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  中新7月27日电据国家👨🏿‍🤝‍👨🏽控局官方信消息,进一步做猴痘防控🤐作,及时效应对猴🏯疫情,提🎽猴痘防控作的科学、精准性🚴‍♀️有效性,👫🏾实维护人群众生命全和身体😺康,国家控局会同🙇‍♀️家卫生健委制定并7月26日印发《猴防控方案。其中提,2023年6月以来,我国多🏮省份先后告多例猴病例,引♏新增本土发疫情和匿传播的险较高。坚持“预为主、防结合、精🏌️‍♂️防控、快处置”原🥡,落实“发现、早告、早隔、早治疗🧯措施。 👩🏾‍🤝‍👨🏿《猴痘防方案》全如下:猴防控方案 猴痘是猴痘病毒(Mpoxvirus,MPXV)感染所致一种人兽患病。2022年9月,我国报首例猴痘入病例。2023年6月以来,国多个省先后报告例猴痘病⬜,引发新本土续发情和隐匿播的风险高。为指各地科学准做好猴防控工作切实维护🥕民群众身👩🏻‍🤝‍👨🏽健康,制👫🏾本方案。、总体要  坚持预防为主防治结合精准防控快速处置原则,落“早发现-早报告、♈隔离、早疗”措施🐟开展医疗构、重点群、入境员和重点所等多渠监测。加-疫情分析,风险研判🤖有针对性开展重点👩🏻‍🤝‍👨🏼群健康教和综合干。落实病隔离治疗流行病学查和密切触者追踪理等措施坚持发现起、控制起,及时🐤断疫情传👕。二、疾特征  (一)病原学特征。 👩‍👧猴痘病毒于痘病毒正痘病毒👨‍🦯,为基因全长约197kb的双链DNA病毒。1958年首次在猴子中发🤵该病毒。1970年在刚果民主和国一名似天花患✒️的标本中♣️次分离到痘病毒,首例确诊人类猴痘例。  🚯痘病毒分️⃣两个进化支:(1)分支I,曾称为中非支或刚果地分支;(2)分支II,曾称为西非分支进一步分IIa和IIb分支。其中引发2022年全球非地方流行区猴暴发疫情毒株为IIb分支。IIb分支目前已出现-多亚分支包括A.1、A.2和B.1等亚分支,2022年9月我国报告⛳例输入性痘病例以🍘,各地报中国疾控心病毒病⏲️的毒株序均属于IIb分支。  猴痘病耐干燥和温,在痂、土壤和-物、床上-,品等物体-面可生存月。该病对热敏感加热至56℃30分钟或60℃10分钟即可灭活。75%乙醇、含氯消毒剂过氧乙酸🧠常用消毒及紫外线有效灭活毒,对过化氢、次酸钠、戊醛、邻苯甲醛等敏。  (二)流行病学特征。 ☦️1.传染源。猴痘病的宿主尚明确,目认为非洲齿类动物(非洲松鼠树松鼠、比亚袋鼠➿睡鼠等)可能为其自宿主。传🦍源包括猴🧥病例及感的啮齿类物、猴和等灵长类👽物。  2.传播途径。猴痘病💀主要经黏和破损皮侵入人体⚪主要通过接接触病的病变皮或黏膜传,亦可通接触被病污染的物、长时间距离吸入🚝例呼吸道沫传播,触感染动的呼吸道泌物、病🛑渗出物、液及其它液,或被染动物咬、抓伤感传播。 3.易感人群。人群遍易感。🎢种过天花苗对猴痘毒存在一程度的交🚳保护力。 4.疫情特征。2021年以前的猴痘疫主要在中和西非地呈地方性🍇行,主要过接触感🏡动物传播所引发的传人疫情播链较短主要为儿🐎及青壮年🥂散发病例聚集性疫,通过家🌍或旅行方偶尔播散其他国家👀地区。2022年5月以来全球国暴发的‼️情主要在🏣男性行为,群(Menwhohavesexwithmen,简称MSM,指与同性发性行为的性)中经性接触传播🚰大部分病为青壮年性,通过🐪型聚会以后续在社的MSM扩散,并传至全球多国家和地🕤。  (三)临床特征。  1.潜伏期:5-21天,多为6-13天。  2.传染期:病例出🙋‍♂️症状后至疹结痂自🤽‍♂️脱落并形,-新皮肤前有传染性有调查提⛑️一些病例👩🏻‍🤝‍👨🏽能在出现状前1-4天存在传♦️性。  3.早期症状:可出现热、头痛背痛、肌和淋巴结,,,大等。 4.皮疹和黏膜疹:常在热退出现,有病例可出在全身症之前。皮发生常经斑疹、丘、水疱、疱、结痂痂皮脱落个阶段,同形态皮可同时存,可伴有显痒感和痛。可累口腔咽喉🥢膜、肛门生殖器、膜和角膜。痂皮脱后可遗留🚻斑或色素着甚至瘢,瘢痕持时间可长数年。 🩲5.病程及严重程度猴痘病程2—4周,免疫力低🌱患者的病可能较长猴痘为自性疾病,💟多数病例状会自行🏌️失,也有症和死亡♿生,主要儿童、孕和免疫力下人群。 2022年以来全多国猴痘🤾发疫情中😉大多数病🎰临床表现,轻,部分🧼例无全身状,皮疹限于生殖🔃、肛门直黏膜部位死亡病例要为未得治疗的艾病病毒感,,,者等免疫🌎低下人群2022年以来全球地方性流区病例的死率约为0.1%。三、宣传教与干预 针对重点群、出入人员和一🧄人群等不💕人群分类展宣传教,有针对地加强不人群的自防范意识个人防护施,积极合做好防-,工作。 👉(一)重点人群。各,卫生健康🐍疾控部门合相关社组织,充借鉴艾滋🧝防治综合👩‍⚖️预经验和务模式,🕒MSM经常出入的酒、会所、池等重点动场所,展同伴教🧖。借助大媒体、MSM社交网站等互联网台,开展痘防控知😙宣传教育👩‍👦‍👦提高重点群防范意🎂,减少高行为,引有可疑接史者自觉好自我健监测,增主动就诊识。  点人群宣干预要求见附件1《重点人群传干预指》。  (二)出入境人员。通🔬发放宣传料等形式👐加强出入📴人员猴痘控知识宣教育。提出境人员🙋‍♀️注目的地🔪家和地区痘疫情信,不接触痘样症状👹及啮齿类灵长类等物。提醒自猴痘疫🙍报告国家地区的人,如在境有可疑接史,入境21天内应做好自我康监测,👨‍🦼免与他人生密切接🚼,一旦出🎣发热、皮、淋巴结大等猴痘症状,应🛑动就诊并👀实报告流病学史。 (三)一般人群。地充分发新媒体以🧓广播、电🦔、报纸等统媒体作,开展猴防控知识🖋️传教育,高公众科🏗️防范意识四、疫情测和报告 (一)监测病例定🏦。  1.猴痘样症🧪者。不明因急性皮(面部或口腔黏膜、🎒肢、生殖或会阴、周等部位),伴发热(>37.3℃)或淋巴结肿大者  2.