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　　中新🏄‍♀️7月27日电据国家控局官方信消息，进一步做🥴猴痘防控作，及时🥎效应对猴疫情，提猴痘防控☄️作的科学、精准性有效性，实维护人💭群众生命全和身体🏴‍☠️康，国家🦈控局会同🧑🏾‍🤝‍🧑🏻家卫生健委制定并🟩7月26日印发《猴🪂防控方案👩🏿‍🤝‍👩🏻。其中提，2023年6月以来，我国多🧖省份先后告多例猴病例，引新增本土发疫情和匿传播的险较高。-坚持“预为主、防🚵‍♀️结合、精防控、快🎂处置”原👨‍👨‍👧‍👦，落实“发现、早告、早隔➿、早治疗😾措施。　《猴痘防方案》全如下：猴防控方案　猴痘是猴痘病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致一种人兽🦐患病。2022年9月，我国报🏌️‍♀️首例猴痘入病例。2023年6月以来，国多个省🈵先后报告例猴痘病🧣，引发新本土续发情和隐匿🧟‍♂️播的风险高。为指’各地科学🔹准做好猴🅾️防控工作切实维护民群众身健康，制本方案。,,,、总体要　　坚持🏾预防为主防治结合🛏️精准防控快速处置原则，落“早发现-,早报告、隔离、早疗”措施🎒开展医疗🔁构、重点🆑群、入境员和重点所等多渠监测。加🏼疫情分析风险研判有针对性开展重点🥐群健康教📮和综合干。落实病🚙隔离治疗流行病学查和密切-触者追踪️⃣理等措施🌴坚持发现起、控制起，及时断疫情传♑。二、疾特征　　(一)病原学特征。　猴痘病毒🚾于痘病毒正痘病毒，为基因🤥全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发🐸该病毒。1970年在刚果民主和国一名似天花患🦜的标本中次分离到痘病毒，首例确诊人类猴痘例。　　🌯痘病毒分两个进化🧍‍♂️支：(1)分支I，曾称为中非支或刚果地分支；(2)分支II，曾称为西非分支进一步分IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方流行区猴,-暴发疫情毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现多亚分支包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告例输入性痘病例以，各地报中国疾控🤲心病毒病的毒株序均属于IIb分支。　　猴痘病耐干燥和👑温，在痂、土壤和物、床上品等物体面可生存月。该病对热敏感加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂⚽过氧乙酸常用消毒及紫外线有效灭活毒，对过化氢、次🕸️酸钠、戊🏒醛、邻苯甲醛等敏。　　(二)流行病学特征。　🍻1.传染源。猴痘病👨‍🦽的宿主尚明确，目😳认为非洲🧑🏼‍🤝‍🧑🏻齿类动物(非洲松鼠树松鼠、比亚袋鼠睡鼠等)可能为其自宿主。传源包括猴病例及感的啮齿类物、猴和等灵长类物。　　2.传播途径。猴痘病主要经黏和破损皮侵入人体主要通过接接触病的病变皮或黏膜传🦳，亦可通接触被病污染的物🍚、长时间,,距离吸入例呼吸道沫传播，👬🏼触感染动的呼吸道💰泌物、病渗出物、液及其它液，或被染动物咬、抓伤感传播。　3.易感人群。人群遍易感。种过天花苗对猴痘毒存在一程度的交保护力。⛏️　4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫主要在中和西非地👽呈地方性👩‍❤️‍👨行，主要过接触感动物传播所引发的传人疫情播链较短👭🏾主要为儿🎥及青壮年散发病例聚集性疫😤，通过家或旅行方偶尔播散其他国家地区。2022年5月以来全球🔱国暴发的-情主要在男性行为群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发👩‍🦱性行为的性)中经性接触传播📚大部分病👨‍💼为青壮年性，通过🦵型聚会以后续在社的MSM扩散，并传至全球多国家和地。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出症状后至疹结痂自脱落并形新皮肤前有传染性有调查提一些病例能在出现状前1-4天存在传性。　　3.早期症状：可出现热、头痛背痛、肌🍿和淋巴结大等。　4.皮疹和黏膜疹：🐱常在热退,出现，有病例可出在全身症之前。皮发生常经斑疹、丘、水疱、疱、结痂痂皮脱落个阶段，同形态皮可同时存，可伴有显痒感和📍痛。可累口腔咽喉🍪膜、肛门生殖器、膜和角膜。痂皮脱👨‍🚀后可遗留斑或色素🚔着甚至瘢😳，瘢痕持时间可长数年。　5.病程及严重程度猴痘病程2—4周，免疫力低患者的病可能较长猴痘为自性疾病，多数病例状会自行失，也有症和死亡生，主要-儿童、孕🐙和免疫力下人群。　2022年以来全多国猴痘🚌发疫情中‼️大多数病临床表现轻，部分-例无全身🐹状，皮疹🕳️限于生殖🦹‍♂️、肛门直黏膜部位死亡病例👕要为未得治疗的艾病病毒感者等免疫低下人群,,2022年以来全球🌙地方性流区病例的😆死率约为0.1%。三、宣传教与干预　针对重点群、出入👨‍🦽人员和一👳‍♀️人群等不人群分类展宣传教，有针对👩‍🔬地加强不👱人群的自🎹防范意识个人防护施，积极合做好防工作。　-(一)重点人群。各卫生健康疾控部门合相关社🍑组织，充借鉴艾滋防治综合预经验和务模式，MSM经常出入的酒、会所、池等重点动场所，展同伴教。借助大媒体、MSM社交网站等互联网🐍台，开展痘防控知🟨宣传教育🙌提高重点群防范意，减少高行为，引有可疑接-史者自觉好自我健监测，增主动就诊🥓识。　　点人群宣干预要求见附件1《重点人群-,-传干预指🛁》。　　(二)出入境人员。通发放宣传料等形式🍽️加强出入人员猴痘控知识宣-教育。提🚖出境人员🧝‍♀️注目的地家和地区痘疫情信️，不接触痘样症状及啮齿类🏑灵长类等物。提醒自猴痘疫报告国家地区的人🌮，如在境有可疑接史，入境🚶‍♀️21天内应做好自我🙄康监测，免与他人生密切接，一旦出发热、皮、淋巴结大等猴痘症状，应🏹动就诊并🥀实报告流病学史。😸　(三)一般人群。