、诊疗隔离、密接触者追踪管理等作，防止疫情扩散蔓延。各地在猴痘⌚情防控过程中应注保护病例、密切接🚙者和重点人群等个隐私。　　(二)加强宣传引导。各地及时发布辖区猴痘情相关信息，做好策解读和公众健康🙄示。通过多种方式-,渠道开展猴痘防控识宣传，加强重点群宣传教育的针对和实效性。及时回社会关切，引导公科学认识猴痘。　(三)加强人员培训。各地要加强对各疾控机构和医疗机专业人员的培训。医务人员重点开展❇️痘病例的识别与诊📴、病例发现与报告病例管理等相关知🤒培训，强化诊治意。对疾控人员重点展流行病学调查、*️⃣切接触者的判定和理、实验室检测、点人群宣传干预等关知识培训，提高痘疫情防控和应急💿置能力。　　附件　　1.重点人群宣传干预指南　　2.猴痘病例居家隔离疗健康告知书　　3.猴痘疫情流行病学调查指南　　4.猴痘密切接触者判定管理指南　　5.猴痘消毒技术指南　6.猴痘个人防护指南　　7.猴痘病毒实验室检测技术指　　附件1　　重点人群宣传干预指南　2022年5月以来，全球非地方性行区发生的猴痘疫👓以男男性行为人群(MSM)为主。为充分利用我国艾滋病治综合干预服务体👯‍♀️，开展MSM等重点人群宣传干预，防🚠猴痘疫情传播扩散形成常态化艾滋病猴痘综合防控一体应对机制，制定本南。一、实施策略🕥　在现有艾滋病防综合干预服务体系础上，综合运用行学干预方法和手段通过宣传教育、促安全性行为、动员测、外展服务、同教育和互联网干预，从个体、群体和👩‍👦会等多个层面为目人群提供猴痘综合预服务。二、组织施　　各级医疗机和疾控机构要加强点科室和艾滋病自🥫咨询检测门诊工作员猴痘知识培训，重点人群提供猴痘控知识宣传、检测询与动员、治疗和怀等服务。各级疾机构应当积极推动地有能力、具有良👒艾滋病防治经验的MSM志愿者或社会组织共同参与猴痘防宣传工作，在工作🦙程中注意保护重点群个人隐私。三、势分析　　各地要🍊强对重点人群猴痘情、防控现状、影因素及出入境情况调查，及时分析研猴痘疫情形势，为定本地高危行为干工作计划提供依据具体内容包括：1.重点人群基数、活形式和特点、活动所、出入境的时间地区等；2.猴痘知识、态度和高危行；3.猴痘疫情水平及其影响因素；4.猴痘防治政策及专机构已开展的工作5.包括志愿者在内的有关组织和个人开展的干预活动；6.影响猴痘防治工作的困难和问题。四🚟宣传干预　　(一)宣传教育。各级疾机构或健康教育专机构提供技术支持-,-社会组织参与，共研究制定适合当地点的猴痘预防宣传👫🏿料，加强警示宣传育。通过大众媒体☂️MSM网站和以移动终端为载体的交友件等平台，宣传国、国内及本地猴痘🔣情信息和防控知识提高重点人群猴痘范意识。　　(二)同伴教育。各级疾机构要加强同伴教☣️员挑选、招募和培，组织和支持同伴传活动，增强人群🍠痘风险防范意识，动主动检测。定期,织同伴教育员工作会，了解猴痘干预作存在的困难和问🕴️，有针对性地给予🧁助和支持。　　(三)外展服务。各级疾控机构干预工作人定期到重点人群活场所开展猴痘宣传🍓咨询、发放宣传材🚝等外展服务活动，高重点人群猴痘防🥻意识和知识水平，动重点人群加强自健康管理，主动寻👯‍♂️检测咨询服务。　(四)检测咨询。各级疾控机构通过互🎻网、同伴教育、外🐪活动等多种形式动有猴痘样症状或可接触史的重点人群行猴痘检测。各级类医疗机构皮肤(性病)科、肛肠科、艾滋病自愿咨询检测诊发现猴痘样症状，应主动询问其流病学史及性接触史记录患者现住址及⛹️‍♀️系方式，采集标本疾控机构进行猴痘👩酸检测，具备猴痘测能力及猴痘病毒验活动资质的医疗构也可开展检测。于已建立互联网+HIV检测平台的地区，可增加猴痘检测容，实现互联网在检测预约和结果查。五、重点场所干　　重点活动场所🧐括实体和虚拟两类-所，实体场所包括吧、会所、浴池等🦸营性场所，虚拟场包括移动互联网和交媒体。　　(一)实体场所干预。　👸各级疾控机构负责📋织干预工作人员在地MSM经常出入的酒吧、会所、浴池活动场所，开展猴💙预防干预宣传，主包括：　　1.在MSM经常出入的酒吧、会所、浴池等实场所，张贴醒目的💁康教育宣传图片，置健康教育资料公栏；　　2.强化个人健康责任意识，展猴痘健康咨询，动开展自我风险评；　　3.提供转介服务信息，告知明的诊疗流程以及相🔨检测、医疗机构名🚔、联系人等信息。　各地要加强对猴确诊病例发病前21天内活动过的场所及污水监测阳性场-的干预宣传，重视-标人群的个人隐私护，加强对社会组同伴教育员猴痘防🧫知识培训，建立规💦的行为干预流程，高自我防护技能。🚷　(二)虚拟场所干预。　　各级疾控构负责组织指导当-有序开展猴痘线上👮传，在相关网站、交媒体平台及时发和更新猴痘宣传教内容，形成面向重人群的猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣传干预服务体系。　