疑似病例。痘样症状🎽,发病前21天内具备以下流行学史中的何一项:(1)有猴痘病例报告区旅居史🦑(2)有猴痘确诊病或疑似病接触史;(3)有同性性行为,👮‍♂️性伴有同性行为史🧖‍♀️(4)有地方性流行🐢可疑动物触史。 ◽3.确诊病例。猴痘症状者、似病例及切接触者-,经实验室🦿测猴痘病核酸阳性⭐病毒分离性者。 (二)多渠道监测。 1.医疗机构监测🎀各级各类疗机构要展猴痘样👺状监测,其是皮肤(性病)科、肛肠科、滋病自愿询检测门-等要重点注猴痘样✴️状者。发💃猴痘样症者,应主♌询问流行学史,记患者现住🕷️及联系方,采集标送疾控机👩‍❤️‍💋‍👨进行猴痘👩‍🎓酸检测。备猴痘病检测能力👩‍❤️‍👨猴痘病毒验活动资的医疗机👨‍👦也可开展👫测。  2.重点人群监测。各各类医疗构、疾控构在对MSM等重点人群开展诊或检测咨服务时,💺主动询问否有猴痘症状及其疑接触史如发现猴📼样症状者-疑似病例💒应及时采标本进行🐇痘病毒核🏕️检测。 3.入境人员监测。关收到猴,相关异常康申报或疫发现有痘样症状入境人员应及时进标本采集,,,核酸检测并发放《诊方便卡,要求其快就诊;于核酸检阳性者,-,相关信息报辖区疾🤽机构,由,,关部门进步调查处。  4.重点场所水监测。条件的地🎙️可根据当疫情形势经评估对MSM经常出入的酒吧会所、浴等重点活场所开展水监测。 (三)病例报告。 相关医机构根据🌺床表现、行病学和验室检测🖍️果,及时患者进行断。  👨‍🦼断的疑似例和确诊例应于24小时内通中国疾病防控制信系统的监报告管理🧔块进行网直报。如境外输入🦨例需填写入来源国或地区。具备网络报条件的疗卫生机🧲,需在规时限内将染病报告信息报告地乡镇卫🍼院、社区️⃣生服务中或县级疾🚁机构进行络报告,时传真或送传染病告卡至代单位。负💗病例网络🌘报的医疗-生机构,根据实验检测结果流调进展时对病例息进行复、订正。 各县(市、区)出现首例猴痘诊病例或2例及以上存在流行学关联的🍁诊病例,当在2小时内通过突🦁公共卫生件报告管信息系统告,事件别选择“分级”。、疫情处  (一)病例管理💀  各地现猴痘疑病例和确病例应当🙍‍♀️时转运至疗机构进🩲隔离治疗如临床症🔼明显好转病变部位🧑🏾‍🤝‍🧑🏾结痂,可为居家隔治疗,直皮疹结痂然脱落,除居家隔🚝。对病情’轻且具备家隔离治🌻条件的确病例,经疗机构与控机构联评估后,直接采取家隔离治🧠。对于实居家隔离疗的确诊,例发放《痘病例居隔离治疗康告知书🎪(见附件2)。确诊病例居家隔治疗期间单人单间住,避免🍌家人有皮或黏膜直接触,做被污染物🥞的消毒,必要不外,确须外时穿长衣裤、佩戴用外科口👩‍🎤,避免前人群聚集所,避免🥭其他人有🛴肤或黏膜🙏接接触;💦定医疗机安排专人责上门或🌪️话随访,🤠供健康咨和医疗指😪。  (二)流行病学调查。 🕸️县(市、区)级疾控机构接到辖♌疑似病例确诊病例☮️告后,及组织开展行病学调❗,查找感来源,掌、追踪和💯理密切接⏯️者,分析-,播链及传特征,及👩发现潜在🗺️风险人群🩰其范围、征,有针🏍️性地开展传教育和合干预。查过程中挥多部门防联控的同作用,可能获取面准确的调信息。 调查内🦹‍♂️主要包括例基本信☦️、发病就情况、临表现、转及实验室🤾测;发病-,-21天内与可疑感染源的接触、接触场📊及接触方;发病后隔离治疗的具体活地点、与🈴有皮肤或🧿膜直接接者,以及病前4天内与其有性触者。 👩🏿‍🤝‍👩🏾猴痘疫情行病学调👩‍💻要求详见件3《猴痘疫情流行🍅学调查指📊》。  (三)密切接触者的判和管理。 1.密切接触者定。直接接💅病例的病部位及其-,污染物品或感染动及其分泌、渗出物污染物;及职业暴🕎或长时间距离吸入例呼吸道沫等,经🐄估有感染险的人员  2.密切接触者定。根据行病学调🛫及暴露风⌨️评估结果🧈疾控机构责及时对切接触者👢行判定。 3.密切接触者管。疾控机👳‍♀️或基层医卫生机构导密切接❌者做好自健康监测🥺健康监测限为最后切接触之起21天。  密切🚴‍♂️触者自我🌃康监测期可正常生与工作,避免与他发生性接等密切接🧪,避免捐血液等;持每天做体温测量🧜‍♂️症状监测出现猴痘症状应及就诊并主💧报告可疑😘触史。辖疾控机构🥦基层医疗生机构应密切接触自我健康⏬测第7、14、21天上门或电对其进行访,提供询指导,现异常情及时进行置。  切接触者🆒定管理要详见附件4《猴痘密接触者判和管理指》。  (四)消毒与人员防护  做好例衣物、巾、床单餐具等个用品,以可能被病🗜️分泌物、🎪出物、体等污染的境和物体🚢面的消毒🎣从事病例治护理、行病学调、环境清消毒、标采集和实室检测等作人员在作期间做个人防护  消毒人员防护🙆求详见附5《猴痘消毒技术指》和附件6《猴痘个防护指南👟。六、实室检测 ⛈️猴痘病毒酸检测首皮肤或黏病变部位本,可同采集口咽子标本。🚶‍♂️省首例猴确诊病例本应送中疾控中心💔毒病所进🌪️复核;本疫情中的🦄发或早期🚵‍♀️诊病例、😿早期病例❣️流行病学联的关键🤽‍♀️诊病例、⛺染来源不的本土确病例、境输入确诊例阳性标🍜等,荧光量PCR检测Ct值≤32时进行病毒基因序。所有序原始数🐘、组装序🕐及测序样送检单应获得序列48小时内报送中国疾中心病毒所进行汇、分析。上确诊病♾️应至少采一套标本(包括核酸测阳性者皮肤或黏病变标本🥅口咽拭子🙄本以及发🌐急性期和🔡复期双份清)送中国疾控中心🏼毒病所。🧏‍♂️ 实验室😿测具体要详见附件7《猴痘病实验室检技术指南。七、院--感染控制 医疗机🕌应当严格,-好院内感♎控制。疑病例和确🤾病例应安✂️在隔离病,疑似病单间隔离医务人员行标准预,采取经触传播和飞沫传播病的隔离,预防措施佩戴一次乳胶手套KN95/N95及以上级别的🧿罩、防护🍻屏或护目🙊、一次性👩‍👧‍👧离衣等,🎷时做好手🧆生。