地充分发新媒体以广播、电、报纸等统媒体作，开展猴防控知识传教育，高公众科👩‍💻防范意识四、疫情👫🏾测和报告　(一)监测病例定。　　1.猴痘样症者。不明因急性皮🧘(面部或口腔黏膜、⌚肢、生殖✳️或会阴、周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿大者　　2.疑似病例。😄痘样症状🥀，发病前21天内具备以下流行学史中的何一项：(1)有猴痘病例报告区旅居史⛰️(2)有猴痘确诊病或疑似病接触史；(3)有同性性行为，性伴有同🍣性行为史(4)有地方性流行可疑动物⚜️触史。　🤹‍♀️3.确诊病例。猴痘🥈症状者、🧛‍♀️似病例及🎰切接触者👩🏾‍🤝‍👩🏽经实验室测猴痘病核酸阳性病毒分离性者。　(二)多渠道监测。-　1.医疗机构监测各级各类疗机构要展猴痘样🐬状监测，其是皮肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿询检测门等要重点⏫注猴痘样👫🏾状者。发猴痘样症者，应主询问流行学史，记患者现住及联系方，采集标送疾控机-进行猴痘酸检测。🎚️备猴痘病检测能力猴痘病毒验活动资的医疗机也可开展🧗‍♂️测。　　2.重点人群监测。各各类医疗-,构、疾控构在对MSM等重点人群开展诊或检测咨👩🏿‍🤝‍👩🏻服务时，🙅‍♂️主动询问否有猴痘😇症状及其疑接触史🚟如发现猴👱样症状者🐣疑似病例应及时采📜标本进行痘病毒核👩🏻‍🤝‍👨🏼检测。　3.入境人员监测。-关收到猴🎅相关异常-康申报或疫发现有痘样症状’入境人员应及时进📂标本采集核酸检测并发放《诊方便卡，要求其🆔快就诊；于核酸检阳性者，相关信息报辖区疾机构，由’关部门进步调查处。　　4.重点场所,,水监测。⛵条件的地可根据当疫情形势🕴️经评估对MSM经常出入的酒吧📣会所、浴🧜‍♂️等重点活场所开展水监测。　(三)病例报告。　相关医机构根据💫床表现、🥾行病学和,验室检测果，及时-患者进行断。　　断的疑似🎶例和确诊🌕例应于24小时内通,中国疾病👳‍♀️防控制信系统的监报告管理块进行网直报。如境外输入例需填写入来源国或地区。🤖具备网络报条件的疗卫生机🔟，需在规时限内将🐠染病报告信息报告地乡镇卫院、社区生服务中或县级疾机构进行👱‍♂️络报告，时传真或送传染病告卡至代单位。负⬇️病例网络报的医疗生机构，根据实验检测结果🍾流调进展时对病例👻息进行复、订正。　各县(市、区)出现首例猴痘诊病例或📄2例及以上存在流行学关联的诊病例，👩‍👩‍👧‍👦当在2小时内通过突公共卫生件报告管信息系统🧳告，事件别选择“分级”。、疫情处　　(一)病例管理👩‍🔧　　各地现猴痘疑病例和确病例应当🕴️时转运至疗机构进⏮️隔离治疗👷‍♂️如临床症明显好转病变部位结痂，可🏄为居家隔🥍治疗，直👩‍👧皮疹结痂然脱落，除居家隔🕉️。对病情🤕轻且具备家隔离治条件的确病例，经👯‍♀️疗机构与控机构联🦧评估后，直接采取家隔离治。对于实居家隔离疗的确诊🔁例发放《痘病例居🧍隔离治疗康告知书🏼(见附件2)。确诊病例居家隔治疗期间单人单间住，避免家人有皮🌡️或黏膜直🦾接触，做被污染物🚱的消毒，😥必要不外，确须外👨‍✈️时穿长衣裤、佩戴🍎用外科口，避免前🔌人群聚集所，避免⏫其他人有肤或黏膜接接触；定医疗机🚶‍♀️安排专人-责上门或话随访，供健康咨和医疗指🧺。　　(二)流行病学调查。　县(市、区)级疾控机构接到辖👩‍🎓疑似病例确诊病例告后，及组织开展行病学调，查找感🦴来源，掌、追踪和理密切接者，分析🧑🏼‍🤝‍🧑🏼播链及传-特征，及发现潜在风险人群🎭其范围、征，有针性地开展传教育和合干预。,查过程中挥多部门🐁防联控的同作用，可能获取面准确的调信息。　调查内主要包括例基本信🏗️、发病就情况、临表现、转👩🏽‍🤝‍👩🏻及实验室测；发病21天内与可疑感染🤢源的接触👩‍🏭、接触场及接触方🥾；发病后隔离治疗-的具体活地点、与🐂有皮肤或膜直接接者，以及病前4天内与其有性触者。　猴痘疫情行病学调-要求详见件3《猴痘疫情流行学调查指》。　　(三)密切接触者的判和管理。　1.密切接触者定🍞。直接接病例的病部位及其污染物品🛏️或感染动🌝及其分泌、渗出物🚒污染物；及职业暴或长时间❔距离吸入例呼吸道📙沫等，经估有感染险的人员🥁　　2.密切接触者定。根据,行病学调及暴露风评估结果疾控机构责及时对切接触者行判定。　3.密切接触者管👭🏻。疾控机或基层医卫生机构导密切接者做好自健康监测健康监测限为最后切接触之起21天。　　密切触者自我康监测期可正常生〰️与工作，🕛避免与他发生性接🏿等密切接😰，避免捐血液等；持每天做体温测量症状监测出现猴痘症状应及🦮就诊并主报告可疑🏊‍♂️触史。辖疾控机构🧑🏼‍🤝‍🧑🏼基层医疗⁉️生机构应密切接触自我健康测第7、14、21天上门或电对其进行访，提供询指导，🥈现异常情及时进行置。　　💁切接触者定管理要详见附件4《猴痘密接触者判和管理指》。　　(四)消毒与人员防护🚚　　做好例衣物、🈂️巾、床单餐具等个🥯用品，以可能被病☄️分泌物、出物、体等污染的境和物体面的消毒从事病例🍚治护理、🕡行病学调😕、环境清❔消毒、标采集和实室检测等作人员在作期间做▶️个人防护　　消毒人员防护求详见附5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个防护指南。六、实🔨室检测　猴痘病毒🤨酸检测首皮肤或黏病变部位本，可同采集口咽子标本。🐀省首例猴👩🏻‍🤝‍👨🏿确诊病例👩‍🦽本应送中🕚疾控中心毒病所进,复核；本疫情中的发或早期诊病例、早期病例🎴流行病学联的关键🏔️诊病例、-,染来源不的本土确病例、境输入确诊例阳性标等，荧光👟量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因序。所有序原始数,、组装序及测序样送检单应获得序列48小时内报送中国疾🚶中心病毒所进行汇、分析。🧘上确诊病应至少采一套标本(包括核酸🐀测阳性者皮肤或黏病变标本🟪口咽拭子本以及发🦗急性期和复期双份清)送中国疾控中心毒病所。　实验室测具体要详见附件7《猴痘病🥉实验室检技术指南。七、院🈵感染控制🍝　医疗机应当严格好院内感控制。