各级疾控机构支持-会组织或同伴教育利用网站、信箱或交媒体平台，组织展在线咨询和交流及时解答网友提出各种猴痘相关问题针对不同时期猴痘播特点，定期或不🥑期组织专家、专业🤕员、同伴教育员利互联网和社交媒体台进行在线宣教。级疾控机构要定期导更新相关专业信，确保宣传内容科、有效。　　附件2　　附件3　　猴痘疫情流行病学调查南　　为指导各地控机构规范开展猴疑似病例、确诊病’和聚集性疫情的流🤘病学调查，及时掌病例暴露史、接触等流行病学相关信♐，落实密切接触者追踪判定，防止疫传播扩散，制定本南。一、调查目的　(一)查找感染来源，掌握、追踪和理密切接触者。　🧤(二)分析传播链及传播特征。　　(三)及时发现潜在的风险人群及其特征、围，有针对性地开🦂宣传教育和综合干。二、调查对象　🥊疑似病例、确诊病和聚集性疫情。三🍱调查方法和内容　🐛通过查阅资料，询病例、诊治医生、属和知情人等进行行病学调查。如病的病情允许，调查应先调查病例本人🌒再对其诊治医生、属和知情者进行调。　　开展个案调时，要认真、详细,,,解和记录病例基本息、发病就诊情况临床表现、转归及验室检测信息；发前21天内与可疑感染来源的接触史、触场所及接触方式发病后至隔离治疗的具体活动地点、其有皮肤或黏膜直接触者，以及发病4天内与其有性接触者。　　(一)基本情况。如姓名、性🧠、年龄、住址、国😃、联系方式等。　(二)发病就诊情况。临床表现、实验检测、发病就诊经和病情变化与转归　　(三)感染来源调查。对病例发病💟21天内的暴露史开展调查，包括境内猴痘病例报告地区🌋行史或居住史，对👩🏼‍🤝‍👩🏻疑的感染来源要详询问接触时间、方、频次、地点及接时采取的防护措施，特别是性接触史🛐调查时，若发现调表中未列入，但具-重要流行病学意义内容也应进行详细问和记录。　　(四)密切接触者调查及判定。对病例传染🐪的活动情况和人群👨‍👨‍👧‍👧触情况进行追踪和🐊查后，判定其密切触者。密切接触者定和管理按照《猴👑密切接触者判定和🔐理指南》(附件4)执行。　　详见附3-1《猴痘病例个案调查表》。四、织与实施　　按照属地化管理”原则由病例现住址所在,-县(市、区)级疾控部门组织辖区疾控🏑构开展猴痘病例的🧤行病学调查，就诊🔥疗机构提供诊疗信。调查单位应根据查计划和调查目的确定调查人员组成职责分工，及时开病例流行病学个案🍤查。调查过程中发多部门联防联控的同作用，尽可能获全面准确的流调信,,。调查期间，调查员要做好个人防护五、信息的上报与析　　疾控机构完调查后，应做好病🕡分析总结，及时将🔸行病学个案调查表调查报告等资料逐报送上级疾控机构并做好调查资料的管和存档。病例流信息要按有关规定严格做好信息安全个人隐私信息保护🔣　　附件：3-1.猴痘病例个案调查🧎‍♀️　　附件4　　猴痘密切接触者判定和理指南　　为指导🚘地做好猴痘密切接🍙者判定和管理，有控制猴痘疫情的传，制定本指南。一密切接触者判定标　　密切接触者是直接接触病例的病🈴部位及其被污染物，或感染动物及其🧝‍♂️泌物、渗出物等污物的人员；以及职暴露或长时间近距吸入病例呼吸道飞等，经评估有感染📮险的人员。具体情包括：　　1.与疑似病例或确诊病例病后有皮肤或黏膜接接触的人员，接方式包括性接触、摸、拥抱和亲吻等　　2.与有皮疹症状的疑似病例或确’病例共用衣物、被🥍、餐具等物品的人；　　3.医疗诊疗、采样或实验室检️⃣等操作过程中可能露于病毒，经评估🆚感染风险的医疗卫👩‍❤️‍👨工作人员；　　4.与疑似病例或确诊例发病前4天内有性接触，并经流行病调查专业人员评估感染风险的人员，可判定为密切接触；　　5.在狭小密闭空间与疑似病例,-确诊病例长时间近🚵‍♀️离接触(如长时间共处同一封闭空间)，经流行病学调查专人员评估有感染风的人员，亦可判定密切接触者；　　6.接触感染猴痘病毒的动物及其分泌物渗出物等污染物，未采取有效个人防的人员；　　7.其他可能存在病毒暴🦪风险的人员。二、切接触者管理　　1.管理期限与方式。病例发现地疾控机或密切接触者所在🆒疾控机构应于追踪-密切接触者当天及🙁开展猴痘病毒核酸🚷测，通知并指导密接触者做好自我健监测，健康监测期为自最后密切接触🏝️日算起21天。自我健康监测期间可正生活与工作，需避与他人发生性接触密切接触，避免捐血液等。　　2.知情告知。实施健康🌝测时，疾控机构或层医疗卫生机构应,,,头告知健康监测的由、期限、注意事🤡和疾病相关知识，👨‍🔧及负责随访疾控机或基层医疗卫生机联系人和联系方式并发放《猴痘密切触者健康告知书》🎿　　3.定期随访。疾控机构或基层医卫生机构应在第7、14、21天电话或上门主动询问密切触者自我健康监测🛀况，提供咨询指导议。发现异常情况👩‍🔧及时调查处置。　4.自我健康监测。