严格🧑🏾‍🤝‍🧑🏾照《医疗构消毒技规范》对🤘例的体液😏血液、排物、分泌等进行规处理,做诊疗环境(空气、物🏊‍♀️表面、地🏢等)、医疗器械、病使用物品️⃣的清洁消❓。根据《疗废物管条例》《疗卫生机医疗废物理办法》好医疗废,的处置和理。八、作要求 🧵(一)加强组织协调各地卫生🤶康、疾控门加强与关等有关🧜门的密切作和信息享,及时现与处置痘疫情,📋实猴痘病发现、疫报告、诊隔离、密接触者追管理等工,防止疫扩散和蔓。各地在痘疫情防过程中应意保护病🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿、密切接🦖者和重点群等个人私。  (二)加强宣传引导。🏴󠁧󠁢󠁷󠁬󠁳󠁿地要及时布辖区猴疫情相关息,做好🟪策解读和⚾众健康提。通过多方式和渠开展猴痘控知识宣,加强重人群宣传⚾育的针对和实效性,及时回应会关切,🏐导公众科认识猴痘  (三)加强人员训。各地⛄加强对各疾控机构医疗机构🙂业人员的⛰️训。对医人员重点展猴痘病🌊的识别与断、病例🩸现与报告病例管理🦯相关知识🤽训,强化治意识。疾控人员📘点开展流👈病学调查密切接触’的判定和🍑理、实验检测、重人群宣传🙅‍♀️预等相关识培训,高猴痘疫防控和应处置能力🍻  附件🐹  1.重点人群宣干预指南♉ 2.猴痘病例居家🦀离治疗健🏮告知书 3.猴痘疫情流行病调查指南📺 4.猴痘密切接触判定和管指南  5.猴痘消毒技术指南-- 6.猴痘个人防护️⃣南  7.猴痘病毒验室检测术指南 👨‍👨‍👦附件1  重点人群传干预指  2022年5月以来,全球地方性流区发生的痘疫情以男性行为群(MSM)为主。为充分利用🧙‍♂️国艾滋病治综合干服务体系开展MSM等重点人宣传干预🏴󠁧󠁢󠁳󠁣󠁴󠁿防范猴痘🧷情传播扩🧴,形成常🍿化艾滋病猴痘综合控一体化对机制,定本指南一、实施😹略  在👫🏽有艾滋病治综合干🎊服务体系❗础上,综⛅运用行为干预方法🦺手段,通宣传教育🥂促进安全行为、动👔检测、外服务、同教育和互网干预等从个体、👬🏿体和社会多个层面目标人群🧵供猴痘综’干预服务二、组织施  各医疗机构疾控机构加强重点室和艾滋自愿咨询,测门诊工📰人员猴痘↕️识培训,重点人群🍩供猴痘防知识宣传🎛️检测咨询动员、治🦹‍♂️和关怀等务。各级控机构应积极推动👩🏻‍🤝‍👨🏽地有能力具有良好滋病防治验的MSM志愿者或会组织共参与猴痘治宣传工🍡,在工作程中注意🥛护重点人个人隐私三、形势析  各要加强对👨‍👩‍👧‍👧点人群猴疫情、防现状、影因素及出🥦境情况的查,及时析研判猴疫情形势为制定本🤰高危行为预工作计提供依据具体内容括:1.重点人群基⏭️、活动形💥和特点、动场所、入境的时🍂及地区等2.猴痘知识、态度高危行为3.猴痘疫情水平及🚳影响因素4.猴痘防治政策及业机构已展的工作💸5.包括志愿者在内😯有关组织💜个人已开🏆的干预活💁‍♂️;6.影响猴痘防治作的困难👟问题。四🏯宣传干预 (一)宣传教育。级疾控机😈或健康教专业机构供技术支,-,社会组参与,共研究制定⛺合当地特的猴痘预宣传材料--加强警示传教育。过大众媒、MSM网站和以移终端为载的交友软等平台,🏕️传国际、内及本地📜痘疫情信和防控知,提高重人群猴痘💐范意识。 (二)同伴教育。📇级疾控机要加强同️⃣教育员挑🍇、招募和🎽训,组织🦝支持同伴传活动,强人群猴风险防范🏕️识,推动,,动检测。-期组织同教育员工🔈例会,了猴痘干预作存在的难和问题有针对性给予帮助支持。 (三)外展服务。各疾控机构😗预工作人定期到重人群活动所开展猴⚫宣传、咨🥉、发放宣材料等外❄️服务活动提高重点群猴痘防💛意识和知🖇️水平,推重点人群强自我健🦹‍♂️管理,主👩🏾‍🤝‍👨🏻寻求检测询服务。👳‍♀️ (四)检测咨询。级疾控机通过互联、同伴教📭、外展活等多种形动员有猴样症状或疑接触史👨‍🌾重点人群行猴痘检。各级各医疗机构🕤肤(性病)科、肛肠、艾滋病愿咨询检门诊发现痘样症状♦️,应主动♀️问其流行💝学史及性👨‍🔬触史,记👩‍🔧患者现住🚦及联系方,采集标👭🏽送疾控机进行猴痘酸检测,备猴痘检能力及猴病毒实验动资质的🚟疗机构也开展检测对于已建互联网+HIV检测平台的地区可增加猴检测内容➰实现互联⁉️在线检测约和结果询。五、点场所干🦸‍♂️  重点动场所包实体和虚✨两类场所🧑🏿‍🤝‍🧑🏻实体场所括酒吧、所、浴池经营性场,虚拟场包括移动联网和社媒体。 (一)实体场所干预-  各级控机构负组织干预作人员在地MSM经常出入的吧、会所浴池等活🐉场所,开猴痘预防预宣传,🚁要包括: 1.在MSM经常出入的酒吧会所、浴等实体场,张贴醒🤎的健康教宣传图片设置健康育资料公栏;  2.强化个人健康责任识,开展痘健康咨🥬,推动开自我风险估;  3.提供转介服务信息告知明确诊疗流程➕及相关检、医疗机名称、联人等信息  各地加强对猴确诊病例病前21天内活动过🥂场所以及水监测阳场所的干♋宣传,重目标人群个人隐私护,加强🏜️社会组织🤴伴教育员痘防治知培训,建👩‍👩‍👦规范的行🗿干预流程-,提高自我🎌护技能。▶️ (二)虚拟场所干-。  各🌹疾控机构责组织指当地有序展猴痘线宣传,在关网站、交媒体平🦗及时发布更新猴痘传教育内,形成面🧚‍♂️重点人群猴痘检测-咨询-诊疗的线上宣干预服务系。  级疾控机支持社会🐏织或同伴🕖育员利用站、信箱社交媒体台,组织展在线咨和交流。时解答网💑提出的各猴痘相关题。针对同时期猴传播特点定期或不期组织专、专业人、同伴教↩️员利用互网和社交体平台进在线宣教各级疾控构要定期导更新相🍆专业信息🔣确保宣传容科学、🧻效。  件2  附件3  猴痘疫情流🥟病学调查➗南  为导各地疾👩🏿‍🤝‍👩🏼机构规范🌂展猴痘疑病例、确病例和聚性疫情的行病学调,及时掌病例暴露、接触史🌡️流行病学关信息,实密切接者的追踪定,防止👩‍❤️‍👩情传播扩🤑,制定本🎫南。一、查目的 🎅(一)查找感染来源掌握、追和管理密📑接触者。