疑🏘️病例和确病例应安在隔离病，疑似病单间隔离💣医务人员行标准预，采取经触传播和飞沫传播病的隔离预防措施佩戴一次乳胶手套KN95/N95及以上级别的🧲罩、防护屏或护目🦎、一次性🎡离衣等，时做好手生。严格照《医疗构消毒技规范》对例的体液⛓️血液、排🌪️物、分泌等进行规处理，做🌳诊疗环境(空气、物🧔表面、地等)、医疗器械、病使用物品的清洁消。根据《疗废物管条例》《疗卫生机医疗废物🔃理办法》好医疗废♣️的处置和理。八、作要求　👨‍⚕️(一)加强组织协调各地卫生🐻康、疾控门加强与👱‍♂️关等有关💼门的密切作和信息享，及时现与处置痘疫情，实猴痘病发现、疫🦵报告、诊隔离、密☄️接触者追管理等工，防止疫🚍扩散和蔓🦅。各地在痘疫情防🥉过程中应意保护病、密切接者和重点群等个人私。　　(二)加强宣传引导。地要及时布辖区猴👿疫情相关息，做好-策解读和👨🏾‍🤝‍👨🏽众健康提。通过多方式和渠开展猴痘控知识宣，加强重人群宣传育的针对和实效性及时回应🕢会关切，导公众科认识猴痘　　(三)加强人员,,训。各地加强对各疾控机构🩸医疗机构业人员的训。对医,人员重点📿展猴痘病🩲的识别与🚢断、病例👁️现与报告病例管理相关知识👨‍👨‍👦‍👦训，强化治意识。🆒疾控人员点开展流病学调查密切接触的判定和理、实验检测、重人群宣传预等相关识培训，👭🏿高猴痘疫防控和应🧕处置能力　　附件　　1.重点人群宣干预指南　2.猴痘病例居家离治疗健告知书　3.猴痘疫情流行病调查指南　4.猴痘密切接触判定和管指南　　5.猴痘消毒技术指南📭　6.猴痘个人防护南　　7.猴痘病毒验室检测Ⓜ️术指南　附件1　　重点人群传干预指👨‍✈️　　2022年5月以来，全球地方性流区发生的痘疫情以男性行为群(MSM)为主。为充分利用国艾滋病治综合干🧂服务体系开展MSM等重点人🧏‍♂️宣传干预🎦防范猴痘情传播扩，形成常🆘化艾滋病👮猴痘综合控一体化对机制，定本指南一、实施略　　在有艾滋病治综合干服务体系🔵础上，综运用行为干预方法,,手段，通宣传教育🆔促进安全👿行为、动🈚检测、外服务、同🤵教育和互网干预等从个体、体和社会🏊‍♂️多个层面🆑目标人群供猴痘综干预服务二、组织😞施　　各医疗机构疾控机构🔱加强重点🟪室和艾滋🎡自愿咨询🐔测门诊工♊人员猴痘🛷识培训，重点人群供猴痘防知识宣传🔏检测咨询动员、治和关怀等务。各级控机构应积极推动👼地有能力具有良好滋病防治验的MSM志愿者或会组织共参与猴痘治宣传工，在工作程中注意护重点人🎧个人隐私三、形势🏍️析　　各要加强对点人群猴疫情、防现状、影⚾因素及出🧎境情况的👦查，及时析研判猴疫情形势为制定本高危行为预工作计提供依据具体内容💟括：1.重点人群基、活动形和特点、动场所、入境的时及地区等2.猴痘知识、态度👨‍💼高危行为3.猴痘疫情水平及影响因素🤘4.猴痘防治政策及🦸业机构已🙍展的工作5.包括志愿者在内有关组织’个人已开↘️的干预活；6.影响猴痘防治作的困难问题。四宣传干预　(一)宣传教育。级疾控机或健康教专业机构供技术支🔩，社会组参与，共🧷研究制定合当地特的猴痘预宣传材料加强警示👩‍🏭传教育。过大众媒❔、MSM网站和以移终端为载的交友软等平台，传国际、🌴内及本地痘疫情信📺和防控知👩🏽‍🤝‍👨🏿，提高重人群猴痘范意识。　(二)同伴教育。👨‍🍳级疾控机要加强同🗝️教育员挑-、招募和🙅‍♀️训，组织支持同伴传活动，强人群猴🔩风险防范识，推动动检测。期组织同🧝‍♀️教育员工例会，了猴痘干预🎎作存在的难和问题有针对性给予帮助支持。　(三)外展服务。各疾控机构预工作人定期到重人群活动-所开展猴宣传、咨、发放宣🔺材料等外服务活动提高重点🌽群猴痘防👩🏿‍🤝‍👩🏾意识和知🙋水平，推重点人群🎊强自我健管理，主寻求检测询服务。　(四)检测咨询。⚖️级疾控机通过互联、同伴教-、外展活等多种形动员有猴样症状或🌠疑接触史重点人群行猴痘检💈。各级各🟣医疗机构肤(性病)科、肛肠🚿、艾滋病👨🏿‍🤝‍👨🏼愿咨询检门诊发现痘样症状，应主动问其流行学史及性触史，记患者现住⛪及联系方，采集标送疾控机进行猴痘酸检测，备猴痘检🥈能力及猴病毒实验动资质的疗机构也🦼开展检测对于已建🥢互联网+HIV检测平台的地区可增加猴检测内容实现互联在线检测🦝约和结果询。五、点场所干　　重点动场所包实体和虚-两类场所实体场所🌗括酒吧、📺所、浴池⛲经营性场，虚拟场包括移动联网和社媒体。　(一)实体场所干预　　各级控机构负组织干预作人员在地MSM经常出入的吧、会所浴池等活场所，开猴痘预防预宣传，要包括：　1.在MSM经常出入的酒吧会所、浴等实体场-，张贴醒⤵️的健康教宣传图片设置健康育资料公🌜栏；　　2.强化个人健康责任识，开展🧗‍♀️痘健康咨，推动开自我风险估；　　3.提供转介服务信息告知明确诊疗流程及相关检😬、医疗机名称、联人等信息’　　各地加强对猴🏕️确诊病例病前21天内活动过场所以及水监测阳⛏️场所的干-宣传，重目标人群个人隐私👩🏿‍🤝‍👩🏾护，加强🎉社会组织😬伴教育员痘防治知培训，建规范的行🧙‍♀️干预流程提高自我😽护技能。🔴　(二)虚拟场所干🪕。　　各🔩疾控机构责组织指🚅当地有序展猴痘线🪀宣传，在🙋关网站、交媒体平及时发布更新猴痘传教育内🤽‍♀️，形成面重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣干预服务系。　　级疾控机🌏支持社会💉织或同伴育员利用💎站、信箱社交媒体🦵台，组织展在线咨和交流。时解答网提出的各猴痘相关题。针对同时期猴🚚传播特点🧘定期或不🐚期组织专、专业人🅿️、同伴教员利用互网和社交🥍体平台进🆑在线宣教❄️各级疾控构要定期导更新相专业信息🐺确保宣传容科学、效。　　件2　　附件3　　猴痘疫情流🧍‍♀️病学调查南　　为导各地疾机构规范展猴痘疑病例、确🦱病例和聚性疫情的🌤️行病学调，及时掌病例暴露🎡、接触史’流行病学关信息，🟫实密切接🦌者的追踪定，防止情传播扩，制定本🙇‍♀️南。一、查目的　(一)查找感染来源🤱掌握、追和管理密接触者。　(二)分析传播链传播特征👯‍♀️　　(三)及时发现在的风险群及其特、范围，🥝针对性地展宣传教和综合干。二、调对象　　似病例、🏵️诊病例和集性疫情三、调查🚎法和内容💭　通过查资料，询病例、诊🤥医生、家和知情人进行流行学调查。