坚持每天做好体温🤹‍♀️量和症状监测，主症状包括发热(＞37.3℃)、皮疹、浅表淋巴结肿大等密切接触者一旦出相关症状应及时前医疗机构就诊或与访联系人取得联系接受猴痘病毒核酸测。　　附件：4-1.猴痘密切接触者健康告知书　　附➿5　　猴痘消毒技术指南　　为进一步🟦范猴痘疫情相关的毒工作，落实科学毒、精准消毒，减猴痘病毒对公众健🤺造成的危害，制定’指南。一、疫源地-毒　　(一)适用范围。　　适用于出猴痘病例后，对其能污染的场所和物进行的随时消毒和末消毒。　　(二)消毒原则。　　1.范围和对象确定。　根据流行病学调结果，确定现场消的范围和对象。对例在住院、转运期可能污染的环境和品，进行随时消毒对病例居住或活动的场所，如居住场❕、工作场所、学习所、诊疗场所、转工具，及其他可能到污染的场所，在离开后(如住院、转院、出院、死亡)进行终末消毒。　　2.方法选择。　　(1)诊疗用品消毒。尽量选择一次性诊用品，非一次性诊用品应首选压力蒸🧿灭菌，不耐热物品🌂选择化学消毒剂或温灭菌设备进行消🧑🏽‍🤝‍🧑🏼或灭菌。　　(2)手消毒。建议使用消毒剂揉搓双手进消毒，也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒剂。　　(3)环境和物体表面消🧑。可选择含氯消毒🌥️、二氧化氯、过氧酸、过氧化氢等消🔸剂擦拭、喷洒或浸🕸️消毒。　　(4)衣物、床单等纺织品毒。可选择热力消、含氯消毒剂或季🍈盐类消毒剂浸泡等🤮毒方式。　　(三)常见污染对象的消方法。　　1.手消毒。　　可选用速➕手消毒剂，或直接用75%乙醇进行擦拭消毒；醇类过敏，可选择季铵盐类有效的非醇类手消剂。有肉眼可见污物时，应先使用洗液(或肥皂)在流动水下按照六步洗手清洗双手，然后按😳述方法消毒。　　2.皮肤、黏膜。　　皮肤被污染物污染♂️，应立即清除污染，再用一次性吸水料沾取0.5%碘伏或过氧化氢消毒剂-拭消毒3分钟以上，使用清水清洗干净粘膜应用大量生理水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。　3.床单、毛巾、衣服等纺织品。　　例使用的床单、毛、衣服等纺织品，肉眼可见污染物时😳若需重复使用，可流通蒸汽或煮沸消30分钟；或用有效氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒剂浸泡30分钟后，按照常规清👨‍🦳；或用其他有效的毒方法。不耐湿的物可选用环氧乙烷干热方法进行消毒🤸理。　　有分泌物🥺渗出液、排泄物、液、体液等污染物👨‍👦，建议按医疗废物🧛中处理。　　4.餐(饮)具。　　病例所使用的碗、盘、、杯等餐(饮)具清除食物残渣后，煮消毒30分钟，或使用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再用清水洗净。　　5.污染物。　　对病分泌物、渗出液、泄物、血液、体液少量污染物可用一性吸水材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒剂(或能达到高水平消毒的消毒湿🐊/干巾)小心移除。　　对病例分泌物🥘渗出液、排泄物、液、体液等大量污物应使用含吸水成的消毒粉或漂白粉🚶‍♂️全覆盖，或用一次吸水材料完全覆盖🏋️用足量的有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒剂浇在吸水材料上，用30分钟以上(或能达到高水平消毒消毒干巾)，小心清除干净。清除过程避免接触污染物，理的污染物按医疗🤓物集中处置。　　例的分泌物等应有门容器收集，用有,,氯20000mg/L的含氯消毒剂，按物、药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污染物后，应😊污染的环境和物体面进行消毒。盛放🙇‍♀️染物的容器可用有氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟，然后清洗干净。　　6.地面、墙壁。　　有肉眼可见污染物，应先完全清除污物再消毒。无肉眼见污染物时，可用’效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂擦拭或洒消毒；不耐腐蚀地面和墙壁，也可2000mg/L的季铵盐类消毒剂喷或擦拭；消毒作用间不少于30分钟。　　7.物体表面。　　诊疗设施设备面以及床围栏、床柜、家具、门把手🚏卫生洁具和家居用等有肉眼可见污染时，应先完全清除染物再消毒。