🍦 (二)分析传播链传播特征👨‍⚖️  (三)及时发现在的风险群及其特、范围,针对性地展宣传教🏸和综合干。二、调对象  似病例、诊病例和⚾集性疫情三、调查法和内容 通过查资料,询🦜病例、诊医生、家🎅和知情人进行流行学调查。🔧病例的病🖱️允许,调时应先调病例本人再对其诊🈚医生、家和知情者-行调查。 开展个调查时,认真、详了解和记病例基本息、发病诊情况、床表现、归及实验📀检测信息👩‍👩‍👦发病前21天内与可感染来源接触史、触场所及😊触方式;病后至隔治疗前的体活动地、与其有肤或黏膜接接触者以及发病👩‍🦼4天内与其有性接触💋。  (一)基本情况。如姓名性别、年、住址、籍、联系式等。 (二)发病就诊情况👩‍🎤临床表现实验室检、发病就🕚经过和病变化与转😌。  (三)感染来源调查。对例发病前21天内的暴露史开展查,包括🕘内外猴痘例报告地✌️旅行史或,,住史,对🐮疑的感染源要详细问接触时、方式、次、地点💷接触时采的防护措-,等,特别性接触史调查时,发现调查中未列入但具备重-流行病学义的内容应进行详👩🏾‍🤝‍👨🏽询问和记。  (四)密切接触者调查及定。对病传染期的动情况和群接触情-进行追踪排查后,🌃定其密切触者。密🐇接触者判🐴和管理按👩🏼‍🤝‍👨🏿《猴痘密🧑🏿‍🤝‍🧑🏾接触者判🕎和管理指》(附件4)执行。  详见附👩‍🦳3-1《猴痘病例个调查表》🙅‍♀️四、组织实施  照“属地管理”原🦦,由病例住址所在县(市、区)级疾控部门组织辖🍛疾控机构展猴痘病⛄的流行病调查,就医疗机构供诊疗信。调查单应根据调计划和调目的,确调查人员成和职责工,及时展病例流病学个案查。调查程中发挥部门联防控的协同用,尽可,,获取全面确的流调息。调查,,间,调查员要做好💚人防护。🎨、信息的报与分析 疾控机完成调查🙏,应做好,,,例分析总,及时将👱‍♀️行病学个调查表、查报告等料逐级报👎上级疾控构,并做调查资料保管和存。病例流🐤信息要按关规定,格做好信安全和个隐私信息护。  ,-件:3-1.猴痘病例个案调查🧗  附件4  猴痘切接触者定和管理🎗️南  为👩🏿‍🤝‍👨🏻导各地做猴痘密切触者判定管理,有🚞控制猴痘📣情的传播制定本指。一、密-接触者判标准  切接触者🌿指直接接病例的病部位及其污染物品或感染动及其分泌、渗出物👩🏽‍🤝‍👨🏼污染物的员;以及✖️业暴露或🧔时间近距吸入病例吸道飞沫,经评估🍥感染风险人员。具情形包括-  1.与疑似病例📺确诊病例病后有皮🚇或黏膜直🧘接触的人,接触方包括性接、抚摸、抱和亲吻;  2.与有皮疹状的疑似例或确诊例共用衣、被褥、具等物品人员; 3.医疗诊疗、采样🐿️实验室检等操作过🌳中可能暴于病毒,评估有感风险的医卫生工作🆔员;  4.与疑似病例或确诊例发病前4天内有性触,并经行病学调专业人员🆘估有感染险的人员亦可判定密切接触;  5.在狭小密空间与疑病例或确🤹‍♀️病例长时近距离接(如长时间共处同一闭空间),经流行病调查专业员评估有-染风险的员,亦可,-定为密切👖触者; 6.接触感染猴痘病的动物及Ⓜ️分泌物、出物等污物,而未取有效个防护的人;  7.其他可能在病毒暴风险的人。二、密👕接触者管  1.管理期限与🎹式。病例👩‍🦼现地疾控构或密切触者所在疾控机构于追踪到切接触者💙天及时开猴痘病毒酸检测,💺知并指导切接触者🤜好自我健🚖监测,健监测期限自最后密接触之日🔙起21天。自我健康💆测期间可常生活与作,需避与他人发性接触等切接触,💔免捐献血等。  2.知情告知。实施健监测时,控机构或层医疗卫机构应口告知健康测的缘由期限、注事项和疾🛂相关知识以及负责访疾控机🕛或基层医卫生机构🏕️系人和联🍭方式,并放《猴痘.切接触者康告知书。  3.定期随访疾控机构👨‍👩‍👦基层医疗生机构应🍛第7、14、21天电话或上门动询问密接触者自健康监测况,提供🦋询指导建--。发现异🍘情况,及🧘调查处置  4.自我健康监。坚持每👩🏿‍🤝‍👨🏾做好体温🔜量和症状🥇测,主要🩰状包括发(>37.3℃)、皮疹、浅表巴结肿大。密切接🏅者一旦出相关症状及时前往疗机构就🧮或与随访♦️系人取得系,接受痘病毒核检测。 附件:4-1.猴痘密切接触者康告知书 附件5  猴痘消技术指南🍺 为进一规范猴痘🤡情相关的毒工作,实科学消🔗、精准消,减少猴病毒对公-健康造成🧚危害,制本指南。、疫源地📘毒  (一)适用范围。  适于出现猴-,病例后,其可能污的场所和品进行的时消毒和末消毒。⛔ (二)消毒原则。♿ 1.范围和对象确🧎‍♂️。  根🏢流行病学查结果,定现场消的范围和象。对病在住院、运期间可污染的环和物品,行随时消。对病例住或活动的场所,居住场所工作场所学习场所诊疗场所Ⓜ️转运工具及其他可👨‍🎨受到污染😠场所,在🏴󠁧󠁢󠁷󠁬󠁳󠁿离开后(如住院、转、出院、亡)进行终末消毒。🤔 2.方法选择。 🔟(1)诊疗用品消毒尽量选择🚳次性诊疗🏍️品,非一🐺性诊疗用🪕应首选压👭🏽蒸汽灭菌不耐热物⬇️可选择化📒消毒剂或♉温灭菌设进行消毒灭菌。 (2)手消毒。建议🚆用手消毒揉搓双手🐯行消毒,可选择75%乙醇、过氧化氢等毒剂。 ❣️(3)环境和物体表消毒。可择含氯消剂、二氧氯、过氧酸、过氧氢等消毒擦拭、喷或浸泡消。  (4)衣物、床单等纺织消毒。可择热力消、含氯消剂或季铵类消毒剂泡等消毒式。  (三)常见污染对象的毒方法。 1.手消毒。  🔞选用速干消毒剂,直接选用75%乙醇进行擦拭消👬🏿;醇类过💻者,可选🎰季铵盐类有效的非👫🏾类手消毒。有肉眼见污染物,应先使洗手液(或肥皂)在流动水下按’六步洗手🌟清洗双手然后按上🧘方法消毒  2.皮肤、黏膜  皮肤🥣污染物污时,应立清除污染,再用一性吸水材沾取0.5%碘伏或过氧化氢消剂擦拭消3分钟以上,使用清🧖‍♂️清洗干净粘膜应用-量生理盐冲洗或0.05%碘伏冲洗消毒🍨  3.床单、毛巾衣服等纺,-品。  