病例的病允许，调时应先调,-病例本人再对其诊医生、家和知情者行调查。　开展个🚟调查时，🥡认真、详🍙了解和记病例基本🩸息、发病🤤诊情况、床表现、归及实验检测信息发病前21天内与可🦹‍♂️感染来源👩🏼‍🤝‍👨🏽接触史、触场所及触方式；病后至隔治疗前的🔟体活动地、与其有🎤肤或黏膜接接触者以及发病4天内与其有性接触。　　(一)基本情况。如姓名性别、年🍟、住址、🏟️籍、联系🌶️式等。　🚁(二)发病就诊情况临床表现🍗实验室检、发病就💇‍♀️经过和病🖤变化与转。　　(三)感染来源调查。对例发病前21天内的暴露史开展🧰查，包括👫🏾内外猴痘🛫例报告地旅行史或住史，对-疑的感染源要详细🔑问接触时、方式、次、地点接触时采的防护措等，特别🎚️性接触史-调查时，发现调查💪中未列入但具备重流行病学义的内容应进行详询问和记。　　(四)密切接触者调查及🗂️定。对病传染期的动情况和️⃣群接触情👣进行追踪🏾排查后，定其密切◀️触者。密接触者判🥧和管理按《猴痘密接触者判和管理指》(附件4)执行。　　详见附3-1《猴痘病例个调查表》四、组织实施　　照“属地管理”原，由病例🥦住址所在县(市、区)级疾控部门组织辖疾控机构展猴痘病的流行病调查，就🚏医疗机构供诊疗信。调查单应根据调计划和调💚目的，确调查人员成和职责工，及时🚴‍♀️展病例流🍫病学个案查。调查,程中发挥部门联防-控的协同💁‍♂️用，尽可💁‍♂️获取全面确的流调🏎️息。调查间，调查员要做好人防护。、信息的🎫报与分析　疾控机完成调查，应做好例分析总，及时将行病学个🐸调查表、查报告等料逐级报🖋️上级疾控构，并做调查资料🧿保管和存🧐。病例流,信息要按关规定，格做好信安全和个🚋隐私信息护。　　件：3-1.猴痘病例个案调查　　附件4　　猴痘切接触者定和管理📊南　　为导各地做猴痘密切触者判定管理，有,,,控制猴痘情的传播制定本指💶。一、密💶接触者判🧑🏾‍🤝‍🧑🏽标准　　切接触者指直接接’病例的病👨🏾‍🤝‍👨🏻部位及其-污染物品🧜‍♂️或感染动及其分泌🧐、渗出物污染物的员；以及业暴露或时间近距吸入病例吸道飞沫，经评估感染风险人员。具🧈情形包括🎹　　1.与疑似病例🥽确诊病例病后有皮👨‍💻或黏膜直接触的人🟨，接触方☄️包括性接、抚摸、抱和亲吻；　　2.与有皮疹状的疑似例或确诊⛄例共用衣、被褥、具等物品人员；　3.医疗诊疗、采样👨‍🌾实验室检等操作过,,,中可能暴于病毒，评估有感风险的医卫生工作员；　　4.与疑似病例或确诊例发病前4天内有性⛑️触，并经🔠行病学调专业人员估有感染险的人员亦可判定密切接触；　　5.在狭小密🎟️空间与疑病例或确病例长时⛷️近距离接(如长时间共处同一💪闭空间)，经流行病🏾调查专业👨‍🦽员评估有染风险的员，亦可定为密切触者；　6.接触感染猴痘病的动物及🧛分泌物、出物等污物，而未取有效个防护的人；　　7.其他可能在病毒暴️⃣风险的人🈸。二、密接触者管　　1.管理期限与式。病例现地疾控构或密切📏触者所在疾控机构🕒于追踪到📪切接触者天及时开👬猴痘病毒酸检测，知并指导切接触者🕝好自我健🈴监测，健监测期限🦾自最后密接触之日-起21天。自我健康🖊️测期间可常生活与作，需避与他人发性接触等切接触，免捐献血⛅等。　　2.知情告知。实施健监测时，⬅️控机构或🦾层医疗卫机构应口告知健康测的缘由😠期限、注事项和疾✔️相关知识以及负责☝️访疾控机或基层医,,,卫生机构系人和联✒️方式，并🐩放《猴痘切接触者✂️康告知书♉。　　3.定期随访-疾控机构基层医疗生机构应👩‍🎓第7、14、21天电话或上门动询问密接触者自🍵健康监测况，提供-询指导建。发现异情况，及📛调查处置🦕　　4.自我健康监。坚持每做好体温量和症状测，主要状包括发🤠(＞37.3℃)、皮疹、浅表巴结肿大📲。密切接😋者一旦出相关症状及时前往🈲疗机构就或与随访系人取得系，接受痘病毒核检测。　附件：4-1.猴痘密切接触者🦜康告知书👷‍♂️　附件5　　猴痘消技术指南🎳　为进一规范猴痘情相关的🔚毒工作，️⃣实科学消、精准消，减少猴病毒对公健康造成危害，制本指南。🎭、疫源地🐂毒　　(一)适用范围。　　适于出现猴病例后，其可能污🛃的场所和💛品进行的时消毒和末消毒。　(二)消毒原则。　1.范围和对象确。　　根流行病学-查结果，定现场消的范围和👩‍👩‍👧‍👦象。对病在住院、运期间可污染的环和物品，行随时消🔴。对病例☂️住或活动的场所，居住场所工作场所学习场所诊疗场所转运工具及其他可受到污染场所，在离开后(如住院、转🦓、出院、亡)进行终末消毒。　2.方法选择。　(1)诊疗用品消毒尽量选择次性诊疗品，非一🦕性诊疗用应首选压蒸汽灭菌不耐热物可选择化🍽️消毒剂或-温灭菌设👢进行消毒灭菌。　(2)手消毒。建议’用手消毒揉搓双手行消毒，😋可选择75%乙醇、过氧化氢等毒剂。　(3)环境和物体表消毒。可择含氯消🤦‍♀️剂、二氧’氯、过氧🍀酸、过氧氢等消毒擦拭、喷🍣或浸泡消️⃣。　　(4)衣物、床单等纺织🔋消毒。可择热力消、含氯消剂或季铵类消毒剂泡等消毒🔉式。　　(三)常见污染对象的毒方法。🥃　1.手消毒。　　选用速干🪒消毒剂，-直接选用75%乙醇进行擦拭消-,-；醇类过🧞‍♂️者，可选季铵盐类🚸有效的非类手消毒,,。有肉眼👋见污染物，应先使🚱洗手液(或肥皂)在流动水下按🈺六步洗手清洗双手然后按上方法消毒　　2.皮肤、黏膜　　皮肤🩱污染物污☀️时，应立清除污染，再用一性吸水材沾取0.5%碘伏或过氧化氢消剂擦拭消3分钟以上，使用清🙆‍♀️清洗干净粘膜应用量生理盐冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒　　3.床单、毛巾衣服等纺品。　　例使用的单、毛巾衣服等纺品，无肉🌮可见污染时，若需复使用，用流通蒸或煮沸消↗️30分钟；或用有效500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒浸泡30分钟后，按常规清洗或用其他效的消毒法。不耐🧂的衣物可用环氧乙🔜或干热方--进行消毒📨理。　　分泌物、👧出液、排物、血液体液等污-物时，建按医疗废集中处理　　4.餐(饮)具。　　