无肉☢️可见污染物时，用效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂，不耐蚀的物体表面也可👨🏽‍🤝‍👨🏻2000mg/L的季铵盐类消毒剂进🌍喷洒、擦拭或浸泡🤚毒，作用30分钟后清水擦拭干净。　8.污水和粪便。　　在进入市政排水🐍网前需进行消毒处☝️，消毒后污水应当🦆合《医疗机构水污物排放标准》(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃圾。　　病生活垃圾按医疗废处理。　　10.医疗废物。　　医疗物的处置应遵循《疗废物管理条例》《医疗卫生机构医🎁废物管理办法》的求，规范使用双层色医疗废物收集袋🦮装后，按常规流程🌜行处置。　　11.室内空气。　　如科学评估，需对室空气进行消毒，则无人情况下，可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化氯(浓度按产品说明书)等消毒剂，按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。也可采用经验安全有效的其他消➡️方法。二、注意事　　现场消毒应确所用消毒产品合法🟩效，所选消毒方法学可行。现场消毒🚿，根据现场情况和关标准要求，选择格有效的个人防护备，在做好个人防的前提下，严格按🏚️工作方案实施消毒　　消毒实施单位具备现场消毒能力操作人员应经过消专业培训，掌握消和个人防护基本知💙，熟悉消毒器械的🤲用和消毒剂的配制-。　　每次开展消👨🏿‍🤝‍👨🏼工作时均应做好消,记录，包括消毒对、消毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作用时间等。同，相关部门和单位做好消毒工作的监管理和评价。　　件6　　猴痘个人防护指南　　为加强众、疫情处置相关作人员和医务人员个人防护，避免猴🐨病毒暴露感染，制本指南。一、居家离治疗的病例等相人员　　(一)适用范围。　　适用于🏖️家隔离治疗的病例(疑似病例和确诊病😪)、照护人员或共同居住者的个人防护,,,　　(二)居家隔离区域要求。　　1.应选择有自然通风独立卫生间的房间为隔离区域。　　2.应配备专用的餐具，床单、毛巾等床用品，消毒剂和口等个人防护用品，视和平板电脑等电设备。　　3.卫生间宜配备专用的洗机，地漏应有水封　　(三)病例管理要求。　　1.应能够进行自我照护。　2.应每天做好体温测量和症状监测😕避免与他人共用个👨‍🏫物品。　　3.避免与他人发生性接触🏸避免与免疫力低下员、儿童、老人、妇及其他人员的直👓接触，避免与宠物动物接触，避免捐👮血液等。　　4.外出就诊时，应佩戴,-用外科口罩，着长长裤，确保遮住所损伤皮肤，避免与人密切接触，避免坐公共交通工具。　(四)照护人员要求。　　1.应每天做好体温测量和症监测。　　2.应尽量避免进入隔离区。如需进入隔离区,-，应佩戴医用外科-罩和一次性手套，病例保持至少1米的距离。在离开隔离🥌域之后，应加强手🛶生，并对脱下的口和手套进行消毒处🤽后废弃。　　3.在拿放和清洗居家隔治疗病例的床单、服和处理垃圾的过中，应避免抖动。湿拖布拖地，避免🕺扫。用湿抹布清洁居用品表面，地毯用蒸汽清洗，避免📫用吸尘器。　　4.应将居家隔离治疗例的餐具、床单、🚆巾和衣物单独洗涤消毒，可选择热力毒、含氯消毒剂或铵盐类消毒剂浸泡消毒方式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同居住者出现任何症状不适表现，应当及😎前往指定医疗机构诊并主动报告可疑🐡触史。　　2.对其接触的物品、活动区域等结合风险评结果进行消毒处理二、疫情处置相关作人员　　(一)适用范围。　　适用猴痘疫情期间流行学调查、环境清洁毒人员的个人防护　　(二)流行病学调查人员防护要求　　1.个人防护装备。一次性乳胶手📉、医用外科口罩、次性隔离衣等。　2.个人防护要求。规范佩戴口罩，加🐫手卫生，与被调查员保持至少1米的距离。　　3.废物管理。调查结束后，-弃的个人防护装备🦨存、处理和处置应照《医疗废物管理🏋️例》执行。　　4.应急处置。如在调过程中出现口罩脱、直接接触了病例肤或分泌物等情况要结合被调查人员临床诊断结果、空的密闭性、接触的间和距离等进行风👚评估，结合风险评结果，采取相应的置措施。　　(三)环境清洁消毒人员护要求。　　1.个人防护装备。一次乳胶手套、医用外口罩、一次性隔离😳、防水靴套等。　2.个人防护要求。规范佩戴口罩，加🚾手卫生，尽量减少被消毒物品的直接触。　　3.废物管理。清洁消毒结束，废弃的个人防护📐备暂存、处理和处应按照《医疗废物理条例》执行。　4.应急处置。如在清洁消毒过程中出口罩脱落、皮肤损🕕或直接接触排泄物血液等情况，要结被清洁消毒物品的型、接触的时间和间的密闭性等进行险评估，结合风险估结果，采取相应处置措施。