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　　中新网7月27日电据国家疾控局方微信消息🦜为进一步做猴痘防控工，及时有效对猴痘疫情提升猴痘防👤工作的科学、精准性和🤤效性，切实护人民群众👼命安全和身健康，国家控局会同国卫生健康委定并于7月26日印发《猴痘防控方案。其中提出2023年6月以来，我多个省份先报告多例猴病例，引发增本土续发👩‍🚀情和隐匿传的风险较高要坚持“预为主、防治合、精准防🍣、快速处置原则，落实👨‍👧‍👦早发现、早🥝告、早隔离早治疗”措🚟。　　《猴防控方案》👲文如下：猴📌防控方案　🐠猴痘是由猴病毒(Mpoxvirus，MPXV)感染所致的▪️种人兽共患。2022年9月，我国报告首例猴痘🍽️入病例。2023年6月以来，我国多省份先后报📹多例猴痘病🚝，引发新增土续发疫情🌊隐匿传播的👒险较高。为导各地科学👷‍♂️准做好猴痘控工作，切维护人民群身体健康，定本方案。、总体要求　坚持“预为主、防治📐合、精准防🩲、快速处置🟣原则，落实早发现、早🦉告、早隔离早治疗”措🍓。开展医疗构、重点人、入境人员重点场所等🦆渠道监测。🚴‍♂️强疫情分析风险研判，🤣针对性地开重点人群健教育和综合预。落实病隔离治疗、行病学调查-密切接触者踪管理等措。坚持发现起、控制一，及时阻断情传播。二🏸疾病特征　(一)病原学特征。　　痘病毒属于🍯病毒科正痘🖼️毒属，为基组全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中现该病毒。1970年在刚果民主共和💼一名疑似天患者的标本首次分离到痘病毒，为例确诊的人🧖猴痘病例。,　猴痘病毒为两个进化支：(1)分支I，曾称为中非分支或果盆地分支(2)分支II，曾称为西非分支，进步分为IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方性流区猴痘暴发🤱情的毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现较多-,分支，包括A.1、A.2和B.1等亚分支，2022年9月我国报告首例输性猴痘病例📉来，各地报中国疾控中😭病毒病所的株序列均属IIb分支。　　猴痘病😄耐干燥和低🥢，在痂皮、壤和衣物、上用品等物表面可生存月。该病毒热敏感，加至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯毒剂、过氧👨‍🦼酸等常用消剂及紫外线👩🏿‍🤝‍👩🏽有效灭活病🍉，对过氧化、次氯酸钠戊二醛、邻,-二甲醛等敏。　　(二)流行病学特。　　1.传染源。猴痘💇毒的宿主尚👩🏿‍🤝‍👨🏾明确，目前为非洲啮齿🦢动物(非洲松鼠、树松鼠▫️冈比亚袋鼠-睡鼠等)可能为其自然宿💹。传染源包🎱猴痘病例及染的啮齿类物、猴和猿灵长类动物　　2.传播途径。猴痘💛毒主要经黏️⃣和破损皮肤入人体，主☔通过直接接病例的病变肤或黏膜传，亦可通过触被病毒污的物品、长👳‍♂️间近距离吸病例呼吸道沫传播，接感染动物的🗽吸道分泌物病变渗出物,,血液及其它液，或被感动物咬伤、伤感染传播　　3.易感人群。人群遍易感。接👤过天花疫苗猴痘病毒存👬🏾一定程度的叉保护力。　4.疫情特征。2021年以前的猴疫情主要在🍒非和西非地🧍‍♀️呈地方性流，主要通过触感染动物🧊播，所引发☘️人传人疫情播链较短，👚要为儿童及壮年的散发例及聚集性情，通过家🍉或旅行方式尔播散至其国家和地区2022年5月以来全球国暴发的疫🔊主要在男男行为人群(Menwhohavesexwithmen，简称MSM，指与同性发生性行为男性)中经性接触传播，部分病例为壮年男性，📣过大型聚会♨️及后续在社🥡的MSM扩散，并传播至️⃣球多个国家地区。　　(三)临床特征。　　1.潜伏期：5-21天，多为6-13天。　　2.传染期：病例出现状后至皮疹痂自然脱落⚗️形成新皮肤具有传染性有调查提示些病例可能🤲出现症状前1-4天存在传染性。　　3.早期症状：可出现发热头痛、背痛肌痛和淋巴肿大等。　4.皮疹和黏膜疹：通常热退后出现有些病例可现在全身症之前。皮疹👯‍♀️生常经过斑、丘疹、水、脓疱、结至痂皮脱落️⃣个阶段，不形态皮疹可-时存在，可有明显痒感🏡疼痛。可累口腔咽喉黏、肛门、生🌧️器、结膜和膜等。痂皮落后可遗留斑或色素沉甚至瘢痕，痕持续时间长达数年。　5.病程及严重程度。痘病程约2—4周，免疫力低下患者的程可能较长猴痘为自限🆘疾病，大多💊病例症状会行消失，也重症和死亡生，主要为童、孕妇和🆔疫力低下人👷‍♀️。　　2022年以来全球多国猴痘暴疫情中，大数病例临床现较轻，部病例无全身状，皮疹仅于生殖器、门直肠黏膜位，死亡病🍦主要为未得⛹️治疗的艾滋病毒感染者🚥免疫力低下🔐群。2022年以来全球地方性流行🃏病例的病死🏷️约为0.1%。三、宣传育与干预　针对重点人、出入境人和一般人群🥖不同人群分开展宣传教，有针对性加强不同人的自我防范识和个人防措施，积极合做好防控作。　　(一)重点人群。各地卫生健与疾控部门🚗合相关社会🧛‍♂️织，充分借艾滋病防治合干预经验服务模式，MSM经常出入的酒吧、👊所、浴池等点活动场所开展同伴教。借助大众体、MSM社交网站等互网平台，开猴痘防控知🐕宣传教育，高重点人群范意识，减高危行为，导有可疑接🆓史者自觉做自我健康监，增强主动🍀诊意识。　重点人群宣干预要求详附件1《重点人群宣传干指南》。　(二)出入境人员。通过放宣传资料形式，加强入境人员猴防控知识宣教育。提醒境人员关注的地国家和区猴痘疫情息，不接触痘样症状者啮齿类、灵类等动物。醒来自猴痘情报告国家地区的人员如在境外有疑接触史，境后21天内应做好自我,康监测，避💋与他人发生⌚切接触，一出现发热、疹、淋巴结大等猴痘样状，应主动诊并如实报👨‍🦰流行病学史　　(三)一般人群。各充分发挥新,-体以及广播电视、报纸🕹️传统媒体作，开展猴痘📿控知识宣传育，提高公🗄️科学防范意。四、疫情测和报告　🏃‍♂️(一)监测病例定义。　