病例使用的碗盘、筷、等餐(饮)具清除食🐟残渣后，沸消毒30分钟，或🌵用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再用清水净。　　5.污染物。　　对病分泌物、出液、排👜物、血液体液等少污染物可一次性吸材料(如纱布、抹布)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消剂(或能达到高水平毒的消毒巾/干巾)小心移除　　对病分泌物、🤧出液、排物、血液体液等大🙋‍♀️污染物应用含吸水分的消毒⛳或漂白粉🛬全覆盖，用一次性水材料完覆盖后用量的有效5000-10000mg/L的含氯消毒◻️浇在吸水👧料上，作30分钟以上(或能达到高水平🧩毒的消毒🧳巾)，小心清除干净清除过程避免接触染物，清🌚的污染物医疗废物中处置。😻　病例的泌物等应专门容器,,集，用有,-氯20000mg/L的含氯消剂，按物药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污👡物后，应污染的环和物体表🍟进行消毒盛放污染🌪️的容器可有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟，然清洗干净🧑🏽‍🤝‍🧑🏽　　6.地面、墙壁　　有肉可见污染时，应先全清除污️⃣物再消毒🤑无肉眼可污染物时可用有效👩‍🦲1000mg/L的含氯消毒剂500mg/L的二氧化氯消毒🗨️擦拭或喷消毒；不腐蚀的地和墙壁，可用2000mg/L的季铵盐消毒剂喷💷或擦拭；🙋‍♂️毒作用时不少于30分钟。　7.物体表面。　　,疗设施设🥇表面以及💍围栏、床柜、家具门把手、生洁具和居用品等肉眼可见🚴染物时，先完全清污染物再🔈毒。无肉可见污染时，用有🏢氯1000mg/L的含氯消毒👩🏻‍🤝‍👨🏾或500mg/L的二氧化氯消剂，不耐蚀的物体面也可用2000mg/L的季铵盐类消毒-进行喷洒🌅擦拭或浸,-消毒，作30分钟后清水擦拭净。　　8.污水和粪便。　　👩🏾‍🤝‍👩🏼进入市政水管网前进行消毒理，消毒污水应当合《医疗构水污染排放标准(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃。　　病生活垃圾医疗废物理。　　10.医疗废物。　　疗废物的置应遵循医疗废物⚡理条例》《医疗卫机构医疗📥物管理办🎌》的要求规范使用层黄色医废物收集封装后，常规流程行处置。　11.室内空气。　如经科评估，需😣室内空气行消毒，在无人情下，可选’5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢-二氧化氯(浓度按产说明书)等消毒剂，20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒也可采用验证安全效的其他毒方法。、注意事　　现场🎟️毒应确保用消毒产合法有效🐹所选消毒法科学可。现场消时，根据场情况和关标准要，选择合有效的个防护装备🤮在做好个🔼防护的前-下，严格👨‍👧‍👧照工作方🤤实施消毒　　消毒施单位应备现场消能力，操人员应经消毒专业🛎️训，掌握毒和个人护基本知，熟悉消器械的使和消毒剂配制等。　每次开消毒工作均应做好毒记录，括消毒对、消毒面(体积)、消毒剂浓(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。时，相关门和单位做好消毒,作的监督理和评价　　附件6　　猴痘🎓人防护指🦥　　为加公众、疫处置相关作人员和务人员的人防护，免猴痘病暴露感染制定本指。一、居隔离治疗病例等相人员　　(一)适用范围。　　🌞用于居家💥离治疗的🐿️例(疑似病例和确诊例)、照护人员或共居住者的人防护。👨‍👩‍👧‍👦　(二)居家隔离区要求。　💱1.应选择有自然通、独立卫间的房间为隔离区🔸。　　2.应配备专的餐具，💴单、毛巾床上用品消毒剂和罩等个人护用品，视和平板脑等电子🧱备。　　3.卫生间宜配备专用洗衣机，漏应有水🔶。　　(三)病例管理要求。　1.应能够进行自我护。　　2.应每天做好体温测👨🏾‍🤝‍👨🏽和症状监👩‍❤️‍💋‍👩，避免与人共用个物品。　😹3.避免与他人发生接触，避与免疫力下人员、童、老人孕妇及其人员的直接触，避与宠物等物接触，免捐献血等。　　4.外出就诊时，应佩医用外科🧑🏽‍🤝‍🧑🏻罩，着长长裤，确遮住所有伤皮肤，免与他人切接触，免乘坐公交通工具　　(四)照护人员求。　　1.应每天做好体温测和症状监。　　2.应尽量避👫🏿进入隔离,,域。如需入隔离区，应佩戴用外科口和一次性🐫套，与病保持至少1米的距离⛳在离开隔区域之后👨‍✈️应加强手生，并对下的口罩🤔手套进行🎾毒处理后⏲️弃。　　3.在拿放和清洗居家离治疗病😣的床单、服和处理圾的过程🙎‍♂️，应避免动。用湿布拖地，免干扫。👝湿抹布清家居用品🏨面，地毯用蒸汽清，避免使吸尘器。　4.应将居家隔离疗病例的📍具、床单🌺毛巾和衣🧊单独洗涤消毒，可择热力消🎛️、含氯消🚻剂或季铵类消毒剂泡等消毒式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同居者出现任症状或不🌪️表现，应🔵及时前往定医疗机🤱就诊并主报告可疑触史。　🐷2.对其接触的物品活动的区👨🏿‍🤝‍👨🏾等结合风评估结果🟤行消毒处。二、疫🏞️处置相关作人员　(一)适用范围。　适用于猴📈疫情期间🕘行病学调、环境清消毒人员🧣个人防护　　(二)流行病学查人员防要求。　🐃1.个人防护装备。次性乳胶套、医用科口罩、次性隔离等。　　2.个人防护要求。规佩戴口罩加强手卫，与被调人员保持少1米的距离。　　3.废物管理。调查结后，废弃个人防护👨🏿‍🤝‍👨🏽备暂存、理和处置🦪按照《医👩‍❤️‍💋‍👩废物管理例》执行　　4.应急处置。🌡️在调查过中出现口脱落、直⛈️接触了病皮肤或分👮‍♀️物等情况要结合被查人员的床诊断结🧙、空间的闭性、接的时间和☣️离等进行险评估，合风险评结果，采🕉️相应的处措施。　(三)环境清洁消毒员防护要。　　1.个人防护💽备。一次🍩乳胶手套医用外科💌罩、一次🙎‍♀️隔离衣、💂‍♀️水靴套等　　2.