三、医人员的个人防护　(一)适用范围。　　适用于猴痘疫情间医务人员及其工🕙环境的防护。　　(二)基本要求。　　1.个人防护装备要求。医务人员执行准预防，采取经接传播和经飞沫传播🤾‍♂️病的隔离与预防措🦹‍♀️，佩戴一次性乳胶🎏套、KN95/N95及以上级别的口罩、防护面屏或护目、一次性隔离衣等☔　　2.环境防护要求。医院环境的清🌄消毒应符合附件5的要求。应避免干除💼、清扫或吸尘等活。首选湿式清洁方🤽。　　3.废物管理。个人防护装备、例敷料等暂存、处和处置应按照《医🦒废物管理条例》执。　　附件7　　猴痘病毒实验室检测👩‍👧‍👧术指南　　为指导级疾控部门和其他关机构规范开展猴病毒实验室检测工，快速、准确识别痘确诊病例，制定指南。本指南主要绍标本采集以及猴病毒核酸荧光定量PCR检测方法、生物安全要求等内容。、检测对象　　(一)猴痘确诊病例和疑似病例；　　(二)密切接触者；　　(三)感染或疑似感染猴痘病毒的动物；　(四)环境或其它生物材料。二、技人员基本要求　　(一)采样人员。从事猴痘病毒核酸检测本采集的技术人员当经过生物安全培🌨️，培训合格后方可🌋事采样工作。采样员应熟悉采集标本🐄类和采集方法，熟掌握标本采集操作程及注意事项，做💇标本信息记录，确标本质量符合要求🤫标本及相关信息可-溯。　　1.采样人员个人防护装备要📆：KN95/N95及以上级别的口罩😶防护面屏或护目镜🙅‍♀️一次性隔离衣、一🐿️性乳胶手套(尽可能戴两层)、靴套；如果接触了病例血液体液、分泌物或排物，应及时更换手。污水采样人员可据实际工作需要，当降低防护级别。　2.住院病例的标本由所在医院医护员采集，根据实验检测工作的需要，结合病程多次采样　　3.密切接触者标本由当地疾控机🍅或医疗机构专业人采集。　　4.感染或疑似感染猴痘病的动物由当地疾控-,构协调动物疫控部⛹️‍♂️专业采样人员负责🏾集。　　5.环境或其它生物材料标本相关专业采样人员责采集。　　(二)检测人员。实验室🐚测技术人员应具备关专业大专以上学或具有中级及以上业技术资格，并有2年以上实验室工作👥历，接受过核酸检相关培训，培训合🧃后方可从事检测工🪁。实验室配备的工📇人员数量应与所开检测项目及标本量适宜，确保能够及、熟练、准确地开实验室检测和报告-,果。三、标本采集保存和运输　　(一)标本采集种类。　　1.首选标本是皮肤(黏膜)病变部位标本，包括病变表拭子、痘疱液或痘渗出物拭子、痘痂痘痂拭子等。　　2.呼吸道标本，如口咽拭子，可用于病急性期检测，也是切接触者检测最常标本。　　3.发病急性期可采集EDTA抗凝血标本进行核酸检测。　　4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检测。　5.直肠拭子、尿液、精液、唾液等其😲标本仅用于研究，据工作需要采集。　6.污水或其它环境生物材料标本根实际工作需要进行集。　　(二)标本采集要求。　　采皮肤(黏膜)病变部位标本时应使用无聚酯纤维、尼龙或🃏似材质拭子，避免↙️用棉拭子。采集疑病例的标本前应避🤓使用75%乙醇等消毒剂清洁病变部位每种类型的皮肤(黏膜)病变应尽可能采集两个以上拭子，-个病例应同时采集体不同部位或外观👩🏽‍🤝‍👩🏻同的2-3种病变标本。采集皮肤(黏膜)病变部位标本时应适当用力。皮肤(黏膜)病变部位、痘痂或分泌物等不同拭标本应放置于不同采样管中。进行病👦分离时应采集干拭标本(无采样液)或以非灭活型病毒采液保存。根据实验👭🏿活动资质确定使用灭活型或灭活型采液采集标本。　　(三)标本采集方法。　　1.斑疹、丘疹、水疱或脓疱等皮😄(黏膜)病变部位标本：一手紧握采样子尾部，手与拭子部保持一寸以上距🏌️‍♂️。采样时适当用力压拭子，在皮损表🛸来回擦拭至少2-3次，然后以拭子另面再重复擦拭2-3次。如果在擦拭过中痘疱破裂，要确👨‍🦲采集到痘疱液。采🦱后将拭子放置于无⚡采样管中(可含病毒采样液或不含液体)，折断拭子头，去拭子尾部，盖上管🥼，以消毒纸巾擦拭👨‍👩‍👧‍👦毒采样管，以封口-密封管盖后将采样保存或送检。　　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样前应确保实验室可检🍛此类标本。使用无🤼‍♀️镊子或其他钝头器夹取全部痘痂或面至少4mm×4mm大小的痂皮，放置干燥、无菌的采样中，采样完成后以可贴覆盖患处。　3.口咽拭子标本：被采集人员头部微🌹，嘴张大，露出两,-扁桃体，将拭子越舌根，在被采集者🍯侧扁桃体稍微用力🌌回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下拭至少3次，将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中置于不含液体(干拭子)的无菌管中，尾部弃去，旋紧管盖　　4.