1.猴痘样症状者。不明因急性皮疹(面部或口腔膜、四肢、🤶殖器或会阴肛周等部位)，伴发热(＞37.3℃)或淋巴结肿者。　　2.疑似病例。痘样症状者发病前21天内具备以下行病学史中🧚‍♀️任何一项：(1)有猴痘病例报告地区👨‍🎤居史；(2)有猴痘确诊例或疑似病🍬接触史；(3)有同性性行为，或性伴🕞同性性行为♥️；(4)有地方性流行区疑动物接触😒。　　3.确诊病例。猴-样症状者、👩‍🍳似病例及密接触者，经验室检测猴病毒核酸阳或病毒分离性者。　　(二)多渠道监测。　　1.医疗机构监。各级各类疗机构要开🏔️猴痘样症状测，尤其是肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨检测门诊等重点关注猴样症状者。现猴痘样症🤽‍♂️者，应主动问流行病学，记录患者住址及联系式，采集标😸送疾控机构💈行猴痘核酸-测。具备猴👨🏽‍🤝‍👨🏼病毒检测能🚵及猴痘病毒验活动资质医疗机构也🧑🏻‍🤝‍🧑🏻开展检测。　2.重点人群监测。各各类医疗机、疾控机构对MSM等重点人群开展疗或检测咨服务时，应动询问是否猴痘样症状其可疑接触。如发现猴样症状者和似病例，应时采集标本行猴痘病毒酸检测。　🔛3.入境人员监测。海关到猴痘相关常健康申报👩‍🦰检疫发现有痘样症状的境人员，应时进行标本集和核酸检，并发放《🚴‍♀️诊方便卡》,要求其尽快诊；对于核检测阳性者将相关信息报辖区疾控构，由相关🍗门进一步调👨‍👧‍👧处置。　　4.重点场所污水监测。有件的地区可据当地疫情🚨势，经评估🎒MSM经常出入的酒吧、所、浴池等点活动场所展污水监测　　(三)病例报告。　相关医疗机根据临床表、流行病学实验室检测果，及时对🍞者进行诊断　　诊断的似病例和确病例应于24小时内通过国疾病预防🥻制信息系统监测报告管模块进行网直报。如为外输入病例填写输入来⏮️国家或地区不具备网络🍚报条件的医卫生机构，在规定时限将传染病报🙎‍♀️卡信息报告地乡镇卫生,-、社区卫生务中心或县🐡疾控机构进📜网络报告，🎒时传真或寄传染病报告至代报单位负责病例网直报的医疗生机构，要据实验室检结果、流调展及时对病信息进行复🍭、订正。　各县(市、区)出现首例猴痘确诊病例者2例及以上存在流行病关联的确诊例，应当在2小时内通过发公共卫生件报告管理⛹️‍♂️息系统报告事件级别选“未分级”🤿五、疫情处　　(一)病例管理。　🔚各地发现猴💕疑似病例和诊病例应当时转运至医🛌机构进行隔治疗，如临症状明显好，病变部位结痂，可转居家隔离治，直至皮疹痂自然脱落解除居家隔。对病情较且具备居家离治疗条件🧍‍♀️确诊病例，医疗机构与控机构联合估后，可直📿采取居家隔治疗。对于行居家隔离疗的确诊病发放《猴痘例居家隔离疗健康告知🧑🏿‍🤝‍🧑🏻》(见附件2)。确诊病例居家隔离治️⃣期间，单人间居住，避与家人有皮或黏膜直接触，做好被⚜️染物品的消，非必要不出，确须外时穿长衣长、佩戴医用科口罩，避前往人群聚场所，避免其他人有皮或黏膜直接🐍触；指定医⏲️机构安排专负责上门或话随访，提健康咨询和疗指导。　(二)流行病学调查。　县(市、区)级疾控机构🙄到辖区疑似📌例和确诊病报告后，及🤶组织开展流病学调查，找感染来源掌握、追踪管理密切接🧚者，分析传链及传播特，及时发现在的风险人及其范围、征，有针对地开展宣传育和综合干💁。调查过程发挥多部门👨‍🚀防联控的协作用，尽可获取全面准的流调信息　　调查内主要包括病基本信息、病就诊情况临床表现、归及实验室🐨测；发病前21天内与可疑感染来源的🎟️触史、接触⏏️所及接触方；发病后至离治疗前的体活动地点💚与其有皮肤黏膜直接接者，以及发前4天内与其有性接触者-　　猴痘疫’流行病学调,要求详见附3《猴痘疫情流行病学调指南》。　🚴‍♂️(三)密切接触者的判定管理。　　1.密切接触者定义。直接触病例的病部位及其被染物品，或染动物及其泌物、渗出等污染物；🏮及职业暴露💷长时间近距💿吸入病例呼📊道飞沫等，评估有感染险的人员。🚣　2.密切接触者判定。据流行病学🤯查及暴露风评估结果，控机构负责时对密切接🏰者进行判定🖲️　　3.密切接触者管理,疾控机构或层医疗卫生构指导密切触者做好自健康监测，康监测期限💕最后密切接之日起21天。　　密切触者自我健监测期间可常生活与工，需避免与人发生性接等密切接触❄️避免捐献血等；坚持每📦做好体温测和症状监测出现猴痘样状应及时就并主动报告疑接触史。区疾控机构基层医疗卫👅机构应在密🪕接触者自我康监测第7、14、21天上门或电话其进行随访提供咨询指，发现异常况及时进行🔁置。　　密接触者判定理要求详见件4《猴痘密切接触者判和管理指南🅿️。　　(四)消毒与人员护。　　做病例衣物、◀️巾、床单、,,具等个人用，以及可能🅱️病例分泌物渗出物、体🩸等污染的环🏌️‍♀️和物体表面消毒。从事🧹例诊治护理流行病学调🙋‍♂️、环境清洁毒、标本采和实验室检等工作人员工作期间做🤎个人防护。　消毒与人🕺防护要求详附件5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个人防-指南》。六实验室检测　猴痘病毒酸检测首选肤或黏膜病🔊部位标本，🚜同时采集口🦰拭子标本。省首例猴痘诊病例标本送中国疾控心病毒病所😻行复核；本疫情中的首或早期确诊例、与早期例有流行病关联的关键诊病例、感来源不明的土确诊病例境外输入确病例阳性标🏊等，荧光定PCR检测Ct值≤32时进行病毒基🍏测序。所有序原始数据组装序列及序样本送检应在获得序48小时内报送中国疾控心病毒病所行汇总、分☕。以上确诊例应至少采⚙️一套标本(包括核酸检测性者的皮肤黏膜病变标🍈、口咽拭子本以及发病性期和恢复双份血清)送中国疾控中病毒病所。　实验室检🏓具体要求详附件7《猴痘病毒实验室测技术指南🐚。七、院内染控制　　疗机构应当格做好院内染控制。疑✨病例和确诊例应安置在👩🏿‍🤝‍👨🏾离病房，疑🦚病例单间隔🐺。医务人员行标准预防👩‍👩‍👧‍👧采取经接触播和经飞沫播疾病的隔与预防措施佩戴一次性🍩胶手套、KN95/N95及以上级别🏊‍♀️口罩、防护🦇屏或护目镜🎚️一次性隔离等，同时做手卫生。