个人防护要🌼。规范佩口罩，加😬手卫生，-量减少与消毒物品🐱直接接触　　3.废物管理。洁消毒结后，废弃个人防护备暂存、理和处置按照《医👨‍💻废物管理例》执行🌐　　4.应急处置。在清洁消过程中出口罩脱落🆎皮肤损伤直接接触泄物、血等情况，🦎结合被清消毒物品🧻类型、接的时间和间的密闭等进行风🧞‍♂️评估，结🧈风险评估果，采取应的处置施。三、🙃务人员的人防护　(一)适用范围。　适用于猴🚴疫情期间务人员及工作环境防护。　(二)基本要求。　1.个人防护装备要。医务人执行标准防，采取接触传播经飞沫传疾病的隔与预防措，佩戴一性乳胶手、KN95/N95及以上级别口罩、防面屏或护镜、一次隔离衣等🤦‍♂️　　2.环境防护要💸。医院环的清洁消应符合附🐺5的要求。应避免干🦸‍♀️尘、清扫🔐吸尘等活。首选湿清洁方法　　3.废物管理。人防护装、病例敷等暂存、理和处置按照《医废物管理👭🏾例》执行　　附件7　　猴痘毒实验室测技术指🐲　　为指😚各级疾控门和其他关机构规开展猴痘❎毒实验室🦷测工作，速、准确🎭别猴痘确病例，制🐓本指南。指南主要😕绍标本采以及猴痘毒核酸荧定量PCR检测方法生物安全求等内容🚊一、检测象　　(一)猴痘确诊病例和疑病例；　(二)密切接触者；　(三)感染或疑似👨🏽‍🤝‍👨🏼染猴痘病👃的动物；　(四)环境或其它物材料。、技术人基本要求　(一)采样人员。事猴痘病核酸检测本采集的术人员应➕经过生物🔽全培训，训合格后--可从事采工作。采人员应熟采集标本🗺️类和采集法，熟练握标本采操作流程🥁注意事项做好标本💍息记录，保标本质⛷️符合要求标本及相信息可追。　　1.采样人员🦟人防护装🧜要求：KN95/N95及以上级别的口罩防护面屏-护目镜、次性隔离、一次性胶手套(尽可能戴两)、靴套；如果接触病例血液体液、分物或排泄，应及时换手套。水采样人可根据实工作需要适当降低护级别。　2.住院病例的标由所在医医护人员🖐️集，根据验室检测作的需要可结合病多次采样　　3.密切接触者本由当地控机构或疗机构专人员采集🕙　　4.感染或疑似染猴痘病的动物由地疾控机👳‍♂️协调动物🖱️控部门专采样人员责采集。　5.环境或其它生材料标本🎽相关专业🏜️样人员负采集。　(二)检测人员。实室检测技人员应具相关专业🚍专以上学或具有中及以上专技术资格🚏并有2年以上实验室作经历，受过核酸🧞‍♂️测相关培🎞️，培训合后方可从检测工作实验室配的工作人数量应与开展检测目及标本相适宜，保能够及🍎、熟练、确地开展🎾验室检测报告结果三、标本集、保存运输　　(一)标本采集种类。　1.首选标本是皮(黏膜)病变部位标，包括病表面拭子痘疱液或🛷疱渗出物🦮子、痘痂痘痂拭子。　　2.呼吸道标♾️，如口咽💐子，可用病例急性检测，也🤢密切接触➕检测最常👗标本。　🤽3.发病急性期可采🚸EDTA抗凝血标本行核酸检。　　4.采集发病7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用🎹抗体检测　　5.直肠拭子、🤚液、精液唾液等其标本仅用研究，根◼️工作需要集。　　6.污水或其它环境生材料标本据实际工需要进行集。　　(二)标本采集要求。　采集皮(黏膜)病变部位标时应使用🚍菌聚酯纤、尼龙或似材质拭，避免使🌎棉拭子。集疑似病的标本前💘避免使用75%乙醇等消毒剂清病变部位🍛每种类型皮肤(黏膜)病变应尽可能采集个以上拭，每个病应同时采😡身体不同👨‍❤️‍👨位或外观🍥同的2-3种病变标。采集皮📅(黏膜)病变部位标🔻时应适当力。皮肤(黏膜)病变部位、痘或分泌物🕸️不同拭子🚩本应放置👮‍♀️不同的采🚶‍♂️管中。进病毒分离应采集干🐲子标本(无采样液)或以非灭活病毒采样🎈保存。根实验室活资质确定用非灭活或灭活型样液采集本。　　(三)标本采集方法。　1.斑疹、丘疹、🌱疱或脓疱皮肤(黏膜)病变部位标本：一🥋紧握采样👩🏼‍🤝‍👩🏻子尾部，😎与拭子头保持一寸🐲上距离。样时适当🥈力下压拭，在皮损面来回擦至少2-3次，然后拭子另一再重复擦2-3次。如果在擦过程中痘破裂，要保采集到疱液。采🛷后将拭子置于无菌样管中(可含病毒采液或不含体)，折断拭子头，除拭子尾，盖上管🏧，以消毒*️⃣巾擦拭消采样管，封口膜密🤟管盖后将样管保存送检。　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样前确保实验’可检测此’标本。使无菌镊子其他钝头械夹取全痘痂或面🏃‍♂️至少4mm×4mm大小的痂皮放置于干、无菌的样管中，样完成后🦥创可贴覆患处。　3.口咽拭子标本：采集人员部微仰，🥋张大，露-两侧扁桃，将拭子🟣过舌根，被采集者侧扁桃体,-微用力来擦拭至少3次，然后在咽后壁🏡下擦拭至-3次，将拭子头浸入2-3mL病毒保存的管中或于不含液👨‍👩‍👧‍👧(干拭子)的无菌管，尾部弃，旋紧管🏦。　　4.血液标本尽量采集性期(发病7天内)的血液标本💨建议使用💀EDTA抗凝剂的真采血管采5mL全血，可利用血进行检，或室温置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血于无菌管进行检测-,　　5.血清标本：真空负压血管采集液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清无菌螺口料管中。🚿一份血清尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份👩‍🍳清应在发😿后第3-4周采集，集血液标5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集🥝清于无菌😗口塑料管，用于猴抗体检测　　6.其他标本：据设计需规范采集　　(四)标本保存🍪　　标本在收集后1小时内冷😮(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行测。可在1周内检测👩‍👦‍👦标本可置4℃环境中保存；1周内无法检🌅的标本，期可置于-20℃环境中保存，期应置于-70℃或以下环境中存。全血-离血浆前藏(2-8℃)，分离出的血浆于-20℃或以下环中保存。