例使用的单、毛巾⚱️衣服等纺品,无肉可见污染🤔时,若需复使用,用流通蒸🧐或煮沸消30分钟;或用有效500mg/L的含氯消毒剂或1000mg/L的季铵盐类消毒浸泡30分钟后,按常规清洗🔝或用其他效的消毒法。不耐的衣物可用环氧乙或干热方进行消毒👨‍👨‍👧‍👦理。  👌分泌物、出液、排物、血液体液等污物时,建按医疗废集中处理  4.餐(饮)具。  病例👩‍💻使用的碗盘、筷、等餐(饮)具清除食残渣后,沸消毒30分钟,或🏏用有效氯500mg/L的含氯消毒剂浸泡30分钟后,再用清水净。  5.污染物。  对病分泌物、出液、排物、血液🥙体液等少🦿污染物可🔸一次性吸材料(如纱布、抹布)沾取有效氯5000-10000mg/L的含氯消剂(或能达到高水平🍘毒的消毒🥠巾/干巾)小心移除  对病分泌物、出液、排物、血液体液等大🛥️污染物应用含吸水分的消毒🦒或漂白粉全覆盖,用一次性水材料完覆盖后用🐓量的有效💭5000-10000mg/L的含氯消毒浇在吸水料上,作30分钟以上(或能达到高水平毒的消毒巾),小心清除干净-,清除过程👿避免接触染物,清🌤️的污染物医疗废物🦙中处置。📬 病例的泌物等应专门容器🔍集,用有氯20000mg/L的含氯消剂,按物药比例1:2浸泡消毒2小时。  清除污’物后,应污染的环和物体表进行消毒盛放污染🌀的容器可🕧有效氯5000mg/L的含氯消毒剂溶液泡消毒30分钟,然清洗干净-  6.地面、墙壁  有肉可见污染时,应先🩱全清除污-物再消毒无肉眼可污染物时可用有效-1000mg/L的含氯消毒剂500mg/L的二氧化氯消毒擦拭或喷消毒;不🥢腐蚀的地-和墙壁,可用2000mg/L的季铵盐消毒剂喷或擦拭;毒作用时🔸不少于30分钟。 7.物体表面。  疗设施设-表面以及围栏、床柜、家具🦑门把手、👛生洁具和居用品等肉眼可见🎻染物时,先完全清污染物再毒。无肉可见污染👨‍💻时,用有氯1000mg/L的含氯消毒或500mg/L的二氧化氯消🆘剂,不耐蚀的物体🦓面也可用2000mg/L的季铵盐类消毒进行喷洒擦拭或浸消毒,作👯30分钟后清水擦拭净。  8.污水和粪便。  🐧进入市政水管网前进行消毒理,消毒污水应当合《医疗🥝构水污染排放标准(GB18466-2005)。  9.病例生活垃。  病生活垃圾医疗废物🟢理。  10.医疗废物。  🍦疗废物的置应遵循医疗废物理条例》😖《医疗卫机构医疗物管理办》的要求规范使用层黄色医废物收集🤗封装后,常规流程,-行处置。 11.室内空气。 如经科评估,需室内空气行消毒,🚺在无人情✴️下,可选5000mg/L过氧乙酸、3%过氧化氢二氧化氯(浓度按产说明书)等消毒剂,20mL/m3用超低容量(气溶胶)喷雾法进行消毒🕠也可采用验证安全效的其他毒方法。、注意事  现场毒应确保用消毒产合法有效所选消毒🥱法科学可。现场消🤚时,根据场情况和🚦关标准要,选择合有效的个🧾防护装备🍪在做好个防护的前下,严格照工作方,实施消毒  消毒,,,施单位应备现场消能力,操人员应经消毒专业训,掌握♋毒和个人😯护基本知,熟悉消器械的使和消毒剂👨‍👨‍👧‍👦配制等。🚣‍♀️ 每次开👨‍🌾消毒工作🚮均应做好毒记录,🈵括消毒对🧕、消毒面(体积)、消毒剂浓🚑(或消毒器械强度)、剂量、作时间等。时,相关🎞️门和单位做好消毒📶作的监督理和评价  附件6  猴痘人防护指  为加-公众、疫处置相关作人员和务人员的人防护,免猴痘病暴露感染🦜制定本指。一、居隔离治疗病例等相人员  (一)适用范围。  用于居家🎼离治疗的例(疑似病例和确诊🐨例)、照护人员或共居住者的-人防护。💴 (二)居家隔离区🍠要求。 🍡1.应选择有自然通、独立卫间的房间为隔离区。  2.应配备专的餐具,单、毛巾床上用品消毒剂和🧾罩等个人🤜护用品,视和平板🧎‍♂️脑等电子备。  3.卫生间宜配备专用洗衣机,漏应有水。  (三)病例管理要求。 1.应能够进行自我护。  2.应每天做好体温测和症状监,避免与人共用个🎛️物品。 3.避免与他人发生接触,避与免疫力🖖下人员、童、老人,,,孕妇及其人员的直🧙‍♀️接触,避📍与宠物等物接触,‼️免捐献血等。  4.外出就诊时,应佩医用外科罩,着长长裤,确遮住所有😸伤皮肤,🍎免与他人🧈切接触,免乘坐公🥗交通工具’  (四)照护人员️求。  1.应每天做好体温测和症状监🧑🏽‍🤝‍🧑🏼。  2.应尽量避进入隔离域。如需入隔离区🈺,应佩戴用外科口和一次性套,与病保持至少1米的距离🧖‍♀️在离开隔🚨区域之后应加强手生,并对下的口罩手套进行毒处理后弃。  3.在拿放和清洗居家离治疗病🖥️的床单、服和处理圾的过程,应避免动。用湿🥼布拖地,免干扫。湿抹布清家居用品面,地毯用蒸汽清,避免使’吸尘器。 4.应将居家隔离疗病例的具、床单毛巾和衣单独洗涤✈️消毒,可择热力消、含氯消🗽剂或季铵类消毒剂🎣泡等消毒🧎式。  (五)应急处置。  1.照护人员或共同居🎫者出现任🦹‍♀️症状或不😋表现,应及时前往定医疗机👨‍❤️‍👨就诊并主,报告可疑触史。 2.对其接触的物品🐚活动的区等结合风评估结果行消毒处。二、疫处置相关作人员 (一)适用范围。 -适用于猴疫情期间行病学调、环境清消毒人员❔个人防护  (二)流行病学查人员防©️要求。 1.个人防护装备。次性乳胶⭕套、医用科口罩、次性隔离〽️等。  2.个人防护要求。规📺佩戴口罩加强手卫,与被调人员保持少1米的距离。  3.废物管理。调查结后,废弃🎑个人防护🐅备暂存、理和处置按照《医废物管理例》执行👁️  4.应急处置。在调查过👩🏽‍🤝‍👨🏻中出现口脱落、直接触了病皮肤或分物等情况要结合被查人员的床诊断结、空间的闭性、接的时间和离等进行险评估,🕵️合风险评结果,采相应的处🏔️措施。 (三)环境清洁消毒员防护要。  1.个人防护备。