严按照《医疗构消毒技术范》对病例📷体液、血液排泄物、分物等进行规处理，做好-,疗环境(空气、物体表面地面等)、医疗器械、病使用物品等清洁消毒。据《医疗废🔙管理条例》✔️医疗卫生机📨医疗废物管办法》做好疗废物的处和管理。八工作要求　’(一)加强组织协调。各✖️卫生健康、控部门加强-海关等有关🔘门的密切协和信息共享及时发现与-置猴痘疫情🉑落实猴痘病💘发现、疫情告、诊疗隔、密切接触追踪管理等作，防止疫,扩散和蔓延🕉️各地在猴痘情防控过程应注意保护例、密切接🧑🏽‍🤝‍🧑🏼者和重点人等个人隐私🎣　　(二)加强宣传引导各地要及时布辖区猴痘情相关信息🎼做好政策解和公众健康示。通过多方式和渠道🉑展猴痘防控👩🏿‍🤝‍👩🏻识宣传，加重点人群宣🍂教育的针对😤和实效性。时回应社会切，引导公🕒科学认识猴🥪。　　(三)加强人员培⛸️。各地要加对各级疾控构和医疗机专业人员的训。对医务员重点开展痘病例的识与诊断、病发现与报告病例管理等关知识培训-强化诊治意。对疾控人重点开展流🧘‍♀️病学调查、切接触者的定和管理、👯‍♂️验室检测、点人群宣传预等相关知🍩培训，提高痘疫情防控🦺应急处置能💹。　　附件　　1.重点人群宣传干🍒指南　　2.猴痘病例居-隔离治疗健告知书　　3.猴痘疫情流行病学调查南　　4.猴痘密切接触判定和管理➿南　　5.猴痘消毒技术🧏‍♀️南　　6.猴痘个人防护南　　7.猴痘病毒实验🚆检测技术指🛁　　附件1　　重点人群😀传干预指南　2022年5月以来，全球非地方性行区发生的痘疫情以男-性行为人群(MSM)为主。为充分利我国艾滋病治综合干预务体系，开MSM等重点人群宣传干，防范猴痘,-情传播扩散形成常态化🎷滋病与猴痘合防控一体应对机制，-定本指南。、实施策略　在现有艾🥊病防治综合预服务体系📝础上，综合用行为学干方法和手段🤵通过宣传教、促进安全行为、动员,测、外展服、同伴教育互联网干预，从个体、🥌体和社会等个层面为目,人群提供猴综合干预服。二、组织👩🏿‍🤝‍👩🏻施　　各级疗机构和疾机构要加强点科室和艾病自愿咨询😧测门诊工作员猴痘知识训，对重点群提供猴痘控知识宣传🔗检测咨询与🖱️员、治疗和怀等服务。级疾控机构当积极推动地有能力、有良好艾滋防治经验的MSM志愿者或社会组织共🖥️参与猴痘防宣传工作，工作过程中意保护重点群个人隐私三、形势分　　各地要👚强对重点人猴痘疫情、控现状、影因素及出入情况的调查😑及时分析研猴痘疫情形😟，为制定本高危行为干工作计划提🏓依据。具体容包括：1.重点人群基👧、活动形式👊特点、活动🦞所、出入境时间及地区📆；2.猴痘知识、态度和危行为；3.猴痘疫情水及其影响因☸️；4.猴痘防治政策及专☪️机构已开展🎓工作；5.包括志愿者在的有关组织🌔个人已开展干预活动；6.影响猴痘防治工作的困🎇和问题。四宣传干预　(一)宣传教育。各级疾机构或健康育专业机构供技术支持社会组织参，共同研究定适合当地🕺点的猴痘预,宣传材料，🚯强警示宣传👔育。通过大媒体、MSM网站和以移终端为载体交友软件等台，宣传国、国内及本猴痘疫情信🙅和防控知识提高重点人猴痘防范意。　　(二)同伴教育。级疾控机构加强同伴教☝️员挑选、招和培训，组和支持同伴传活动，增人群猴痘风防范意识，动主动检测定期组织同🛫教育员工作😹会，了解猴干预工作存❣️的困难和问，有针对性给予帮助和持。　　(三)外展服务。各级疾控机🔑干预工作人定期到重点群活动场所展猴痘宣传👩‍🦱咨询、发放传材料等外服务活动，高重点人群痘防范意识🚶知识水平，动重点人群😴强自我健康理，主动寻🔔检测咨询服。　　(四)检测咨询。级疾控机构过互联网、伴教育、外🛵活动等多种📘式动员有猴样症状或可接触史的重人群进行猴⬜检测。各级🌃类医疗机构👫🏾肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿咨🧛‍♀️检测门诊发猴痘样症状，应主动询其流行病学🥏及性接触史记录患者现址及联系方，采集标本♣️疾控机构进猴痘核酸检，具备猴痘测能力及猴病毒实验活👏资质的医疗构也可开展测。对于已立互联网+HIV检测平台的地区，可💬加猴痘检测🐣容，实现互,-网在线检测约和结果查🕔。五、重点🏹所干预　　点活动场所括实体和虚🏜️两类场所，🧓体场所包括✌️吧、会所、池等经营性所，虚拟场包括移动互♓网和社交媒🤫。　　(一)实体场所干。　　各级控机构负责📘织干预工作员在当地MSM经常出入的酒吧、会所浴池等活动🧆所，开展猴-,预防干预宣，主要包括　　1.在MSM经常出入的酒吧、会、浴池等实场所，张贴目的健康教🦥宣传图片，⚒️置健康教育,料公告栏；📎　2.强化个人健康责任识，开展猴健康咨询，动开展自我🦽险评估；　🗑️3.提供转介服务信息，知明确的诊🧷流程以及相检测、医疗构名称、联人等信息。　各地要加🎋对猴痘确诊例发病前21天内活动过🥎场所以及污🚎监测阳性场的干预宣传重视目标人的个人隐私护，加强对会组织同伴育员猴痘防知识培训，🚩立规范的行🦸干预流程，高自我防护📇能。　　(二)虚拟场所干预。　　各疾控机构负🎐组织指导当有序开展猴线上宣传，相关网站、交媒体平台🥰时发布和更⚕️猴痘宣传教👨🏼‍🤝‍👨🏻内容，形成🔘向重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣传干预🗣️务体系。　各级疾控机支持社会组或同伴教育🏾利用网站、箱或社交媒平台，组织展在线咨询交流。及时♻️答网友提出各种猴痘相问题。针对同时期猴痘播特点，定🐡或不定期组专家、专业员、同伴教员利用互联👤和社交媒体台进行在线教。各级疾机构要定期📸导更新相关业信息，确宣传内容科🗂️、有效。　附件2　　附件3　　猴痘疫情流行病调查指南　🥡为指导各地控机构规范展猴痘疑似例、确诊病和聚集性疫的流行病学查，及时掌病例暴露史接触史等流📡病学相关信，落实密切触者的追踪定，防止疫🤎传播扩散，定本指南。📇、调查目的👹　(一)查找感染来源，握、追踪和💒理密切接触📽️。　　