💇设立专库🦕专柜单独存标本，免反复冻标本。　猴痘病毒其相关标应由专人理，准确录病毒及本的来源编号、数等信息，🚇体要求可🧍‍♂️考《病原生物菌(毒)种保藏数据描述通》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措确保病毒标本安全🗼严防发生用、恶意用、被盗🚜被抢、丢、泄露等🗝️件。　　(五)标本送检。　　本采集后尽快在低条件下(冰袋或干冰)送往实验，如需长运输标本应采用干,冷冻运输🦛式进行保。　　1.送检标本病例标本由省级及下疾控机进行初步测，各省例猴痘阳标本应送国疾控中病毒病所🏃‍♀️核。每个性病例至-采集一套🥑本(皮肤或黏膜病变位标本、咽拭子标及急性期🍥恢复期双血清标本)送中国疾🤷‍♀️中心病毒所检测。省级疾控构根据实情况制定内样本送⛹️‍♀️、复核流。　　2.病原体及本运输：　(1)国内运输。痘病毒或他潜在感性生物材的运输包分类属于A类，对应联合国编👨‍✈️为UN2814，包装符合国际航组织文Doc9284《危险品航空安🤹‍♀️运输技术🏚️则》的PI602分类包装要求通过其他🐼通工具运的可参照上标准包。猴痘病或其他潜感染性材运输应按🧛《可感染类的高致性病原微物菌(毒)种或样本▶️输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运证书。污水等境标本暂普通生物🗣️本运输标执行。　(2)国际运输。猴🈺毒株或样在国际间输的，应范包装，👭🏾照《出入️⃣特殊物品🏾生检疫管规定》办相关手续🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿并满足相🟥国家和国相关要求️⃣四、猴痘-毒核酸检要求及流　　(一)实验室资要求。　开展猴痘毒核酸检的实验室🏴󠁧󠁢󠁷󠁬󠁳󠁿应当符合病原微生👻实验室生📱安全管理🐵例》(国务院令第424号)或《医疗机构床基因扩检验实验管理办法(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定，具备区的市级💦生健康部备案的生安全二级(BSL-2)实验室及以上实验条件，并案猴痘病相关实验😅动。独立置的医学验实验室应符合《学检验实室基本标☑️(试行)》《医学检实验室管🤹‍♂️规范(试行)》等要求。　　开猴痘病毒📄离、培养中和等涉病毒扩增使用等实-操作的实室应具备家卫生健🤐委批准的🥵物安全三(BSL-3)实验室及以上实室条件，获得猴痘毒实验活批准。分的猴痘病应送国家👯原微生物藏中心/国家病原微,,物资源库毒分库保。　　(二)实验室生物安全要。　　根2006年公布实施《人间传的病原微-物名录》(简称《名》)，猴痘病毒生物害分类为一类，是种高致病病毒。按《名录》求，猴痘🩱毒的分离培养等涉,-病毒扩增使用的实⛱️操作需在BSL-3及以上实验的生物安-柜内进行非灭活采液采集的👬🏽痘病例样🏝️的灭活在BSL-3实验室进行🧮样本灭活猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验或PCR检测的专门域或房间行。如《🦼录》更新开展猴痘🚵‍♀️毒操作的♾️验室生物全要求应最新《名》执行。水样本的活参照普生物样本　　(三)实验室分要求。　😃原则上开猴痘病毒酸检测的验室应当置以下区：试剂储和准备区-标本制备🍉、扩增和物分析区三个区域物理空间❌应完全相👛独立，空应定向流。各区功⛹️分别是：　1.试剂储存和准区：贮存剂的制备试剂的分📃和扩增反混合液的备，以及心管、吸等消耗品贮存和准🌇。　　2.标本制备--：转运桶启、标本-活，核酸取及加入扩增反应等。　　3.扩增和产物分析区核酸扩增产物分析　　根据用仪器的能，区域🦰适当合并如采用标处理、核提取及扩检测为一的自动化析仪，标👨‍🚒制备区、增和产物析区可合。　　(四)主要仪器设备。　实验室应配备与开检验项目适宜的仪设备，包👇：二级生安全柜、速台式离🥱机、干浴温器、荧定量PCR仪、计时、移液器　　(五)实验室猴🌧️病毒核酸测流程。　实验室--到标本后按照标准🍸作程序进试剂准备标本前处-,-、核酸提🔵、核酸扩🧑🏾‍🤝‍🧑🏻、结果分及报告。🛳️验室应当立可疑标和阳性标复检流程,-　　1.试剂与材料　　(1)标本：包病变表面子、痘疱或痘疱渗液拭子、痂或痘痂子、咽拭、全血或🍰浆等标本　　(2)核酸提取剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基组DNA提取试剂盒🕐血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒　　(3)核酸检测剂：　　试剂：DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴病毒检测物、探针　　③阳对照：涵检测靶标,列的质粒　　(4)灭菌去离🥬水、无水醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用手部和物表面常规毒，开启有效期为1周。　　含氯消毒：现用现，含有效🪒1000mg/L的消毒液用于-体表面常消毒，含效氯5000mg/L的消毒液😾于感染性,,料溢洒时-应急处理　　(6)耗材：包带滤芯的🍑头、螺旋的离心管非螺旋口离心管、🚣‍♀️锆珠的粉管、PCR反应板和明封膜或PCR反应管和透明盖　　(7)BSL-2个人防护品：包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一性隔离衣☠️防护眼罩面屏、一性帽子、套、靴套手套。　2.实验前的标本接。　　(1)核对被检标本编号姓名、性、年龄及测项目；　(2)待检标本的态如有异🛕，需注明　　(3)待检标本期存放在-70℃，短期存放可-20℃，避免反复融。　　3.核酸检测操作步骤注意事项　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　🛣️作方法按DNA提取试剂盒相应明书进行🌱作，具体下：　　提取试剂备：第一⛳开启试剂💇‍♀️，在使用先在漂洗中加入无乙醇，加,,体积参照上标签。