一次🐸乳胶手套🛁医用外科罩、一次🤳隔离衣、水靴套等😫  2.个人防护要👨‍🔧。规范佩口罩,加手卫生,+量减少与消毒物品直接接触  3.废物管理。洁消毒结🌵后,废弃个人防护🍭备暂存、🆘理和处置按照《医废物管理例》执行  4.应急处置。在清洁消过程中出口罩脱落皮肤损伤直接接触泄物、血🎮等情况,🦘结合被清消毒物品🚺类型、接的时间和间的密闭等进行风〰️评估,结风险评估果,采取应的处置施。三、务人员的📷人防护 🎴(一)适用范围。 适用于猴疫情期间务人员及🚅工作环境🚥防护。 (二)基本要求。 ’1.个人防护装备要。医务人执行标准防,采取接触传播经飞沫传’疾病的隔💰与预防措,佩戴一性乳胶手、KN95/N95及以上级别口罩、防🙁面屏或护镜、一次隔离衣等🧰  2.环境防护要。医院环🚔的清洁消应符合附️⃣5的要求。应避免干尘、清扫吸尘等活。首选湿清洁方法  3.废物管理。🕶️人防护装、病例敷等暂存、理和处置按照《医😀废物管理例》执行  附件7  猴痘毒实验室👩🏻‍🤝‍👨🏼测技术指  为指🎸各级疾控门和其他🌼关机构规🌥️开展猴痘毒实验室️⃣测工作,速、准确别猴痘确病例,制本指南。指南主要🌾绍标本采以及猴痘毒核酸荧🈂️定量PCR检测方法,-生物安全求等内容-一、检测🧑🏾‍🤝‍🧑🏻象  (一)猴痘确诊病例和疑病例; (二)密切接触者; (三)感染或疑似☀️染猴痘病🥝的动物;-,- (四)环境或其它物材料。、技术人基本要求 (一)采样人员。事猴痘病🌕核酸检测本采集的术人员应经过生物🏨全培训,🥈训合格后可从事采🐬工作。采⬅️人员应熟采集标本🐆类和采集🚳法,熟练握标本采-操作流程注意事项做好标本🐯息记录,保标本质符合要求标本及相👨‍👨‍👦信息可追🌉。  1.采样人员人防护装🔰要求:KN95/N95及以上级别的口罩☢️防护面屏护目镜、次性隔离、一次性胶手套(尽可能戴两)、靴套;如果接触病例血液体液、分物或排泄😸,应及时换手套。水采样人可根据实工作需要适当降低护级别。 2.住院病例的标,-由所在医医护人员集,根据验室检测作的需要🤦‍♂️可结合病多次采样🐿️  3.密切接触者本由当地控机构或◼️疗机构专人员采集🦧  4.感染或疑似+染猴痘病☯️的动物由👩‍👧‍👦地疾控机协调动物🤦‍♀️控部门专采样人员🐧责采集。 5.环境或其它生-材料标本相关专业✍️样人员负💉采集。 (二)检测人员。实室检测技🦗人员应具相关专业♨️专以上学或具有中及以上专🕖技术资格♻️并有2年以上实验室作经历,受过核酸🪓测相关培,培训合后方可从-检测工作实验室配的工作人🎰数量应与开展检测🛌目及标本相适宜,保能够及、熟练、确地开展验室检测-报告结果三、标本集、保存运输  (一)标本采集种类。👂 1.首选标本是皮(黏膜)病变部位标,包括病表面拭子✨痘疱液或👰疱渗出物子、痘痂痘痂拭子。  2.呼吸道标,如口咽🌝子,可用’病例急性检测,也密切接触🥒检测最常标本。 -3.发病急性期可采EDTA抗凝血标本行核酸检。  4.采集发病7天内(急性期)、3-4周后(恢复期)双份血清用🔩抗体检测  5.直肠拭子、🧷液、精液唾液等其标本仅用研究,根工作需要集。  6.污水或其它环境生🤹材料标本-据实际工⚖️需要进行集。  (二)标本采集要求。 采集皮(黏膜)病变部位标🥡时应使用菌聚酯纤🎭、尼龙或💓似材质拭,避免使棉拭子。⚫集疑似病👨‍⚕️的标本前避免使用75%乙醇等消毒剂清🧖‍♀️病变部位每种类型皮肤(黏膜)病变应尽可能采集个以上拭,每个病应同时采身体不同位或外观🏃‍♀️同的2-3种病变标。采集皮🎦(黏膜)病变部位标👨‍🦯时应适当力。皮肤(黏膜)病变部位、痘或分泌物不同拭子本应放置🔏不同的采管中。进病毒分离应采集干子标本(无采样液)或以非灭活病毒采样🪀保存。根😳实验室活资质确定用非灭活或灭活型样液采集本。  (三)标本采集方法。 1.斑疹、丘疹、疱或脓疱皮肤(黏膜)病变部位标本:一📛紧握采样子尾部,与拭子头保持一寸上距离。样时适当🎀力下压拭,在皮损面来回擦✖️至少2-3次,然后拭子另一再重复擦2-3次。如果在擦过程中痘破裂,要保采集到疱液。采后将拭子置于无菌🥉样管中(可含病毒采液或不含体),折断拭子头,除拭子尾💳,盖上管,以消毒巾擦拭消采样管,封口膜密-管盖后将样管保存送检。 🍻2.痘痂或痘疱皮肤(黏膜)标本:采样前确保实验可检测此🏌️标本。使无菌镊子其他钝头械夹取全痘痂或面,至少4mm×4mm大小的痂皮🌪️放置于干、无菌的🦍样管中,♒样完成后🔞创可贴覆🧑🏿‍🤝‍🧑🏼患处。 3.口咽拭子标本:采集人员部微仰,张大,露两侧扁桃,将拭子🩲过舌根,被采集者📦侧扁桃体微用力来擦拭至少3次,然后在咽后壁下擦拭至3次,将拭子头浸入2-3mL病毒保存,,,的管中或于不含液😒(干拭子)的无菌管,尾部弃🏿,旋紧管🤲。  4.血液标本尽量采集性期(发病7天内)的血液标本🧑🏽‍🤝‍🧑🏼建议使用👼EDTA抗凝剂的真采血管采5mL全血,可利用血进行检👨‍✈️,或室温置30分钟后,1500-2000rpm离心10分钟,收集血👩🏻‍🤝‍👨🏽于无菌管进行检测  5.血清标本:真空负压血管采集液标本5mL,室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集血清无菌螺口料管中。一份血清尽早(最好在发病后7天内)釆集,第二份清应在发后第3-4周采集,集血液标5mL后室温静置30分钟,1500-2000rpm离心10分钟,收集清于无菌口塑料管,用于猴抗体检测🍤  6.其他标本:🙍‍♀️据设计需🧑🏻‍🤝‍🧑🏻规范采集  (四)标本保存  标本在收集后1小时内冷(2-8℃)或冷冻(-20℃或以下),并尽快进行🈶测。可在1周内检测标本可置4℃环境中保存;1周内无法检的标本,期可置于-20℃环境中保存,期应置于-70℃或以下环境中存。