(二)分析传播链🏠传播特征。　(三)及时发现潜在的❇️险人群及其👨‍❤️‍👨征、范围，针对性地开🍟宣传教育和合干预。二调查对象　疑似病例、诊病例和聚🍽️性疫情。三调查方法和容　　通过阅资料，询👳病例、诊治生、家属和情人等进行行病学调查如病例的病允许，调查应先调查病🟩本人，再对诊治医生、属和知情者行调查。　--开展个案调时，要认真详细了解和录病例基本🤦‍♀️息、发病就情况、临床🏁现、转归及验室检测信👨‍🍳；发病前21天内与可疑染来源的接史、接触场及接触方式😴发病后至隔治疗前的具活动地点、其有皮肤或膜直接接触🚣，以及发病4天内与其有性接触者。🧑🏾‍🤝‍🧑🏼　(一)基本情况。如姓、性别、年、住址、国💂‍♂️、联系方式🌅。　　(二)发病就诊情。临床表现-实验室检测🥼发病就诊经📲和病情变化转归。　　(三)感染来源调查。对病发病前21天内的暴露史展调查，包👙境内外猴痘🌨️例报告地区行史或居住，对可疑的染来源要详询问接触时、方式、频、地点及接时采取的防措施等，特🍥是性接触史-调查时，若现调查表中列入，但具重要流行病🧍‍♀️意义的内容’应进行详细问和记录。🔺　(四)密切接触者调查判定。对病传染期的活情况和人群触情况进行🦗踪和排查后,,判定其密切触者。密切触者判定和🔻理按照《猴👭🏼密切接触者🕉️定和管理指》(附件4)执行。　　见附件3-1《猴痘病例案调查表》-,四、组织与💳施　　按照属地化管理原则，由病现住址所在⤴️县(市、区)级疾控部门织辖区疾控🥤构开展猴痘例的流行病调查，就诊疗机构提供⛽疗信息。调单位应根据🙋‍♂️查计划和调目的，确定查人员组成🛅职责分工，时开展病例行病学个案查。调查过👭中发挥多部联防联控的同作用，尽能获取全面确的流调信-。调查期间🐷调查人员要好个人防护五、信息的报与分析　疾控机构完😋调查后，应好病例分析结，及时将🆕行病学个案👨‍👨‍👦‍👦查表、调查告等资料逐报送上级疾’机构，并做👨‍🏭调查资料的管和存档。例流调信息按有关规定🧶严格做好信安全和个人🥌私信息保护　　附件：3-1.猴痘病例个案调查　　附件4　　猴痘密切💍触者判定和理指南　　指导各地做猴痘密切接✝️者判定和管，有效控制痘疫情的传🈯，制定本指。一、密切触者判定标🈶　　密切接者是指直接触病例的病🌅部位及其被染物品，或染动物及其泌物、渗出等污染物的员；以及职🔘暴露或长时近距离吸入例呼吸道飞-等，经评估感染风险的员。具体情包括：　　1.与疑似病例或确诊病例病后有皮肤黏膜直接接的人员，接🏃方式包括性🤲触、抚摸、抱和亲吻等　　2.与有皮疹症状的似病例或确病例共用衣、被褥、餐等物品的人；　　3.医疗诊疗、采*️⃣或实验室检⏹️等操作过程可能暴露于毒，经评估感染风险的疗卫生工作员；　　4.与疑似病例确诊病例发前4天内有性接触，并经行病学调查👨‍❤️‍👨业人员评估⚓感染风险的员，亦可判🧎为密切接触；　　5.在狭小密闭空🙎‍♀️与疑似病例确诊病例长🎲间近距离接(如长时间共处同一封闭🥚间)，经流行病学调查专人员评估有染风险的人，亦可判定密切接触者🪂　　6.接触感染猴痘病🚘的动物及其📓泌物、渗出等污染物，未采取有效🎂人防护的人；　　7.其他可能存在🎹毒暴露风险人员。二、切接触者管🎴　　1.管理期限与方式病例发现地控机构或密接触者所在🐅疾控机构应追踪到密切触者当天及💉开展猴痘病核酸检测，-知并指导密🆘接触者做好我健康监测健康监测期🖌️为自最后密⏮️接触之日算👨‍🚒21天。自我健康监测期可正常生活工作，需避与他人发生接触等密切触，避免捐血液等。　2.知情告知。实施健康-测时，疾控构或基层医⛵卫生机构应头告知健康测的缘由、限、注意事和疾病相关识，以及负随访疾控机👩‍⚖️或基层医疗生机构联系和联系方式🍭并发放《猴🌍密切接触者❣️康告知书》　　3.定期随访。疾控👨🏿‍🤝‍👨🏽构或基层医卫生机构应🙊第7、14、21天电话或上门主动询密切接触者我健康监测况，提供咨指导建议。现异常情况及时调查处。　　4.自我健康监测坚持每天做体温测量和🐫状监测，主症状包括发🟠(＞37.3℃)、皮疹、浅表淋巴结☔大等。密切♌触者一旦出相关症状应时前往医疗🕜构就诊或与👨‍🔧访联系人取联系，接受痘病毒核酸⏮️测。　　附：4-1.猴痘密切接触健康告知书♠️　附件5　　猴痘消毒技指南　　为一步规范猴疫情相关的毒工作，落科学消毒、😵准消毒，减猴痘病毒对众健康造成危害，制定指南。一、👩🏻‍🤝‍👨🏾源地消毒　(一)适用范围。　　适✅于出现猴痘例后，对其能污染的场和物品进行随时消毒和🍜末消毒。　♿(二)消毒原则。　　1.范围和对象定。　　根流行病学调结果，确定🗃️场消毒的范🔝和对象。对例在住院、运期间可能🎛️染的环境和品，进行随🖐️消毒。对病居住或活动的场所，如住场所、工🍠场所、学习所、诊疗场、转运工具®️及其他可能到污染的场🧧，在其离开(如住院、转院、出院、🙌亡)进行终末消毒。　　2.方法选择。　　(1)诊疗用品消毒尽量选择一👡性诊疗用品非一次性诊用品应首选💿力蒸汽灭菌不耐热物品选择化学消剂或低温灭设备进行消或灭菌。　(2)手消毒。建议使用🦅消毒剂揉搓手进行消毒也可选择75%乙醇、过氧化氢等消毒👩🏾‍🤝‍👨🏽。　　(3)环境和物体👩‍👩‍👧‍👦面消毒。可择含氯消毒、二氧化氯过氧乙酸、🧪氧化氢等消剂擦拭、喷👩‍👩‍👧或浸泡消毒　　(4)衣物、床单等织品消毒。选择热力消、含氯消毒或季铵盐类毒剂浸泡等毒方式。　(三)常见污染对象的消方法。　　1.手消毒。　　可选用速手消毒剂，直接选用75%乙醇进行擦拭消毒；醇过敏者，可择季铵盐类有效的非醇手消毒剂。♻️肉眼可见污物时，应先,,用洗手液(或肥皂)在流动水下按照六洗手法清洗手，然后按⁉️述方法消毒　　2.皮肤、黏膜。　皮肤被污染污染时，应即清除污染，再用一次🌪️吸水材料沾0.5%碘伏或过氧化氢毒剂擦拭消3分钟以上，使用清水清干净；粘膜💨用大量生理水冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒。　3.床单、毛巾、衣服等织品。　　