血液标本：尽量采集急性期(发病7天内)的血液标本，建议使用含EDTA抗凝剂的真空采血管采集5mL全血，可利用全血进行💠测，或室温静置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血浆于无菌管中进行检。　　5.血清标本：用真空负压采血🚶采集血液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于无螺口塑料管中。第份血清应尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份血清应发病后第3-4周采集，采集血液标本5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于无菌螺口塑料管中用于猴痘抗体检测　　6.其他标本：依据设计需求规范👨‍👨‍👧‍👦集。　　(四)标本保存。　　标本应收集后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行检测🔉可在1周内检测的标本可置于4℃环境中保存；1周内无法检测的标本，短期可于-20℃环境中保存，长期应置于-70℃或以下环境中保存。全血分离血浆冷藏(2-8℃)，分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存。应设立专库专柜单独保存标本避免反复冻融标本🦝　　猴痘病毒及其关标本应由专人管，准确记录病毒及☎️本的来源、编号、🏬量等信息，具体要可参考《病原微生菌(毒)种保藏数据描述通则》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措施确保病毒及标安全，严防发生误、恶意使用、被盗被抢、丢失、泄露事件。　　(五)标本送检。　　标本集后应尽快在低温件下(冰袋或干冰)送往实验室，如需途运输标本，应采🔒干冰冷冻运输方式行保藏。　　1.送检标本：病例标本👬🏾由省级及以下疾控构进行初步检测，🩳省首例猴痘阳性标应送中国疾控中心♎毒病所复核。每个性病例至少采集一🅾️标本(皮肤或黏膜病变部位标本、口咽👨🏽‍🤝‍👨🏼子标本及急性期、复期双份血清标本)送中国疾控中心病病所检测。各省级👨🏾‍🤝‍👨🏽控机构根据实际情📇制定省内样本送检复核流程。　　2.病原体及标本运输　　(1)国内运输。猴痘病毒或其他在感染性生物材料运输包装分类属于A类，对应的联合国👙号为UN2814，包装符合国际民航织文件Doc9284《危险品航空安全运输技术细则》的PI602分类包装要求，通过其他交通具运输的可参照以标准包装。猴痘病或其他潜在感染性-,料运输应按照《可👩🏿‍🤝‍👩🏽染人类的高致病性🐿️原微生物菌(毒)种或样本运输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运证书》。污水等环境⚱️本暂按普通生物样运输标准执行。　🍱(2)国际运输。猴痘毒株或样本在国间运输的，应规范装，按照《出入境殊物品卫生检疫管☮️规定》办理相关手，并满足相关国家国际相关要求。四猴痘病毒核酸检测😐求及流程　　(一)实验室资质要求。　开展猴痘病毒核检测的实验室，应🐉符合《病原微生物验室生物安全管理👜例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因扩增检♍实验室管理办法》(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定，具备设区的级卫生健康部门备的生物安全二级(BSL-2)实验室及以上实验室条件，备案猴痘病毒相关验活动。独立设置医学检验实验室还💇符合《医学检验实🏕️室基本标准(试行)》《医学检验实验管理规范(试行)》等要求。　　开展痘病毒分离、培养中和等涉及病毒扩、使用等实验操作实验室应具备国家生健康委批准的生安全三级(BSL-3)实验室及以上实验室条件，且获得痘病毒实验活动批。分离的猴痘病毒❕送国家病原微生物藏中心/国家病原微生物资源库病毒分保藏。　　(二)实验室生物安全要求　　根据2006年公布实施的《人间染的病原微生物名》(简称《名录》)，猴痘病毒生物危分类为第一类，是种高致病性病毒。️⃣照《名录》要求，👩‍👩‍👧痘病毒的分离、培🌧️等涉及病毒扩增及用的实验操作需在BSL-3及以上实验室的生物安全柜内行；非灭活采样液集的猴痘病例样本灭活在BSL-3实验室进行；样本灭,-后猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验室或PCR检测的专门区域或房间进行。