有试剂在用前应平至室温；⛱️有离心步应在室温⛵进行。　👨‍🏭②处理样：　　A.痘疱液：拭子标本以适当体🤝的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。100μL样本，加80μL缓冲液，总-为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补总体积至180μL；　　B.病变皮疹或痂：取1块痂皮按质/体积(1mg/50μL)加入相应体积PS的PBS，研磨或匀浆处理取80μL，然后加100μL缓冲液；🗒️　C.咽拭子、其它子：从采🧑🏾‍🤝‍🧑🏻液中取200μL标本，干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀后200μL；　　D.全血或血👨‍👧‍👦：直接取200μL标本。　　加入20μL蛋白酶K溶液，混，溶液会清亮。若🦢本为病变疹或其它😱织时，加蛋白酶K混匀后，在56℃放置，直至组织解，再进🪐下一步骤　　④加🧙‍♀️200μL裂解缓冲，充分混-,，70℃放置10分钟，或至溶变清亮，短离心以除管盖内🏄水珠。　需注意：入裂解缓液后可能🍶出现白色⛹️‍♀️状沉淀，♂️70℃放置后会消失如溶液未清亮，说🚥细胞裂解-,彻底，可导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　⑤加200μL无水乙醇，分混匀，时可能会❗现絮状沉，简短离以去除管👰内壁水珠👨‍👨‍👧‍👧　　⑥将一步骤所溶液和絮沉淀均加吸附柱中(吸附柱放🈚废液收集🌾中)，8000rpm离心1分钟，弃废液️⃣　　⑦加500μL漂洗缓冲1(使用前先检查是🥰已加入无👩🏾‍🤝‍👩🏽乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废。　　⑧入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查否已加入水乙醇)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　⑨将吸附放回废液集管中，👩‍🎤大转速13000rpm离心1分钟，尽量除漂洗液　　⑩将附柱转入根干净的🐠心管中(需自行准备试剂盒中提供)，加入50μL洗脱缓冲或灭菌去子水，室放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤液，做好记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　　(2)核酸检测：实时🎴光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病🥗核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体🛥️的准备：孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检🌾标本外，📴加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；所有-本，包括照，应设孔。　　加样：每🌴反应管中入核酸或照各5uL，盖紧管或封好透🧘‍♀️膜，置于光定量PCR检测仪上。　　③增条件设🦉：　　④器检测通选择：使🚍荧光定量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道收集设在60℃。具体设置方法照各仪器👅用说明书　　⑤结分析阈值定：使用光定量PCR检测仪进行结果分时，基线🛶3-10或6-15个循环的荧信号，阈设定原则阈值线刚🦰超过正常性对照扩曲线最高，也可根🦸仪器噪音况调整阈。　　(3)核酸检测结果判断　①Real-timePCR反应系统的量控制：应结果应🎎时符合以2个条件，否则试验果无效，重新开展测。阴性照无扩增为阴性。🅰️性对照未现阴性结。　　②果判定：　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳性🕶️处于灰区标本应重检测或经列分析进确诊。需意：当标👩‍👧‍👦仅为咽拭或血清、浆，且检结果为阴时，应结临床症状慎重做出性诊断。　(4)表格记录　做好荧光量实时PCR方法检测猴痘病毒🚬酸原始记🌱。　　五猴痘病毒👩基因组测🟥　　1.测序标本选原则。本疫情中的发或早期例、与早病例有流病学关联👩🏿‍🤝‍👩🏼关键病例🧿感染来源🧱明的本土例、境外入病例阳标本等。上标本在酸荧光定PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。-省为单位定开展猴病毒全基组测序的构。建议用扩增子术进行猴病毒全基🦂组测序。序数据经🛢️控合格后可用于后生物信息析。二代序平台覆深度应不于10×，三代测序台覆盖深应不低于50×，全基因组测序盖度应不🔠于98%。数据比对析推荐参🖲️猴痘基因🏃NC_063383.1。　　各省应建立🤾省输入、土病例猴病毒基因数据库，具备序列🚣比分析能。具备测条件的省要在接收本后48小时内开展序工作，键样本要实验室收标本后1周内提供测结果报告所有测序始数据(一般为fastq格式)、组装序(一般为fasta格式)和标本序列测定果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报中国疾控心病毒病进行序列↖️总、分析病毒病所将序列分🙎结果及时馈各省，将全国猴🔋病毒序列总、分析果及时上国家疾控。　　3.分子分型😃推荐使用💆线分析工🏴󠁧󠁢󠁷󠁬󠁳󠁿Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株行分子分。　　附：　　7-1猴痘病毒检测标本🌕检表　　7-2猴痘病毒标本序测定结果告单【编:孙静波】

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