🔳例使用的床、毛巾、衣等纺织品，肉眼可见污🎧物时，若需复使用，可🧎‍♂️流通蒸汽或沸消毒30分钟；或用有氯500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消剂浸泡30分钟后，按照🧟规清洗；或其他有效的毒方法。不湿的衣物可用环氧乙烷干热方法进消毒处理。　有分泌物渗出液、排物、血液、液等污染物🕗，建议按医废物集中处♉。　　4.餐(饮)具。　　病例所使的碗、盘、、杯等餐(饮)具清除食物残渣后，煮⛅消毒30分钟，或使用有🕜氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后，再清水洗净。,,　5.污染物。　　对病分泌物、渗液、排泄物血液、体液少量污染物用一次性吸👭🏿材料(如纱布、抹布等)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒(或能达到高水平消毒的毒湿巾/干巾)小心移除。　　对病例泌物、渗出、排泄物、液、体液等🤏量污染物应用含吸水成👭的消毒粉或白粉完全覆📘，或用一次吸水材料完🐮覆盖后用足的有效氯5000-10000mg/L的含氯消毒浇在吸水材🗑️上，作用30分钟以上(或能达到高水消毒的消毒巾)，小心清除干净。清过程中避免触污染物，理的污染物医疗废物集处置。　　例的分泌物应有专门容收集，用有氯20000mg/L的含氯消毒剂，物、药比例1:2浸泡消毒2小时。　　清除污染物，应对污染😩环境和物体面进行消毒盛放污染物容器可用有氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液⏯️泡消毒30分钟，然后清干净。　　6.地面、墙壁。　　有肉可见污染物🐙，应先完全除污染物再毒。无肉眼🐽见污染物时📨可用有效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯消毒剂拭或喷洒消🧨；不耐腐蚀地面和墙壁也可用2000mg/L的季铵盐类消🦹‍♂️剂喷洒或擦；消毒作用间不少于30分钟。　　7.物体表面。　　诊疗设♨️设备表面以床围栏、床柜、家具、把手、卫生📘具和家居用-等有肉眼可污染物时，🈁先完全清除染物再消毒无肉眼可见染物时，用效氯1000mg/L的含氯消毒剂或500mg/L的二氧化氯毒剂，不耐🐉蚀的物体表📓也可用2000mg/L的季铵盐类消剂进行喷洒擦拭或浸泡🍯毒，作用30分钟后清水拭干净。　8.污水和粪便。　　在入市政排水网前需进行毒处理，消后污水应当合《医疗机水污染物排标准》(GB18466-2005)。　　9.病例生活垃圾。👨‍👨‍👧‍👧　病例生活圾按医疗废处理。　　10.医疗废物。　　医疗物的处置应循《医疗废管理条例》《医疗卫生🧹构医疗废物理办法》的求，规范使🦑双层黄色医-,-废物收集袋装后，按常流程进行处。　　11.室内空气。👩🏼‍🤝‍👨🏿　如经科学估，需对室空气进行消，则在无人🧑🏼‍🤝‍🧑🏼况下，可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢、二氧化(浓度按产品说明书)等消毒剂，按20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒。可采用经验🚴‍♀️安全有效的🐻他消毒方法🧼二、注意事　　现场消🛕应确保所用毒产品合法效，所选消方法科学可。现场消毒，根据现场况和相关标要求，选择格有效的个防护装备，做好个人防的前提下，格按照工作案实施消毒　　消毒实🧁单位应具备场消毒能力操作人员应过消毒专业🦩训，掌握消🤮和个人防护本知识，熟消毒器械的🏃‍♀️用和消毒剂配制等。　每次开展消工作时均应🥈好消毒记录📒包括消毒对、消毒面积(体积)、消毒剂浓度(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。同，相关部门单位应做好毒工作的监管理和评价　　附件6　　猴痘个人🔦护指南　　加强公众、🌼情处置相关作人员和医人员的个人护，避免猴🌾病毒暴露感，制定本指。一、居家🐫离治疗的病等相关人员　(一)适用范围。　　-用于居家隔👩🏻‍🤝‍👨🏼治疗的病例(疑似病例和-,诊病例)、照护人员或共居住者的个⚙️防护。　　(二)居家隔离区域要求。　1.应选择有自然通风独立卫生间👨‍👦房间作为隔区域。　　2.应配备专用的餐具，床、毛巾等床用品，消毒和口罩等个防护用品，视和平板电等电子设备💎　　3.卫生间宜配备专的洗衣机，漏应有水封　　(三)病例管理要求　　1.应能够进行自我🤽‍♀️护。　　2.应每天做好温测量和症监测，避免🎭他人共用个✂️物品。　　3.避免与他人发生性接触避免与免疫-低下人员、童、老人、妇及其他人的直接接触避免与宠物动物接触，免捐献血液💄。　　4.外出就诊时，佩戴医用外口罩，着长长裤，确保住所有损伤肤，避免与⭐人密切接触避免乘坐公交通工具。　(四)照护人员要求。　1.应每天做好体温测和症状监测　　2.应尽量避免进入离区域。如👩🏿‍🤝‍👩🏽进入隔离区🔓，应佩戴医外科口罩和次性手套，👩‍🎓病例保持至1米的距离。在离开隔离域之后，应强手卫生，🏌️‍♀️对脱下的口和手套进行毒处理后废。　　3.在拿放和清洗家隔离治疗例的床单、服和处理垃的过程中，🤨避免抖动。🍒湿拖布拖地🟥避免干扫。湿抹布清洁居用品表面🌀地毯应用蒸清洗，避免用吸尘器。🐾　4.应将居家隔离治疗😬例的餐具、单、毛巾和物单独洗涤消毒，可选🌰热力消毒、氯消毒剂或铵盐类消毒🦸浸泡等消毒式。　　(五)应急处置。　　1.照护人员或共同住者出现任症状或不适现，应当及-前往指定医机构就诊并🚶‍♀️动报告可疑触史。　　2.对其接触的物品、活动📙区域等结合险评估结果行消毒处理🏗️二、疫情处相关工作人　　(一)适用范围。　适用于猴痘情期间流行学调查、环🔂清洁消毒人的个人防护🥵　　(二)流行病学调查员防护要求　　1.个人防护装备。🍵次性乳胶手、医用外科罩、一次性离衣等。　