全血离血浆前藏(2-8℃),分离出的血浆👨‍🔧于-20℃或以下环中保存。设立专库专柜单独存标本,免反复冻’标本。 🥘猴痘病毒其相关标应由专人理,准确📃录病毒及本的来源编号、数等信息,🦼体要求可考《病原🛎️生物菌(毒)种保藏数据描述通,,》(T/CPMA011-2020)。应采取有效措确保病毒标本安全严防发生用、恶意用、被盗被抢、丢🚕、泄露等件。  (五)标本送检。  本采集后尽快在低条件下(冰袋或干冰)送往实验,如需长运输标本🤹‍♂️应采用干冷冻运输式进行保。  1.送检标本病例标本🥇由省级及⚰️下疾控机进行初步🍥测,各省例猴痘阳标本应送国疾控中病毒病所🎆核。每个✋性病例至🦎采集一套💽本(皮肤或黏膜病变⛔位标本、咽拭子标及急性期🍁恢复期双血清标本)送中国疾💈中心病毒所检测。省级疾控😀构根据实情况制定内样本送、复核流。  2.病原体及本运输: (1)国内运输。痘病毒或他潜在感性生物材的运输包分类属于A类,对应联合国编为UN2814,包装符合国际航组织文Doc9284《危险品航空安运输技术则》的PI602分类包装要求通过其他通工具运的可参照🚧上标准包。猴痘病或其他潜感染性材⛵运输应按🔍《可感染类的高致性病原微物菌(毒)种或样本输管理规》(原卫生部令第45号)办理《准运证书。污水等,境标本暂普通生物本运输标执行。 (2)国际运输。猴毒株或样在国际间输的,应范包装,照《出入特殊物品生检疫管规定》办📸相关手续🧫并满足相↪️国家和国🤾‍♀️相关要求四、猴痘🤼毒核酸检🧬要求及流  (一)实验室资,,要求。 开展猴痘🌹毒核酸检的实验室🚡应当符合病原微生实验室生安全管理例》(国务院令第424号)或《医疗机构床基因扩👩🏿‍🤝‍👨🏻检验实验👨🏿‍🤝‍👨🏽管理办法-(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定,具备📣区的市级生健康部🛐备案的生安全二级(BSL-2)实验室及以上实验🥺条件,并案猴痘病相关实验动。独立👨‍🦯置的医学验实验室🥪应符合《👨‍👦‍👦学检验实室基本标(试行)》《医学检🤷‍♀️实验室管规范(试行)》等要求。  开🧭猴痘病毒离、培养中和等涉病毒扩增使用等实🧤操作的实室应具备家卫生健委批准的物安全三(BSL-3)实验室及以上实🤷‍♂️室条件,💵获得猴痘毒实验活🏧批准。分的猴痘病应送国家原微生物🧖藏中心/国家病原微物资源库毒分库保。  (二)实验室生物安全要。  根2006年公布实施《人间传的病原微物名录》(简称《名》),猴痘病毒生物害分类为一类,是种高致病🛁病毒。按《名录》🧜‍♂️求,猴痘👩🏾‍🤝‍👨🏻毒的分离培养等涉🏴病毒扩增🍘使用的实操作需在BSL-3及以上实验💼的生物安柜内进行非灭活采🈲液采集的痘病例样的灭活在BSL-3实验室进行⏺️样本灭活猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验👨‍👦‍👦或PCR检测的专门-域或房间⤴️行。如《录》更新😍开展猴痘🌟毒操作的验室生物🙋‍♀️全要求应最新《名》执行。🧜‍♀️水样本的🏝️活参照普👩‍🦰生物样本  (三)实验室分要求。 原则上开💣猴痘病毒酸检测的验室应当置以下区:试剂储和准备区标本制备、扩增和物分析区三个区域物理空间’应完全相独立,空☀️应定向流。各区功分别是:👻 1.试剂储存和准区:贮存剂的制备👩🏽‍🤝‍👨🏼试剂的分和扩增反混合液的备,以及-心管、吸等消耗品贮存和准♀️。  2.标本制备’:转运桶启、标本-活,核酸🌖取及加入🏄‍♀️扩增反应🤹‍♂️等。  3.扩增和产物分析区核酸扩增🐑产物分析  根据用仪器的能,区域适当合并🗞️如采用标处理、核提取及扩检测为一的自动化析仪,标制备区、,,增和产物析区可合📩。  (四)主要仪器设备。 实验室应🤸‍♀️配备与开检验项目适宜的仪设备,包:二级生安全柜、🐡速台式离机、干浴温器、荧定量PCR仪、计时🚲、移液器☄️  (五)实验室猴病毒核酸测流程。 实验室到标本后按照标准作程序进🗼试剂准备标本前处、核酸提、核酸扩、结果分🎵及报告。验室应当立可疑标📴和阳性标复检流程  1.试剂与材料  (1)标本:包病变表面⛽子、痘疱或痘疱渗液拭子、痂或痘痂🧡子、咽拭、全血或🚶‍♂️浆等标本  (2)核酸提取🧑🏿‍🤝‍🧑🏻剂盒(基因组DNA提取试剂盒):组织基🍄组DNA提取试剂盒血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒🦚  (3)核酸检测👨‍👩‍👧‍👦剂:  🎒试剂:DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCRMasterMix)。  ②猴病毒检测🐉物、探针  ③阳对照:涵检测靶标列的质粒  (4)灭菌去离-,水、无水醇  (5)消毒液  ①75%乙醇:用手部和物表面常规🔷毒,开启有效期为1周。  含氯消毒:现用现📟,含有效🥭1000mg/L的消毒液用于体表面常消毒,含效氯5000mg/L的消毒液于感染性料溢洒时应急处理  (6)耗材:包带滤芯的🐓头、螺旋的离心管💀非螺旋口离心管、锆珠的粉管、PCR反应板和-明封膜或PCR反应管和透明盖  (7)BSL-2个人防护🏄‍♂️品:包括KN95/N95口罩及以上级别口罩、一性隔离衣⌚防护眼罩面屏、一性帽子、套、靴套手套。 2.实验前的标本接。  (1)核对被检标本编号姓名、性、年龄及测项目; (2)待检标本的✝️态如有异,需注明  (3)待检标本期存放在-70℃,短期存放可🚯-20℃,避免反复融。  3.核酸检测操作步骤注意事项  (1)病毒核酸(DNA)的制备  作方法按DNA提取试剂盒相应🚊明书进行作,具体下:  提取试剂备:第一👇开启试剂🎒,在使用️⃣先在漂洗中加入无-,乙醇,加体积参照’上标签。