如名录》更新，开展🍶痘病毒操作的实验生物安全要求应按新《名录》执行。水样本的灭活参照通生物样本。　　(三)实验室分区要求。　　原则上开展痘病毒核酸检测的验室应当设置以下域：试剂储存和准区、标本制备区、增和产物分析区。🐃个区域在物理空间应完全相互独立，😽气应定向流通。各功能分别是：　　1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备试剂的分装和扩增应混合液的制备，及离心管、吸头等-耗品的贮存和准备🤜　　2.标本制备区：转运桶开启、标灭活，核酸提取及入至扩增反应管等🌰　　3.扩增和产物分析区：核酸扩增产物分析。　　根👨‍❤️‍💋‍👨使用仪器的功能，域可适当合并。如💈用标本处理、核酸取及扩增检测为一的自动化分析仪，🕯️本制备区、扩增和🧼物分析区可合并。　(四)主要仪器设备。　　实验室应↪️配备与开展检验项相适宜的仪器设备🦟包括：二级生物安柜、高速台式离心🪔、干浴恒温器、荧定量PCR仪、计时器、移液器。　　(五)实验室猴痘病毒核酸检测流程。　实验室接到标本后👬按照标准操作程序行试剂准备、标本处理、核酸提取、🈹酸扩增、结果分析报告。实验室应当立可疑标本和阳性本复检流程。　　1.试剂与材料。　　(1)标本：包括病变表面拭子、痘疱或痘疱渗出液拭子痘痂或痘痂拭子、拭子、全血或血浆🥟标本。　　(2)核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。　　(3)核酸检测试剂：　　①试剂DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴痘病毒检测引物、针：　　③阳性对：涵盖检测靶标序的质粒。　　(4)灭菌去离子水、无乙醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用于手部和物体面常规消毒，开启有效期为1周。　　②含氯消毒液：现▫️现配，含有效氯1000mg/L的消毒液用于物体表面常消毒，含有效氯5000mg/L的消毒液用于感染性材料洒时的应急处理。⏲️　(6)耗材：包括带滤芯的吸头、螺口的离心管、非螺🧜‍♂️口的离心管、含锆的粉碎管、PCR反应板和透明封膜或PCR反应管和透明盖。　　(7)BSL-2个人防护用品：包括KN95/N95口罩及以上级别的口罩、一次性隔离、防护眼罩或面屏一次性帽子、鞋套靴套和手套。　　2.实验前的标本接收。　　(1)核对被检标本编号、姓名性别、年龄及检测目；　　(2)待检标本的状态如有异，需注明；　　(3)待检标本长期存放在-70℃，短期存放可在-20℃，避免反复冻融。　　3.核酸检测操作步骤及注意事项。　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　操作方法按DNA提取试剂盒相应说明书进🌯操作，具体如下：➕　①提取试剂准备第一次开启试剂盒👩‍🎤在使用前先在漂洗♦️中加入无水乙醇，入体积参照瓶上标。所有试剂在使用👨🏿‍🤝‍👨🏽应平衡至室温；所离心步骤应在室温进行。　　②处理🤸‍♀️本：　　A.痘疱液：干拭子标本需以当体积的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本，加入80μL缓冲液，总量为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补足总体积180μL；　　B.病变皮疹或痘痂：取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体积含PS的PBS，研磨或匀浆处理，取80μL，然后加入100μL缓冲液；　　C.咽拭子、其它拭子：从采样液中200μL标本，干拭子标本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀后取200μL；　　D.全血或血清：直接取200μL标本。　　③加入20μL蛋白酶K溶液，混匀，溶液会变清亮若样本为病变皮疹其它组织时，加入白酶K混匀后，在56℃放置，直至组织溶解，再进行下一🥉骤。　　④加入200μL裂解缓冲液，充分混匀，70℃放置10分钟，或至溶液变清亮，简短离🕧以去除管盖内壁水。　　需注意：加裂解缓冲液后可能🔜出现白色絮状沉淀在70℃放置后会消失。如溶液未变清，说明细胞裂解不底，可能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　⑤加200μL无水乙醇，充分混匀，此可能会出现絮状沉，简短离心以去除盖内壁水珠。　　