👩‍🏫2.个人防护要求。规范戴口罩，加手卫生，与🗂️调查人员保至少1米的距离。　　3.废物管理。🦀查结束后，🍧弃的个人防装备暂存、理和处置应照《医疗废管理条例》行。　　4.应急处置。在调查过程出现口罩脱📨、直接接触病例皮肤或👮泌物等情况要结合被调人员的临床断结果、空的密闭性、🤤触的时间和离等进行风评估，结合🔬险评估结果👘采取相应的😯置措施。　(三)环境清洁消毒人员⬅️护要求。　1.个人防护装备。一次🎟️乳胶手套、◽用外科口罩🕙一次性隔离、防水靴套。　　2.个人防护要求规范佩戴口，加强手卫，尽量减少👯被消毒物品直接接触。　3.废物管理。清洁消结束后，废🏜️的个人防护🏄‍♀️备暂存、处和处置应按🗝️《医疗废物理条例》执🍒。　　4.应急处置。如🐋清洁消毒过👳中出现口罩落、皮肤损或直接接触🤵泄物、血液🥠情况，要结被清洁消毒⛓️品的类型、触的时间和间的密闭性♎进行风险评🌏，结合风险估结果，采🙇‍♂️相应的处置🙍施。三、医人员的个人护　　(一)适用范围。　适用于猴🦹疫情期间医人员及其工环境的防护👩🏿‍🤝‍👨🏼　　(二)基本要求。　1.个人防护装备要求。🥄务人员执行-,准预防，采经接触传播经飞沫传播病的隔离与防措施，佩一次性乳胶套、KN95/N95及以上级别的口、防护面屏护目镜、一性隔离衣等　　2.环境防护要求。院环境的清消毒应符合件5的要求。应避免干除、清扫或吸等活动。首🌬️湿式清洁方🐕‍🦺。　　3.废物管理。个防护装备、例敷料等暂、处理和处🛶应按照《医废物管理条》执行。　附件7　　猴痘病毒实验🔒检测技术指　　为指导级疾控部门其他相关机规范开展猴病毒实验室测工作，快、准确识别痘确诊病例🎑制定本指南本指南主要绍标本采集👍及猴痘病毒🧝酸荧光定量PCR检测方法、生物安全求等内容。、检测对象　(一)猴痘确诊病例和🚾似病例；　(二)密切接触者；　　(三)感染或疑似感染猴痘🙆‍♂️毒的动物；　(四)环境或其它生物料。二、技人员基本要🙇‍♂️　　(一)采样人员。从猴痘病毒核检测标本采的技术人员当经过生物🖇️全培训，培合格后方可🧐事采样工作采样人员应悉采集标本类和采集方，熟练掌握®️本采集操作程及注意事，做好标本🆒息记录，确🐳标本质量符要求、标本相关信息可👩🏻‍🤝‍👨🏾溯。　　1.采样人员个防护装备要：KN95/N95及以上级别的口罩防护面屏或目镜、一次隔离衣、一🚸性乳胶手套(尽可能戴两)、靴套；如果接触了病血液、体液分泌物或排物，应及时换手套。污⛲采样人员可🦐据实际工作要，适当降防护级别。　2.住院病例的标本由🚔在医院医护🧝员采集，根实验室检测作的需要，结合病程多采样。　　3.密切接触者标本由当地控机构或医机构专业人🦪采集。　　4.感染或疑似感染猴痘病的动物由当疾控机构协动物疫控部🎐专业采样人负责采集。　5.环境或其它生物材标本由相关👫业采样人员责采集。　(二)检测人员。实验室测技术人员🍔具备相关专🧺大专以上学或具有中级🐀以上专业技-资格，并有2年以上实验工作经历，🎂受过核酸检相关培训，训合格后方从事检测工。实验室配的工作人员量应与所开检测项目及🛥️本量相适宜确保能够及、熟练、准地开展实验🎩检测和报告🐽果。三、标采集、保存🕟运输　　(一)标本采集种类。　　1.首选标本是👩🏿‍🤝‍👩🏾肤(黏膜)病变部位标本包括病变表拭子、痘疱或痘疱渗出拭子、痘痂痘痂拭子等　　2.呼吸道标本，如🔨咽拭子，可于病例急性🐍检测，也是切接触者检最常用标本🆕　　3.发病急性期可采EDTA抗凝血标本进行酸检测。　💔4.采集发病后7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用于抗体检。　　5.直肠拭子、尿、精液、唾🧊等其它标本用于研究，据工作需要集。　　6.污水或其它,-境生物材料🐇本根据实际作需要进行🛑集。　　(二)标本采集要求。　　采皮肤(黏膜)病变部位标时应使用无聚酯纤维、龙或类似材👁️拭子，避免用棉拭子。集疑似病例标本前应避👩🏽‍🤝‍👩🏻使用75%乙醇等消毒剂洁病变部位每种类型的肤(黏膜)病变应尽可能⛸️集两个以上子，每个病应同时采集🙁体不同部位外观不同的2-3种病变标本。采集皮(黏膜)病变部位标本时🙍‍♂️适当用力。肤(黏膜)病变部位、痘🔈或分泌物等同拭子标本放置于不同采样管中。🏇行病毒分离↪️应采集干拭-标本(无采样液)或以非灭活型病毒采液保存。根实验室活动质确定使用🚶‍♀️灭活型或灭☀️型采样液采标本。　　(三)标本采集方法。　　1.斑疹、丘疹、水疱或脓等皮肤(黏膜)病变部位标本：一手紧采样拭子尾，手与拭子部保持一寸上距离。采时适当用力压拭子，在损表面来回拭至少2-3次，然后以😔子另一面再🤯复擦拭2-3次。如果在拭过程中痘破裂，要确采集到痘疱。采样后将子放置于无-采样管中(可含病毒采样🍅或不含液体)，折断拭子，去除拭子部，盖上管，以消毒纸🧟擦拭消毒采管，以封口密封管盖后采样管保存送检。　　2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本：采样应确保实验可检测此类本。使用无🏗️镊子或其他🥦头器械夹取🌁部痘痂或面🆎至少4mm×4mm大小的痂皮，放置干燥、无菌采样管中，🧦样完成后以可贴覆盖患。　　3.口咽拭子标本🎂被采集人员部微仰，嘴大，露出两扁桃体，将子越过舌根在被采集者🔁侧扁桃体稍🚢用力来回擦至少3次，然后再在咽后上下擦拭至3次，将拭子头浸入含2-3mL病毒保存液的管中置于不含液🙃(干拭子)的无菌管中，部弃去，旋管盖。　　4.血液标本：尽量采集急期(发病7天内)的血液标本，建议使🌚含EDTA抗凝剂的真空🦧血管采集5mL全血，可利用全血进行测，或室温置30分钟后，1500-2000rpm离心10分钟，收集血🦲于无菌管中行检测。　5.血清标本：用真空负🤧采血管采集液标本5mL，室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清于无螺口塑料管😨。