有试剂在🩰用前应平至室温;👨‍🔬有离心步🦒应在室温进行。 ②处理样:  A.痘疱液:💠拭子标本+以适当体🧵的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。100μL样本,加80μL缓冲液,总为180μL;标本体积不足100μL时用缓冲液补总体积至180μL;  B.病变皮疹或痂:取1块痂皮按质/体积(1mg/50μL)加入相应体积PS的PBS,研磨或匀浆处理取80μL,然后加100μL缓冲液; C.咽拭子、其它🔰子:从采液中取200μL标本,干拭子本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬,混匀后🌙200μL;  D.全血或血🎰:直接取200μL标本。  😽加入20μL蛋白酶K溶液,混🦻,溶液会清亮。若本为病变疹或其它织时,加蛋白酶K混匀后,在56℃放置,直至组织解,再进下一步骤  ④加200μL裂解缓冲🕳️,充分混️⃣,70℃放置10分钟,或至溶变清亮,短离心以除管盖内水珠。 需注意:入裂解缓液后可能🏹出现白色状沉淀,70℃放置后会消失如溶液未清亮,说细胞裂解彻底,可-导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。  ⑤加200μL无水乙醇,分混匀,时可能会👨‍💻现絮状沉⛹️,简短离-以去除管🕺内壁水珠  ⑥将一步骤所溶液和絮沉淀均加吸附柱中(吸附柱放👩🏼‍🤝‍👨🏾废液收集中),8000rpm离心1分钟,弃废液📑  ⑦加500μL漂洗缓冲1(使用前先检查是已加入无乙醇),8000rpm离心1分钟,弃废🖕。  ⑧入500μL漂洗缓冲液2(使用前先检查否已加入🌯水乙醇),最大转速13000rpm离心3min,弃废液。 ⑨将吸附🦹‍♀️放回废液集管中,大转速13000rpm离心1分钟,尽量除漂洗液👔  ⑩将附柱转入根干净的心管中(需自行准备👨‍👨‍👧‍👧试剂盒中🔀提供),加入50μL洗脱缓冲📆或灭菌去子水,室-,-放置2-5分钟,8000rpm离心1分钟。收集滤液,做好记,4℃或-20℃(短期)保存备用,-70℃长期保存。  (2)核酸检测:实时光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病核酸(PCR实验室进行)。  ①反应体的准备:🌗孔20μL,加入5μL样本DNA,共计25μL;每次PCR反应,除检标本外,加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照;所有🐠本,包括照,应设孔。  ,,,加样:每🍾反应管中入核酸或,照各5uL,盖紧管或封好透膜,置于🙄光定量PCR检测仪上。  ③增条件设:  ④器检测通选择:使荧光定量PCR检测仪,选择Fam荧光信号检测通道收集设在60℃。具体设置方法,,,照各仪器用说明书  ⑤结分析阈值定:使用光定量PCR检测仪进行结果分时,基线🚖3-10或6-15个循环的荧信号,阈设定原则阈值线刚超过正常️⃣性对照扩曲线最高,也可根仪器噪音况调整阈🙆‍♀️。  (3)核酸检测结果判断 ①Real-timePCR反应系统的🥕量控制:,应结果应🧅时符合以❎2个条件,否则试验🔘果无效,重新开展️⃣测。阴性🐖照无扩增为阴性。-性对照未🐬现阴性结🙉。  ②果判定:🎨 A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值;  B.灰区:一#️⃣Ct值>37;  C.阳性:双孔Ct值<37。  所有阳性处于灰区标本应重🍀检测或经列分析进🟥确诊。需意:当标🌎仅为咽拭🧪或血清、浆,且检结果为阴时,应结临床症状慎重做出🌉性诊断。 (4)表格记录 🚶‍♂️做好荧光量实时PCR方法检测猴痘病毒酸原始记。  五猴痘病毒🔼基因组测  1.测序标本选原则。本疫情中的🍹发或早期例、与早病例有流病学关联关键病例👇感染来源明的本土例、境外入病例阳标本等。上标本在酸荧光定PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。  2.测序要求。-省为单位定开展猴🍖病毒全基👨‍👧‍👦组测序的构。建议💂‍♀️用扩增子🧤术进行猴病毒全基,组测序。序数据经控合格后可用于后生物信息析。二代序平台覆👨🏾‍🤝‍👨🏽深度应不于10×,三代测序台覆盖深🥮应不低于50×,全基因组测序盖度应不于98%。数据比对💂‍♂️析推荐参猴痘基因NC_063383.1。  各省应建立省输入、👨🏿‍🤝‍👨🏻土病例猴病毒基因数据库,💛具备序列🚸比分析能。具备测条件的省要在接收🥛本后48小时内开展序工作,键样本要实验室收标本后1周内提供测结果报告所有测序👿始数据(一般为fastq格式)、组装序(一般为fasta格式)和标本序列测定果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报中国疾控心病毒病进行序列总、分析病毒病所将序列分结果及时馈各省,将全国猴病毒序列😎总、分析果及时上🏃‍♀️国家疾控-。  3.分子分型推荐使用线分析工Nextclade(https://clades.nextstrain.org)对变异株行分子分。  附🐦:  7-1猴痘病毒检测标本检表  7-2猴痘病毒标本序测定结果🚧告单【编:孙静波】
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评论
  • 王鹤隶 2024-05-22
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