将上一步骤所得溶和絮状沉淀均加至🌘附柱中(吸附柱放入废液收集管中)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　🩳⑦加入500μL漂洗缓冲液1(使用前先检查是否已加入水乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　　⑧加500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是否已加入无水乙)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　　⑨将吸附柱放回废🖋️收集管中，最大转13000rpm离心1分钟，尽量去除漂洗液。　　⑩将附柱转入一根干净离心管中(需自行准备，试剂盒中未提)，加入50μL洗脱缓冲液或灭菌去👩‍❤️‍👨子水，室温放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤出液，做好标，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　　(2)核酸检测：实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病毒核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体系的备：每孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检测标本外，应加DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；所有样本，包对照，应设复孔。　②加样：每根反⛲管中加入核酸或对🔰各5uL，盖紧管盖或封好透明膜，置,,荧光定量PCR检测仪上。　　③扩增件设定：　　④仪⬅️检测通道选择：使荧光定量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道，收设在60℃。具体设置方法参照各仪器🥘用说明书。　　⑤🚱果分析阈值设定：用荧光定量PCR检测仪进行结果分析，基线取3-10或6-15个循环的荧光信号，阈值设定则为阈值线刚好超💅正常阴性对照扩增线最高点，也可根🖋️仪器噪音情况调整值。　　(3)核酸检测结果判断　　Real-timePCR反应系统的质量控制：反应结果同时符合以下2个条件，否则试验结果效，应重新开展检。阴性对照无扩增为阴性。阳性对照出现阴性结果。　🧳②结果判定：　　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一孔Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳性和处于灰区标本应重复检测或🕦序列分析进行确诊需注意：当标本仅咽拭子或血清、血，且检测结果为阴时，应结合临床症，慎重做出阴性诊。　　(4)表格记录　　做好荧光定实时PCR方法检测猴痘病毒核酸原始录。　　五、猴痘毒全基因组测序　1.测序标本选取原则。本土疫情中的🍖发或早期病例、与⛲期病例有流行病学联的关键病例、感🍩来源不明的本土病👨🏾‍🤝‍👨🏼、境外输入病例阳标本等。以上标本核酸荧光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。以省为单💣确定开展猴痘病毒基因组测序的机构建议使用扩增子技🧾进行猴痘病毒全基组测序。测序数据质控合格后方可用🐆后续生物信息分析👎二代测序平台覆盖度应不低于10×，三代测序平台覆盖度应不低于50×，全基因组测序覆盖应不低于98%。数据比对分析推荐参猴痘基因组NC_063383.1。　　各省应建立本省入、本土病例猴痘毒基因组数据库，具备序列对比分析🙎‍♀️力。具备测序条件👩‍👩‍👧‍👦省份要在接收标本48小时内开展测序工作，关键样本要实验室收到标本后1周内提供测序结果告，所有测序原始🎆据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中心病毒所进行序列汇总、析。病毒病所应将列分析结果及时反各省，并将全国猴病毒序列汇总、分结果及时上报国家🌂控局。　　3.分子分型。推荐使用在分析工具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行分子分。　　附件：　　7-1猴痘病毒检测标本送检表　　7-2猴痘病毒标本序列定结果报告单【编:孙静波】

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