第一份血应尽早(最好在发病后7天内)釆集，第二份血清应发病后第3-4周采集，采集血液标本5mL后室温静置30分钟，1500-2000rpm离心10分钟，收集血清无菌螺口塑,,,管中，用于👩🏿‍🤝‍👩🏼痘抗体检测🚞　　6.其他标本：依据计需求规范集。　　(四)标本保存。　　标本应收集后1小时内冷藏(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下)，并尽快进行检测可在1周内检测的标本可于4℃环境中保存；1周内无法检测的本，短期可于-20℃环境中保存，🏊期应置于-70℃或以下环境中保存。血分离血浆🍗冷藏(2-8℃)，分离出的血浆置于-20℃或以下环境中保存应设立专库🪂专柜单独保标本，避免🧟‍♂️复冻融标本　　猴痘病及其相关标,,应由专人管，准确记录毒及标本的源、编号、量等信息，体要求可参《病原微生菌(毒)种保藏数据描述则》(T/CPMA011-2020)。应采取有措施确保病🍵及标本安全严防发生误⛪、恶意使用被盗、被抢📍丢失、泄露事件。　　(五)标本送检。　　标本集后应尽快低温条件下(冰袋或干冰)送往实验室⤴️如需长途运标本，应采👨‍👨‍👦干冰冷冻运🏾方式进行保。　　1.送检标本：病标本先由省🕘及以下疾控构进行初步测，各省首猴痘阳性标应送中国疾🍮中心病毒病复核。每个性病例至少集一套标本(皮肤或黏膜💇‍♀️变部位标本口咽拭子标🧑🏼‍🤝‍🧑🏻及急性期、复期双份血标本)送中国疾控中心病病所检测。🔝省级疾控机根据实际情制定省内样,送检、复核程。　　2.病原体及标-运输：　　(1)国内运输。猴痘病毒🛍️其他潜在感性生物材料运输包装分属于A类，对应的联合国🌀号为UN2814，包装符合国际民航织文件Doc9284《危险品航空安运输技术细》的PI602分类包装要求，通过其🏙️交通工具运👨‍⚖️的可参照以🐚标准包装。痘病毒或其⛺潜在感染性料运输应按《可感染人的高致病性原微生物菌(毒)种或样本运输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运🥀书》。污水环境标本暂👡普通生物样运输标准执。　　(2)国际运输。痘毒株或样在国际间运😚的，应规范装，按照《入境特殊物卫生检疫管规定》办理关手续，并🧣足相关国家🕯️国际相关要。四、猴痘毒核酸检测求及流程　👩(一)实验室资质要求。　开展猴痘毒核酸检测实验室，应符合《病原◾生物实验室物安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因👩🏾‍🤝‍👩🏻增检验实验管理办法》(卫办医政发2010〕194号)有关规定，具备区的市级卫健康部门备的生物安全级(BSL-2)实验室及以上实验室👁️件，并备案痘病毒相关验活动。独设置的医学🏨验实验室还🏵️符合《医学验实验室基标准(试行)》《医学检实验室管理范(试行)》等要求。　👩‍🚀开展猴痘病🕷️分离、培养🛀中和等涉及毒扩增、使等实验操作实验室应具国家卫生健委批准的生🧫安全三级(BSL-3)实验室及以上验室条件，-获得猴痘病实验活动批。分离的猴病毒应送国病原微生物🔦藏中心/国家病原微生物源库病毒分保藏。　　(二)实验室生物安全要求　　根据2006年公布实施的《人间📯染的病原微物名录》(简称《名录》)，猴痘病毒🧛物危害分类第一类，是♎种高致病性👆毒。按照《🔘录》要求，👛痘病毒的分、培养等涉病毒扩增及👃用的实验操需在BSL-3及以上实验室的生物安柜内进行；🚤灭活采样液集的猴痘病🌄样本的灭活BSL-3实验室进行；本灭活后猴病毒DNA提取、检测可BSL-2及以上实验室PCR检测的专门区域或间进行。如👨‍🦱名录》更新🧀开展猴痘病操作的实验生物安全要应按最新《录》执行。水样本的灭👓参照普通生样本。　　(三)实验室分区要求。　🤠原则上开展痘病毒核酸🙍‍♂️测的实验室🎅当设置以下域：试剂储和准备区、✊本制备区、⛅增和产物分区。三个区在物理空间🚁应完全相互🏀立，空气应向流通。各’功能分别是　　1.试剂储存和准备：贮存试剂💹制备、试剂💣分装和扩增应混合液的备，以及离💋管、吸头等耗品的贮存准备。　　2.标本制备区：转运桶开、标本灭活核酸提取及入至扩增反🍙管等。　　3.扩增和产物分析区：核扩增和产物析。　　根🐛使用仪器的能，区域可当合并。如用标本处理🟣核酸提取及增检测为一的自动化分仪，标本制区、扩增和物分析区可并。　　(四)主要仪器设备。　　实室应当配备开展检验项相适宜的仪🈹设备，包括二级生物安柜、高速台离心机、干恒温器、荧🌒定量PCR仪、计时器、⏩液器。　　(五)实验室猴痘病毒核酸🛡️测流程。　实验室接到本后，按照🧑🏻‍🤝‍🧑🏻准操作程序行试剂准备标本前处理核酸提取、酸扩增、结分析及报告👯实验室应当立可疑标本阳性标本复流程。　　1.试剂与材料。　　(1)标本：包括变表面拭子痘疱液或痘🚚渗出液拭子痘痂或痘痂子、咽拭子全血或血浆标本。　　(2)核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒)：组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。　　(3)核酸检测试剂：　　试剂：DNA聚合酶或预📤的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。　　②猴痘病检测引物、针：　　③性对照：涵检测靶标序🥔的质粒。　(4)灭菌去离子水、无乙醇　　(5)消毒液　　①75%乙醇：用于手部--物体表面常消毒，开启有效期为1周。　　②含消毒液：现现配，含有氯1000mg/L的消毒液用于物体面常规消毒含有效氯5000mg/L的消毒液用感染性材料洒时的应急理。　　(6)耗材：包括带滤芯的吸、螺旋口的心管、非螺口的离心管🛑含锆珠的粉管、PCR反应板和透明膜或PCR反应管和透明。　　(7)BSL-2个人防护用品包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一次隔离衣、防📇眼罩或面屏一次性帽子🐹鞋套、靴套😺手套。　　2.实验前的标本接收。　🌼(1)核对被检标本编号,姓名、性别🧦年龄及检测目；　　(2)待检标本的状态如有异，需注明；　(3)待检标本长期存在-70℃，短期存放可-20℃，避免反复冻融👩🏿‍🤝‍👨🏼　　3.核酸检测操作步及注意事项　　(1)病毒核酸(DNA)的制备　　操作方法💏DNA提取试剂盒相应说书进行操作具体如下：　①提取试准备：第一开启试剂盒🎌在使用前先漂洗液中加无水乙醇，🌼入体积参照🎌上标签。所试剂在使用👃应平衡至室🐠；所有离心骤应在室温进行。　　处理样本：　A.痘疱液：干拭子标需以适当体的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本，加入80μL缓冲液，总量为180μL；标本体积不足100μL时用缓冲液补足体积至180μL；　　B.病变皮疹或痘痂：取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体🏹含PS的PBS，研磨或匀浆处理，取80μL，然后加入100μL缓冲液；　　C.咽拭子、其它拭子从采样液中👩‍❤️‍💋‍👩200μL标本，干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬，混匀取200μL；　　D.全血或血清：接取200μL标本。　　③加入20μL蛋白酶K溶液，混匀，🥠液会变清亮若样本为病皮疹或其它⏩织时，加入🎡白酶K混匀后，在56℃放置，直至组溶解，再进👨‍✈️下一步骤。📝　④加入200μL裂解缓冲液，充分匀，70℃放置10分钟，或至溶液变👙亮，简短离以去除管盖😾壁水珠。　需注意：加裂解缓冲液🦠可能会出现色絮状沉淀在70℃放置后会消失。🚜溶液未变清，说明细胞解不彻底，👩‍👩‍👦‍👦能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。　　加200μL无水乙醇，分混匀，此可能会出现状沉淀，简🐲离心以去除盖内壁水珠　　⑥将上步骤所得溶🍡和絮状沉淀加至吸附柱🧅(吸附柱放入废液收集管)，8000rpm离心1分钟，弃废🏴󠁧󠁢󠁥󠁮󠁧󠁿。　　⑦加500μL漂洗缓冲液1(使用前先检是否已加入水乙醇)，8000rpm离心1分钟，弃废液。　,⑧加入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查是否加入无水乙🎌)，最大转速13000rpm离心3min，弃废液。　　⑨将附柱放回废收集管中，大转速13000rpm离心1分钟，尽量去除漂洗。　　⑩将附柱转入一干净的离心⛹️中(需自行准备，试剂盒未提供)，加入50μL洗脱缓冲液或菌去离子水室温放置2-5分钟，8000rpm离心1分钟。收集滤出液，🔦好标记，4℃或-20℃(短期)保存备用，-70℃长期保存。　(2)核酸检测：实时🪐光定量PCR(qPCR)方法检测猴病毒核酸(PCR实验室进行)。　　①反应体系的备：每孔20μL，加入5μL样本DNA，共计25μL；每次PCR反应，除检测标本外应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照；有样本，包对照，应设孔。　　②样：每根反管中加入核🧝或对照各5uL，盖紧管盖或封好透明，置于荧光量PCR检测仪上。　　⏫扩增条件设：　　④仪检测通道选🎣：使用荧光量PCR检测仪，选择Fam荧光信号检测通道，收👨‍💻设在60℃。具体设置方参照各仪器用说明书。　⑤结果分🔐阈值设定：用荧光定量PCR检测仪进行结果分析，基线取3-10或6-15个循环的荧光信号，阈🧯设定原则为,,,值线刚好超正常阴性对扩增曲线最👨🏽‍🤝‍👨🏻点，也可根仪器噪音情🚧调整阈值。　(3)核酸检测结果判　　①Real-timePCR反应系统的质量控：反应结果同时符合以🧚2个条件，否则试验结果🙆‍♂️效，应重新’展检测。阴’对照无扩增🥌为阴性。阳对照未出现性结果。　②结果判定🕍　　A.阴性：双孔Ct值＞37，或无Ct值；　　B.灰区：一孔Ct值＞37；　　C.阳性：双孔Ct值＜37。　　所有阳和处于灰区标本应重复测或经序列🍪析进行确诊💗需注意：当🧏‍♂️本仅为咽拭或血清、血，且检测结为阴性时，结合临床症，慎重做出性诊断。　(4)表格记录　　做好光定量实时PCR方法检测猴痘病毒核原始记录。🌌　五、猴痘毒全基因组序　　1.测序标本选取则。本土疫中的首发或🐸期病例、与期病例有流病学关联的键病例、感🐖来源不明的土病例、境输入病例阳标本等。以标本在核酸光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。　　2.测序要求。以省为单确定开展猴👨‍👦‍👦病毒全基因🍞测序的机构🛳️建议使用扩子技术进行-痘病毒全基🐨组测序。测数据经质控格后方可用后续生物信🦼分析。二代序平台覆盖🧝‍♂️度应不低于10×，三代测序平台覆盖度应不低于50×，全基因组测序覆盖应不低于98%。数据比对分析推荐参猴痘基因组NC_063383.1。　　各省应建⏮️本省输入、土病例猴痘毒基因组数🧡库，应具备列对比分析🤜力。具备测🍲条件的省份在接收标本48小时内开展测序工作关键样本要实验室收到本后1周内提供测序结果告，所有测📰原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中病毒病所进序列汇总、析。病毒病应将序列分🧣结果及时反👨‍🚒各省，并将国猴痘病毒列汇总、分结果及时上国家疾控局　　3.分子分型。推荐用在线分析具Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株进行子分型。　🌆附件：　　7-1猴痘病毒检测标本送表　　7-2猴痘病毒标序列测定结报告单【编:孙静波】

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